升陷汤对肺纤维化大鼠肺组织α-平滑肌肌动蛋白、肺表面活性蛋白D及TGF-β1/Smads通路蛋白表达的影响

目的观察升陷汤对肺纤维化大鼠肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、肺表面活性蛋白D(SP-D)及TGF-β1/Smads通路蛋白表达的影响,探讨其作用机制。方法 SPF级SD雄性大鼠60只,随机分为正常组、模型组、吡非尼酮组和升陷汤高、中、低剂量组。除正常组外,其余大鼠采用气管内注射硫酸博莱霉素建立肺纤维化模型,造模后第8日起,升陷汤高、中、低剂量组分别予10.4、5.2、2.6 g/(kg·d)升陷汤灌胃,吡非尼酮组予0.72 g/(kg·d)吡非尼酮混悬液灌胃,连续28 d。记录大鼠肺脏质量和体质量,计算肺脏系数,HE染色观察大鼠肺组织病理变化,Masson染色观察大鼠肺组织纤维化程度,免疫组化检测大鼠肺组织α-SMA、SP-D的表达,Western blot检测大鼠肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad2、Smad7蛋白的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠肺脏质量和肺脏系数明显增加,体质量明显减轻,肺组织损伤评分和肺组织胶原容积分数明显增加(P0.05),肺组织α-SMA、TGF-β1、Smad2蛋白表达明显升高,SP-D、Smad7蛋白表达明显降低(P0.05);与模型组比较,升陷汤高、中、低剂量组大鼠肺脏质量和肺脏系数明显降低,体质量增加,肺组织损伤评分及肺组织胶原容积分数明显降低(P0.05),肺组织α-SMA、TGF-β1、Smad2蛋白表达明显降低,SP-D、Smad7蛋白表达明显升高(P0.05)。结论升陷汤可降低肺纤维化模型大鼠肺脏质量,增加大鼠体质量,降低肺组织损伤,其机制可能与下调肺组织α-SMA、TGF-β1、Smad2蛋白的表达,上调SP-D、Smad7蛋白的表达相关。     

柴葛芩连汤对解脲脲原体肺炎小鼠肺功能及CARDS TX/NLRP3信号通路的影响

目的 探究柴葛芩连汤对解脲脲原体肺炎模型小鼠肺功能以及CARDS TX/NLRP3信号通路的影响。方法 60只小鼠分为对照组，肺炎组，柴葛芩连汤低、高剂量组和阿奇霉素组。鼻腔滴注解脲脲原体菌液进行造模，柴葛芩连汤低、高剂量组灌胃5.4、16.2 g/kg柴葛芩连汤；阿奇霉素组灌胃90 mg/kg阿奇霉素溶液2个周期(1周期为7 d,前3 d连续灌胃阿奇霉素溶液，后4 d灌胃等量蒸馏水);对照组和肺炎组灌胃等量蒸馏水，连续14 d。采用动物肺功能分析仪检测肺功能，ELISA法检测肺泡灌洗液中炎症因子水平，HE染色观察肺组织病理变化，RT-qPCR和Western blot法检测肺组织肺炎支原体外毒素(CARDS TX)、炎症小体(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(caspase-1)的mRNA和蛋白表达。结果 与对照组比较，肺炎组小鼠PEF、FEV0.1、FEF-50降低(P<0.05),IL-6、TNF-α水平及CARDS TX、NLRP3、ASC、caspase-1 mRNA和蛋白表达均升高(P<0.05),肺泡结构模糊，有炎性细胞浸...     

眼针对脑缺血再灌注损伤模型大鼠脑皮层组织TNFR1表达的影响

目的:观察眼针对脑缺血再灌注损伤(CIRI)模型大鼠脑皮层组织TNFR1表达的变化,探讨眼针治疗CIRI的作用机制。方法:健康雄性SPF级Wistar雄性大鼠60只,随机分为正常组、假手术组、模型组和眼针组。模型组和眼针组采用改良的线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血(MACO)再灌注动物模型。分别以免疫组化和RT-PCR方法观察缺血侧脑皮层TNF-α、TNFR1蛋白表达,TNFR1 mRNA表达的变化。结果:与正常组及假手术组比较,模型组大鼠缺血侧脑皮层TNF-α、TNFR1的蛋白及基因均显示出明显的高表达(P<0.01),而眼针组同模型组相比,TNF-α、TNFR1表达均下调(P<0.05)。结论:眼针抑制CIRI大鼠TNF-α、TNFR1的高表达,可能是眼针治疗CIRI的作用机制之一。     

