鸟苷酸环化酶C在大肠癌淋巴结中表达的意义

目的:探讨在新鲜淋巴结组织检测鸟苷酸环化酶C(GCCmRNA)对大肠癌淋巴结微转移的诊断意义,以求更准确地评估大肠癌的转移情况。方法:收集本院2001.10～2002.3大肠癌根治术标本42例,计得淋巴结618枚;其中经病理形态学诊断无淋巴结转移者25例,得淋巴结370枚。用RT-PCR法检测GCCmRNA、CEAmRNA及CK20mRNA,分别以形态学证实转移淋巴结、良性大肠疾病淋巴结及正常大肠粘膜组织作为对照。全组病例随访6～26个月。结果:病例中临床分期为:DukesA期14例、B期11例、C期17例。总的阳性检出率为GCC22.65%(140/618)、CEA44.01%(272/618)、CK2043.69%(270/618);而在25例形态学诊断无转移病例中,三者的阳性率分别为12.16%(45/370)、42.16%(156/370)和41.62%(154/370)。25例常规病理阴性病例中14例检出GCCmRNA阳性淋巴结,其中4例出现复发转移,GCC诊断试验的灵敏度及特异度分别为100%、52.38%。淋巴结GCCmRNA阳性与复发/转移有统计学相关,影响无瘤生存率。结论:在传统病理形态学阴性的淋巴结中仍可能存在癌转移,用RT-PCR法检测微转移可提高淋巴结转移检出率,更准确地评估大肠癌患者的临床病理分期。GCCmRNA具有较好的特异性。     

早中期结直肠癌患者外周血鸟苷酸环化酶mRNA和细胞角蛋白20mRNA检测及预后分析

目的探讨外周血鸟苷酸环化酶（GC．C）mRNA和细胞角蛋白20（CK20）mRNA水平与早中期结直肠癌患者肿瘤转移及预后的关系。方法应用荧光定量聚合酶链反应技术,检测74例早中期结直肠癌患者术前外周血GC．CmRNA以及CK20mRNA的表达．并结合临床和病理各项指标以及术后随访资料,对患者肿瘤转移危险因素和预后进行统计学分析和评价。结果74例结直肠癌患者外周血GC．CmRNA阳性率为33．8％（25／74）,CK20mRNA阳性率为31．1％（23／74）;1、2、3年无瘤生存率分别为94．6％、82．4％和78．4％。单因素预后分析发现,外周血GC．cmRNA、CK20mRNA、肿瘤分化类型、有无肠系膜根部淋巴结转移、有无脉管瘤栓和术后是否接受化疗6因素与本组患者3年无瘤生存有关（均P〈0．05）;有无肠系膜根部淋巴结转移和有无脉管瘤栓是预后的独立影响因素（P〈0．05）。按肿瘤分期分层分析,外周血CK20mRNA和有无脉管瘤栓是Ⅲ期结直肠癌患者3年无瘤生存率的独立影响因素（P〈O．05）。结论检测外周血CK20mRNA、GC—CmRNA对于早期发现早中期结直肠癌转移可能具有重要的临床意义。     

腹腔镜和开腹结直肠癌根治术患者外周血GCC mRNA和hTERT mRNA的表达及意义

目的探讨腹腔镜和开腹结直肠癌根治术患者外周血中鸟苷酸环化酶C(GCC)mRNA和人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的表达及意义。方法按照随机数字表法将2011年7月至2013年7月我院收治的结直肠癌患者分为腹腔镜组和开腹手术组,通过逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测并比较两组患者外周血GCC mRNA和hTERT mRNA的表达情况。结果腹腔镜组手术时间长于开腹手术组,差异有统计学意义(P<0.05),术中出血量、术后排气时间、住院时间均少于开腹组,差异有统计学意义(P<0.05);腹腔镜组和开腹组患者手术前、手术后的GCC mRNA、hTERT mRNA阳性率表达分别比较差异无统计学意义(P>0.05),两组患者手术后的GCC mRNA、hTERT mRNA阳性率均高于手术前,差异有统计学意义(P<0.05)。结论结直肠癌采用腹腔镜和开腹手术根治治疗均会增加血行微转移可能性,但是腹腔镜结直肠根治术不会增加术后肿瘤血循环微转移的危险性。     

