苦参碱对LPS诱导的阿尔茨海默病小鼠模型学习记忆功能和脑内神经炎症的影响

目的:研究苦参碱对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)模型小鼠学习记忆损伤的治疗作用并探讨其可能的作用机制。方法:ICR小鼠随机分为正常组、模型组、苦参碱高、中、低剂量组和阳性药组。除正常组之外其余各组小鼠侧脑室注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)建立AD小鼠模型,正常组小鼠注射等量生理盐水。之后连续灌胃给药21 d,每天1次,其中苦参碱各给药组高、中、低剂量分别为40,20,10 mg·kg~(-1),阳性药多奈哌齐剂量为5 mg·kg~(-1)。采用新物体识别(novel object recognition,NOR)实验,Y迷宫实验评价各组动物的学习记忆能力;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测各组小鼠脑内海马组织中炎症因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α),白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL~(-1)β)和活性氧(reactive oxygen species,ROS)的含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组小鼠脑内海马区烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶亚基gp91phox,p47phox蛋白的含量。结果:与正常组比较,模型组小鼠的新物体偏爱指数和自发交替反应率明显降低(P 0. 01),海马组织中TNF-α,IL~(-1)β和ROS的含量明显升高(P 0. 01),NADPH氧化酶亚基gp91phox,p47phox蛋白的表达明显升高(P 0. 01)。与模型组比较,苦参碱高、中、低剂量组均可使小鼠的新物体偏爱指数和自发交替反应率明显升高(P 0. 05,P 0. 01),明显改善AD小鼠的学习记忆能力;同时,苦参碱各剂量组可显著降低AD模型小鼠海马组织中TNF-α,IL~(-1)β和ROS的含量(P 0. 05,P 0. 01),并下调NADPH氧化酶亚基gp91phox,p47phox蛋白的表达(P 0. 05,P 0. 01)。结论:苦参碱可缓解LPS诱导的学习记忆功能损伤和脑内神经炎症,这些作用可能是通过抑制NADPH氧化酶亚基gp91phox和p47phox的蛋白表达来发挥的。     

清燥救肺汤对荷Lewis小鼠肺癌细胞糖酵解关键限速酶HK2，PFK2，PKM2的影响

目的:观察清燥救肺汤对荷Lewis小鼠肺癌细胞糖酵解关键限速酶己糖激酶2(hexokinase 2,HK2),6-磷酸果糖激酶2(phosphofructokinase,PFK2),M2型丙酮酸激酶(pyruvate kinase isoform M2,PKM2)的表达及葡萄糖含量的影响。方法:雄性C57BL/6J小鼠50只,随机分为模型组,环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)组,清燥救肺汤高、中、低剂量组,每组10只。所有小鼠右腋下注射Lewis肺癌细胞建立肺癌荷瘤模型,清燥救肺汤高、中、低剂量组剂量分别为11,5.5,2.75 g·kg^-1·d^-1,造模前2周开始灌胃给药,CTX组以50 mg·kg^-1·(2 d)-1腹腔注射给药,模型组以等体积生理盐水灌胃给药,接种后继续给药2周,处死小鼠取瘤组织;氧化酶法检测葡萄糖含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测HK2 mRNA表达;蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测PFK2蛋白表达;酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunesorbent assay,ELISA)检测PKM2活性。结果:与模型组比较,清燥救肺汤高、中、低剂量组肺癌细胞HK2 mRNA表达及PKM2活性显著降低,葡萄糖含量显著升高(P<0.01);与模型组比较,清燥救肺汤高、中剂量组肺癌细胞PFK2蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:清燥救肺汤可有效抑制荷Lewis肺癌细胞增殖,降低肺癌细胞葡萄糖摄取速率,糖酵解关键限速酶HK2,PFK2,PKM2可能是其药效作用靶点。     