加味涤痰汤对脑缺血再灌注损伤大鼠脑细胞自噬相关蛋白表达的影响

目的:探讨加味涤痰汤对脑缺血再灌注损伤大鼠脑细胞自噬相关蛋白表达的影响。方法:采用可逆性脑中动脉闭塞线栓法栓塞右侧大脑中动脉,构建脑缺血再灌注(CIR)损伤模型,随机分为假手术组、模型组、加味涤痰汤高、低剂量组(0. 768,0. 384 g·kg~(-1))和吡拉西坦组(0. 1 g·kg~(-1))。假手术组和模型组灌胃生理盐水,加味涤痰汤高、低剂量组灌胃加味涤痰汤,吡拉西坦组灌胃吡拉西坦片,灌胃10 m L·kg~(-1);给药7 d。给药24 h内,处死后行组织病理学检查,比较脑梗死体积、神经细胞凋亡和血清炎症因子水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)测定脑组织中自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3(LC3)Ⅱ,Beclin1,B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和p62的表达。结果:模型组脑组织梗死灶内细胞和血管坏死,神经元肿胀,间质水肿;加味涤痰汤高、低剂量组及吡拉西坦组脑组织少数神经细胞死亡,水肿减轻,神经细胞肿胀减轻。加味涤痰汤高、低剂量组及吡拉西坦组脑梗死体积和神经细胞凋亡低于模型组(P 0. 05),加味涤痰汤高、低剂量组及吡拉西坦组肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-2(IL-2)和白细胞介素-8(IL-8)水平降低(P 0. 05)。与假手术组比较,模型组LC3Ⅱ,Bcl-2和Beclin1蛋白及mRNA表达明显升高,p62蛋白及mRNA表达明显下降;与模型组比较,加味涤痰汤高、低剂量组及吡拉西坦组LC3Ⅱ和Beclin1蛋白及mRNA表达均明显降低,p62蛋白及mRNA表达明显升高,差异均具有明显性(P 0. 05)。结论:加味涤痰汤可改善MCAO/R脑组织损伤和自噬,减轻炎症反应,调节自噬活性,可能与下调LC3Ⅱ,Beclin1表达,上调p62表达有关。     

补肺汤对肺纤维化小鼠肺组织中自噬相关蛋白的影响

目的:探讨补肺汤对肺纤维化中自噬相关蛋白Smad3、ATG5、p62的影响。方法:C57小鼠分为假手术组,模型组,补肺汤高、中、低剂量组,地塞米松组及补肺汤+地塞米松联合用药组。假手术组气管内滴注生理盐水,其余各组气管内滴注博莱霉素注射液。术后2 d给药,于第56天取肺组织分别进行HE染色、Mssson染色,并以免疫组化法及免疫蛋白印记法检测肺组织Smad3、ATG5、p62蛋白表达变化。结果:与模型组比较,补肺汤高剂量组、地塞米松组和联合用药组肺组织病理学显著改善,补肺汤高剂量组和联合用药组肺组织胶原活性显著降低;免疫组化检测显示补肺汤低剂量组Smad3表达减弱,补肺汤高剂量组及地塞米松组ATG5表达显著增强,补肺汤高、中剂量组和联合用药组p62表达显著增强;免疫蛋白印迹法显示各给药组Smad3、ATG5、p62蛋白表达差异与免疫组化结果基本一致。结论:补肺汤对肺纤维化组织病理学和胶原活性有明显影响,并对自噬相关蛋白Smad3、ATG5、p62有调节作用。     