miR-21和PDCD4mRNA在大肠癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨miR-21和PDCD4mRNA在大肠癌组织中的表达及与其临床病理特征的关系,并阐明在大肠癌活体组织中miR-21与其靶基因PDCD4表达的关系.方法 用荧光定量PCR技术检测43对大肠癌组织及其对应的正常黏膜组织中的miR-21和PDCD4 mRNA表达量;免疫组化SP法检测PDCD4蛋白的表达.结果 大肠癌组织中miR-21的表达升高(P＜0.05),而PDCD4mRNA的表达降低(P＜0.05).miR-21的表达与大肠癌的淋巴结转移、临床分期(Ⅰ+Ⅱ、Ⅲ+Ⅳ)有关(P＜0.05),而与患者的性别、肿瘤位置、肿瘤大小、浸润深度、远处转移、临床分期(Ⅰ、Ⅱ)无关(P＞0.05);PDCD4mRNA的表达与大肠癌的浸润深度、临床分期(Ⅰ、Ⅱ)有关(P＜0.05),而与患者的性别、肿瘤位置、肿瘤大小、淋巴结转移、远处转移、临床分期(Ⅰ+Ⅱ、Ⅲ+Ⅳ)无关(P＞0.05).miR-21的表达与PDCD4蛋白的核表达、核与浆表达之和存在负相关(P＜0.05),而与PDCD4mRNA、PDCD4蛋白的浆表达无相关性(P＞0.05).结论 miR-21和PDCD4mRNA在大肠癌中的异常表达与大肠癌的预后有关;在大肠癌活体组织中,miR-21通过与PDCD4mRNA的3’非编码区结合抑制PDCD4mRNA翻译成蛋白质.     

大肠癌患者术中腹腔冲洗液中Survivin mRNA的检测及临床意义

目的 探讨检测大肠癌患者术中腹腔冲洗液Survivin mRNA表达的临床意义.方法 收集36例大肠癌和8例大肠良性病变患者的术中腹腔冲洗液,用RT-PCR方法 测定腹腔冲洗液中游离细胞的Survivin mRNA表达,同时作腹腔冲洗液细胞学检查(PLC).结果 腹腔冲洗液用RT-PCR方法 测定Survivin mRNA的阳性率为52.7%(19/36),高于腹腔冲洗液PLC的30.5%(11/36).Survivin mRNA的阳性率与肿瘤的组织学类型、淋巴结转移、浆膜侵犯程度、肿瘤分化程度和Dukes分期有关.结论 检测腹腔冲洗液中Survivin mRNA的表达将有助于大肠癌的预后的判断及治疗方案的制定.该法较PLC方法 有更高的灵敏度和特异性.     

Survivin基因在人大肠癌中的表达及临床意义

目的:研究Survivin基因在大肠癌中的表达及临床意义.方法:应用反转录RT-PCR方法,检测了29例大肠癌组织中Survivin基因mRNA的表达.结果:发现正常大肠黏膜组织中Survivin基因不表达,肿瘤组织中Survivin 基因表达阳性率为72.4%(21/29).半定量分析结果显示,29例大肠癌组织中Survivin其表达的平均值为 0.61 ±0.39.Survivin基因表达与淋巴结转移,肿瘤分期及远处转移有关.但与年龄,肿瘤大小,分化程度无关.结论:提示Survivin基因在大肠癌病程中起重要的作用,对筛选大肠癌术后高危转移患者,加强随访诊治有一定参考意义.     

大肠癌患者外周血淋巴细胞粘着斑激酶表达的临床意义

目的：探讨大肠癌患者外周血淋巴细胞粘着斑激酶(FAK)的表达及其临床意义。方法 结果 结论 方法：应用流式细胞仪(flow cytometry, FCM)检测40例大肠癌患者及20例正常人外周血淋巴细胞中FAK的表达。结果：大肠癌患者外周血淋巴细胞FAK阳性表达率为60.0%，与正常人(25.0%)比较，差异有显著性意义(P＜0.05)。并且外周血淋巴细胞FAK表达与大肠癌临床分期、组织学分化程度、淋巴转移有关。结论：大肠癌患者外周血淋巴细胞FAK异常表达与荷瘤状况有关，对大肠癌的早期诊断、临床分期、组织学分型、淋巴转移的预测等可能有一定帮助。     

