P物质和P物质受体

Ｐ物质 (ＳｕｂｓｔａｎｃｅＰ ,ＳＰ)是 1931年ｖｏｎＥｕｌｅｒ和Ｇａｄ ｄｕｍ在马脑和肠的提取物中偶然发现的一种物质 ,195 3年Ｐｅｒｎｏｗ应用氧化铝柱吸附技术获得了第一代纯化的制剂 ,1971年Ｃｈａｎｇ等将牛下丘脑提取物经凝胶过滤、离子交换层析及高压纸上电泳后确定了ＳＰ的分子序列 ,阐明了其化学结构为十一肽 ,Ｈ -Ａｒｇ -Ｐｒｏ -Ｌｙｓ -Ｐｒｏ -Ｇｌｎ -Ｇｌｎ -Ｐｈｅ -Ｐｈｅ-Ｇｌｙ -Ｌｅｕ -Ｍｅｔ -ＮＨ2 ,分子量为 134 8,属于速激肽 (ＴＫ)族。 1979年Ｖｉｊａｙａｎ首次报道了ＳＰ与生殖功能有关[1,2 ] 。本文主要…     

外感寒湿对小鼠胰蛋白酶及蛋白酶激活受体2的影响

目的模拟中医病因学条件观察内外感寒湿对小鼠胰蛋白酶及蛋白酶活性受体2的影响。方法 SPF级昆明小鼠60只,随机分为正常对照组、寒湿组、湿邪组、药物组。每组15只。放入人工气候箱,连续7d后取材。应用免疫组化方法检测胰蛋白酶(Trypsin)水平,Western blot检测蛋白酶激活受体2(PAR-2)。结果与正常对照组比较,外感寒湿组小肠组织胰蛋白酶及蛋白酶激活受体2表达明显增高。结论外感寒湿能加重胰蛋白酶和蛋白酶活性受体2的表达。     

人单核细胞表达蛋白酶激活受体

目的：使用高纯化的人外周血单核细胞研究蛋白酶激活受体（protease activated receptors,PARs）在单核细胞上的表达。方法：采用密度梯度离心法和磁激活细胞分选法分离人外周血单核细胞,采用流式细胞仪、逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）分析单核细胞PARs表达情况。结果：流式细胞分析示人外周血单核细胞表达PAR-1、PAR-3、PAR-4蛋白质,但不表达PAR-2蛋白质;RT-PCR示单核细胞表达PAR-1和PAR-3,但不表达PAR-2和PAR-4 mRNA。结论：单核细胞表达PARs,为进一步研究PARs在单核细胞上的功能提供依据。     

腹腔神经节毁损对胃扩张兔脊髓P物质表达的影响

目的：观察高强度聚焦超声毁损兔腹腔神经节（Celiac ganglion,CG）对胃扩张兔脊髓P物质（Substance P,SP）表达的影响,探讨SP是否也参与内脏痛的传递。方法：按2×2析因设计,将新西兰大白兔20只,随机分为4组：非扩张非毁损组（nDnB）、扩张非毁损组（DnB）、非扩张毁损组（nDB）、扩张毁损组（DB）,每组各5只。DB、nDB组用HIFU毁损神经节,nDnB、DnB组假手术,术后7d,安置胃扩张装置。安置后7d,nDB、nDnB组在麻醉下灌注固定取胸段6～8（T6-T8）脊髓,DB和DnB组在扩张胃1h后,灌注固定取脊髓。用免疫组织化学方法检测脊髓后角sP光密度（Opticaldensity,OD）。结果：在后角Ⅰ、Ⅱ层内,毁损CG使中间区及其后根投射纤维内的OD增加（P〈0．01）,胃扩张后使内、外侧区的OD增加（P〈0．01）,毁损CG后,胃扩张使后角Ⅰ、Ⅱ层的内、外侧区OD增加值下降（P〈0．01）。结论：胃扩张会引起胸段脊髓后角SP的表达明显增加;毁损CG使胃扩张引起的增加值下降。     