姜虎汤对结缔组织病相关间质性肺病模型小鼠免疫炎性损伤的影响

[目的] 探讨姜虎汤对博来霉素（BLM）诱导结缔组织病相关间质性肺病（CTD-ILD）模型小鼠肺间质病变的影响。[方法] 采用SPF级雄性C57/BL6小鼠,经BLM（2 mg/kg）气管内滴注诱导间质性肺病模型,将造模成功的30只小鼠随机分为模型组6只、阳性药组6只、姜虎汤高、中、低剂量组各6只,另选6只未造模小鼠作为正常对照组。正常对照组和模型组予蒸馏水10 mL/（kg·d）,阳性药组予泼尼松7.5 mg/（kg·d）,姜虎汤高、中、低剂量组分别予姜虎汤26.66、13.33、6.67 g/（kg·d）剂量灌胃给药,其中姜虎汤高剂量组每日分2次灌胃给药。干预4周后处死小鼠,采集肺组织标本。以苏木精-伊红染色法（HE）观察肺组织病理改变;蛋白免疫印迹（Western Blot）技术检测肺组织高迁移率族蛋白B1（HMGB1）、转化生长因子β1（TGF-β1）、核因子-κB p65（NF-κB p65）、单磷酸腺苷（AMP）活化蛋白激酶α1（AMPKα1）、磷酸化AMPKα1（pAMPKα1）蛋白表达水平。[结果] 模型组小鼠较正常对照组有明显病理改变（P<0.01）,主要表现在肺组织炎症细胞浸润、间质纤维化;阳性药组肺组织炎症病变较模型组有改善（P<0.05）;姜虎汤中、低组小鼠肺组织炎症细胞浸润较模型组有改善（P<0.05）,姜虎汤高、中、低剂量组小鼠肺组织间质纤维化较模型组有改善（P<0.05）。Western Blot结果显示,与正常组比较,模型组小鼠肺组织中HMGB1、NF-κB p65蛋白表达水平显著升高（P<0.01）,TGF-β1蛋白表达水平明显升高（P<0.05）,AMPKα1、pAMPKα1蛋白表达水平明显降低（P<0.05,P<0.01）。与模型组比较,姜虎汤中、低剂量组小鼠肺组织中HMGB1、NF-κB p65蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,姜虎汤高剂量组小鼠肺组织TGF-β1蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,阳性药组小鼠肺组织中AMPKα1蛋白表达水平明显上调（P<0.05）,姜虎汤高剂量组小鼠肺组织中pAMPKα1蛋白表达水平明显上调（P<0.05）;与阳性药组比较,姜虎汤高剂量组小鼠肺组织中TGF-β1 蛋白表达水平明显下调（P<0.05）;姜虎汤各剂量组间比较,姜虎汤高剂量组TGF-β1 蛋白表达水平与姜虎汤中剂量组差异明显（P<0.05）。[结论] 姜虎汤中、低剂量组在改善小鼠肺组织炎症病理损伤,及抑制免疫炎性因子高表达的作用更具优势;姜虎汤高剂量组在改善小鼠肺组织间质纤维化、抑制纤维化生成因子高表达及上调免疫炎性抑制因子的作用更强。其分子机制可能与激活AMPK,从而抑制HMGB1/ NF-κB/TGF-β1免疫炎性信号通路相关。     

基于Keap1-Nrf2/ARE轴防风提取物对间质性肺炎幼鼠肺纤维化及血管新生的抑制作用研究

目的：基于Keap1-Nrf2/ARE轴探讨防风提取物对间质性肺炎(IP)幼鼠肺纤维化及血管新生的作用及机制。方法：随机选取15只30日龄雄性Wistar大鼠作为假手术组,另外60只采用气管内滴注5 mg/kg博来霉素(BLM)诱导构建幼鼠IP模型,后随机分为模型组、强的松(0.2 mg/kg)组及防风提取物低(100 mg/kg)、高(200 mg/kg)剂量组,每组各15只,灌胃给药,假手术组及模型组幼鼠灌胃相应体积生理盐水,连续14 d。HE及Masson染色观察分析各组幼鼠肺脏组织形态及肺纤维化程度;免疫组化技术检测血小板内皮细胞粘附分子(CD31)抗原阳性表达;比色分析法检测各组幼鼠肺组织MDA、SOD、GSH水平;ELISA法检测各组幼鼠血清VEGF、Ang-2含量;Western Blot法检测各组幼鼠肺组织中α-SMA、Keap1、Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达。结果：与模型组比较,各给药组幼鼠肺组织结构较完整,肺泡间隔及肺泡壁较薄,炎性渗出减少,肺组织胶原沉积面积、纤维化程度及血管密度逐渐减小;肺组织中MDA含量,血清VEGF、Ang-2含量及α-SMA、Kea...     

