体外受精-胚胎移植中新鲜睾丸精子与解冻后睾丸精子助孕结局比较

目的 比较单精子卵泡浆内显微注射受精助孕(intracytoplasmic sperm injection ,ICSI)中,使用新鲜睾丸精子与解冻后睾丸精子两组的助孕结局.方法 回顾性分析2002年1月至2008年8月在本所接受ICSI助孕的272个周期,其中117个周期使用新鲜睾丸精子,为A组;155个周期使用解冻后睾丸精子,为B组.结果 (1)A、B两组受精率为77.1% vs 78.9%、优质胚胎率:20.7% vs 17.5%,两组比较差异无统计学意义.(2)妊娠及出生结局分析,A、B组临床妊娠率、着床率、流产率分别为48.7% vs 52.3%、26.9% vs 32.3%、8.8% vs 14.8%.足月活产率,低体重儿发生率分别为63.2% vs 55.6%、20.3% vs 29.5%,两组比较差异均无统计学意义.结论体外受精-胚胎移植中采用解冻睾丸精子其助孕结局与新鲜睾丸精子相同,解冻后睾丸精子的使用可以最大限度减少反复睾丸活检对睾丸组织的损伤,增加睾丸组织的利用率.     

Combination of serum inhibin B and follicle-stimulating hormone levels can not improve the diagnostic accuracy on testicular sperm extraction outcomes in Chinese non-obstructive azoospermic men

Background  It is still controversial whether the serum inhibin B level is a superior predictor of the presence of sperm in testicular sperm extraction (TESE) in azoospermic men compared with serum follicle-stimulating hormone (FSH). In this study, we evaluated the diagnostic accuracy of serum inhibin B levels as a predictor of the outcome of TESE in Chinese non-obstructive azoospermic men and compared it with the traditional marker serum FSH and testicular volumes.

Methods  Basal values of serum hormone levels, testicular volumes and histological evaluation of 305 Chinese non-obstructive azoospermic men were analyzed. The level of inhibin B was measured using a three-step enzyme-linked immunoassay before sperm extraction, and the diagnostic accuracy of prediction of the outcome of TESE was compared for different markers by the receiver operating characteristics (ROC) curve analysis.

Results  Testicular sperm was successfully retrieved in 137 of 305 patients (44.9%). The serum level of inhibin B, the FSH and the testicular volume were significantly different between the successful TESE group and the unsuccessful group. According to the ROC curve analysis, for inhibin B, the cut-off value for discriminating between successful and failed TESE was 28.39 pg/ml (sensitivity 83.5%, specificity 79.1%). For FSH, the best cut-off value for discriminating was 11.05 pg/ml (sensitivity 83.5%, specificity 74.5%). The area under the ROC curve of serum inhibin B was similar to that of FSH. Combining the serum inhibin B with FSH levels did not improve the predictive value for successful TESE.

Conclusions  Serum inhibin B and FSH levels are correlated with spermatogenesis. However, inhibin B is not superior to FSH in predicting the presence of sperm in TESE. And the combination of them does not improve the diagnostic accuracy on TESE outcome.

     

睾丸体积和生殖激素水平对非梗阻性无精子症患者睾丸中有无精子的预测价值研究

背景　目前,评估不育症患者睾丸内有无精子最常用的技术为睾丸穿刺取精术（TESA）,但其为有创性操作,对患者的身体机能造成影响。所以实际工作中怎样根据患者实际状况,如睾丸体积及生殖激素水平等,评估其睾丸中是否存在精子,对后续患者是否接受TESA及试管婴儿技术达到生育目的相当重要。目的　探讨睾丸体积和生殖激素水平对非梗阻性无精子症患者睾丸中有无精子的预测价值,以期为NOA的临床无创诊疗提供理论依据。方法　回顾性选择2014年2月-2018年3月贵阳市妇幼保健院收治的NOA患者78例。按照TESA结果分为有精组（32例）和无精组（46例）。收集患者年龄、睾丸体积、生殖激素〔泌乳素（PRL）、卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、雌二醇（E2）、总睾酮（TT）〕水平。结果　无精组左侧睾丸体积、右侧睾丸体积、LH水平、E2水平小于有精组,PRL、FSH水平大于有精组（P<0.05）。NOA患者左侧睾丸体积（rs=0.837,P<0.001）、右侧睾丸体积（rs=0.862,P<0.001）、FSH水平（rs=-0.218,P=0.026）、E2水平（rs=0.218,P=0.021）与TESA结果有关。多因素Logistic回归分析结果显示,左侧睾丸体积〔OR=0.741,95%CI（0.542,0.860）〕、右侧睾丸体积〔OR=1.047,95%CI（1.008,1.113）〕、FSH水平〔OR=3.168,95%CI（1.216,8.872）〕是NOA患者无精子的影响因素（P<0.05）。左侧睾丸体积、右侧睾丸体积预测NOA患者无精子的AUC为0.983、0.957,临界值为6.3、6.5 ml,灵敏度为65.5%、92.4%,特异度为99.4%、99.8%;PRL、FSH、LH、E2、TT预测NOA患者无精子的AUC为0.537、0.742、0.607、0.628、0.568,临界值为9.3 μg/L、12.2 U/L、4.9 U/L、48.5 pmol/L、9.9 nmol/L,灵敏度为56.7%、69.4%、77.5%、88.4%、79.2%,特异度为89.4%、90.5%、91.3%、91.6%、90.4%。结论　NOA患者的睾丸体积、FSH水平均对其睾丸中有无精子有一定预测作用,且睾丸体积的预测准确性高于FSH水平,这对临床操作有一定指导意义。     

