乌司他丁对大鼠重症急性胰腺炎肺损伤中SP-A的影响研究

【摘要】目的 观察乌司他丁对重症急性胰腺炎（SAP）肺损伤大鼠的肺泡表面活性物质相关蛋白A（SP-A）含量的影响,探讨其对SAP肺脏损伤的保护机制。方法 SD大鼠60只,随机分为空白对照组、SAP模型组、乌司他丁组 3组,每组20只。通过胆胰管内逆行注入5%牛磺胆酸钠法建立大鼠SAP 致急性肺损伤模型,用ELISA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中SP-A的含量,离心灌洗液行细胞分类计数,测量肺湿/干重比以判断肺水肿情况。结果 SAP组大鼠肺湿/干重比值、支气管肺泡灌洗液中的中性粒细胞含量高于空白对照组和乌司他丁治疗组,乌司他丁组大鼠肺湿/干重比值和中性粒细胞含量高于空白对照组(P < 0.05）;SAP组支气管肺泡灌洗液中SP-A含量和巨噬细胞低于空白对照组和乌司他丁组,乌司他丁组低于对照组,SAP组和乌司他丁组淋巴细胞高于空白对照组(P < 0.05);3组大鼠肺泡灌洗液中总细胞数差异无统计学意义。结论 SAP肺损伤时肺泡内SP-A含量明显减少,乌司他丁对SAP时肺泡内SP-A起保护作用。     

乌司他丁不同给药途径对重症急性胰腺炎模型大鼠治疗作用的研究

目的:探讨乌司他丁经2种给药途径对重症急性胰腺炎(SAP)模型大鼠的治疗作用及机制。方法:50只♂SD大鼠随机分成假手术组(自由饮水)、SAP模型组、阳性对照药萘莫思他组和乌司他丁外周静脉、腹腔动脉给药组共5组,后4组建立SAP模型后分组给药,12h后观察肺、胰腺大体病理及组织学并评分,检测血清淀粉酶、肿瘤坏死因子(TNF-α)、血栓素B2(TXB2)和肺、胰腺组织中髓过氧化物酶(MPO)水平。结果:与SAP模型组比较,各药物组的淀粉酶、TNF-α、TXB2和肺、胰腺组织的MPO及组织学Hughes评分均明显降低(P<0.05);乌司他丁腹腔动脉给药组与其静脉给药组比较,除肺组织的MPO水平更高外(P<0.05),其余各项指标均明显降低(P<0.05)。结论:乌司他丁经腹腔动脉给药比经外周静脉给药对SAP治疗作用更明显,其作用机制可能与其抑制淀粉酶活性、抑制TNF-α、TXB等炎症介质释放以及肺、胰腺组织中的中性粒细胞的浸润及其活化程度有关。     

醒脑静联合乌司他丁对重症急性胰腺炎大鼠脑损伤的保护作用*

【摘要】目的 研究醒脑静联合乌司他丁对重症急性胰腺炎（SAP）大鼠脑损伤的保护作用。方法 120只雄性远交系大鼠随机分为12组：正常对照6 h组、24 h组,SAP 6 h组、24 h组,醒脑静处理6 h组、24 h组,乌司他丁处理6 h 组、24 h组,醒脑静联合乌司他丁处理6 h组、24 h组及阳性对照6 h组、24 h组;每组10只。分别在术后第6 h、24 h 观察神经功能评分。采集血液、胰腺组织、脑组织标本,观察血清淀粉酶水平、脑组织伊文蓝（EB）含量、胰腺组织及脑组织镜下病理学变化。应用放射免疫法检测血清肿瘤坏死因子（TNF）-α及白细胞介素（IL）-1β水平,应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测脑组织TNF-α 信使核糖核酸（mRNA）及IL-1β mRNA的表达。结果 醒脑静联合乌司他丁处理24 h组血清淀粉酶水平、脑组织EB含量、胰腺组织及脑组织镜下病理学评分、血清TNF-α及IL-1β水平、脑组织TNF-α mRNA及IL-1β mRNA的表达水平均比SAP 24 h组显著降低,而神经功能评分则显著升高（P < 0.01）。醒脑静联合乌司他丁处理24 h组与阳性对照24 h组的上述各指标相比差异均无统计学意义（P﹥0.05）。结论 醒脑静联合乌司他丁对SAP大鼠脑损伤有较好的保护作用。     

