临床分离大肠埃希菌ESBLs的检出率与耐药性分析

目的了解临床分离大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶的检出率和耐药情况,为临床合理选用抗生素提供依据。方法根据NCCLS推荐的琼脂稀释法进行药敏试验 用双纸片协同试验检测产ESBLs菌。结果108株临床分离大肠埃希菌检出产ESBLs菌62株,检出率为57.4%。ESBLs菌株对15种常用抗菌药物耐药率,对亚胺培南的耐药率低于2%,对哌拉西林/他唑巴坦耐药率为35.5%,对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率为45.2%,对头孢他啶的耐药率为46.8%,对其他药物的耐药率均较高。结论应加强对临床分离大肠埃希菌耐药性监测,指导临床合理使用抗生素,减少新的ESBLs的产生。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的耐药性分析

目的 了解大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的流行情况,分析产ESBLs细菌的耐药性.方法 对154株大肠埃希菌用表型确证试验检测ESBLs,用Kirby-Bauer琼脂扩散法做药物敏感试验.结果 154株大肠埃希菌中共检出产ESBLs菌80株,检出率51.95%.在各类标本中,尿中产ESBLs菌株分离率最高(52.50%),其次是痰(22.50%).除亚胺培南、美罗培南、头孢西丁、哌拉西林/他唑巴坦和阿米卡星外,产ESBLs菌株对其他8种抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBLs菌株(P<0.05).结论 该院产ESBLs大肠埃希菌株对多类药物表现出较高的耐药率,临床应加强对产ESBLs大肠埃希菌耐药性监测,严格掌握抗生素的使用指征,防止耐药菌株的传播流行.     

大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯菌AmpC酶及ESBLs酶的检测及耐药性分析

目的：了解我院大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产AmpC酶和产ESBLs的情况及耐药性分析，为临床合理用药提供依据。方法：分别采用改良三维试验和CLSI／NCCLS推荐的纸片扩散法确证试验，检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产AmpC酶和产ESBLs菌株。结果：大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌单产AmpC酶菌株检出率分别为9．3％和4％，单产ESBLs检出率分别为28％和12％，同时产AmpC酶及ESBLs检出率分别为14．7％和0。两种菌单产AmpC酶和单产ESBLs的菌株以及同时产两种酶的菌株对亚胺培南保持较低耐药率，均低于15％，而对其它类抗菌素大于50％，耐药率均较高。两种菌产酶株与不产酶菌株耐药率相比，均有显著性差异（P〈0．01）。结论：产酶株耐药情况严重，应慎重选择用药，减缓耐药菌株的进一步发生发展。     

大肠埃希菌超广谱β-内酰酶产生及耐药分析

目的：探讨临床感染性标本中大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)的情况及耐药状况，以指导临床合理用药。方法：采用浓度梯度法(E-test法)和Vilek微生物自动分析仪进行ESBL的检测，采用K-B法对临床感染标本中分离出的120株大肠埃希菌进行药敏试验。结果：120株大肠埃希菌对亚胺培南耐药最低，耐药率为5％；其次为头孢哌酮／舒巴坦耐药率为5．8％；对丁胺卡那和头孢他啶也显示较低的耐药性，分别为8．3％和15．8％。120株大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶为18，33％。结论：产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌对广谱头孢菌素及氨曲南耐药，耐药性明显高于非产酶株。亚胺培南和头孢派酮／舒巴坦可作为ESBL阳性菌株感染治疗的首选药物。     

产超广谱β－内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测及耐药性分析

目的：对产生超广谱β－内酰胺酶（ESBLs)的肺炎克雷伯菌大肠埃希菌进行耐药检测,指导临床合理用药。方法：采用双纸片扩散法对292株从临床分离的非重复株中检出68株产ESBLs菌,用K－B法检测其对11种抗生素的敏感性。结果：ESBLs菌总阳性率23．3％;产ESBLs菌对头孢他啶,头孢西汀,阿米卡星部分敏感,对亚胺培南100％敏感,对头孢西汀,头孢噻肟,头孢呋辛耐药率达83．3％－100％,显著高于不产ESBLs菌对抗生素耐药率（X2检验,P＜0．05）,对阿米卡星,头孢西汀,环丙沙星,复方SMZ交叉耐药达88．9％,结论：治疗ESBLs菌引起感染应选用亚胺培南或含β－内酰胺酶抑制剂复合抗生素。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的检测和耐药分析