麦冬有效部位对支原体感染小鼠肺组织黏蛋白MUC5ac表达的影响

目的:通过实验研究麦冬有效部位对肺炎支原体(MP)感染小鼠的肺组织黏蛋白5ac(MUC5ac)表达及分泌的影响。方法:将100只BALB/c小鼠,分为正常对照组,模型组,阿奇霉素组,养阴清肺组,麦冬多糖高、中、低剂量组,麦冬皂苷高、中、低剂量组,每组10只。除正常组外,其余各组采用MP滴鼻法造模,连续造模3 d后,各组开始灌胃给药,每天1次,阿奇霉素组连续给药5 d,其他组连续给药6 d后,收集肺泡灌洗液(BALF),ELISA检测BALF中MUC5ac的蛋白含量;采集小鼠肺组织,PCR法测定肺组织中MUC5ac mRNA的表达。结果:1)肺组织MUC5ac mRNA的表达:与正常组相比,模型组肺组织MUC5ac mRNA的表达极显著上升(P<0.01);与模型组对比,阿奇霉素的表达量降低,具有极显著性(P<0.01);麦冬多糖高、中、低剂量组,养阴清肺组及麦冬皂苷高剂量组的表达量降低,具有显著性差异(P<0.05)。2)BALF MUC5ac的含量:与正常组对比模型组含量显著增加(P<0.01),与模型组对比,阿奇霉素组、麦冬皂苷高剂量组含量显著减少(P<0.01),麦冬皂苷中剂量组和麦冬多糖高、中剂量组含量减少,具有显著性差异(P<0.05)。结论:麦冬有效部位可下调MUC5ac蛋白的表达及分泌。     

白及颗粒对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠肺组织α-1 antitrypsin、Neutrophil Elastase及MPO表达的影响

[目的]研究白及颗粒对大鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)横型的治疗作用及作用机制。[方法]60只SPF级SD大鼠分为空白对照组、模型对照组、羧甲司坦片组(0.14 g/kg)、白及颗粒高剂量组(5.4 g生药/kg)、白及颗粒中剂量组(3.6 g生药/kg)、白及颗粒低剂量组(1.8 g生药/kg)。除空白对照组外其余大鼠于实验第1、15天经气管注入0.2 mL脂多糖(LPS)溶液。第15天除外第2~28天每天给予烟熏。记录0.3 s内最大呼气容积与肺活量比值(FEV 0.3/FVC%),采用苏木精-伊红(HE)染色及免疫组化染色观察各组大鼠肺组织的病理改变。[结果]与空白对照组比较,模型对照组FEV 0.3/FVC%显著降低(P<0.01),与模型对照组比较,白及颗粒低剂量组、中剂量组、高剂量组FEV 0.3/FVC%显著增加(P<0.01);病理检测结果显示:与空白对照组比较,模型对照组HE染色病理分级显著增加(P<0.01),与模型对照组比较,白及颗粒中剂量组、高剂量组HE染色炎症分级显著降低(P<0.01);与空白对照组比较,模型对照组肺脏细胞α-抗胰蛋白酶(α-1 antitrypsin)表达显著增加(P<0.05);与模型对照组比较,白及颗粒剂低剂量组、中剂量组和高剂量组大鼠肺脏细胞α-1 antitrypsin表达显著增加(P<0.05);与空白对照组比较,模型对照组肺脏细胞中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)表达显著增加(P<0.05),与模型对照组比较,白及颗粒中剂量组、高剂量组大鼠肺脏细胞NE表达显著降低(P<0.05);与空白对照组比较,模型对照组肺脏细胞髓过氧化物酶(MPO)表达显著增加(P<0.05),与模型对照组比较,白及颗粒低剂量组、中剂量组和高剂量组大鼠肺脏细胞MPO表达显著降低(P<0.05)。蛋白印迹检测结果显示:与空白对照组比较,模型对照组肺组织NE及MPO表达显著增加(P<0.05);与模型对照组比较,白及颗粒中剂量组、高剂量组大鼠肺组织内NE及MPO表达显著降低(P<0.05)。[结论]白及颗粒可能通过增加慢阻肺模型大鼠肺脏α-1 antitrypsin表达,降低NE及MPO的表达,起到减轻慢阻肺模型大鼠肺组织细胞炎症反应,最终产生改善COPD模型大鼠肺功能的药理作用。     

妇科千金片对大鼠慢性盆腔炎模型输卵管组织Caspase-3和Caspase-8表达的影响

目的:通过观察妇科千金片对SD大鼠慢性盆腔炎模型中输卵管组织Caspase-3蛋白和Caspase-8蛋白表达影响,深入探讨妇科千金片治疗慢性盆腔炎的作用机制。方法:采用大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及解脲脲原体混合菌接种法,建立慢性盆腔炎模型,随机分成七组:空白组,模型组,假手术组,中药妇炎康(0.41g·kg-1)对照组,和妇科千金片低剂量组(0.52g·kg-1)、中剂量组(1.04g·kg-1)、高剂量组(2.08g·kg-1)。经药物治疗后,解剖大鼠取输卵管组织,运用免疫细胞化学法观察Caspase-3蛋白和Caspase-8蛋白表达情况。结果:治疗21d后,与模型组比,妇科千金片低剂量组Caspase-3蛋白光密度值升高,具有明显差异(P0.05),妇科千金片中、高剂量Caspase-3蛋白光密度值明显升高,具有显著性差异(P0.01);与模型组比,妇科千金片低、中、高剂量Caspase-8蛋白光密度值明显升高,具有显著性差异(P0.01)。结论:妇科千金片可能通过升高Caspase-3蛋白和Caspase-8蛋白的表达,引发Caspase级联反应,促使炎性细胞凋亡,从而减轻输卵管组织炎性损害。     

