DNA修复酶HOGG1在食管鳞癌的表达和临床意义

目的探讨食管鳞状上皮癌组织中DNA损伤修复酶HOGG1表达与8-oxoG氧化损伤的关系及其表达改变的临床意义。方法免疫组化和Western blot检测鳞癌和癌旁组织中HOGG1的表达和8-oxoG氧化损伤,TUNEL试剂盒检测组织的凋亡指数。相关性统计分析鳞癌组织HOGG1低表达与上述两项指标之间的相关性;χ2检验与秩和检验统计鳞癌组织中HOGG1低表达与临床病理特征之间的关系。结果 HOGG1在食管鳞癌患者的组织中均有不同程度的表达,并且存在个体差异,鳞癌组织中HOGG1表达明显低于其癌旁组织(P<0.05),8-oxoG的氧化损伤程度明显高于癌旁组织(P<0.05),鳞癌组织中HOGG1的低表达与该组织8-oxoG氧化损伤程度、细胞凋亡指数呈负相关,与鳞癌的静脉侵犯、淋巴结转移有关,与患者的年龄、性别、鳞癌组织的病理分化程度无关。结论 HOGG1可作为食管鳞癌术后的检测指标,指导患者术后个体化治疗方案的制定。     

食管鳞状细胞癌中HGF表达与肿瘤血管形成的关系

目的研究肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)在食管鳞癌中的表达及其与肿瘤血管形成之间的关系。方法应用免疫组化PV两步法检测64例食管鳞癌组织及20例癌旁正常组织中HGF及CD34的表达情况,并计数微血管密度(microvessel density,MVD)。结果 HGF在食管鳞癌中的表达(76.6%)高于癌旁正常组织(15.0%,P<0.05),且与肿瘤直径、分化程度及淋巴结转移有关;食管鳞癌组织的MVD值(38.87±17.55)/mm2明显高于癌旁正常组织的MVD值(15.10±3.76)/mm2(P<0.05),肿瘤直径>5 cm,有淋巴结转移及侵袭较深的肿瘤MVD值高(P<0.05);食管鳞癌中HGF阳性组MVD值为(42.25±16.50)/mm2,高于HGF阴性组MVD值(27.89±16.83)/mm2(P=0.005),且MVD值与HGF的表达之间具有相关性。结论 HGF的高表达与食管鳞癌的恶性生物学行为及肿瘤血管生成关系密切,HGF可作为食管鳞癌生物治疗的潜在靶点。     

肺癌MMP-9、TIMP-1表达与微血管密度的关系及意义

目的探讨肺癌组织中MMP-9和TIMP-1的表达与肺癌血管生成的关系及其意义。方法采用免疫组化SP法检测84例肺癌组织中MMP-9、TIMP-1和CD34的表达。结果肺癌组织MMP-9表达显著高于癌旁正常肺组织(P<0.01),小细胞肺癌和腺癌显著高于鳞癌(P<0.01)。肺癌MMP-9表达:有淋巴结转移者高于无淋巴结转移者(P<0.01),Ⅲ~Ⅳ期高于Ⅰ~Ⅱ期(P<0.05)。肺癌组织TIMP-1表达显著高于癌旁正常肺组织(P<0.01)。肺癌MMP-9表达阳性者微血管密度高于MMP-9表达阴性者(P<0.01)。结论MMP-9促进肺癌血管生成,与肺癌侵袭转移密切相关。     