中性粒细胞趋化因子在重症急性胰腺炎中的作用

目的 探讨中性粒细胞趋化因子（CINC）在重症急性胰腺炎（SAP）发病机制中的作用。方法 采用向胆胰管逆行注射5％牛磺胆酸钠建立大鼠SAP模型,72只雄性SD大鼠随机分为手术对照组（40只）和SAP组（32只）,术后1、3、6、12h分别检测血清淀粉酶、胰腺组织病理学改变和肺干湿重比,免疫组织化学法检测胰腺和肺组织中CINC的表达。结果 与手术对照组相比,SAP大鼠的血清淀粉酶明显增高,胰腺组织学明显改变。SAP组术后1h胰腺腺泡细胞即有CINC蛋白的表达,且与胰腺组织病理改变呈正相关。SAP组术后3h肺泡细胞有CINC蛋白的表达。结论 CINC可能在SAP发病及其相关的急性肺损害（ALI）中起了重要的作用。     

山莨菪碱联合乌司他丁对重症胰腺炎大鼠模型的应用价值

目的探讨大剂量山莨菪碱联合乌司他丁治疗重症胰腺炎(SAP)的效果。方法取健康成年大鼠90只,依据随机数字表法分为对照组1(SAP组)、对照组2(SAP+乌司他丁治疗组)和观察组(SAP+大剂量山莨菪碱+乌司他丁治疗组),每组各30只。结果采用大剂量山莨菪碱联合乌司他丁治疗的观察组SAP大鼠血清淀粉酶、磷脂酶A2及内毒素水平低于对照组,3d存活率(73.33%)明显高于对照组;对照组2血清淀粉酶、磷脂酶A2及内毒素水平明显低于对照组1(P0.05)。结论大剂量山莨菪碱联合乌司他丁治疗SAP,能有效松弛Oddi括约肌,抑制蛋白酶反应,抑制炎性介质表达,延长SAP存活期。     

P选择素在大鼠胰腺移植缺血再灌注损伤中的作用

目的 探讨P选择素(selectin)在大鼠胰腺移植缺血再灌注损伤中的作用.方法 将45只SD大鼠随机分为假手术组(15只)和全胰十二指肠移植组(15对),于再灌注后1、3、6h取血测定血清淀粉酶水平,并切取胰腺标本进行组织病理学观察及P选择素免疫组化染色.结果 移植组胰腺组织损伤随再灌注时间的延长而加重,血淀粉酶升高,与中性粒细胞浸润直接相关;而假手术组胰腺组织损伤不明显,血淀粉酶不升高.移植组各时段P选择素均表达,且再灌注后1h即达高峰,假手术组P选择素不表达.结论 中性粒细胞的活化以及释放出各种蛋白酶和活性因子,是导致胰腺移植缺血再灌注损伤的直接原因.P选择素在大鼠胰腺移植缺血再灌注损伤的病理过程中起重要作用.     

乌司他丁对脓毒症致大鼠急性肾损伤肾功能及尿相关指标的影响

目的探讨乌司他丁(UTI)对盲肠结扎穿孔术(CLP)所致大鼠脓毒症急性肾损伤(AKI)的保护作用。方法 SD健康雄性大鼠55只,按随机化原则分成3组:正常对照组5只、模型组25只、乌司他丁治疗组25只,后两组再随机分为5个时间点(1h、6h、12h、24h、48h),每组每时间点各5只,采用盲肠结扎穿孔术复制脓毒症模型,乌司他丁治疗组,造模后立即给予乌司他丁10万U/kg,尾静脉注射,分别在各个时间点采血、留尿标本,进行肾功能血肌酐(Scr)、尿素(Urea),尿肾损伤分子(KIM-1)、白细胞介素-18(IL-18)和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)检测分析。结果与模型组相比,乌司他丁治疗组大鼠各时间点Scr、Urea,尿KIM-1、IL-18、NGAL浓度均显著降低,差异均有统计学意义(P0.05)。结论乌司他丁对脓毒症所致急性肾损伤具有一定的肾脏保护作用。     