Twist 蛋白在结直肠癌和肝转移组织中的表达及临床意义

目的：探讨Twist蛋白在结直肠癌及肝转移组织中的表达及其临床意义。方法选取2001年1月至2012年12月伴有肝转移的结直肠癌患者成套组织标本（原发灶、肝转移灶、距肿瘤边缘10 cm以上的正常结直肠黏膜组织）54例患者。采用免疫组织化学SP法检测54例患者标本的原发灶、肝转移灶及正常结直肠黏膜组织中Twist蛋白的表达,数据分析处理采用SPSS 19．0统计软件包,计数资料采用R ＆#215;C表资料的χ2检验,生存分析采用Kaplan-Meier生存曲线法,Log-rank检验分析肿瘤浸润程度、淋巴结转移、组织学分型及Twist蛋白在原发灶及肝转移灶中表达的情况,采用Cox回归模型进行独立预后因素分析。结果 Twist蛋白在结直肠癌原发灶中的阳性表达率明显高于肝转移灶、正常结直肠黏膜组织（P＜0．001）;原发灶中Twist蛋白在不同浸润深度T2、T3、T4的阳性表达率分别为30．0％、64．9％、85．7％,其差异有统计学意义（P＝0．049）;单因素分析显示,原发灶及肝转移灶中Twist蛋白阳性表达组患者的总体生存率均显著低于阴性表达组（P＝0．034,P＝0．031）;多因素生存分析证实肿瘤浸润深度、淋巴结转移和肿瘤组织学分型为影响患者总体生存率的独立因素（P＜0．001,P＝0．002,P＝0．005）,而Twist蛋白在原发灶及肝转移灶中的表达不是总体生存率的独立因素（ P＝0．548,P＝0．742）。结论 Twist蛋白在结直肠癌肝转移患者的原发灶高表达,其可能参与结直肠癌肝转移的发生,对评价结直肠癌肝转移患者预后具有一定临床意义。     

Kiss-1和KAI-1在大肠癌组织中的表达及临床意义

目的:研究转移抑制基因Kiss-1和KAI-1在大肠癌组织中的表达水平及临床意义.方法:采用原位杂交技术检测61例大肠癌组织和20例癌旁正常组织中Kiss-1和KAI-1的表达情况.结果:大肠癌组织中Kiss-1和KAI-1的阳性表达率明显低于癌旁正常组织(P<0.05),无淋巴结转移和高分化的大肠癌组织中Kiss-1和KAI-1的阳性表达率及评分显著高于有淋巴结转移和低分化病例.DukesA、B期的大肠癌组织中Kiss-1和KAI-1的阳性率显著高于DukesC、D期.二者表达与大肠癌其他病理特征无明显相关性.大肠癌组织中Kiss-1和KAI-1表达评分呈正相关(f=0.98,P<0.01).结论:Kiss-1和KAI-1可能在大肠癌的发生、发展和转移过程中起着重要作用,二者表达水平可作为反映大肠癌侵袭、转移及预后的重要生物学标志,同时可用于评价大肠癌侵袭、转移风险.     

血管内皮生长因子C在大肠癌外周血中表达的研究

目的:研究大肠癌根治术和术后辅助化疗对患者外周血VEGF-C活性表达的影响。方法:用酶联免疫吸附试验（ELISA）定量检测大肠癌患者术前、化疗前及化疗后3个不同时相血清VEGF-C活性。 结果:样品的VEGF-C吸光度（OD）：术前为0.537±0.026，手术后化疗前为0.441±0.023，化疗后为0.387±0.016，手术前后降低幅度为0.096±0.007，化疗前后降低幅度为0.057±0.005，均有统计学意义（P＜0.01）。结论:大肠癌根治术及术后辅助化疗均可不同程度的降低大肠癌患者外周血VEGF-C的活性。     

大肠癌骨髓血癌胚抗原检测的临床意义

７２例大肠癌患者分别检测了骨髓血和周围静脉血癌胚抗原（ＣＥＡ）。结果表明骨髓血ＣＥＡ的阳性率在不同的临床分期及不同的细胞分化程度的患者中均高于周围静脉血。提示骨髓血ＣＥＡ检测比周围静脉血检测更准确、敏感，是判断体内隐性播散和预后的一种好方法。     