清燥救肺汤对肺癌JAK2/STAT3信号通路及其下游凋亡相关蛋白表达的影响

目的:观察清燥救肺汤对肺癌细胞凋亡和Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导和转录活化因子3(STAT3)信号通路及其下游凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax),细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)表达的影响。方法:雄性C57BL/6J小鼠50只,随机分为环磷酰胺(CTX)组,模型组,清燥救肺汤高、中、低剂量组,共5组,每组10只。在小鼠右腋下注射Lewis肺癌细胞建立肺癌荷瘤模型,清燥救肺汤高、中、低剂量组分别以清燥救肺汤11,5.5,2.75 g·kg^-1·d^-1,造模前2周开始灌胃给药,CTX组以CTX 50 mg·kg^-1·(2 d)-1腹腔注射给药,模型组以等体积的生理盐水灌胃给药,接种后继续给药,2周后处死各组小鼠并取瘤组织;免疫组化法(IHC)检测肺癌组织JAK2蛋白磷酸化水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测STAT3,Bax,Cyclin D1的表达;透射电镜(TEM)观察肺癌细胞的凋亡情况。结果:与模型组比较,清燥救肺汤高、中剂量组,CTX组肺癌细胞JAK2,STAT3蛋白磷酸化水平明显降低,Bax蛋白表达明显升高,Cyclin D1蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。透射电镜结果显示,与模型组比较,清燥救肺汤高、中、低剂量组和CTX组均出现显著的凋亡现象。结论:清燥救肺汤能明显促进肺癌细胞凋亡,其机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路,上调其下游Bax蛋白表达,下调其下游Cyclin D1蛋白表达有关。     

清燥救肺汤对荷Lewis小鼠肺癌细胞增殖相关糖酵解乳酸生成的影响

目的:观察清燥救肺汤对荷Lweis小鼠肺癌细胞增殖相关糖酵解乳酸生成的影响,探讨其作用机制。方法:50只雄性C57BL/6J小鼠,随机分为模型组,化疗组,清燥救肺汤高、中、低剂量组,每组10只。右腋下注射Lewis肺癌细胞建立肺癌荷瘤模型,清燥救肺汤高、中、低剂量组以11,5.5,2.75 g·kg~(-1)·d~(-1)造模前2周灌胃给药,化疗组以50 mg·kg~(-1)·(2d)~(-1)腹腔注射给药,模型组以等体积生理盐水灌胃给药,接种后继续给药2周后处死各组小鼠并取瘤称重,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测低氧诱导因子-α亚基(hypoxia inducible factor,HIF-)α),原癌基因蛋白(cancer-myc,C-myc)表达,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测乳酸水平以及乳酸脱氢酶-A(lactate dehydrogenase-A,LDH-A)活性。结果:与模型组比较,清燥救肺汤高、中、低剂量组及化疗组瘤质量,乳酸含量显著降低(P0.01);清燥救肺汤高、中、低剂量组及化疗组中肺癌细胞C-myc蛋白表达,LDH-A活性明显降低(P0.05,P0.01);清燥救肺汤高、中剂量组及化疗组HIF-1α蛋白表达显著降低(P0.01)。结论:清燥救肺汤可通过抑制HIF-1α蛋白表达,导致C-myc蛋白表达下调,从而降低LDH-A活性,减少肺癌细胞糖酵解乳酸的生成,从而达到抑制荷Lewis小鼠肺癌细胞增殖的功效。     

D159687减轻神经元氧化应激损伤的作用机制研究

目的研究D159687对过氧化氢(H_2O_2)所致的小鼠海马神经元HT22细胞损伤的保护作用并探讨其作用机制。方法实验分为正常对照组、模型组、D159687 0.5μmol/L组、D159687 1μmol/L组、D159687 2μmol/L组、D159687 4μmol/L组。将HT22细胞株接种于96孔板,对照组采用10%胎牛血清的DMEM高糖培养基培养,其他组加入不同浓度的D159687进行干预培养,后经H_2O_2损伤。CCK-8法测定各组细胞存活率,Western blot法检测Caspase-3和NADPH氧化酶亚基gp91phox、p47phox表达情况,TUNEL法检测细胞凋亡情况,并测定各组细活性氧(ROS)水平、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果模型组细胞存活率、SOD活性均显著低于正常对照组(P均0.05),ROS表达水平、MDA含量及Caspase-3、p47phox、gp91phox蛋白表达水平均显著高于正常对照组(P均0.05);D159687 0.5μmol/L组、D159687 1μmol/L组、D159687 2μmol/L组、D159687 4μmol/L组细胞存活率、SOD活性显著高于模型组(P均0.05),ROS表达水平、MDA含量及Caspase-3、p47phox、gp91phox蛋白表达水平均显著低于模型组(P均0.05)。结论在0.5～4μmol/L浓度范围内,D159687浓度依赖性地拮抗H_2O_2所致HT22细胞损伤,同时抑制HT22细胞凋亡,这种作用可能与其抑制NADPH氧化酶关键亚基gp91phox和p47phox蛋白表达有关。     