加味不忘散对AD模型大鼠海马区NLRP3炎症通路中相关因子表达的影响

目的:通过观察加味不忘散对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠学习记忆能力及海马区NOD样受体热蛋白结构域3(NLRP3)炎症通路中相关分子NLRP3,天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)和白细胞介素-1β(IL^-1β)表达的影响,探讨其作用机制。方法:通过Morris水迷宫筛选出合格SD大鼠52只,随机均分为假手术组,AD模型组,加味不忘散低剂量组(1.5 g·kg^-1),加味不忘散高剂量组(3 g·kg^-1)。采用双侧海马注射β-淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)5μL(2 g·L^-1)建立AD模型大鼠。造模后分别予低、高剂量加味不忘散灌胃,每日1次,连续4周。灌胃结束后通过Morris水迷宫法检测大鼠学习记忆能力,判断造模是否成功;通过实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠海马组织中NLRP3,Caspase-1,IL^-1βmRNA和蛋白的表达水平。结果:与假手术组比较,AD模型组大鼠学习记忆能力明显下降(P<0.05);与AD模型组比较,加味不忘散低剂量组大鼠学习记忆能力无改善,NLRP3,Caspase-1,IL^-1βmRNA和蛋白的表达水平均无统计学差异,加味不忘散高剂量组大鼠学习记忆能力明显改善,NLRP3,Caspase-1,IL^-1βmRNA和蛋白的表达均明显下降(P<0.05)。结论:高剂量加味不忘散可改善大鼠学习记忆能力,其机制可能与下调NLRP3炎症通路中NLRP3及下游Caspase-1,IL^-1β的表达,抑制海马组织内的炎症反应有关。     

柴葛芩连汤联合常规治疗对湿热闭肺型小儿支气管肺炎患者的临床疗效

目的考察柴葛芩连汤联合常规治疗对湿热闭肺型小儿支气管肺炎患者的临床疗效。方法 137例患者随机分为对照组(68例)和观察组(69例),对照组给予常规治疗(吸氧、布洛芬、头孢美唑钠、喜炎平注射液),观察组在对照组基础上加用柴葛芩连汤,疗程10 d。检测临床疗效、恢复情况、血清炎症因子(CRP、IL-6、IL-8、TNF-α)、中医证候评分变化。结果观察组总有效率高于对照组(P<0.05),恢复情况(除X线全胸片消失时间外)更明显(P<0.05)。治疗后,2组炎症因子水平、中医证候评分降低(P<0.05),以观察组更明显(P<0.05)。结论柴葛芩连汤可缓解湿热闭肺型小儿支气管肺炎患者症状,其机制可能与下调血清CRP、IL-6、IL-8、TNF-α水平有关。     

乌梅丸对2型糖尿病模型大鼠肠道菌群、炎性因子及短链脂肪酸的影响

目的:研究乌梅丸对2型糖尿病(T2DM)模型大鼠血糖,肠道菌群,肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-10(IL-10)以及肠道菌群发酵膳食纤维产生短链脂肪酸(SCFAs)的影响作用。方法:以80只SD清洁大鼠作为实验对象,从中随机选取10只为正常组,其余70只以高糖高脂乳剂灌胃8周后联合链脲佐菌素(STZ,35 mg·kg^-1)腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型,空腹血糖>11.10 mmol·L-1即为造模成功。将造模未成功的大鼠剔除,余造模成功大鼠随机分为模型组、二甲双胍组、乌梅丸高、中、低剂量组,每组10只。正常组与模型组灌胃(ig)生理盐水20 mL·kg^-1·d^-1,二甲双胍组ig二甲双胍200 mg·kg^-1·d^-1,乌梅丸高、中、低剂量组分别ig乌梅丸20,10,5 g·kg^-1·d^-1。造模和用药前后定期监测大鼠血糖和体质量,用药四周后取血及大鼠粪便。16S-rDNA高通量测序技术对肠道菌群进行基因测序,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血清炎性因子TNF-α,IL-10的水平,气相色谱法检测粪便中乙酸、丙酸、正丁酸的含量。结果:与正常组比较,模型组体质量下降趋势明显(P<0.01),拟杆菌门(Bacteroidetes),放线菌纲(Actinobacteria),拟杆菌属(Bacteroides),梭菌属(Clostridium)增加,厚壁菌门(Firmicutes),δ-变形菌纲(Deltaproteobacteria),乳酸菌(Lactobacillus)降低,空腹血糖、血清TNF-α水平显著升高(P<0.01),IL-10水平下降(P<0.01),短链脂肪酸乙酸、丙酸、正丁酸含量降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,乌梅丸高、中、低剂量组及二甲双胍组体质量下降趋势变缓,Bacteroidetes,Actinobacteria,Bacteroides,Clostridium降低,Firmicutes,Delta Proteobacteria,Lactobacillus增加,空腹血糖、血清TNF-α水平下降(P<0.01),IL-10水平上升(P<0.01),乙酸、丙酸、正丁酸含量上升(P<0.05,P<0.01)。结论:乌梅丸可能通过调节肠道菌群,改善炎症反应,增加短链脂肪酸的含量,以致血糖降低,从而达到对2型糖尿病的防治作用。     