我们对 6 1株大肠埃希菌进行超广谱 β 内酰胺酶的检测和常规药敏试验 ,以探讨它们其中的内在联系。1　材料和方法1 1　材料　 (1)菌株来源 :2 0 0 0年 2月～ 5月从临床各类标本中分离。 (2 )药敏纸片 :头孢他啶 (ＣＡＺ)、头孢噻肟(ＣＴＸ)、阿米卡星 (ＡＭＫ)、庆大霉素 (ＧＭ )、妥布霉素(ＴＭ ) (北京天坛生物技术公司 ) ,氨曲南 (ＡＺＴ)、亚胺硫霉素 (ＩＰＭ )、头孢曲松 (ＣＲＯ )、环丙沙星 (ＣＩＰ)、四环素(ＴＥ)、复方新诺明 (ＳＸＴ) (杭州天和生物试剂有限公司 )、头孢他啶 (ＣＡＺ) /克拉维酸 (ＣＡ)、头孢噻肟 (ＣＴＸ) /克…     

产ESBLs大肠埃希菌I类整合子与耐药性关系分析

目的了解I类整合子在产ESBLs和非产ESBLs大肠埃希菌中分布流行状况,分析I类整合子在细菌多重耐药中的作用。方法根据NCCLS推荐的琼脂稀释法进行药敏试验,用双纸片协同试验检测产ESBLs菌,PCR扩增Ⅰ类整合酶基因。结果大肠埃希菌ESBLs和I类整合子的检出率分别为57.4%和45.4%,I类整合子在产ESBLs菌的分布明显高于非产ESBLs菌。结论I类整合子的存在与细菌产生ESBLs相关,影响着临床分离株多重耐药率的高低。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测及耐药性分析

目的:对产生超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的肺炎克雷伯菌大肠埃希菌进行耐药检测,指导临床合理用药。方法:采用双纸片扩散法对292株从临床分离的非重复株中检出68株产ESBLs菌,用K-B法检测其对11种抗生素的敏感性。结果:ESBLs菌总阳性率23.3％;产ESBLs菌对头孢他啶、头孢西汀、阿米卡星部分敏感,对亚胺培南100％敏感,对头孢西汀、头孢噻肟、头孢呋辛耐药率达83.3％～100％,显著高于不产ESBLs菌对抗生素耐药率(X_2检验,P<0.05),对阿米卡星、头孢西汀、环丙沙星、复方SMZ交叉耐药达88.9％。结论:治疗ESBLs菌引起感染应选用亚胺培南或含β-内酰胺酶抑制剂复合抗生素。     

大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶基因型及耐药性研究

 目的 了解沈阳地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的流行和耐药特点,初步确定产ESBLs大肠埃希菌的基闪型.方法 收集沈阳地区大肠埃希菌临床分离株246株,通过CLSI确认试验确认产ESBLs大肠埃希菌,应用K-B纸片法进行药敏试验,采用PCR方法检测ESBLs的基冈型.结果 产ESBLs大肠埃希菌共127株(51.6%),对头孢噻肟、头孢曲松、氨曲南、头孢他啶、头孢两丁及阿莫西林/克拉维酸的耐药率分别是:68.3%、92%、43.1%、24.4%、10.5%及37.4%,亚胺培南和美洛培南的敏感率均为100%;在72株CTX-M型中53株(60.2%)为CTX-M-9型、15株(17%)为CTX-M-1型,4株(4.6%)同时携带了CTX-M-9及CTX-M-1两种基因.结论 产ESBLs大肠埃希菌具有多重耐药的特点,产ES-BLs的大肠埃希菌大都携带CTX-M型ESBLs基因.     