清燥救肺汤对Lewis肺癌小鼠EGFR,NF-κB,ICAM-1表达及JAK1,STAT1蛋白磷酸化的影响

目的:观察清燥救肺汤对荷Lewis小鼠肺癌瘤重、瘤指数、检测核转录因子-κB(NF-κB),细胞间黏附分子-1(ICAM-1),两面神激酶1(JAK1),表皮生长因子(EGFR)表达及信号传导及转录激活因子1(STAT1)蛋白磷酸化的影响。方法:雄性C57BL/6J小鼠50只,随机分为模型组,化疗[50 mg·kg~(-1)·(2 d)-1]组,清燥救肺汤高、中、低剂量(15.2,7.6,3.8 g·kg~(-1)·d~(-1))组,每组10只。右腋下注射细胞建立荷Lewis肺癌小鼠模型,清燥救肺汤组以相应剂量造模前2周开始灌胃给药,环磷酰胺(CTX)组以CTX相应剂量腹腔注射给药,隔日1次,模型组以等体积生理盐水灌胃给药,2周后处死各组小鼠并取瘤组织,称定质量计算瘤指数,免疫组化法检测NF-κB蛋白表达,实时荧光定量PCR法检测ICAM-1 mRNA表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测EGFR,p JAK1及p STAT1蛋白表达。结果:与模型组比较,清燥救肺汤高、中剂量组及CTX组瘤重、瘤指数显著降低(P0.01),清燥救肺汤高、中剂量组及CTX组NF-κB蛋白表达,EGFR蛋白表达明显降低(P0.05,P0.01),清燥救肺汤高、中剂量组ICAM-1 mRNA,p JAK1蛋白表达明显降低(P0.05,P0.01),清燥救肺汤高、中、低剂量组p STAT1蛋白磷酸化显著降低(P0.01),高、中剂量组效果优于CTX组(P0.01)。结论:清燥救肺汤能显著抑制荷Lewis小鼠肺癌细胞增殖,其机制可能与降低NF-κB,ICAM-1,p JAK1,EGFR表达及抑制STAT1蛋白磷酸化有关。     

麦门冬饮子对糖尿病模型小鼠认知功能障碍的影响及机制研究

目的:观察麦门冬饮子对糖尿病模型小鼠认知功能障碍的影响,并探讨其机制。方法:高脂高糖饲料联合腹腔注射STZ,诱导C57BL/6J小鼠制备糖尿病认知障碍模型,以不同剂量(5.06、10.13、20.25 g/kg)的麦门冬饮子水煎剂对小鼠进行灌胃,于给药后检测各试验小鼠空腹血糖(FPG),行为学测试水迷宫评估小鼠认知功能影响,ELISA法检测小鼠血清中糖基化血红蛋白(GHbA1c)、乙酰胆碱酯酶(AChE)、胆碱乙酰转移酶(ChAT)及海马组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平,HE染色观察海马组织病理改变,Western blot法检测小鼠脑组织中B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved-Caspase-3)、NADPH氧化酶亚基p67phox(p67phox)、尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(gp91phox)蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组小鼠的体重、平台穿越次数、血清ChAT水平、海马组织中SOD活性明显降低(P<0.05或P<0.01)、Bcl-2蛋白的表达明显下调(P<0.05或P<0.01);且小鼠空腹血糖、逃避潜伏期及探索距离、血清GHbA1c、AChE水平、海马组织中MDA含量明显升高(P<0.05或P<0.01)、p67phox、gp91phox、Cleaved-Caspase-3蛋白的表达明显上调(P<0.05或P<0.01)。与模型对照组相比,麦门冬饮子不同剂量组均能使小鼠的体重、平台穿越次数、血清ChAT水平、海马组织中SOD活性明显升高(P<0.05或P<0.01)、Bcl-2蛋白的表达显著上调(P<0.05或P<0.01);且空腹血糖、小鼠逃避潜伏期及探索距离、血清GHbA1c、AChE水平、海马组织中MDA含量明显下降(P<0.05或P<0.01)、p67phox、gp91phox、Cleaved-Caspase-3蛋白的表达显著下调(P<0.05或P<0.01)。结论:麦门冬饮子可以改善糖尿病认知功能障碍,其机制可能与抗氧化应激反应及调节细胞凋亡相关。     