全真一气汤对COPD模型小鼠Nrf2通路及对炎性细胞因子和肺组织超微结构的影响

目的:研究全真一气汤对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型小鼠炎性细胞因子及肺组织超微结构的影响。方法:实验小鼠分为正常组、模型组、全真一气汤低、高剂量(4.3,8.6 g·kg-1)组、氨茶碱(2.3 mg·kg-1)组,采用熏香烟联合气道内细菌脂多糖(LPS)滴入法制作COPD稳定期小鼠模型,熏烟于16周结束。观察小鼠的一般情况,检测小鼠肺功能,计算肺泡灌洗液炎性细胞总数,肺组织白细胞介素-6(IL-6)和趋化因子(KC)表达量,免疫组化法检测肺组织细胞外调节蛋白激酶(ERK),核转录因子NF-E2相关因子(Nrf2),血红素加氧酶(HO-1)蛋白表达,透射电镜观察肺组织超微结构改变。结果:模型组小鼠一般状态较正常组差,全真一气汤低剂量组及高剂量组小鼠状态较模型组好转。与模型组比较,全真一气汤可降低COPD模型小鼠气道阻力(P0.05),降低肺静态顺应性(P0.05)和功能残气量;降低肺泡炎症细胞数(P0.05),降低炎症介质IL-6和KC表达量(P0.05),降低ERK和Nrf2蛋白表达量,增高HO-1蛋白表达量,肺组织电镜结果显示全真一气汤能减轻肺组织超微损害。结论:全真一气汤可改善COPD模型小鼠一般状态,减少炎症细胞因子表达,保护肺功能,减轻肺组织超微结构损害,能降低ERK和Nrf2蛋白表达量,上调HO-1蛋白表达,起到抗炎作用。     

海龙黄精散对微波辐射诱导少弱精子症小鼠受损生精细胞的作用研究

目的:观察海龙黄精散对微波辐射诱导的少弱精子症小鼠精子活力及对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-12(IL-12)的影响。方法:将40只小鼠随机分为空白组、模型组及海龙黄精散小、中、大剂量组,每组8只。微波辐射造模同时,海龙黄精散小、中、大剂量组分别以0.0075、0.015、0.03 g海龙黄精散灌胃,干预18 d。HE染色观察小鼠睾丸组织病理学改变,比较各组小鼠精子活力、Johnson评分及睾丸组织TNF-α、IL-6、IL-12水平。结果:干预后,模型组小鼠精液前向运动精子(PR)、非前向运动精子(NP)、精子总活力低于空白组(均P<0.05),海龙黄精散小剂量组小鼠NP较模型组升高(P<0.05),海龙黄精散中、大剂量组小鼠PR、NP、精子总活力高于模型组(均P<0.05)。与空白组比较,模型组小鼠Johnson评分下降(P<0.05); 与模型组比较,海龙黄精散小、中、大剂量组小鼠Johnson评分升高(均P<0.05)。与空白组比较,模型组小鼠睾丸组织TNF-α、IL-6、IL-12水平升高(均P<0.05); 与模型组比较,海龙黄精散小、中、大剂量组小鼠TNF-α、IL-12水平降低(均P<0.05); 与模型组比较,海龙黄精散中、大剂量组小鼠IL-6水平降低(均P<0.05)。结论:海龙黄精散可提高微波辐射诱导少弱精子症小鼠精子活力,其机制可能与海龙黄精散降低睾丸TNF-α、IL-6、IL-12水平有关。     