P-选择素在大鼠重症急性胰腺炎时肺损伤中的作用

目的探讨重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)并发急性肺损伤(acutelung injure,ALI)之大鼠P-选择素浓度的变化及其机制。方法取20只大鼠,随机分为假手术组(A组)及胰腺炎组(B组),每组10只。胰管内逆行性注射3%牛磺胆酸钠的方法建立SAP并发ALI大鼠模型,24小时后检测血清淀粉酶、P-选择素和肺组织P-选择素浓度,并取胰腺和肺组织做病理形态学检查。结果制模后B组大鼠血清淀粉酶、P-选择素和肺组织P-选择素浓度较对照组显著升高(P<0.05);A组胸、腹腔内及胰腺、肺组织均无明显病理变化。B组腹水形成,腹腔内组织广泛分布有皂化斑,胰腺广泛水肿、出血、坏死,胸腔内有胸水形成,肺组织存在组织结构紊乱,灶性或片状肺不张,肺泡腔及间质出血等病理学改变,胰腺及肺组织均发现有大量的中性粒细胞浸润。结论SAP合并ALI时,血清P-选择素和肺组织P-选择素浓度均同时异常升高,提示它们在其发病机制中可能具有重要作用。     

AG490 对重症急性胰腺炎大鼠胰腺腺泡细胞凋亡的影响

摘要： 目的 探讨 AG490 对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠胰腺腺泡细胞凋亡及凋亡基因 FasL 和 Bcl-2 表达的影响。方法 健康 Wistar 大鼠 72 只, 按随机数字表法分为对照组(24 只)、 SAP 模型组(24 只)和 AG490 治疗组(24 只)。后 2 组采用 5%牛磺胆酸钠胆胰管内逆行注入诱导 SAP 大鼠模型, 3 组大鼠均于术后 6 h、 12 h、 24 h 心脏采血, 检测血清淀粉酶。剖腹取胰腺组织, 光镜下观察胰腺组织病理改变并进行病理学评分, TUNEL 法检测胰腺腺泡细胞凋亡指数, RT-PCR 检测胰腺组织 FasL、 Bcl-2 mRNA 的表达。结果 与对照组比较, SAP 模型组大鼠胰腺病理损伤加重, 病理评分增高, 血清淀粉酶明显升高, 胰腺腺泡细胞凋亡指数升高, FasL mRNA 表达明显升高, Bcl-2 mRNA 表达明显降低(P＜0.05 或 P＜0.01)。与 SAP 模型组相比较, AG490 治疗组大鼠胰腺病理损伤明显改善, 病理评分降低,血清淀粉酶明显降低, 胰腺腺泡细胞凋亡指数升高, FasL mRNA 表达明显升高, Bcl-2 mRNA 表达明显降低(P＜0.05 或 P＜0.01)。结论 抑制 JAK/STAT3 信号通路可能通过调节凋亡相关基因, 增加胰腺腺泡细胞凋亡, 从而减轻胰腺炎症反应及病理损害。     

乌司他丁对实验性急性胰腺炎胰腺组织病理学变化的影响

目的观察在牛磺胆酸钠溶液逆行胆胰管注射诱发的大鼠急性胰腺炎模型中,乌司他丁的应用对胰腺组织病理学改变的影响,探讨胰酶抑制在急性胰腺炎治疗中的作用和急性胰腺炎发生和加重的机制。方法雄性SD大鼠72只,随机分成4大组。分别是EP组（3%牛磺胆酸钠逆行胆胰管注射组）;TP组（3%牛磺胆酸钠逆行胆胰管注射后30min经股静脉注入乌司他丁组）;CP组（0.9%氯化钠注射液逆行胆胰管注射组）;OP组（假手术组,只行开关腹术）。每大组18只动物,每大组再随机分成A、B、C三组,每组6只动物,分别于制模后3、6、24h后取血处死,留取标本。观测指标有血清淀粉酶、血清IL-6水平并在光镜下对胰腺病变进行双盲的组织病理学评分。结果 EP组和TP组动物随制模时间的增加,胰腺病理组织学评分亦增高。TP组与EP组相比,制模后24h,胰腺病理损害差异非常显著。制模后6h,24h血清IL-6水平TP组（489.81±33.88）pg/ml和（652.22±40.39pg/ml）明显低于EP组（619.07±42.25）pg/ml和（903.35±48.44）pg/ml（P〈0.01）。结论在此牛磺胆酸钠逆行胆胰管注射诱发的大鼠AP模型中,乌司他丁的应用对于大鼠胰腺组织病理学的发展有非常显著的抑制作用,同时还能够有效抑制血液中炎性介质的产生,从而对于急性胰腺炎的病程产生干预。乌司他丁有望在临床急性胰腺炎患者的治疗中发挥更加积极的作用。     