人肺上皮细胞表达蛋白酶激活受体

目的: 蛋白酶激活受体(protease-activated receptors, PARs) 广泛分布在多种组织细胞上,但4种PARs在肺上皮细胞的表达情况尚不清楚. 我们用A549细胞研究PARs在肺上皮细胞的表达. 方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、流式细胞仪和免疫荧光细胞染色分析技术分析肺上皮细胞系A549细胞PARs的表达情况. 结果:4种PARs在肺上皮细胞上均有不同程度的表达. 结论:肺上皮细胞同时表达PAR 1～4 4种受体,这为进一步研究PARs在肺上皮细胞的功能奠定了基础.     

蛋白酶激活受体在心搏骤停后综合征兔肾组织的表达

目的:探讨蛋白酶激活受体(protease-activated receptor,PAR)在心搏骤停后综合征(post-cardiac arrest syndrome,PCAS)兔肾组织的表达及其意义。方法:采用窒息性心搏骤停制备兔心搏骤停后综合征模型(PCAS组),取股静脉血监测器官功能,心肺复苏后48 h,取肾脏组织,采用免疫组织化学技术分别测定兔肾组织PAR-1、PAR-2蛋白表达情况。同时,以假手术组作为对照组。结果:免疫组化结果显示PCAS组、假手术组肾组织PAR-1平均光密度值分别为(1047.67±186.04)、(2278.79±285.77);PCAS组、假手术组肾组织PAR-2平均光密度值分别为(1495.99±133.26)、(2020.85±419.02),PCAS组兔肾脏组织PAR-1、PAR-2蛋白含量均显著减少,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PAR-1、PAR-2蛋白表达减少可能与PAR激活有关,并可能与心搏骤停后综合征的多器官功能障碍发生发展相关。     

蛋白酶激活受体2对慢性应激小鼠结肠传输功能的影响

目的·观察蛋白酶激活受体2(protease activated receptor 2,PAR2)对慢性应激小鼠结肠运动的影响,并探究其作用机制.方法·通过慢性多源应激构建慢性应激小鼠模型.分离小鼠结肠平滑肌,通过肌条收缩实验和Western blotting,观察PAR2激动剂和小电导钙激活钾通道3(small co...     

重组人生长激素对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、一氧化碳产生及Toll样受体4表达的影响

目的 研究重组人生长激素(rhGH)对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、一氧化氮(NO)生成及Toll样受体4(TLR4)表达的影响以探讨rhGH的免疫调节作用.方法 采用Griess反应、中性红吞噬实验及RT-PCR法分别测定不同剂量(1、3、25和100μg/L)rhGH作用的小鼠腹腔巨噬细胞的NO生成量、吞噬功能及TLR4的表达.结果 结果显示3μg/L rhGH可显著促进小鼠腹腔巨噬细胞的NO生成量及TLR4的表达,增强巨噬细胞吞噬中性红能力.结论 rhGH对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、NO产生及TLR4表达有显著的调节作用,这种调节作用呈现剂量相关性,为rhGH的合理应用提供一定的实验基础.     

军术液对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响

本文通过对小鼠腹腔内注射军术液,研究其对所噬细胞免疫功能的影响,报告如下。1资料与方法1.1资料药物军术膏:由文登整骨医院供给。主要成分有川军、苍术、炉甘石、用香油熬制而成。军术液:将上述三药等量混合、乙醇回流、提取4 h,回收乙醇后得浸膏加吐温80配成水混悬液。1.2动     

