甘草酸二胺抗大鼠肾间质纤维化作用及其机制

目的探讨甘草酸二胺对肾间质纤维化的影响及其与TGF-β1／Smad2通路的关系。方法以Wistar大鼠单侧输尿管梗阻（UUO）为模型，在不同的时间点（7、14、28d）处死动物，以Masson染色观察甘草酸二胺治疗前后梗阻侧。肾小管的损害、肾间质纤维化指数；以免疫组化染色观察肾小管间质中转化生长因β1（TGF—β1）、Smad2信号蛋白及纤维连接蛋白（FN）等的表达情况；结果①随着梗阻时间的延长，肾小管损害、肾间质纤维化程度逐渐加重，呈时间依赖性（P〈0．01）；TGF—β1、Smad2、FN蛋白呈时间依赖性上调（P〈0．01），均显著高于假手术组（P〈0．01）；TGF—β1与Smad2、Smad2与FN、TGF—β1与FN蛋白之间均呈显著正相关（r=0．987，r=0．992，r=0．981，均P〈0．01）。②甘草酸二胺能改善UUO所致的肾间质纤维化程度（P〈0．01），下调肾脏组织TGF—β1、Smad2、FN蛋白的表达（P〈0．01）。结论甘草酸二胺能减轻UUO所致的。肾间质纤维化损伤，其作用机制可能是通过抑制TGF-β1／Smads通路的激活，减少肾间质纤维连接蛋白的沉积，减轻肾间质的纤维化。     

山莨菪碱对梗阻性肾病大鼠肾间质纤维化的抑制

目的：探讨山莨菪碱对梗阻性肾病大鼠肾间质纤维化（RIF）的影响及机制。方法：将27只SD大鼠随机分为假手术组（SHAM,S组）、模型组（UUO,U组）及山莨菪碱治疗组（A组,14mg·kg^-1·d^-1）。U组和A组采用单侧输尿管结扎术（UUO）制作肾小管间质纤维化的动物模型。术后第11天处死大鼠,肾组织HE染色及Masson染色后进行图像分析,评定各组肾小管间质损害及肾间质纤维化状况;用免疫组织化学方法检测各组大鼠肾间质的转化生长因子-β1（TGF—β1）的表达。结果：U组肾小管间质损伤指数（TDI）及肾间质纤维化指数（TFI）均明显高于S组（P〈0．01）;U组TGF—β1的表达均明显高于S组（P〈0．01）;A组的上述各指标分别较U组降低（P〈0．05）;TDI、TFI分别与TGF—β1的表达呈正相关。结论：山莨菪碱对梗阻性肾病大鼠肾间质纤维化具有一定的抑制作用,其机制可能是抑制肾间质细胞TGF—β1的表达而在一定程度上减轻了RIF。     

活性维生素D3抑制UUO模型大鼠肾间质纤维化作用的研究及其对TGF-β1，α—SMA表达的影响

目的：探讨活性维生素D3对单侧输尿管梗阻模型（UUO）大鼠肾小管间质纤维化的抑制作用,研究该病理过程中转化生长因子β1（TGF—β1）,α-平滑肌肌动蛋白（α—SMA）的表达变化。方法：36只雄性Wistar大鼠,随机分为三组,活性维生素D。组、假手术组、模型组,每组12只。造模后活性维生素D。组给予罗盖全（骨化三醇）灌胃（3ng／100g）,假手术组及UUO模型组给予等量生理盐水灌胃。三组大鼠于给药后第14天,28d分批（n=6）处死,留取造模侧肾脏。用HE染色及Masson染色法观察肾小管间质纤维化程度,用免疫组化法测定TGF-β1,α-SMA在各组大鼠造模侧肾脏的表达情况。结果：免疫组织化学显示：UUO模型组大鼠的肾脏组织中TGF—β1及α—SMA的表达显著高于假手术组（P〈0．05）,而在活性维生素D3治疗组中,TGF—β1及的n—SMA表达低于UUO模型组（P〈0．05）,肾脏组织形态学显示：模型组肾间质纤维化程度明显高于假手术组,活性维生素D3组肾间质纤维化程度明显小于模型组（P〈0．05）。结论：活性维生素D3能有效抑制UUo大鼠肾间质中TGF—β1及Ⅱ-SMA的表达,从而减轻UU0大鼠肾间质纤维化程度。     