睾丸抽吸取精术结合 ICSI 治疗无精子症的研究

目的:通过观察睾丸抽吸取精结合胞浆内单精子注射技术( TESA - ICSI)治疗无精子症的临床妊娠率,并与传统IVF、ICSI方法对比,以提高治疗无精子症的疗效.方法:选取不育症患者451例,将所有患者以助孕方法分为IVF、ICSI、无精子症三组,以睾丸体积和血清FSH将80例无精子患者分为三组(A组睾丸体积正常、血清FSH值正常;B组睾丸体积偏小,血清FSH值正常;C组睾丸体积小于正常,血清FSH值明显增高),三组患者均采用睾丸穿刺取精,并对获取精子者行TESA - ICSI助孕.结果:80例无精子症患者中,总共有42例成功获取精子,成功率为52.5％,其中A、B、C三组成功率分别为88.57％、47.37％、7.70％;其中29例成功妊娠,临床妊娠成功率为72.50％.IVF、ICSI组临床妊娠成功率分别为42.51％、47.62％,经x2检验分析,无精子症患者组临床妊娠率明显高于常规IVF组和ICSI组,差异有显著意义.结论:睾丸抽吸取精术结合ICSI技术是治疗无精子症的有效方法.     

睾丸或附睾精子ICSI治疗无精子症

目的 比较睾丸和附睾精子ICSI治疗无精子症的临床效果.方法 分别用睾丸或附睾来源的精子进行ICSI,对其受精率、优质胚胎率、胚胎种植率和临床妊娠率等指标进行评价.结果 睾丸精子的受精率明显低于附睾精子的受精率(P ＜0.001),两者的优质胚胎率、胚胎种植率和临床妊娠率差异无显著性(P＞0.05).结论 附睾精子较睾丸精子有更强的受精能力,但不影响治疗结局.     

睾丸与附睾精子 DNA 完整率及行 ICSI 结局的对比研究

目的：对比分析睾丸与附睾精子行卵胞浆内单精子注射术(ICSI)的结局及精子 DNA 完整率(用精子 DNA 断裂指数 DFI 表示)的差异。方法对来该院生殖中心就诊的183例梗阻性无精子症患者行 ICSI,将患者根据取精途径的不同分为两组,其中经皮附睾穿刺抽吸术(PESA)取精80个周期,经睾丸穿刺抽吸术(TESA)取精103个周期,对比两组精子 DNA 完整率及行 ICSI 的结局。结果两种方法精子 DNA 完整率和行 ICSI 时受精率、卵裂率、优胚率、妊娠率比较,差异无统计学意义(P >0.05)。结论睾丸及附睾精子的 DNA 完整率及行 ICSI 结局无显著差异,临床医生可根据个人经验或患者意愿选取精子行 ICSI助孕。     

不同参数精子对卵胞质内单精子注射术结局的影响

目的 分析不同精子参数对卵胞质内单精子注射术（ICSI）临床结局的影响.方法 选取在我院接受ICSI治疗的不孕夫妇235对（共299个ICSI周期）,根据男方精液的来源和参数不同,我们将299个ICSI周期分为4组：精液正常组（A组,70例、96个周期）,严重少弱精子症组（B组,33例、44个周期）,附睾精子组（C组,23例、28个周期）和睾丸精子组（D组,109例、131周期）.比较4组的受精率、优质胚胎率、种植率和临床妊娠率等.结果 A组年龄明显大于其他3组（P〈0.01）.A、B、C、D组患者行ICSI卵数分别为937、476、344、1543,单周期移植胚胎数分别为2.74±0.49、2.22±0.47、2.07±0.26、2.12±0.43,A组单周期移植胚胎数显著多于其他各组（P〈0.01）.D组受精率（62.80%）显著低于其他3组（75.03%、72.06%、78.02%）（P〈0.01）.C组优质胚胎率（35.31%）显著低于其他3组{47.65%、48.40%、45.71%）（P〈0.01）,4组间临床妊娠率和种植率并无明显差异（P〉0.05）.结论 不同参数的精子虽然可以影响ICSI后胚胎早期的发育,但对临床妊娠率并无明显影响.     