食管鳞状细胞癌中FOXM1基因的表达及临床意义

目的探讨FOXM1基因在食管鳞状细胞癌中的表达和临床意义以及下调FOXM1表达对人食管鳞状细胞癌细胞株KYSE-30增殖活性的影响。方法采用qRT-PCR及免疫组化技术检测FOXM1基因在食管鳞状细胞癌及癌旁组织中的表达;通过RNA干扰技术(RNAi)下调KYSE-30细胞FOXM1表达,CCK-8法检测细胞的增殖活性。结果 qRT-PCR结果显示,食管鳞状细胞癌中FOXM1 mRNA表达显著高于对应癌旁组织(P0.01);FOXM1 mRNA在低分化食管鳞状细胞癌组织中的表达量显著高于高+中分化食管鳞状细胞癌组织(P0.01);FOXM1 mRNA过表达与食管鳞状细胞癌肿瘤分化程度(P=0.001)、淋巴结转移(P=0.000)、临床分期(P=0.004)显著相关;高表达FOXM1食管鳞状细胞癌患者生存率下降(P0.001)。免疫组化结果显示,FOXM1蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达显著增高并与其分化程度密切相关(P0.01);下调KYSE-30细胞中FOXM1表达后,细胞增殖速度受抑制(P0.01)。结论 FOXM1在食管鳞状细胞癌组织中呈高表达,并与食管癌分化程度、淋巴结转移、临床分期及预后密切相关,FOXM1可能参与调控人食管鳞状细胞癌细胞KYSE-30的增殖。     

Caspase-3和Survivin在食管鳞癌中的表达及其与临床的关系

目的探讨Caspase-3和Survivin在食管鳞癌中的表达及二者与标本临床病理特征之间的关系。方法采用免疫组织化学方法,检测80例食管鳞癌组织和30例食管癌旁组织的Caspase-3和Survivin表达水平;采用定期发信与门诊面检相结合的方法,对80例食管鳞癌单纯手术患者连续跟踪随访5年。结果食管癌旁组及食管鳞癌组中Caspase-3的阳性表达率逐渐减少,差异有统计学意义(P<0.05);其表达与浸润深度呈负相关与分化程度呈正相关(P均<0.05);Caspase-3阳性表达组5年生存率低于失表达组(P<0.05)。Survivin的阳性表达率逐渐增高,差异有统计学意义(P<0.05);其表达与浸润深度呈正相关而与pTNM呈负相关(P均<0.05);Survivin阳性表达组5年生存率高于失表达组(P<0.05)。在食管鳞癌中,Caspase-3与Survivin表达呈负相关(P<0.05)。结论Caspase-3和Survivin在食管鳞癌的发生、发展中起重要作用,联合检测Caspase-3和Survivin蛋白表达对食管鳞癌的早期诊断及判断预后有重要的参考价值。     

宫颈上皮内肿瘤及宫颈鳞状细胞癌组织中HPV16感染与hTERT、p21waf1和Ki67表达的关系及意义

目的探讨宫颈鳞状细胞癌(SCC)及宫颈上皮内肿瘤(CIN)组织中人乳头瘤病毒(HPV)16感染与端粒酶反转录蛋白(hTERT)、抑癌基因p21waf1和增生抗原Ki67表达的关系及其意义。方法在130例宫颈组织中利用组织芯片技术结合原位杂交技术检测HPV16感染及结合免疫组织化学技术检测hTERT、Ki67、p21waf1的表达。结果(1)HPV16杂交信号阳性率及hTERT、Ki67表达在CINⅡ～Ⅲ级、原位癌、浸润性鳞癌组织中都显著高于正常宫颈组织(P均<0.05),浸润癌也显著高于CIN(P均<0.05),CIN三级之间差异也具统计学意义(P均<0.05)。(2)p21waf1仅在浸润性鳞癌组织中的阳性率显著低于正常宫颈组织(P<0.05),其他组别之间差异无统计学意义(P均>0.05)。(3)HPV16感染及Ki67表达与hTERT表达均呈正相关(P<0.05,r=0.339;P<0.05,r=0.398);HPV16感染、hTERT及Ki67表达与p21waf1表达均呈负相关(P<0.05,r=0.337;P<0.05,r=0.248;P<0.05,r=0.446);HPV16感染与Ki67表达无相关性(P>0.05)。结论宫颈上皮内肿瘤及宫颈鳞状细胞癌组织中hTERT、p21waf1、Ki67表达的改变可能与HPV16感染有关,且互相作用,共同影响CIN的发展及宫颈鳞癌的发生。这些指标综合分析可能为阐明HPV16的恶性转化机制以及为提高宫颈鳞癌及其癌前病变诊断率提供参考依据。组织芯片技术是高效的研究基因及其表达产物的技术平台。     