高迁移率族蛋白B1在肾间质纤维化中作用

目的：观察高迁移率族蛋白B1（HMGB1）在肾小管间质纤维化大鼠模型中的表达,探讨肾炎舒对肾小管间质纤维化的疗效及作用机制。方法：将36只大鼠随机分为假手术组、模型组、肾炎舒治疗组[378mg／（kg·d）],采用单侧输尿管结扎术（UUO）制作肾小管间质纤维化大鼠模型,术后第7天及第14天分别处死各组中6只大鼠。检测各组大鼠肾小管间质损害程度及组织中HMGB1、转化生长因子-B1（TGF．B1）的表达。结果：模型组HMGB1、TGF—β1的表达及肾小管间质损伤指数明显高于同期假手术组（P〈0．05）,肾炎舒治疗组HMGB1、TGF-β1的表达及肾小管间质损伤指数明显低于同期模型组（P〈0．05）。结论：HMGB1可能协同TGF-β1促进肾小管间质纤维化,肾炎舒胶囊可抑制肾组织中HMGB1及TGF-β1的表达,对肾间质纤维化有一定的防治作用。     

雌激素对实验性肾间质纤维化大鼠肾小管上皮细胞表型转化的影响

目的探讨雌激素在单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾间质纤维化模型中对肾小管上皮细胞表型转化的影响。方法雌性SD大鼠30只，随机分为4组：对照组；生理雌激素组（单纯UUO）；低雌激素组（UUO＋OVX）；高雌激素组（UUO＋E2）。21d后处死各组大鼠，用光镜观察梗阻肾组织病理变化。并用免疫组化和RT-PCK方法检测肾组织α-SMA蛋白和mRNA的表迭。结果生理雌激素组出现肾小管间质纤维化改变，其肾组织α-SMA表迭上调，与对照组相比有统计学意义（P〈O．01）；和生理雌激素组相比，低雌激素组纤维化病变加重，α-SMA表达明显增多（P〈O．05）；而高雌激素组则病变减轻，上述表达减少（均为P〈O．05）。结论雌激素可能通过抑制UUO大鼠肾小管上皮细胞裹型转化而发挥延缓肾间质纤维化的作用。     

水飞蓟素对肾小管间质纤维化大鼠转化生长因子-β_1 mRNA和金属蛋白酶组织抑制物-1 mRNA表达的影响

目的探讨水飞蓟素对肾小管间质纤维化大鼠肾脏病理、肾组织Ⅲ型胶原蛋白及转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA和金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)mRNA表达的影响。方法 SD大鼠72只随机分为假手术组、模型组和治疗组,每组24只。行单侧输尿管梗阻(UUO)术诱导肾小管间质纤维化模型。治疗组大鼠给予30 mg.kg-1水飞蓟素,模型组及假手术组给予生理盐水灌胃。分别于UUO术后第7、14、21天各组随机处死8只大鼠,光镜下观察肾组织的病理改变,免疫组织化学法评价肾组织Ⅲ型胶原蛋白的表达,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组肾组织TGF-β1mRNA及TIMP-1 mRNA的表达水平。结果各时间点肾小管间质损伤和肾组织Ⅲ型胶原蛋白表达量在治疗组和模型组均较假手术组明显增多(P均<0.01),治疗组较模型组则明显减轻(P均<0.05)。各时间点治疗组和模型组肾脏TGF-β1mRNA和TIMP-1 mRNA表达量明显高于假手术组(P均<0.01),治疗组则明显低于模型组(P均<0.05)。UUO大鼠肾间质中TGF-β1mRNA、TIMP-1 mRNA表达量与肾小管间质损伤评分均呈正相关(r=0.915、0.838、P均<0.01)。TGF-β1mRNA、TIMP-1 mRNA表达量与肾组织Ⅲ型胶原蛋白表达量均呈正相关(r=0.833、0.786、P均<0.01)。结论在UUO大鼠模型中,水飞蓟素通过下调TGF-β1mRNA、TIMP-1 mRNA的表达,减少Ⅲ型胶原的产生,从而发挥延缓肾间质纤维化的作用。     