经皮附睾、睾丸穿刺取精卵浆内显微注射治疗阻塞性无精子症

目的: 应用经皮附睾、睾丸穿刺取精术(PETSA),结合单精子卵浆内显微注射(ICSI)技术治疗阻塞性无精子症。方法: 对8对不孕症夫妇,男性采用经皮附睾、睾丸穿刺取精术;女方采用长方案和短方案超排卵,对分裂中期(M Ⅱ)的卵母细胞行ICSI。结果: 9个周期中,获M Ⅱ 46个,均行ICSI,其中正常受精33个,形成胚胎22个,3例临床妊娠。结论: PET SA和ICSI技术是治疗男性阻塞性无精子症不育的有效方法。     

不同精子来源及参数对卵胞浆内单精子注射术结局的影响

目的:探讨不同源性精子、不同参数精子对卵胞浆内单精子注射术(intracytoplasmic sperm injection, ICSI)结局的影响.方法:回顾性分析2005年6月至2008年12月在中南大学湘雅医院生殖医学中心接受ICSI治疗的433个周期.根据行ICSI的精子来源,分为射出精子组(A组)336个周期...     

隐匿精子症和严重弱精子症的ICSI术前准备和疗效分析

目的总结运用卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)技术治疗隐匿精子症和严重弱精子症的诊治经验。方法283周期隐匿精子症及65周期严重弱精子症患者经药物治疗提高活动精子数量后再进入ICSI治疗周期,观察ICSI操作情况和受精、妊娠等治疗结果,并以52周期供精ICSI作为对照组。结果隐匿精子症和严重弱精子症两组分别有15周期和3周期因精子不足或卵子数量较多使用部分供精,其余均使用夫精完成ICSI操作治疗。隐匿精子症组的受精率与对照组比较有显著差异(77.4%vs85.1%,P=0.001),临床妊娠率无显著差异(40.7%vs38.8%,P=0.805);严重弱精子症组的受精率和临床妊娠率与对照组比较均无显著差异(81.2%vs85.1%,P=0.131;31.3%vs38.8%,P=0.404)。结论恰当的ICSI术前准备和熟练的ICSI操作技术能使隐匿精子症和严重弱精子症达到与正常精子相似或稍低的受精率和妊娠率。     

Utility of micro-TESE in the most severe cases of non-obstructive azoospermia

The use of intracytoplasmic sperm injection (ICSI) has been a major breakthrough in the treatment of male infertility. Even patients with non-obstructive azoospermia (NOA) may benefit from the ICSI technique to father a child as long as spermatogenesis is present. There are several techniques to recover testicular sperm in patients with NOA. However, retrieval of spermatozoa is unfortunately still only successful in a subset of patients with NOA, and the most superior sperm retrieval method is still under debate. A more recent technique, microdissection testicular sperm extraction (MD-TESE) with an operative microscope collecting larger and more opaque seminiferous tubules, is a non-blind sperm retrieval technique with theoretical benefits. The MD-TESE procedure seems to be feasible, effective, and safe in NOA patients but also more technically demanding and time-consuming compared with conventional blind techniques. In the present report, we describe our clinical experience and results from our first 159 MD-TESE procedures. The probability to retrieve sperm with the MD-TESE technique is high in NOA cases where earlier sperm retrieval with blind methods such as needle aspiration, percutaneous needle biopsy, or conventional TESE has failed.     