急性胰腺炎胰腺内皮素mRNA表达与肠壁通透性的关系及丹参的影响

目的探讨重症急性胰腺炎（SAP）胰腺内皮素（ET-1）mRNA表达与肠壁通透性的关系及丹参的作用。方法Wistar大鼠45只,随机分为3组：SAP模型组（SAP组）,SAP丹参治疗组（T纽）和假手术组（C组）,每组15只。SAP组用5％的牛磺胆酸钠复制大鼠SAP模型,T组按SAP组方式复制SAP模型,并分别即刻、8h及18h予丹参注射液肌注,剂量2mL／kg。24h处死动物。用原位杂交检查胰腺组织ET-1mRNA表达,检测血中ET-1、淀粉酶（AML）和内毒素（LPS）以及胰腺和回肠的病理变化;^125I-白蛋白测定肠壁通透性。结果SAP组胰腺和回肠病理损害明显,胰腺ET-1mRNA呈强阳性表达,血中ET-1、AML、LPS含量及腹水量以及肠壁通透性均显著高于C组（P〈O．01）;与SAP组比较,T组胰腺及回肠病理损害明显减轻,胰腺ET-1mRNA表达强度较弱,血中ET-1、AML、LPS及腹水量均显著下降（P〈O．01）,^125I-白蛋白测定肠壁通透性降低。结论（1）SAP时肠壁通透性增加的原因之一是胰腺ET-1mRNA的过度表达,使血中ET-1浓度升高,造成肠壁通透性增加;（2）丹参可减轻胰腺和肠道损伤,其机制之一是下调胰腺内ET-1mRNA的表达,对SAP及其肠道损伤有一定治疗作用。     

大黄素对重症急性胰腺炎致全身炎症反应综合征大鼠腹腔巨噬细胞ICAM-3的体外作用

目的研究在重症急性胰腺炎(SAP)导致全身炎症反应综合征(SIRS)的大鼠模型中,大黄素和地塞米松体外对腹腔巨噬细胞细胞间黏附因子(ICAM)-3蛋白表达水平的变化。方法经胆胰管逆行注入1.5%去氧胆酸钠溶液制备大鼠SAP/SIRS模型。重症急性胰腺炎SIRS模型制备:20只SD大鼠随机分为假手术组和重症急性胰腺炎SIRS模型组,每组10只。体外干预实验:将假手术组取出的腹腔巨噬细胞单独设为1组;将重症急性胰腺炎SIRS模型组取出的腹腔巨噬细胞分为大黄素干预组、地塞米松干预组、对照组。结果①胰腺组织病理学改变:与假手术组比较,SIRS模型组具有显著性病理改变。②各组大鼠腹腔巨噬细胞吞噬凋亡PMN能力比较差异均有统计学意义(P<0.05)。③流式细胞仪检测各组细胞ICAM-3表达情况比较差异均有统计学意义(P<0.05)。④免疫荧光技术检测各组细胞ICAM-3表达情况比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论大黄素可能通过改变巨噬细胞的胞膜ICAM-3的表达水平,增强腹腔巨噬细胞吞噬及清除凋亡细胞的能力。     