肾纤复元胶囊对单侧输尿管梗阻大鼠模型肾间质纤维化的抑制作用及机制探讨

目的观察肾纤复元胶囊对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠模型的治疗作用并探讨其机制。方法将48只SD大鼠随机分为假手术（SOR）组、UUO模型组、氯沙坦治疗组（LOS组）和肾纤复元胶囊治疗组（SXFYC组）。后三组采用经典的单侧输尿管梗阻术建立肾间质纤维化大鼠模型。观察术后第7、14天各组大鼠血尿生化指标变化、肾组织病理变化，检测转化生长因子β1（TGF—β1）、α-平滑肌肌动蛋白（α—SMA）、Ⅰ型胶原（ColⅠ）和纤维连接蛋白（FN）在肾组织中的表达及TGF-β1、α-SMA、ColⅠ和FN在基因水平的表达情况。结果不同组大鼠术后第7、14天24小时尿蛋白总量差异无显著性（P〉0．05），两治疗组血肌酐明显低于UUO模型组（P〈0．05），两治疗组间差异无统计学意义（P〉0．05）；光镜下肾组织病理切片显示两治疗组与同一时间点UUO模型组相比，肾间质纤维化程度显著降低（P〈0．05），两治疗组间差异无统计学意义（P〉0．05）；免疫组化和RT—PCR结果表明，两治疗组各时间点TGF—β1、α—SMA、ColⅠ和FN的表达均低于UUO模型组（P〈0．05），两治疗组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论肾纤复元胶囊可从一定程度上减轻UUO大鼠肾间质纤维化程度，其作用机制可能与下调TGF—β1和α—SMA表达、抑制ColⅠ和FN的合成有关。     

苦参碱对UUO模型肾小管间质MMP-3、TIMP-1和FN影响的实验研究

目的 观察苦参碱对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠模型肾小管间质基质金属蛋白酶-3（MMP-3）、基质金属蛋白酶组织抑制物-1（TIMP-1）和纤维联结蛋白（FN）表达水平的影响，初步探讨其对小管间质纤维化的作用机制。方法 实验采用UUO肾间质纤维化模型作为研究模型，分为正常组、假UUO组、UUO组、福辛普利治疗组（F组）、苦参碱大剂量治疗组（E组）和苦参碱小剂量治疗组（D组）。运用免疫组化技术半定量分析实验第7、14d各组的MMP-3、TIMP-1和FN表达水平。结果 UUO组和治疗组的MMP-3表达水平第7、14d均低于正常组和假UUO组（P〈0．05），但三个治疗组的表达水平高于UUO组（P〈0．05）；TIMP-1和FN在正常组和假UUO组中的表达最低，而三个治疗组的表达均低于UUO组（P〈0．05）；MMP-3、TIMP-1和FN在E组与F组间的表达差异均无统计学意义（P〉0．05）；在UUO组中，MMP-3与FN、MMP-3与TIMP-1的免疫组化半定量分析均呈负相关（P〈0．01）。结论 苦参碱可以部分恢复小管间质MMP-3的表达水平，降低TIMP-1和FN的表达水平．从而延缓肾小管间质纤维化的进程。     