P物质在变应性鼻炎中对一氧化氮作用的研究

目的:探讨P物质(substance P,SP)在变应性鼻炎中对一氧化氮(nitric oxide,NO)的影响.方法:以卵清蛋白建立变应性鼻炎豚鼠模型.然后用SP滴鼻(1次/d)激发变应性鼻炎各组1、2、4、8 d,并与正常组对照,观察其症状和体征.同时观察鼻黏膜病理学变化,并采用硝酸还原酶法测定各组豚鼠的鼻腔灌洗液和血清中NO3-/NO2-的含量确定NO的浓度.结果:SP激发能诱发正常的豚鼠出现相似的变应性鼻炎症状,并能加重模型组豚鼠变应性鼻炎症状和鼻黏膜炎症(P<0.01).模型组SP激发后鼻腔灌洗液和血清中NO含量明显增加,并且随着激发次数的增加,NO有逐渐增高的趋势(P<0.05).结论:在变应性鼻炎中,SP能促进NO在鼻黏膜的产生,引发和加重变应性鼻炎的炎症反应.     

哮喘大鼠孤束核内H3受体对呼吸道P物质样免疫反应物的影响

目的:探讨大鼠孤束核(NTS)内组胺H3受体对哮喘发作时呼吸道内神经源性炎症介质P物质(SP)含量的影响。方法:取健康雄性SD大鼠成功制备哮喘模型后诱发哮喘急性发作,采用中枢立体定位及核团微量注射技术,分组依次向NTS内微量注射无菌生理盐水、H3受体激动剂RMHA以及其拮抗剂Thio,利用肺内SP特异性抗血清、免疫组化法(SABC法)、葡萄糖氧化酶-DAB-镍染色和计算机图像分析等技术检测肺内SP的含量。结果:和对照组相比较,哮喘大鼠NTS内微量注射1μgRMHA,肺内SP样免疫反应物(SPR-IL)阳性数量显著减少、阳性密度降低,差异有显著统计学意义(P<0.01);如果在哮喘大鼠NTS内注射Thio5μg,则可拮抗RMHA的上述效应。结论:大鼠NTS内H3受体参与减少哮喘发作时神经源性炎症介质SP的释放,从而可能抑制哮喘发作。     

锌影响坐骨神经损伤模型小鼠脊髓P物质表达的实验研究

目的研究锌对选择性坐骨神经分支损伤（spared nerve injury,SNI）小鼠脊髓P物质（substance P,SP）表达的影响。方法 48只CD1小鼠分为4组,采用SNI手术制备神经病理性疼痛（neuropathic pain,NPP）小鼠模型：对照组（Con）给予假手术（单纯分离坐骨神经）,适锌喂养神经分支损伤（N-NPP）组锌饲料30 mg/（kg.d）喂养2周后给予SNI手术,低锌喂养神经分支损伤（L-NPP）组锌饲料0.85 mg/（kg.d）喂养2周后给予SNI手术,高锌喂养神经分支损伤（H-NPP）组硫酸锌水溶液227 mg/（L.d）喂养2周后给予SNI手术。应用原子吸收光谱、免疫组织化学、免疫印迹和图像分析技术检测术后7d锌对脊髓SP表达的影响。结果高锌喂养能显著增加血清和脊髓中锌的含量,脊髓SP表达下调（P〈0.01）;而低锌喂养加重血清和脊髓的缺锌状况,脊髓SP表达上调（P〈0.01）。结论锌能抑制SNI后小鼠脊髓SP的表达。     

Role of Protease Activated Receptor-2 Expression in Renal Interstitial Fibrosis Model in Mice

Summary： The role of protease activated receptor-2 （PAR-2） in the renal tubulointerstitial lesion induced by unilateral ureteral obstruction （UUO） was explored. Mice were sacrificed on the day 1, 3, 5, 7, 10, 14 and 21 after UUO. The expression of PAR-2 mRNA and protein and a-smooth muscle actin （α-SMA） protein in tubuloin,terstitium was detected by RT-PCR and immunohistochemistry at each time point, respedtively. The results showed that the PAR-2 expression in renal tubulointerstitium was increased progressively starting from 24 h to the day 14 post-ligation, and it was significantly associated with the relative volume of interstitium and the positive area of α-SMA. PAR-2 was mainly expressed in renal tubule epithelial cells, especially in proximal tubular cells. It also located in renal capillary ansa, interstitial infiltrate cells and fibroblasts. It was concluded that PAR-2 was active in interstitial and tubular cells in the early phase of fibrotic process and played an important role in mediating the tubulointerstitial lesion after UUO.     