乳腺癌患者外周血乳腺珠蛋白mRNA和CD44V6-mRNA表达及临床意义

目的研究人乳腺珠蛋白（hMAM）mRNA和CD44v6-mRNA在乳腺癌患者外周血中的表达及临床意义。方法应用巢式-逆转录-聚合酶链反应（Nested-RT-PCR）技术检测67例乳腺癌、16例乳腺良性肿瘤患者和20例健康志愿者外周血hMAM-mRNA和CD44V6-mRNA表达。结果乳腺癌患者外周血hMAM-mRNA阳性表达率为50．7％；Ⅳ期乳腺癌患者外周血hMAM-mR-NA表达率明显高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期者（P〈0．05）；hMAM-mRNA在健康人外周血无表达，乳腺良性肿瘤中仅6．25％阳性表达，乳腺癌患者外周血hMAM-mRNA的阳性表达率明显高于乳腺良性肿瘤患者及健康人（P〈0.05）。而CD44V6-mRNA在乳腺癌、乳腺良性肿瘤及健康志愿者中检出率差异无统计学意义（P〉0.05）。结论hMAM-mRNA特异性表达于乳腺癌患者外周血，乳腺癌患者外周血中检测出hMAM-mRNA提示可能有血循环转移；而CD44V6-mRNA作为血液中乳腺癌细胞的标志缺乏特异性。     

胃癌患者术后化疗前后检测外周血细胞角蛋白20mRNA的临床意义

目的探讨将外周血细胞角蛋白20（CK20mRNA）动态变化作为临床评估胃癌化疗敏感性分子学指标的可行性。方法对31例胃癌术后行辅助化疗（FOLFOX4）患者．运用荧光定量RT—PCR检测化疗前后各时点外周血中CK20mRNA的表达．选取15位健康志愿者为阴性对照组。结果化疗前1周时检测,有25例（80．6％）胃癌患者表达CK20mRNA,6例（19．4％）始终不表达;其中16例（51．6％）升高,9例降低（29．0％）;CK20mRNA表达量为2．22±2．12。化疗开始时检测,CK20mRNA表达量已升高至2．96±2．27,两个时间点检测结果比较,t=2．10．P〈0．05,差异有统计学意义。化疗1周期后检测,有24例（77.4％）胃癌患者表达CK20mRNA．7例（22．6％）升高．17例（54．8％）降低,7例（22．6％）不表达;表达量为2．05±1．86,与化疗开始时的检测结果比较t=2．50,P〈0．05,差异有统计学意义。化疗前后CK20mRNA表达率比较,差异有统计学意义（χ^2=6．06,P〈0．05）。结论化疗可使外周血中CK20mRNA表达水平明显降低．动态定量检测化疗前后外周血中CK20mRNA可能成为评估胃癌术后化疗敏感性的重要指标。     

Dukes‘B期大肠癌淋巴结微转移的检测及其临床意义

目的探讨免疫组化测定CEA检测Dukes'B期大肠癌淋巴结微转移的可行性及其临床意义.方法应用以CEA为目标抗原的免疫组化技术来检测42例Dukes'B期大肠癌的淋巴结微转移;并分析其对术后3年肿瘤复发转移的影响.结果在42例(330枚淋巴结)中;共有10例(16枚淋巴结)为微转移阳性,阳性率23.81%(10/42);微转移阳性组的3年肿瘤复发转移率为40%(4/10),明显高于阴性组的9.4%(3/32)(P=0.032).结论通过免疫组化测定CEA可以检测到Dukes'B期大肠癌淋巴结的微转移;微转移阳性者肿瘤容易复发转移;预后不良,应加强术后辅助治疗和随访.     

胰腺癌外周血中CK20mRNA的表达及临床意义

目的应用荧光定量逆转录聚合酶联反应（RT-PCR）检测胰腺癌外周血中cK20mRNA的表达及其临床意义。方法用荧光定量RT-PCR检测40例作根治术的胰腺癌病人外周血中CK20mRNA,并与病人的临床病理学指标、随访结果进行相关性研究。结果40例胰腺癌外周血中CK20mRNA阳性率57．5％（23／40）,CK20mRNA的表达与年龄、性别、肿瘤大小无关,与肿瘤分化程度、淋巴结转移、临床分期有相关性。随访发现CK20mRNA阳性病人术后6个月（P=0．043）或1年内（P=0．02）肿瘤转移的可能性明显大于阴性病人。外周血中CK20mRNA阳性病人预后不良,其生存率明显低于阴性病人（Log Rank=13．31,P=0．0003）。结论CK20mRNA是检测胰腺癌外周血中微转移的敏感指标,CK20mRNA的表达与肿瘤的生物学行为有关,并能预测胰腺癌预后和决定采用更有效的辅助治疗。     