血府逐瘀胶囊对单侧输尿管梗阻大鼠SnoN和Ski表达的影响

目的：探讨血府逐瘀胶囊对单侧输尿管梗阻所致大鼠肾间质纤维化的作用及其机制。方法：雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、血府逐瘀胶囊治疗组，采用单侧输尿管结扎术（UUO）建立大鼠肾间质纤维化模型。术后21d取各组大鼠肾组织HE染色及六胺银染色（PASM），观察肾组织病理变化；检测大鼠血肌酐和尿素氮含量，观察肾功能变化；放射免疫法检测肾组织中Ⅲ型前胶原含量，观察肾纤维化程度；Western blot检测肾组织中核转录共抑制因子SnoN与Ski蛋白表达水平，观察TGF—β1／Smad信号转导通路中逆向调控信号分子表达水平的变化。结摹：与假手术组比较，模型组大鼠肾小管基底膜明显增厚，部分肾小管上皮细胞变性，肾小管萎缩，管腔显著扩张，。肾间质明显增宽；血肌酐与尿素氮含量以及肾组织中Ⅲ型前胶原含量显著增加：SnoN、Ski蛋白表达显著减少。血府逐瘀胶囊治疗组大鼠梗阻侧肾组织的病理变化明显改善，血肌酐与尿素氮水平以及肾组织中Ⅲ型前胶原含量明显降低，SnoN蛋白表达水平显著增加，而Ski蛋白表达没有改变。结论：血府逐瘀胶囊可通过恢复SnoN蛋白表达水平，抑制TGF—β1，靶基因的活化，从而改善UUO大鼠的。肾功能和肾间质纤维化程度。     

益气活血方对肾间质纤维化大鼠肾脏TGF—β／smad信号通路及结缔组织生长因子的影响

目的：观察益气活血方对肾间质纤维化大鼠肾脏TGF-β／smad信号通路及结缔组织生长因子（connectivetissue growthfactor,CTGF）的影响。方法：健康雄性Wistar大鼠30只诱导建立单侧输尿管梗阻（unilateralureteralobstruction,UUO）致肾小管间质纤维化模型,模型成功后随机分为模型组,益气活血方大、中、小剂量组和西药组,另取健康雄性Wistar大鼠6只设为假手术组。3周后处死大鼠,称取体质量;取血清检测肌酐（creatinine,Cr）、尿素氮（bloodureanitrogen,BUN）水平;取肾脏组织采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应法和免疫印迹法检测各组转化生长因子G（transforminggrowthfactor—B,TGF-β）、smad2、smad7、CTGFmRNA和蛋白表达水平;苏木精一伊红染色和Masson染色检测各组肾间质纤维化指数。结果：模型组大鼠血清Cr和BUN值较假手术组偏高;与模型组比较,大剂量益气活血方可以降低Cr和BUN值,但差异无统计学意义。苏木精-伊红染色和Masson染色显示模型组肾小管上皮细胞萎缩,大部分肾小管管腔扩张,间质纤维组织增生,大量炎性细胞浸润,肾小球数目明显减少,胶原成分显著增加。益气活血方大剂量组、中剂量组和西药福辛普利钠组大鼠肾间质炎性细胞浸润、纤维组织增生、肾小管扩张情况较模型组明显减轻,胶原成分明显减少。与假手术组比较,模型组大鼠肾脏组织中TGF—D、smad2和CTGFmRNA以及蛋白表达水平明显升高（P〈0．05）,smad7的表达水平则明显降低（P〈0．05）。与模型组比较,益气活血方大剂量组和中剂量组大鼠TGF-β、smad2、CTGFmRNA和蛋白表达明显下降（P〈0．01,P〈0．05）,smad7表达明显升高（P〈0．01,P＜0．05）。结论：UUO大鼠肾组织中CTGFmRNA的表达可能通过TGF-β／smad信号通道进行调节;益气活血方可以通过下调TGF—β、smad2和上调smad7的表达来抑制CTGF表达,进而遏制肾纤维化的进展。