P物质在成骨细胞分化过程中对转录因子Osterix表达的影响

目的:在成骨细胞分化过程中检测转录因子Osterix的表达,探讨P物质调控成骨细胞分化及骨形成的分子机制.方法:原代培养大鼠骨髓基质干细胞(rMSCs),并诱导其向成骨细胞定向分化.采用RT-PCR法检测转录因子Osterix在P物质和/或P物质NKI受体拮抗剂L732138干预下的表达.结果:在诱导成骨细胞定向分化的过程中,与空白对照组相比,P物质组转录因子Osterix的表达增强(LSD-t=0.117,P<0.01),P物质NK1受体拮抗剂L732138组转录因子Osterix的表达差异无统计学意义(LSD-t=0.008,P>0.05);与P物质组相比,P物质与P物质NK1受体拮抗剂L732138组转录因子Osterix的表达降低(LSD-t=-0.172,P<0.01).结论:P物质可以促进转录因子Osterix的表达,其受体拮抗剂L732138具有拮抗作用;P物质可通过促进转录因子Osterix的表达,促进成骨细胞分化及骨形成.     

Effect of gingerol on substance P and NK1 receptor expression in a vomiting model of mink

Background Gingerol is the generic term for pungent constituents in ginger, which has been reported to be effective for inhibiting vomiting. We attempted to investigate the antiemetic effect of gingerol and its effective mechanism on substance P and NK1 receptors in minks. Methods The antiemetic effect of gingerol was investigated during a 6-hour observation on a vomiting model in minks induced by cisplatin, （7.5 mg/kg, intraperitoneal）. The distribution of substance P and NK1 receptors in the area postrema and ileum were measured by immunohistochemistry, and the expression of NK1 receptor in the area postrema and ileum were measured by Western blotting. Results The frequency of cisplatin induced retching and vomiting was significantly reduced by pretreatment with gingerol in a dose-dependent manner （P 〈0.05）. Substance P-immunoreactive was mainly situated in the mucosa and submucosa of the ileum as well as in the neurons of the area postrema. The immunoreactive production of NK1 receptor was mainly situated in the muscular and submucosa of ileum and the neurons of area postrema, gingerol markedly suppressed the increased immunoreactivity of substance P and NK1 receptor induced by cisplatin in a dose-dependent manner （P 〈0.05）, and exhibited effective inhibition on the increased expression levels of NK1 receptor in both the ileum and area postrema dose-dependently （P 〈0.05）. Conclusions Gingerol has good activity against cisplatin-induced emesis in minks possibly by inhibiting central or peripheral increase of substance P and NK1 receptors.     

P物质与小鼠病毒性心肌炎机制研究

目的P物质广泛分布于中枢神经系统和外周组织如心脏内神经组织内,P物质在病毒性心肌炎病理生理中的作用尚不清楚,本实验研究P物质在小鼠病毒性心肌炎病理生理中的变化。方法脑心肌炎病毒（encephalomyocarditis virus,EMCV）接种4周龄DBA/2小鼠制成病毒性心肌炎模型。免疫组化法检测P物质阳性细胞在病毒性心肌炎小鼠心脏组织内的分布,酶免疫分析法测定P物质在病毒性心肌炎小鼠血清和心脏组织的水平。结果病毒性心肌炎小鼠心脏组织内P物质水平和P物质阳性细胞密度均低于正常对照组（P〈0.05）。小鼠心脏组织P物质水平与小鼠心脏质量/体质量比值成负相关（r=-0.460,P〈0.05）。小鼠血清与心脏组织P物质水平成正相关（r=0.399,P〈0.05）。病毒性心肌炎小鼠血清P物质水平低于正常对照组（P〈0.05）。结论病毒性心肌炎小鼠P物质血清水平降低,心脏组织内分布减少,可能反映心脏内神经组织受损,并引起心脏电活动调控和神经内分泌调节过程的改变。     