CK19/20检测对结直肠癌微转移的诊断意义

目的 探讨 CK19/20mRNART-PCR检测对结直肠癌微转移的诊断意义。方法 采用RT-PCR逆转录多聚酶链反应）方法检测42例结、直肠癌患者及对照组6例非恶性病变腹部手术患者骨髓血、门静脉血和外周血CK19mHNA及 CK20 mRNA的表达。结果 对照组6例患者无 CK19及 CK20阳性表达,CK19及CK20在42例结、直肠癌患者骨髓血、门静脉血及外周血中阳性表达分别为24/42、21/42、11/42及27/42、18/42、11/42,两间无显著差异（P>0.05）,骨髓和门静脉中表达比外周血高（P<0.01）,Dukes　C 期患者表达高于Dukes A、B期（P<0.05）。结论 CK19、CK20的RT-PCR检测是较敏感和特异的结、直肠癌微小转移指标,阳性表达患者有较高发生远处转移的危险。     

磷酸化Afadin在骨质疏松患者大肠癌组织的表达研究

目的检测磷酸化Afadin在伴有骨质疏松的大肠癌患者肿瘤组织中的表达水平,分析其与临床病理因素以及总生存率的相关性。 方法回顾性筛选了73例伴有骨质疏松的大肠癌患者,收集组织标本,利用免疫组化及蛋白免疫印迹的方法对肿瘤组织中磷酸化Afadin的表达水平进行检测,与配对的非肿瘤组织进行比较,根据免疫组化染色结果,将患者分为磷酸化Afadin高表达和低表达两组,与临床病理资料进行相关性分析,采用Log-rank检验比较两组患者的总生存率,采用Cox比例风险模型,进行总生存的多因素分析。 结果与配对的非肿瘤组织相比,伴有骨质疏松的大肠癌患者肿瘤组织中磷酸化Afadin的表达水平升高,并且磷酸化Afadin的表达水平与肿瘤的浸润深度、淋巴结转移状况、脉管浸润以及神经侵犯状况相关,磷酸化Afadin高表达患者的总生存率降低,磷酸化Afadin表达水平是影响死亡的独立风险因素。 结论伴有骨质疏松的大肠癌患者肿瘤组织中存在磷酸化Afadin高表达的现象,磷酸化Afadin的表达水平和肿瘤的进展和预后相关。     

检测膀胱癌患者外周血中CK-20mRNA的临床意义

目的 :探讨膀胱肿瘤患者外周血中CK 2 0mRNA表达的临床意义。方法 :采用RT PCR技术检测 32例膀胱癌患者手术前、10例手术后及 10例健康者外周血标本中CK 2 0mRNA的表达。结果 :在手术前外周血中CK 2 0mRNA表达阳性率为 15 .6 % (5 / 32 ) ;在手术后外周血中CK 2 0mRNA表达阳性率为 2 0 .0 % (2 / 10 ) ,其中 1例术前外周血CK 2 0mRNA表达阴性 ,手术后变为阳性 ;健康者外周血均无CK 2 0mRNA表达。膀胱癌患者外周血中CK 2 0mRNA表达阳性率与肿瘤大小、数目无显著关系 (P >0 .0 5 ) ,但随着肿瘤分级、分期的增加 ,CK 2 0的检出率似有增加的趋势。结论 :以RT PCR技术检测膀胱癌患者外周血中CK 2 0mRNA的表达 ,可早期诊断和监测膀胱肿瘤细胞血行微转移。     

微RNA在胰腺癌患者血浆中的表达及临床意义

目的 探讨微RNA(microRNA,miR)在胰腺癌诊断中的意义,为胰腺癌的早期诊断提供一种新的方法.方法 收集37例胰腺癌患者血浆标本及临床资料,10例正常人血浆标本作为对照.采用RT-PCR方法,以U6为内参,检测4种miR(miR-190、miR-196a、miR-221、miR-222)在胰腺癌患者及正常人中的相对表达量,并分析其与胰腺癌临床病理特征及CA199的关系.结果 胰腺痛患者血浆中4种miR的表达量均显著高于正常人.其相对表达量分别为miR 190(3.50±4.07)、miR-196a(4.21±4.13)、miR-221(4.00±4.11)、miR-222(2.57±2.55).其中miR-196a的高表达和胰腺癌临床分期呈正相关(P＜0.05),与其他病理特征无关.其余3种miR与临床病理特征均无关.4种miR的相对表达量与CA199浓度无相关性.结论 miR-190、miR-196a、miR-221、miR-222在胰腺癌患者血浆中显著高表达.血浆中miR-190、miR-196a、miR-221、miR-222的检测可能为胰腺癌的早期诊断提供一个新方法.