乌司他丁与奥曲肽联合治疗重症急性胰腺炎的疗效观察

目的：探讨乌司他丁与奥曲肽联合治疗重症急性胰腺炎（ SAP）的疗效。方法：125例SAP患者按随机数字表法分为对照组（n＝62）和观察组（n＝63）。对照组患者单用奥曲肽治疗,观察组患者采用乌司他丁、奥曲肽联合治疗,对比2组的总有效率、临床症状和体征改善时间、血及尿淀粉酶阳性率、C反应蛋白（ CRP）及炎症细胞因子水平、不良反应等指标。结果：治疗后,观察组患者腹痛缓解时间、胰腺水肿消退时间、住院时间明显短于对照组（ P ＜0.05）;观察组患者总有效率显著高于对照组（P＜0.05）;观察组患者血尿淀粉酶阳性率明显低于对照组（P＜0.05）;观察组患者CRP、白细胞介素-10（IL-10）、白细胞介素（ IL-15）和肿瘤坏死因子（ TNF-α）等指标明显优于对照组（ P＜0.05）;2组患者均未出现不良反应。结论：乌司他丁和奥曲肽联合治疗SAP的效果显著。     

乌司他丁联合奥曲肽治疗重症急性胰腺炎的效果观察

目的探讨乌司他丁联合醋酸奥曲肽治疗重症急性胰腺炎（SAP）的临床效果。方法将146例SAP患者按随机数字表法分为两组,每组各73例。对照组给予醋酸奥曲肽治疗,观察组在对照组的基础上加用乌司他丁治疗。比较两组的效果。结果观察组的总有效率为95.89%,明显高于对照组的83.56%（χ2=4.6953,P〈0.05）;观察组治疗后的CRP、TNF-α、IL-6、IL-10等血清炎症因子水平均较对照组明显下降（P均〈0.05）,胃肠减压、血淀粉酶恢复正常、腹痛消除、住院时间均短于对照组（P均〈0.05）,满意度为97.26%,明显高于对照组的84.93%（P〈0.05）。结论乌司他丁联合奥曲肽治疗SAP的效果肯定,两者具有很好的协同作用,可明显降低血清炎症因子水平,显著缩短住院时间,预后良好。     

新型特异性磷脂酶A2抑制剂对急性胰腺炎肺损伤的疗效研究

目的探讨一种新型磷脂酶A2（PLA2）抑制剂对重症急性胰腺炎（SAP）并发急性肺损伤（ALI）的保护作用。方法24只Wistar大鼠随机分为3组：假手术组（SO组）、SAP模型组（SAP组）、抑制剂预处理组（抑制剂组）。采用5％牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射的方法制备SAP模型,抑制剂组在术前30min经股静脉注射特异性PLA2抑制剂（5mg／kg）。3组于手术后12h处死大鼠并收集标本,测定3组血清淀粉酶、肺干湿比、大鼠血清和肺组织sPLA2活性,聚合酶链反应（PCR）法检测肺组织Ⅱ型分泌型PLA2抑制剂（sPLA2-ⅡA）mRNA的表达,光镜下观察胰腺和肺脏的病理变化并计算病理评分。结果SAP组血清淀粉酶、肺干湿比、血清和肺组织sPLA2-ⅡA、肺组织sPLA2-ⅡA mRNA表达、胰腺和肺组织病理评分明显高于其他2组（P〈0．01）;抑制剂组上述指标均低于SAP组（P〈0．01）,但仍高于SO组（P〈0．01）。结论该新型特异性PLA2抑制剂通过降低血清和肺组织PLA2的活性,对大鼠SAP并发肺损伤有一定的保护作用。     

重症急性胰腺炎时胰腺组织细胞凋亡与病变严重程度的关系

目的探讨实验性重症急性胰腺炎（SAP）胰腺组织细胞凋亡与胰腺病变严重程度的关系。方法28只SD大鼠随机分为两组：对照组7只、SAP组21只。牛磺胆酸钠诱导SD大鼠SAP模型，于造模成功后3、6、12h分别处死7只。检测血清淀粉酶浓度、胰腺组织学损伤评分（HI），TUNEL法检测胰腺组织细胞凋亡指数（AI）、免疫组化法检测Fas／FasL表达。结果12h时SAP组大鼠死亡1只，对照组无死亡。SAP组的血清淀粉酶浓度（U／L）在3h．6h、12h时分别为3904±737、6133±882、10606±2641（对照组1518±562，P=0．000），相应时点的H1分别是4．85±1．35、8．14±1．34、11．00±1．26（对照组为1．57±0．79，P=0．000），各组间差异有显著统计学意义。对应时间点的胰腺AI分别是1．200±0．497、0．886±0．389和0．700±0．352（对照组为1．028±0．403，），12h与3h的差异有统计学意义（P=0．047）。Fas的表达强度分别为108．00±10．02、93．14±8．17、73．33±9．52（对照组为102．00±13．24，P＝0．001），FasL分别为83．86±31．13、79．57±9．78、73．33±15．79（对照组为88．57±7．68，P=0．023）。SAP组AI与HI（r=-0．510，P=0．022）、AI与AMY（r=-0．471，P：0．036）分别呈负相关关系，Fas与AI（r=0．572，P=0．008）呈正相关关系。结论在实验性SAP大鼠中，胰腺组织细胞凋亡指数与胰腺组织学损伤程度呈负相关，诱导凋亡可能减轻胰腺炎的进展有关。     