IL-29调节的肥大细胞膜表面和胞浆内蛋白酶激活受体表达分析

目的:检测白细胞介素(interleukin,IL)-29引起的肥大细胞膜表面和胞浆内蛋白酶激活受体(protease activated receptor ,PAR)-1,2,3,4表达?方法:肥大细胞P815培养后以不同浓度的IL-29激发肥大细胞,在不同时间点收集细胞,给予透膜和非透膜处理后用流式细胞术检测肥大细胞膜表面和胞浆内蛋白酶激活受体的表达?结果:IL-29激发肥大细胞2?6和16 h后肥大细胞膜表面和胞浆内PAR-1表达与相应对照相比差异有统计学意义,而IL-29调节的膜表面PAR-1表达与胞浆内PAR-1表达相比,差异无统计学意义?IL-29引起的肥大细胞膜表面和胞浆内PAR-2,3,4表达与相应对照相比,差异无统计学意义;而IL-29激发2 h肥大细胞膜表面PAR-2表达与胞浆内PAR-2表达相比,差异有统计学意义;IL-29激发6 h肥大细胞膜表面PAR-3表达与胞浆内PAR-3表达相比,差异有统计学意义;IL-29激发2?6和16h后肥大细胞膜表面PAR-4表达与胞浆内PAR-4表达相比,差异有统计学意义?结论:IL-29可以下调P815肥大细胞膜表面和胞浆内PAR-1表达,且IL-29引起的膜表面和胞浆内PAR-1表达无差异;尽管检测到PAR-2,3,4在膜表面和胞浆内的表达情况不同,但IL-29对膜表面和胞浆内PAR-2,3,4表达的调节作用不明显;流式细胞术检测的膜表面和胞浆内PARs表达结果均可反应IL-29调节的P815肥大细胞PARs表达情况?     

中枢乙酰胆碱对脑脊液中P物质,儿茶酚胺含量的影响

目的 研究在心血管效应中枢调节机制中神经递质的关系。方法 收集家兔脑脊液，用放免法和荧光分光技术在测定侧脑室注射乙胆碱（ＡＣｈ）后，Ｐ物质（ＳＰ）和去甲肾上腺素（ＮＡ），肾上腺素（Ａ）含量的改变。结果 侧脑室注射ＡＣｈ后，ＳＰ含量较生理盐水对照组明显升高，而ＮＡ和Ａ的含量则明显降低。结果 脑内ＡＣｈ可刺激ＳＰ能神经元释放ＳＰ，而抑制去甲肾上腺素能和肾上腺素能神经元释放ＮＡ和Ａ。     

黄连素对巨噬细胞清道夫受体表达的影响

目的:探讨黄连素(berberine)对巨噬细胞清道夫受体CD36、LOX-1、CD68等表达的影响.方法:以佛波醇酯(PMA)诱导分化的单核源巨噬细胞为细胞模型,黄连素(50 μmol/L)预处理1h后,加入氧化低密度脂蛋白(oxLDL)刺激,采用流式细胞仪检测巨噬细胞表面清道夫受体的表达.结果:单核细胞分化成巨噬细胞后,CD36表达明显升高,而黄连素预处理显著抑制CD36的表达.oxLDL刺激巨噬细胞24 h后,巨噬细胞表面清道夫受体CD36、LOX-1和CD68表达明显升高(P＜0.01),黄连素预处理后巨噬细胞表面CD36、LOX-1的表达受到抑制,但CD68的表达未受影响(P＞o.05).结论:黄连素抑制巨噬细胞表面清道夫受体CD36、LOX-1的表达,一定程度上可减少巨噬细胞通过清道夫受体途径对脂质oxLDL的吞噬.