食管鳞状细胞癌组织中Periostin、VEGF的表达及意义

目的：探讨Periostin、VEGF蛋白在食管鳞状细胞癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测130例食管鳞状细胞癌组织及癌旁正常食管黏膜组织中Periostin、VEGF蛋白的表达。结果食管鳞状细胞癌组织中Periostin和VEGF的阳性率明显高于正常食管黏膜组织(P<0．05)。 Periostin表达与食管鳞状细胞癌浸润深度、淋巴结转移有显著相关性(P<0．05)。 VEGF表达与食管鳞状细胞癌分化程度、浸润深度和淋巴结转移有显著相关性(P<0．05)。 Periostin与VEGF表达呈正相关(P<0．05),66例食管鳞状细胞癌患者获得临床随访资料,随访时间1~48个月,Kaplan-Meier生存曲线分析显示,Peri-ostin阳性组患者的生存率明显低于 Periostin阴性组( P<0．05), VEGF阳性组患者的生存率明显低于 VEGF 阴性组( P <0．05)。结论 Periostin与VEGF表达密切相关,联合检测Periostin、VEGF可作为判定食管鳞状细胞癌侵袭、转移能力的客观指标,对食管鳞状细胞癌的预后判断具有重要意义。     

Nrf2在食管鳞癌组织中的表达及意义

目的:探讨Nrf2(Nuclear factor E2 p45-related factor2)在食管鳞癌组织中的表达及其与临床病理学特征的关系。方法:采用免疫组化SP法检测Nrf2在32例食管鳞癌,30例癌旁组织,21个阳性淋巴结和24个阴性淋巴结组织中的表达。结果:Nrf2阳性表达主要定位于细胞核中,在食管鳞癌中的阳性表达率为78.13%,显著高于癌旁组织(13.33%),淋巴结癌转移阳性组织中的表达率(66.67%)也显著高于淋巴结癌转移阴性组织中的表达水平(20.83%),均具有统计学意义(P<0.05)。Nrf2的阳性表达随淋巴结的转移度的增加而表达增加(P<0.05),但在不同年龄、性别、TNM分期、肿瘤分化程度及不同部位之间差异无统计学意义。结论:Nrf2在食管鳞癌中高表达,表达的高低与淋巴结转移与否及转移度有关。     

miR-195抑制舌鳞癌细胞系CAL27增殖、迁移和侵袭

目的研究miR-195对舌鳞癌CAL27细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法用RT-qPCR检测舌鳞癌组织及癌旁正常组织中miR-195 mRNA的表达; CAL27细胞的分组及处理:miR-195组(转染miR-195 mimics)、miR-con组(转染miR-NC)、si-con组(转染si-con)、si-激酶12抑制剂SUZ12组(转染si-SUZ12)、miR-195+Ctrl组(miR-195 mimics和pc DNA 3. 1共转染)、miR-195+SUZ12组(miR-195 mimics和pc DNA 3. 1-SUZ12共转染); MTT法检测细胞增殖; Transwell检测细胞迁移和侵袭; Western blot检测细胞SUZ12蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测细胞荧光活性。结果舌鳞癌组织中miR-195 mRNA表达与癌旁正常组织及与健康口腔角质细胞NHOK相比显著降低(P0. 05);过表达miR-195及敲减SUZ12均可显著抑制CAL27细胞增殖、迁移及侵袭(P0. 05);过表达SUZ12可逆转miR-195对CAL27细胞增殖、迁移和侵袭的抑制。结论 miR-195可抑制CAL27细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与靶向SUZ12有关。     