清燥救肺汤对荷Lewis小鼠肺癌细胞中ACO1,ACL,FFA,CHO的影响

目的：观察清燥救肺汤对荷Lewis小鼠肺癌细胞顺乌头酸酶(Aconitase closing odor,ACO1)、ATP柠檬酸裂解酶(ATP citrate lyase,ACL)、游离脂肪酸(Free fatty acids,FFA)、胆固醇(Cholesterol,CHO)含量的影响。方法：C57BL/6J雄性小鼠,随机分为5组,分别为清燥救肺汤高剂量组、中剂量组、低剂量组,模型组,环磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX)组,每组10只,共50只。于小鼠右腋下注射Lewis肺癌细胞建立肺癌荷瘤模型,清燥救肺汤低、中、高剂量组剂量分别为2.75 ,5.5,11g.kg_^-1.d_^-1,先灌胃给药2周然后造模,CTX组以50 mg.kg_^-1.(2d)_^-1进行腹腔注射给药,模型组用等体积的生理盐水进行灌胃给药,接种后继续灌胃给药2周,处死小鼠取瘤组织。酶联免疫吸附测定(Enzyme-linkedimmunesorbent assay,ELISA)检测FFA、CHO的含量；实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测ACL mRNA的表达；蛋白质免疫印记法(Western blot)检测ACO1蛋白表达。结果：与模型组比较,CTX组及清燥救肺汤高、中、低剂量组中肺癌细胞ACO1蛋白表达,ACL mRNA的表达及FFA、CHO含量显著降低(P＜0.05,P＜0.01)。结论：清燥救肺汤可有效抑制荷Lewis肺癌细胞增殖,减少肺癌细胞能量生成,ACO1、ACL、FFA、CHO可能是其药效作用靶点。     

清燥救肺汤对Lewis肺癌荷瘤小鼠肺癌组织氧化磷酸化能量代谢的影响

目的 探讨清燥救肺汤治疗肺癌的可能作用机制.方法 50只C57BL/6J小鼠随机分为模型组,环磷酰胺(CTX)组,清燥救肺汤高、中、低剂量组,每组10只.各组小鼠分别接种Lewis肺癌细胞建立肺癌荷瘤小鼠模型.24h后,模型组每日给予0.2ml生理盐水灌胃,每日2次;CTX组隔日1次以50mg/kg CTX腹腔注射;清...     

山萘酚和芒柄花黄素对缺氧心肌细胞内NADPH氧化酶相关亚基的调控作用

目的:分析中药单体山萘酚和芒柄花黄素对缺氧条件下H9c2心肌细胞内活性氧水平及NADPH氧化酶亚基NOX4、p67~(phox)、p47~(phox)表达量的影响。方法:采用缺氧造模的方法对H9c2心肌细胞进行造模,通过倒置荧光显微镜观察DCFH-DA染色的H9c2心肌细胞的荧光强弱;Real time PCR和Western blot检测NOX4、p67~(phox)、p47~(phox)表达量变化。结果:各组细胞内绿色荧光有显著变化,即对照组的细胞内荧光微弱,模型组荧光强度显著增强,各给药组荧光强度有所减弱,作用与阳性药组相似;山萘酚能够有效降低NOX4、p67~(phox)、p47~(phox) mRNA的表达量,芒柄花黄素能够有效降低NOX4、p47~(phox) mRNA的表达量;山萘酚能够有效降低NOX4、p67~(phox)、p47~(phox)蛋白的表达量,芒柄花黄素能够有效降低NOX4、p67~(phox)蛋白的表达量。结论:抑制NOX4、p67~(phox)、p47~(phox)的表达量可能是山萘酚和芒柄花黄素发挥抗氧化作用的重要环节,而对于NADPH氧化酶的影响反映了H9c2心肌细胞内活性氧的水平。     