精子DNA完整率、精子顶体完整率及反应率对补救卵泡浆内单精子注射术的影响

目的探讨精子DNA完整率、精子顶体完整率及反应率对补救卵胞浆内单精子注射（ICSI）结局的影响。方法回顾性分
析我院生殖中心行常规试管受精（IVF）失败需行补救ICSI的97对不孕不育夫妇,根据妊娠情况分为妊娠组（41例）及未妊娠组
（56例）,分析两组患者精子DNA完整率(用精子DNA断裂指数DFI表示)、精子顶体完整率及反应率对ICSI结局的影响。结果
两组患者男方年龄、睾酮值、睾丸体积、FSH值、女方年龄、获卵数均无显著差异（P>0.05）,但不育年限未妊娠组长于妊娠组,差
异有统计学意义（P<0.05）。两组患者行补救ICSI时受精率及卵裂率无显著差异（P>0.05）,但优胚率妊娠组高于未妊娠组,差异
有统计学意义（P<0.05）。两组精子DNA完整率（DFI）、顶体反应率均无显著差异（P>0.05）,但顶体完整率妊娠组高于未妊娠
组,差异有统计学意义（P<0.05）;精子DNA完整率、顶体完整率、顶体反应率分别与受精率、卵裂率、优胚率均无显著相关性（P>
0.05）。补救ICSI临床妊娠率为42.3%,双胎率为10.3%,单胎率为32.0%。结论补救ICSI是体外受精-胚胎移植受精失败后有
效的补救方案,精子顶体完整率与其妊娠结局相关。
     

睾丸取精卵浆内显微注射受精治疗无精症的疗效分析

目的：评价采用睾丸取精卵浆内显微注射法治疗无精症的疗效。方法：对2000年7月--2002年7月来我所就诊的35例患者，女方取卵当日，男方取精。手术时，患者取平卧位，术野常规消毒，用1％利多卡因局麻，新鲜人体睾丸组织通过切口活检取材，立即放入装有培养液的培养皿中。取部分睾丸组织在体视显微镜下，用无菌针头划开曲精小管，在显微镜下检查是否存在精子。如果找到精子，将存有睾丸组织的培养皿放入培养箱，直到注射前取出。B超引导下经阴道取卵，常规去卵丘结构处理。在倒置显微镜下进行胞浆内单精子注射(ICSI)。注射后15--18小时检查有无原核，48小时观察卵裂，经阴道宫腔内移植质优胚胎1--3个。移植后11天进行妊娠试验检查，7周进行B超检查，了解有无胎心搏动。结果：35例无精症患者全部在睾丸曲精小管中找到精子。女方取卵466个(5--32个)，其中MⅡ期卵367个，显微注射337个，有270个受精卵见到两个原核，受精率为80．11％，35对全部获得受精卵。临床妊娠率为40％。结论：睾丸取精卵浆内显微注射技术是目前治疗无精症最有效的方法。     

不同来源的精子显微受精治疗男性不育

目的回顾分析不同来源精子的单精子卵胞浆内注射(ICSI)治疗男性不育62个周期.方法比较采用手淫射精获得精子、睾丸活切及附睾穿刺获得精子行ICSI治疗后的受精率、卵裂率、优质胚胎率及临床妊娠率.结果射出精子组50个周期,受精率72.3% 、卵裂率80%、优质胚胎率40%及临床妊娠率40%;睾丸及附睾精子组12个周期,受精率64.1%、卵裂率76.3%、优质胚胎率35.2%及临床妊娠率33.3%.两组结果比较,无显著性差异.结论不同来源精子行ICSI治疗男性因素不育可以获得相似的治疗结果.     

3种取精方式获得的精子进行ICSI治疗效果的比较

目的探讨3种取精方式获得的精子进行卵胞浆内单精子注射(ICSI)治疗的临床效果。方法比较精液精子、附睾精子、睾丸精子进行ICSI治疗后的受精率、优质胚胎率、种植率及妊娠率等。结果3种取精方式获得的精子进行ICSI治疗的受精率、优质胚胎率、种植率及妊娠率差异无统计学意义(P>0.05)。结论3种取精方式获得的精子进行ICSI治疗的临床效果相似,精子的成熟度可能不会影响ICSI的临床效果。     

附睾及睾丸精子结合ICSI治疗无精子症的研究

目的回顾性分析比较附睾精子和睾丸精子结合卵胞浆内单精子注射（intracytoplasmic sperm injection,IC-SI）治疗无精子症的助孕结局。方法 167例无精子症患者经皮附睾精子抽吸术（PESA）取得附睾精子,69例无精子症患者经皮睾丸精子抽吸术（TESA）获得睾丸精子。女方进行常规超排卵。采用卵胞浆内单精子注射技术获得妊娠,比较两者的受精率、种植率和临床妊娠率。结果全部患者共41个治疗周期,附睾精子组和睾丸精子组的受精率分别为75.5%和73.9%,两组间比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。两组的种植率为40.7%、24.6%,临床妊娠率为53.9%、39.1%,两组间比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 PESA和TESA结合ICSI是男性无精子症患者的有效治疗方法 ,附睾是精子获能、成熟的重要部位,附睾精子优于睾丸精子,应首先选取附睾精子。     