食管鳞癌组织中LAT-1、RON蛋白的表达与病理学特征的关系

目的:探究食管鳞癌组织中L型氨基酸转运载体-1(Large neutral amino acid transporter-1,LAT-1)、巨噬细胞刺激蛋白受体(Recepteur d''origine nanta,RON)蛋白的表达与病理学特征的关系.方法:回顾性分析2020年7月至2022年7月本院收治的食管鳞癌患者113例为研究对象.采用免疫组织化学法(Envision法)对其食管鳞癌组织和癌旁组织中的LAT-1、RON蛋白表达水平进行检测.对比不同食管鳞癌组织与癌旁组织间LAT-1、RON蛋白表达水平;对比不同临床特征食管鳞癌组织间LAT-1、RON蛋白表达情况;分析食管鳞癌组织中LAT-1、RON蛋白表达相关性.结果:LAT-1在癌旁组织中无阳性表达,但在食管鳞癌组织中有阳性表达.食管鳞癌组织LAT-1、RON蛋白阳性率均显著高于癌旁组织(P<0.05).食管鳞癌组织中LAT-1、RON蛋白表达在不同分化程度、临床TNM分期及淋巴结转移中表达均有差异(P<0.05).Spearman轶相关分析结果显示在食管鳞癌组织中,LAT-1与RON蛋白表达呈正相关(P<0.05).结论:LAT-1、RON蛋白与食管鳞癌临床病理特征显著相关,并能作为一种新的预后判断指标和治疗靶点,为临床病情诊断及预后评估提供参考.     

膀胱肿瘤细胞产生的白介素-10对T细胞功能的抑制作用

目的 :了解膀胱肿瘤细胞产生的白介素 10对T细胞功能的抑制作用。方法 :用ELISA法检测膀胱肿瘤细胞株EJ、T2 4和正常移行上皮细胞培养上清中IL 10含量。用MTT法检测加与不加IL 10拮抗剂时膀胱肿瘤细胞株EJ、T2 4和正常移行上皮细胞对共培养的T细胞增殖情况的影响。结果 :EJ和T2 4细胞培养上清中IL 10水平明显高于正常移行上皮和T细胞 (P <0 0 1)。EJ组与IL 10阻断EJ组比较 ,T细胞的增殖反应降低 (P <0 0 5 ) ;IL 10阻断EJ组与IL 10阻断正常移行上皮组、正常移行上皮组、IL 10阻断T细胞组和T细胞组比较 ,T细胞的增殖反应降低 (P <0 0 5 ) ;T2 4组与IL 10阻断T2 4组比较 ,T细胞的增殖反应降低 (P <0 0 5 ) ,IL 10阻断T2 4组与IL 10阻断正常移行上皮组、正常移行上皮组、IL 10阻断T淋巴细胞组和T淋巴细胞组比较T淋巴细胞的增殖反应降低 (P <0 0 5 )。结论 :膀胱肿瘤细胞株EJ、T2 4细胞可通过产生IL 10 ,抑制T细胞增殖能力 ,但可能还存在其它机制。     

RNAi双沉默Survivin和hTERT基因抑制人结肠癌SW480细胞增殖促进凋亡

目的探讨双向沉默Survivin和h TERT基因对结肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响,为结肠癌的基因治疗提供实验依据。方法设计并构建能够稳定转录shRNA并可分别及联合干扰Survivin和h TERT分子表达的质粒,将其转染结肠癌SW480细胞后,分阴性对照组、空白质粒对照组、Survivin RNAi组、h TERT RNAi组和Survivinh TERT RNAi组。转染48h后TRAP-PCR-ELISA法检测端粒酶活性,RT-PCR法检测Survivin和h TERT mRNA的表达,Western blot检测Survivin和h TERT蛋白的表达,流式细胞仪及cck-8法分别检测细胞凋亡和细胞增殖的变化。结果 Survivin-h TERT RNAi组SW480细胞端粒酶活性明显下降(P0.01),Survivin-h TERT RNAi组Survivin及h TERT的mRNA水平较正常对照组分别减低82.8%和73.6%(P0.01),蛋白表达抑制率分别为79.2%和66.7%(P0.01)。实验各组中Survivin-h TERT RNAi组细胞增殖抑制率和凋亡率最高,分别为43.6%±0.1%和39.2%±2.3%(P0.01)。结论 Survivin和h TERT双干扰质粒可明显下调Survivin和h TERT蛋白的表达,抑制结肠癌SW480细胞的增殖,促进其凋亡。     