镇肝熄风汤对帕金森病大鼠易激惹程度和结膜充血及NQO-1,TH的影响

目的:观察镇肝熄风汤对帕金森病肝大鼠易激惹程度和结膜充血的影响及可能机制。方法:将105只Wistar大鼠随机分为正常组,假手术组,模型组,司来吉兰组(0.9 mg·kg~(-1)·d~(-1)),镇肝熄风汤低、中、高剂量组(8,16,32 g·kg~(-1)·d~(-1)),每组15只。采用附子汤ig联合6-羟基多巴胺单侧损毁黑质法复制帕金森病肝阳上亢型病证结合大鼠模型,灌胃4周。蛋白质免疫印迹(Western blot)及实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测酪氨酸羟化酶(TH)和醌氧化还原酶-1(NQO-1)蛋白和mRNA表达。结果:与假手术组比较,帕金森病肝阳上亢证模型大鼠易激惹程度和结膜充血显著升高,中脑组织NQO-1蛋白和mRNA表达增加,而TH蛋白表达明显降低(P0.05)。与帕金森病肝阳上亢证模型组比较,镇肝熄风汤组大鼠易激惹程度和结膜充血显著降低,TH蛋白表达显著增加,NQO-1蛋白和mRNA表达均明显增加(P0.05),而司来吉兰组大鼠易激惹程度、结膜充血和中脑组织NQO-1蛋白表达无显著性差异。结论:镇肝熄风汤能显著改善帕金森病肝阳上亢证模型大鼠易激惹程度和结膜充血,其机制可能与上调大鼠中脑组织TH和NQO-1分子表达有关。     

全真一气汤对COPD模型小鼠Nrf2通路及对炎性细胞因子和肺组织超微结构的影响

目的:研究全真一气汤对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型小鼠炎性细胞因子及肺组织超微结构的影响。方法:实验小鼠分为正常组、模型组、全真一气汤低、高剂量(4.3,8.6 g·kg-1)组、氨茶碱(2.3 mg·kg-1)组,采用熏香烟联合气道内细菌脂多糖(LPS)滴入法制作COPD稳定期小鼠模型,熏烟于16周结束。观察小鼠的一般情况,检测小鼠肺功能,计算肺泡灌洗液炎性细胞总数,肺组织白细胞介素-6(IL-6)和趋化因子(KC)表达量,免疫组化法检测肺组织细胞外调节蛋白激酶(ERK),核转录因子NF-E2相关因子(Nrf2),血红素加氧酶(HO-1)蛋白表达,透射电镜观察肺组织超微结构改变。结果:模型组小鼠一般状态较正常组差,全真一气汤低剂量组及高剂量组小鼠状态较模型组好转。与模型组比较,全真一气汤可降低COPD模型小鼠气道阻力(P0.05),降低肺静态顺应性(P0.05)和功能残气量;降低肺泡炎症细胞数(P0.05),降低炎症介质IL-6和KC表达量(P0.05),降低ERK和Nrf2蛋白表达量,增高HO-1蛋白表达量,肺组织电镜结果显示全真一气汤能减轻肺组织超微损害。结论:全真一气汤可改善COPD模型小鼠一般状态,减少炎症细胞因子表达,保护肺功能,减轻肺组织超微结构损害,能降低ERK和Nrf2蛋白表达量,上调HO-1蛋白表达,起到抗炎作用。     

苓桂术甘汤对瘦素基因缺陷ob/ob小鼠肝FXR/FGF15/SHP途径的影响

目的:观察苓桂术甘汤对瘦素基因缺陷小鼠肝脏的影响,探讨其保护作用机制是否与其干预肝法尼醇X受体(FXR)/成纤维细胞生长因子15(FGF15)/小异源二聚体伴侣(SHP)途径有关。方法:将雌性C57小鼠和ob/ob小鼠随机分为正常组,模型组,苓桂术甘汤高、低剂量组(23.1,7.7 g·kg-1),阳性药组(立普妥,0.002 6 g·kg-1),每组各8只。治疗4周后处死小鼠,取小鼠肝脏组织,称量小鼠体质量和肝脏质量,计算肝脏指数;苏木素-伊红(HE)染色和油红O染色观察肝脏组织形态和脂质沉积情况,免疫荧光染色检测肝脏组织法尼醇X受体(farnesoid X receptor,FXR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测成纤维细胞生长因子15(FGF15)和酪氨酸磷酸酶(SHP)蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组体质量和肝脏指数显著增高(P0.01),肝脏脂质沉积严重,肝脏组织FXR,FGF15和SHP蛋白表达下调(P0.01);与模型组比较,苓桂术甘汤组小鼠体质量和肝脏指数降低(P0.05,P0.01),肝脏脂质沉积减少,上调肝脏组织FXR,FGF15和SHP蛋白表达(P0.05,P0.01)。结论:苓桂术甘汤能够抗瘦素基因缺陷模型小鼠的肝损伤,其作用机制可能与其干预肝FXR-FGF15-SHP途径有关。     