益智醒脑方对阿尔茨海默病大鼠学习记忆能力及炎症因子的影响

目的:评估益智醒脑方对阿尔茨海默病大鼠学习记忆能力及对白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的影响。方法:将90只老年Wistar大鼠随机分为六组含高剂量益智醒脑方组(高剂量组)、中剂量益智醒脑方组(中剂量组)、低剂量益智醒脑方组(低剂量组)、正常组、模型组及西药组,每组15只,除了正常组其余各组均进行Aβ_1-42造模制备成阿尔茨海默病大鼠。观察各组大鼠学习记忆力、海马APP、VPS35、SorLA的表达及海马炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平。结果:高剂量组及正常组穿越平台次数高于模型组、西药组、中剂量组及低剂量组,差异均有统计学意义(P<0.05); 高剂量组逃避潜伏期低于模型组、正常组、西药组、中剂量组及低剂量组,差异均有统计学意义(P<0.05)。正常组APP、VPS35、SorLA的表达均高于高剂量组、模型组、西药组、中剂量组及低剂量组,差异均有统计学意义(P<0.05)。正常组IL-1β、IL-6、TNF-α水平均低于高剂量组、模型组、西药组、中剂量组及低剂量组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:益智醒脑方能够改善阿尔茨海默病大鼠学习记忆能力,降低IL-1β、IL-6、TNF-α水平。     

参苓白术散对NAFLD大鼠肝细胞mTORC1/STAT3信号通路的影响

目的:观察参苓白术散对高脂饮食饲养的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合体1(mTORC1)/细胞信号转导因子及转录激活因子3(STAT3)信号通路的影响,从炎症角度揭示参苓白术散抗大鼠NAFLD的作用机制。方法:取SD大鼠80只,随机分为4组,分别为正常组、模型组、参苓白术散高、低剂量组(30,10 g·kg^-1),每组20只。采用高脂饲料喂养大鼠8周,建立NAFLD大鼠模型,各药物干预组大鼠灌服相应剂量的参苓白术散,8周后取血和肝组织样本,全自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)定量;对肝组织进行油红O,苏木素-伊红(HE)染色;采用Ⅳ型胶原酶离体循环灌注法分离肝细胞;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测肝细胞肿瘤坏死因子(TNF)-α,白细胞介素(IL)-1β,IL-5及IL-6含量变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠肝细胞mTORC1,STAT3 mRNA及蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠病理组织学改变表明,肝组织炎症及脂肪蓄积显著,血清ALT,AST,TC,TG及LDL-C含量显著升高,HDL-C显著下降,肝细胞TNF-α,IL-1β,IL-5及IL-6水平显著升高,mTORC1,STAT3 mRNA及蛋白相对表达量显著升高(P<0.01)。与模型组比较,参苓白术散高、低剂量组肝组织脂质蓄积明显改善,血清ALT,AST,TC,TG及LDL-C含量明显下降,肝细胞TNF-α,IL-1β,IL-5及IL-6水平明显下降,肝细胞mTORC1,STAT3 mRNA及蛋白相对表达量明显降低;参苓白术散高剂量组在改善脂质蓄积,抑制肝组织炎症反应方面,效果优于参苓白术散低剂量组,mTORC1,STAT3 mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:参苓白术散能够改善高脂饮食诱导的NAFLD大鼠脂肪代谢紊乱、减轻肝脏脂质蓄积及炎症反应,其作用机制可能与抑制肝细胞内mTORC1/STAT3通路相关mRNA及蛋白表达有关。     

“以方测证”验证化浊解毒对溃疡性结肠炎大鼠血清TNF-α、IL-1β的影响

目的观察解毒消痈方药对溃疡性结肠炎大鼠血清TNF-α、IL-1β的影响。方法将SD大鼠随机分为正常组、模型组、解毒消痈方药大剂量组、解毒消痈方药中剂量组、解毒消痈方药小剂量组、阳性对照柳氮磺胺吡啶组,每组各10只。以三硝基苯磺酸建立溃疡性结肠炎大鼠动物模型,采用双抗体夹心法检测大鼠血清TNF-α、IL-1β的变化。结果大鼠血清肿瘤坏死因子α及白介素1β的含量模型组均明显高于正常组(P均0.05);解毒消痈方药大、中剂量组明显低于模型组(P均0.05)。结论解毒消痈方药有下调促炎因子TNF-α及IL-1β的作用,存在效-量关系,剂量增加能提高疗效,其抗炎机制可能与下调TNF-α及IL-1β含量有关。     