125I粒子对食管癌Eca-109细胞凋亡及细胞周期的影响

研究,125I粒子诱导体外培养的人食管癌Eca-109细胞凋亡及对其细胞周期的影响.设置A组:对照(不加粒子),B组:低剂量(7.4×106Bq 125I粒子1枚),C组:中剂量(14.8×106Bq 125I粒子1枚),D组:高剂量(29.6×106Bq 125I粒子1枚),细胞培养1周后收集细胞,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期.4组凋亡细胞阳性指数(AI)分别为0.17%、1.17%、4.35%、4.72%,B、C和D组与A组之间均有非常显著性差异(P<0.01);C组与B组,D组与B组比较,均有非常显著性差异(P<0.01),D组与C组比较无显著性差异(P>0.05).随粒子剂量增加,G2/M期细胞所占比例增高,各组之间有非常显著性差异(P<0.01).125I粒子可以诱导体外培养的人食管癌Eca-109细胞凋亡,其诱导凋亡的能力可能是通过把细胞阻滞在G2/M期实现.     

胶质瘤miR-218与细胞周期蛋白依赖性激酶6表达的相互关系及其对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨胶质瘤细胞中miR-218及细胞周期蛋白依赖性激酶6(CDK6)表达变化的相互关系及其对肿瘤细胞增殖及凋亡的影响.方法 采用组织微阵列、锁定寡核苷酸探针原位杂交及免疫组织化学(ABC法)方法,检测60例不同级别胶质瘤组织标本及10例对照脑组织中miR-218、CDK6及Ki-67抗原的表达状况,并分析三者之间的相互关系;胶质母细胞瘤细胞系(U87MG)分别被转染阴性对照序列(对照组)及miR-218 mimics(mimics组),采用即时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)及免疫细胞化学方法 分别检测两组细胞中的miR-218水平及CDK6和Ki-67表达变化,用单细胞凝胶电泳检测凋亡细胞.结果 对照组、Ⅰ～Ⅱ级、Ⅲ级和Ⅳ级胶质瘤组miR-218阳性标记指数(LI,%)分别为22.45±0.59、4.00±1.07、1.87±1.06、0.94±0.78,四组间差异均有统计学意义(P<0.05);各组CDK6 LI分别为7.25±1.20、16.71±0.80、24.43±0.62、32.05±0.43,对照组与各胶质瘤组间及Ⅳ级组与Ⅰ～Ⅱ级组间差异有统计学意义(P<0.01);各组Ki-67阳性细胞密度分别为0.00±0.00、9.30±3.48、31.15±9.44、60.15±13.60[(±s)/0.05 mm2],各组间差异均有统计学意义(P<0.01);miR-218 LI与CDK6 LI及Ki-67阳性细胞密度间均呈显著性负相关(r=-0.480,-0.534,P<0.01),后两者间呈显著性正相关(r=0.530,P<0.01).mimics组的miR-218水平明显高于对照组,其CDK6及Ki-67 LI(14.74±1.19、30.88±3.31)均明显低于对照组(79.06±2.07、64.94±3.96,P<0.01),而凋亡指数(68.44±7.05)明显高于对照组(13.04±0.97),以上各指标两组间差异均有统计学意义(P<0.01).结论 miR-218表达水平是评价胶质瘤良恶性程度的重要参考指标;其表达异常减少可导致胶质瘤细胞CDK6表达及增殖活性增强;补充外源性miR-218可有效下调恶性胶质瘤细胞CDK6表达、抑制其增殖和促进其凋亡,故在恶性胶质瘤基因治疗中具有重要的潜在应用价值.