237株ESBLs克雷伯菌和大肠埃希菌的耐药检验

目的：了解超广谱β－内酰胺酶（ESBLs)克雷伯菌和大肠埃希菌的阳率率和耐药性,方法：应用双纸片协同试验法,检测在我院分离到237株克雷伯菌和大肠埃希菌产ESBLs特性,结果：ESBLs总阳性率为23．6％,大肠埃希菌ESBLs,阳性率为24．5％,克雷伯菌ESBLs阳性率为22．1％,通过缩短纸片间的距离至16－18mm,在一定程度上,提高了提该方法的敏感性,结论：我院分离的克雷伯菌和大肠埃希菌ESBLs阳性率较低,双纸片协同试验法的敏感性值得进一步研究提高。     

2006年度临床常见细菌分布及耐药性监测分析

目的了解2006年度本院细菌分布及对抗菌药物耐药情况,为临床抗感染治疗提供依据。方法药物敏感性试验采用琼脂纸片扩散法,耐药性分析采用WHONET 5.4软件。结果2006年度我院共收集患者首次分离株细菌1 497株,革兰阴性菌878株,革兰阳性菌400株,真菌219株。铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、粪肠球菌、阴沟肠杆菌是最常见菌,检出率分别为17.0%、13.2%、8.9%、7.0%、6.9%、4.7%、3.7%、3.2%。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的比例分别为63.9%、82.1%,未发现对万古霉素和替考拉宁耐药的葡萄球菌。肠球菌对万古霉素耐药率为1.0%,对替考拉宁耐药率为3.8%。革兰阴性菌对亚胺培南-西拉司丁钠的敏感性最好,产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌和克雷伯菌株的检出率分别为26.1%和34.2%。在痰标本中铜绿假单胞菌检出率最高,为22.2%,对亚胺培南-西拉司丁钠和头孢他啶敏感性最好;在血标本中大肠埃希菌检出率最高,共9株,占血标本阳性率的18.4%,对万古霉素敏感性最好,耐药率为0。结论加强细菌耐药性监测,以推动临床抗菌药物的合理使用。     

2010年临床分离常见革兰阴性杆菌耐药监测结果分析

目的：分析2010年临床分离分离革兰阴性杆菌的耐药情况,了解本地的常见革兰阴性杆菌的分离及耐药流行情况。方法：运用WHONET5.4软件对2010年分离的常见临床革兰阴性杆菌进行统计分析。结果：在2010年分离的常见革兰阴性杆菌中,大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌及铜绿假单胞菌分别占前三位。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产ESBLs的检出率分别为72.22%、43.75%,产ESBLs株的耐药率明显高于非产ESBLs株,大肠埃希菌产ESBLs株对头孢他啶、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南的耐药率分别为32.1%、3.6%、25%0、%;肺炎克雷伯菌产ESBLs株对哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南的耐药率分别为35.3%、38.9%、0%。除大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌以外的其他肠杆菌科细菌对哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南的耐药率为17.9%、14.3%0、%。铜绿假单胞菌对哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南、头孢他啶、孢哌酮/舒巴坦的耐药率分别为4.8%、5%、0%、4.8%。结论：本地的耐药情况与全国其他地方有相似的,但也有不同之处,所以我们应该加强本地耐药监测,特别是对ESBLs的监测更为重要,以便为临床合理用药提供依据,从而帮助控制耐药株的不断出现。     

Differential Effects of Procaine and Phenethyl Alcohol on Excision Repair of DNA in u.v.-irradiated Escherichia Coli

Summary

Experiments were performed to investigate the involvement of the cell membrane in the excision DNA repair process in Escherichia coli. Two membrane-binding drugs, procaine and phenethyl alcohol (PEA), inhibited liquid-holding recovery (LHR) in u.v.-irradiated E. coli wild-type and recA strains. In uvrB and polA strains where, after u.v.-irradiation, LHR was absent the two drugs had no effect. Both drugs markedly reduced the removal of u.v.-induced thymine dimers in the DNA of wild-type cells (H/r30). Analysis by alkaline sucrose gradients revealed that PEA inhibited the incision step in excision repair. In contrast, procaine had no effect on incision but apparently inhibited the late steps in excision repair. PEA dissociated DNA from the cell membrane, whereas procaine did not. The results suggest that the two drugs PEA and procaine inhibit LHR and the excision repair process operating on u.v.-induced damage in E. coli by at least two different mechanisms each of which may involve the cell membrane.     