桔梗总皂苷通过抑制IRG-1对呼吸道合胞病毒肺炎小鼠治疗作用的研究

目的:探讨桔梗总皂苷通过抑制免疫反应基因1 (IRG-1)对呼吸道合胞病毒(RSV)肺炎小鼠的治疗作用。方法:将60只小鼠分为对照组、模型组、利巴韦林组和桔梗总皂苷低、中、高剂量组,每组10只。除对照组外,其余各组制备RSV肺炎小鼠模型。模型制备后第2天利巴韦林组按0.150 g/(kg·d)的剂量给予利巴韦林灌胃,桔梗总皂苷低、中、高剂量组依次按照0.014 g/(kg·d)、0.028 g/(kg·d)、0.056 g/(kg·d)的剂量给予桔梗总皂苷灌胃,对照组、模型组给予等体积生理盐水。连续给药5天,计算小鼠肺指数,进行病理学检查,检测支气管肺泡灌洗液中白细胞介素-6 (IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、活性氧(ROS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及血清中IRG-1 mRNA的含量。结果:对照组小鼠肺组织未见明显异常;模型组小鼠肺组织见肺泡壁增厚,支气管和细支气管周围有大量淋巴细胞浸润,腔内有大量脱落炎细胞及渗出物,存在肺实变表现;利巴韦林组小鼠肺组织病理改变与对照组接近;桔梗总皂苷各剂量组小鼠肺泡壁部分增厚,肺泡内炎症细胞渗出较模型组轻,呈剂量依赖性。与对照组比较,模型组小鼠肺指数、IL-6、IL-1β、TNF-α、ROS含量及血清中IRG-1 mRNA相对表达量均显著增高(P<0.05)。与模型组比较,利巴韦林组和桔梗总皂苷低、中、高剂量组小鼠肺指数、IL-6、IL-1β、TNF-α、ROS含量及血清中IRG-1 mRNA相对表达量均显著降低(P<0.05)。与利巴韦林组比较,桔梗总皂苷各剂量组小鼠肺指数、IL-6、IL-1β、TNF-α、ROS含量及血清中IRG-1 mRNA相对表达量均增高,除桔梗总皂苷高剂量组肺指数及TNF-α外,差异均有统讨学意义(P<0.05)。结论:桔梗总皂苷能改善RSV感染所致的小鼠肺炎炎症反应,其机制可能与抑制IRG-1的表达有关。     

宽胸理肺汤合三子养亲汤对COPD大鼠炎症因子、氧化应激及凋亡相关蛋白的影响

目的观察宽胸理肺汤合三子养亲汤对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠炎症因子、氧化应激指标、凋亡相关蛋白表达的影响。方法取7只健康雄性Wistar大鼠作为正常组,另取35只雄性Wistar大鼠采用熏香烟加气管注内毒素法建立COPD模型。将建模成功大鼠随机分成COPD组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组、乙酰半胱氨酸组,每组7只。中药高、中、低剂量组分别按照5,2.5,1.25 g生药/kg的剂量给予宽胸理肺汤合三子养亲汤灌胃,乙酰半胱氨酸组给予0.8 g/kg乙酰半胱氨酸灌胃,正常组和COPD组分别给予等体积0.5%羧甲基纤维素钠灌胃,1次/d,持续28 d。末次灌胃后24 h,心脏取血,采用ELISA法检测血清炎症因子[白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]及氧化应激指标[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)]水平,HE染色观察大鼠肺组织病理表现,Western blot法检测大鼠肺组织中Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达情况。结果与正常组比较,COPD组大鼠血清IL-6、IL-8、TNF-α、MDA水平及肺组织中Bax、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达量均显著升高(P均<0.05),血清SOD水平及肺组织中Bcl-2蛋白表达量均显著降低(P均<0.05);HE染色示大鼠小气道管腔明显狭窄,结缔组织增生,支气管管壁增厚,黏液细胞增多,部分可见黏液堵塞气道,肺泡结构紊乱,上皮细胞不同程度皱缩破坏,管腔及周围血管可见中性粒细胞聚集。与COPD组比较,中药各组及乙酰半胱氨酸组血清IL-6、IL-8、TNF-α、MDA水平及肺组织中Bax、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达量均显著降低(P均<0.05),血清SOD水平及肺组织中Bcl-2蛋白表达量均显著升高(P均<0.05);HE染色示气道上皮细胞脱落、炎症细胞浸润、杯状细胞增多以及肺气肿形成等现象均有不同程度减轻。结论宽胸理肺汤合三子养亲汤可以明显改善COPD大鼠的肺组织病理变化,其机制可能与抑制炎症因子、抗氧化应激及抑制细胞凋亡有关。