Abstract：

Objectives To investigate the relationship between the expression of miR-218 and CDK6 in glioma cells, and their biological impacts on the tumor cell proliferation and apoptosis. MethodsExpression levels of miR-218 as well as CDK6 and Ki-67 proteins were analyzed in 60 cases of gliomas with various grades and 10 control brain tissue samples by tissue microarray, locked oligonucleotide probe in situ hybridization and immunohistochemistry. Glioblastoma multiform cell line (U87MG) was transfected with miR-218 mimics (mimics group) and a control sequence (control group), followed by qRT-PCR detection of miR-218 and immunocytochemical stain of CDK6 and Ki-67, respectively. Single cell gel electrophoresis was used to detect the presence of apoptotic cell. Results The miR-218 labeling indexes (LI) were statistically different (P<0.05) among all groups including control (22.45±0.59) and various glioma groups (grades Ⅰ-Ⅱ 4.00±1.07, grade Ⅲ 1.87±1.06 and grade Ⅳ 0.94±0.78, respectively). The CDK6 LI of the four groups was 7.25±1.20, 16.71±0.80, 24.43±0.62 and 32.05±0.43, respectively. Significant differences existed between the control group and the glioma groups, and between grade Ⅳ and grades Ⅰ-Ⅱ glioma groups (P<0.01). Ki-67 positive cell densities of the above four groups (0.00±0.00, 9.30±3.48, 31.15±9.44 and 60.15±13.60) were significantly different from one and another (P<0.01). The expression of miR-218 negatively correlated with CDK-6 LI (r=-0.480, P<0.01) and Ki-67 positive cell density (r=-0.534, P<0.01), while the latter two positively correlated with each other (r=0.530, P<0.01). U87MG transfection experiment showed that the miR-218 level of the mimics group was significantly higher than that of the control group (P<0.01). CDK6 and Ki-67 LI of the mimics group (14.74±1.19 and 30.88±3.31) were significantly lower than those of the control group (79.06±2.07 and 64.94±3.96, P<0.01), whilst its apoptotic index (AI) (68.44±7.05) was significantly higher than that of the control group (13.04±0.97, P<0.01). Conclusions The expression level of miR-218 is an important reference indicator for the assessment of the grade of gliomas. An aberrant decrease of its expression may lead to an increase of the CDK6 expression and proliferative activity of giloma cells. Introducing exogenous miR-218 may effectively down-regulate the CDK6 expression, inhibit cell proliferation and induce apoptosis of malignant giloma cells. These findings imply that miR-218 may serve as a therapeutic agent against malignant glioma.     

11,12-EET对缺氧血管平滑肌细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨11,12-环-二十碳三烯酸(11,12-EET)对缺氧大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和凋亡的影响。方法:采用贴块法体外培养大鼠主动脉VSMC,将细胞分为常氧对照组(Con组),缺氧模型组(H组),EET组(EET组)和EET-缺氧组(EET-H组),以MTT法测定VSMC的增殖率,以流式细胞术观察VSMC细胞周期及凋亡率,Western blot方法检测Bax的表达。结果:与Con组比较,H组VSMC增殖率升高(P<0.01),EET组VSMC存活率降低(P<0.01);EET-H组细胞增殖率低于H组(P<0.01)。与Con组相比,H组G0/G1期VSMC细胞比例减少(P<0.05),S期细胞比例增加(P<0.05);EET组较Con组G0/G1期细胞比例增加(P<0.05);与H组相比,EET-H组G0/G1期细胞比例增加(P<0.05),S期和G2/M期细胞比例减少(P<0.05)。EET-H组VSMC凋亡率高于H组(P<0.05)、Con组(P<0.05)及EET组(P<0.05)。EET组Bax的表达高于Con组(P<0.05);与H组比较,EET组及EET-H组Bax的表达均升高(P<0.01)。结论:外源性给予11,12-EET有抑制缺氧VSMC增殖和促进缺氧VSMC凋亡双重作用。11,12-EET可能通过对VSMC增殖和凋亡的调控,影响血管损伤后血管重构。     