Effects of Peroxide and Catalase on Near Ultraviolet Radiation Sensitivity in Escherichia Coli Strains

Summary

The role of peroxide and catalase on NUV radiation sensitivity was examined in two repair competent E. coli strains, AB1157 and B/r. Exponential phase B/r is considerably more sensitive to NUV radiation than exponential phase AB1157. However, resistance to 5 mmol dm^?3 H₂O₂ was induced in both AB1157 and B/r by pretreating growing cells with 30 μmol dm^?3 H₂O₂. Pretreatment also induced resistance to broad-band NUV radiation in these strains. The addition of catalase to the post-irradiation plating medium increased survival to the same extent as that provided by pretreatment with 30 μmol dm^?3 H₂O₂, in both strains. The NUV radiation sensitivity seen in B/r does not appear to be due to a deficiency in enzymes that scavenge H₂O₂, as a catalase deficient mutant, E. coli UM1, is more resistant to NUV radiation than B/r. Also, assays for H₂O₂ scavenging ability show little difference between AB1157 and B/r in this respect. Two hypotheses are put forward to account for the sensitivity of exponential phase B/r. Whilst it is apparent that peroxides and catalase do have a role in NUV radiation damage, it is clear that other factors also influence survival under certain conditions.     

脑膜炎大肠杆菌侵袭素ibeA蛋白在大肠杆菌中的表达和纯化

目的:为了研究大肠杆菌ibeA的有效表达方法。方法:通过PCR扩增得到大量ibeA基因,并将扩增后的ibeA蛋白基因插入pGEX载体,转化E.coliDH5α,得到ibeADNA重组子的克隆。并以包涵体和可溶形式获得大量表达。结果:亲和层析纯化后获得了大量纯化蛋白,所获得的ibeA蛋白具有良好的抗原性。结论:该方法为进一步研究ibeA介导E.coli穿入血脑屏障的机理,以及筛选ibeA侵袭素的拮抗剂奠定了基础。     

大肠杆菌外膜蛋白交叉保护抗原研究

目的：阐明大肠杆菌不同菌株的外膜蛋白之间的免疫交叉反应性和外膜蛋白抗血清在致病性大肠杆菌感染中的交叉保护价值。方法：选择大肠杆菌J5株进行实验研究。采用Triton-EDTA提取Triton不溶物质获得J5外膜蛋白,肌肉途径免疫制备兔抗J5外膜蛋白抗血清: 通过ELISA方法,定量测定J5具代表性的致病性大肠杆菌感染6h后的小白鼠进行被动保护试验。结果：（1）兔抗J5外膜蛋白抗血清与8株大肠杆菌外膜提取物存在广泛的交叉反应;（2）兔抗1J5外膜蛋白抗血清对致病型大肠杆菌和侵袭型大肠杆菌感染具有较强的保护作用,对产毒素型大肠也具有一定的保护性。结论：大肠肝菌中不菌株的外膜蛋白之间广泛存在交叉反应抗原,其抗血清对该属致病性菌株感染具有一定的交叉被动保护价值。这一结论为研制临床免疫制剂和疫苗提供了一定基础。     

大肠杆菌表达系统在红霉素基因工程中应用的研究进展

大肠杆菌表达系统在红霉素基因工程中的应用面临着许多难题：聚酮合成酶中ACP的后修饰、6-dEB生物合成前体供应、大环内酯糖基化修饰等。通过向大肠杆菌中转入枯草杆菌磷酸泛酰巯基转移酶基因sfp，使大肠杆菌中合成的ACP得以后修饰；6-dEB生物合成前体丙酰CoA和丙二酰CoA可通过Pfeifer途径和Dayem途径提供；目前，在大肠杆菌体内已可以合成6-dEB。利用大肠杆菌系统合成新的大环内酯化合物、对大环内酯糖基化修饰和提高大肠杆菌系统合成大环内酯类抗生素产量将是今后研究的重点。