丹参和氢化可的松对重症急性胰腺炎大鼠三磷酸肌醇及钙代谢的影响

目的:观察重症急性胰腺炎(SAP)动物模型三磷酸肌醇(IP3)的变化及与钙代谢的关系和丹参及糖皮质激素的影响。方法:50只SD大鼠随机分5组:SAP模型组(SAP组)、丹参治疗组(A组)、氢化可的松治疗组(B组)、丹参加氢化可的松治疗组(AB组)和对照组(C组),各10只。SAP组逆行胰胆管注射3%牛磺胆酸钠建立SAP模型,C组则注射生理盐水(NS)。SAP组和C组术后行阴茎背静脉注射NS;A组、B组和AB组如SAP组一样建立模型,术后分别注射丹参、氢化可的松、丹参加氢化可的松。18 h后,观察各组胰腺细胞IP3和细胞内钙(Ca2+)、血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、血清钙(血钙)和淀粉酶(AMY),以及胰腺的病理改变。结果:SAP组IP3、Ca2+、TNF-α、AMY和胰腺病理评分(PSP)显著高于A组、B组、AB组和C组(p0.05),其中AB组明显低于A组和B组(p0.05),但A、B组间无明显差异(p0.05);C组的PSP明显低于A组、B组和AB组(p0.05),C组的IP3和Ca2+明显低于AB组(p0.05),AB组与C组的TNF-α间无明显差异(p0.05);IP3与Ca2+,IP3与TNF-α间呈明显正相关(r分别为0.987和0.937,p0.05);血钙则是SAP组显著低于A组、B组、AB组和C组(p0.05),AB组和C组分别明显高于A组和B组(p0.05),AB组显著低于C组(p0.05),但A组与B组间无明显差别(p0.05)。IP3、Ca2+和TNF-α与血钙为负相关(r分别为-0.997、-0.980和-0.915,p0.05)。结论:SAP大鼠胰腺细胞IP3显著升高;IP3与Ca2+和TNF-α水平呈明显正相关,前三者与血钙呈负相关,IP3可能是引起细胞内外钙和TNF-α变化的重要原因之一;丹参和糖皮质激素均可抑制SAP大鼠胰腺细胞IP3和Ca2+及TNF-α的释放,促进血钙水平回升,胰腺组织病理损害减轻,联合使用丹参和氢化可的松具有协同作用。     

乌司他丁对脓毒症大鼠血管内皮细胞的影响

目的采用盲肠结扎穿孔脓毒症模型,研究乌司他丁对脓毒症大鼠血清E-选择素水平和循环内皮细胞的影响。方法SD大鼠72只随机分为3组:A组(假手术组,n=8),B组(脓毒症组,n=32),C组(乌司他丁组,n=32),A组和B组于术后立即皮下注射生理盐水5 mL,C组皮下注射乌司他丁(100 000 U.kg-1,溶于5 mL生理盐水中)。A组术后和B组、C组术后3,6,12和24 h四时相点采血检测血清E-选择素,同时行循环内皮细胞检测。结果 B组和C组各时相点血清E选择素水平及循环内皮细胞计数显著高于A组(P0.01),而各时相点C组血清E选择素水平及循环内皮细胞计数又显著低于B组(P0.05)。结论脓毒症大鼠存在血管内皮细胞的活化及损伤;在脓毒症早期乌司他丁干预可能对内皮细胞有一定保护作用。