食管鳞癌组织中TIG1基因甲基化及其mRNA表达的研究

 目的：探讨他扎罗汀诱导基因1（tazarotene-induced gene-1, TIG1）基因甲基化及表达与食管鳞癌发生、发展的关系。方法：采用甲基化特异性PCR检测43例食管鳞癌组织、20例癌旁组织和15例正常组织中TIG1基因甲基化状态;实时荧光定量PCR法法检测TIG1 mRNA的表达。结果：食管鳞癌组织TIG1基因启动子甲基化率为25.6%（11/43）,癌旁组织5.0%（1/20）,正常组织中未检测到其甲基化,差异有统计学意义（P<0.05）;其甲基化水平与患者性别、年龄、肿瘤生长部位和分化程度无关（P>0.05）,但与患者TNM分期（P<0.01）及淋巴结转移（P<0.05）有关。鳞癌组织TIG1 mRNA显著低于癌旁组织（P<0.05）及正常组织（P<0.01）,甲基化组织TIGI mRNA表达显著低于非甲基化组织（P<0.01）。结论：甲基化可能是食管鳞癌中TIG1基因失活的重要机制,与患者病理分期及淋巴结转移有关。     

RTN4在胃癌发病机制中的作用

目的 了解RTN4蛋白在胃癌发病过程中的作用,为揭示胃癌发病的分子机制提供实验资料。方法 将pIRESneo3-RTN4真核表达载体转染胃粘膜上皮GES1细胞,建立RTN4高表达的GES1-RTN4细胞系;通过细胞生长曲线、平皿克隆与软琼脂集落形成实验、流式细胞仪,观察RTN4高表达对GES1细胞生长与增殖、周期与凋亡的影响;利用Western-blot检测GES1-RTN4细胞中IκBα蛋白的表达。结果 GES1-RTN4细胞的生长速度较GES1和GES1-pIRESneo3细胞加快,统计学意义显著（P＜0.01）;GES1-RTN4细胞较GES1和GES1-pIRESneo3细胞克隆体积大、数目多,统计学意义显著（P＜0.01）;GES1-RTN4细胞中S期细胞比例较GES1和GES1-pIRESneo3细胞增加,细胞增殖指数增加,细胞凋亡率降低,统计学意义显著（P＜0.01）;GES1-RTN4细胞中IκBα蛋白表达较GES1和GES1-pIRESneo3细胞减少,统计学意义显著（P＜0.01）。结论 RTN4通过活化NF-κB信号通路,提高细胞增殖指数,抑制细胞凋亡,促进GES1细胞的增殖。     

p27kip1基因对食管癌细胞DNA复制及蛋白质合成的影响

目的:研究p27kip1基因对人食管癌细胞EC-9706的DNA复制及蛋白质合成的影响。方法: 重组体腺病毒Ad-p27kip1转染EC-9706细胞, 采用细胞生长计数、 [³H]-TdR、[³H]-Leucine掺入法、流式细胞术,研究其对食管癌细胞DNA复制及蛋白合成的影响。结果: Ad-p27kip1组细胞生长明显受抑, [³H]-TdR、[³H]-Leucine掺入量均明显减少,与对照组比较P<0.01;食管癌细胞的增殖明显受抑制。结论: p27可有效抑制食管癌细胞的增殖活性,这与其抑制食管癌细胞DNA复制及蛋白质合成有关。