常规IVF受精失败后转ICSI与直接ICSI的临床结局比较

目的 探讨常规体外受精(IVF)-胚胎移植受精失败后再次助孕治疗转卵泡浆内单精子注射(ICSI)的临床效果.方法 自2007年1月至2007年12月对27例因女方输卵管因素行常规IVF受精失败的患者再次助孕治疗转为ICSI(A组),并与同期57例因男方因素而用射出精液直接行ICSI(B组)进行临床结局的比较.结果 A组ICSI前、后的受精率分别为(32.3±30.3)%和(80.4±16.6)%(P<0.01);A组平均每周期正常受精率、优良胚胎率、临床妊娠率分别为(77.14±15.98)%、(28.68±23.86)%和48.1%,B组平均每周期正常受精率、优良胚胎率、临床妊娠率分别为(70.59±21.53)%、(27.18±23.97)%和54.4%,两组间比较无显著性差异(P>0.05);A组胚胎分裂率、移植胚胎数分别为(96.66±6.55)%、(2.67±0.56)个,而B组胚胎分裂率、移植胚胎数分别为(92.33±19.41)%、2.12±0.57个,两组间比较有显著性差异(P<0.05).结论 常规IVF受精失败后再次助孕治疗转ICSI可显著提高受精率,改善临床结局.     

单精子卵胞浆内注射术中不同来源精子的处理方法

目的：介绍单精子卵胞浆内注射术（ICSI）中不同来源精子的洗涤处理方法。方法：轻度少、弱精精液或正常精液精子,采用Percoll梯度离心法或直接离心加上游法处理;严重少、弱精液精子或无精子症的附睾液精子,采用直接离心法处理;无精子症的睾丸组织内精子,采用组织磨碎加直接离心法处理。结果：三种方法处理后,均获得足够的活动精子用于ICSI治疗。ICSI操作均能顺利进行。采用直接离心法获得的精子行ICSI可以获得相似的治疗结果。结论：不同来源精子都可以经直接离心法处理,并能有效用于ICSI治疗中。     

精子DNA碎片指数与单精子显微注射妊娠结局的相关性分析

目的 分析精子DNA碎片指数(DNA fragmentation index, DFI)对接受卵胞浆内单精子显微注射(Intracytoplasmic sperm injection, ICSI)助孕后冷冻胚胎移植后的临床妊娠率的影响。方法 回顾性分析接受ICSI助孕的87对夫妇的一般资料,排除女性因素不孕与夫妇双方染色体结构异常和男性Y染色体微缺失,对不同DFI男性患者进行分组,并对2组患者睾丸体积(超声多普勒)、血清促卵泡素(follicle stimulating hormone,FSH)等激素、精液常规分析、精子DFI和临床妊娠率进行统计学分析。结果 不同DFI患者组的女方年龄、男方年龄、不孕时间、冷冻解冻胚胎移植(Frozen embryo transfer,FET)日雌二醇(E2)、FET日子宫内膜厚度等差异无统计学意义;DFI≤25%组的受精率、双原核(2 Pronucleus,2PN)形成率、卵裂率、优质胚胎率、囊胚形成率分别为80.92%、85.37%、96.34%、23.56 %、31.78 %,DFI>25%组分别为70.51 %、71.71%、88.05 %、11.30 %、14.14 %,上述各指标DFI≤25%组均大于DFI>25%组且差异有统计学意义。DFI≤25% 组的临床妊娠率(45.24%)大于DFI>25% 组(20.00%),且差异有统计学意义(χ²=6.340, P=0.012)。结论 精子DFI与妊娠结局密切相关,异常升高的精子DFI(DFI>25%)将对临床妊娠率产生不利影响。     

两种补救性ICSI在常规体外受精中的应用

目的探讨在常规体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期中不受精及受精率低的情况下,应用卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)进行补救后获得胚胎移植的临床应用价值。方法选择IVF周期中发生完全不受精及受精率<30%的病例97个周期,其中57个周期行晚期补救ICSI,40个周期行早期补救ICSI,两种补救ICSI在完全不受精组和受精率低组中分别进行比较。结果在不受精组中,早期补救的2PN受精率、种植率和妊娠率分别为69.44%、28.00%、30.77%,明显高于晚期补救ICSI的56.23%、1.00%、2.50%(P<0.05或P<0.01),在低受精率组中两者的累计妊娠率、种植率差异无显著性(P>0.05),但受精率、优质胚胎率、胚胎冷冻率差异有高度显著性(P均<0.01)。结论早期补救ICSI较晚期ICSI的2PN受精率、胚胎种植率高,能更好地改善补救ICSI的妊娠结局。