脾虚证功能性消化不良大鼠胃窦平滑肌CNP-NPRB-cGMP通路改变及四君子汤的干预作用

目的:探讨脾虚证功能性消化不良的发病及四君子汤干预的作用机制。方法:将52只SD大鼠随机分为空白组、模型组、四君子汤组和莫沙必利组,采用碘乙酰胺灌服+小平台站立+饥饱失常法塑造脾虚证功能性消化不良动物模型,随后给予四君子汤6.3 g·kg~(-1)和莫沙必利0.45 mg·kg-1灌胃,每日灌胃给药1次,共14 d,检测大鼠胃排空率,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清C型钠尿肽(CNP)及胃窦平滑肌组织环磷酸鸟苷(cGMP)含量,蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测胃平滑肌B型钠尿肽受体(NPRB)蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠体重、胃排空率明显下降(P0.05,P0.01),血清CNP含量,平滑肌NPRB蛋白的表达和c GMP含量升高(P0.05,P0.01);与模型组比较,四君子汤和莫沙必利干预后大鼠胃排空率升高(P0.05),血清CNP含量、平滑肌NPRB蛋白的表达量和c GMP含量降低(P0.05,P0.01)。结论:脾虚证功能性消化不良大鼠存在CNP-NPRB-c GMP信号通路改变,四君子汤可能通过调节该信号通路促进胃肠动力。     

龙胆泻肝汤对PCOS模型大鼠的影响

目的:研究龙胆泻肝汤对多囊卵巢综合征(PCOS)模型大鼠药效观察及机制,为龙胆泻肝汤临床PCOS的应用提供初步实验依据。方法:将SD大鼠50只,随机分为2组,即正常组10只、模型制备组40只,采用胰岛素(INS)联合人绒毛膜促性腺激素(HCG)法复制大鼠PCOS模型,造模成功的大鼠分为模型组、达英-35(0.21 g·kg-1)及龙胆泻肝汤高、低剂量组(29.6,7.4 g·kg-1),除正常组外,其余各组连续灌胃给药15 d;动物处理后测量卵巢质量及体积大小,检测各组大鼠血清中促黄体生成素(LH)/卵泡刺激素(FSH),睾酮(T),空腹血糖,空腹胰岛素(INS)激素水平及炎症因子白细胞介素-2(IL-2),IL-4,IL-6,IL-10水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)分析各组卵巢组织中JAK2,STAT3,p-STAT3和IL-6蛋白的表达量。结果:与正常组比较,模型组卵巢质量及体积明显升高,血清LH/FSH,T,空腹血糖及INS均明显升高,IL-2,IL-6,IL-10水平明显升高,JAK2,STAT3和IL-6蛋白的表达量明显升高(P0.05);与模型组比较,龙胆泻肝汤高、低剂量组明显降低卵巢质量及体积,血清LH/FSH,T,空腹血糖及INS,IL-2,IL-6,IL-10水平,升高JAK2,STAT3蛋白的表达量,降低p-STAT3和IL-6蛋白的表达量(P0.05)。结论:龙胆泻肝汤对PCOS大鼠具有明显疗效,主要通过降低激素水平和抑制炎症反应;且其机制可能与JAK2/STAT3通路相关。     

阳和化岩汤对HER-2高表达型乳腺癌细胞PI3K/Akt通路HER-2,PI3K,p-Akt表达的机制

目的:观察阳和化岩汤与磷脂酰肌醇-3羟基激酶(PI3K)抑制剂LY294002对乳腺癌细胞株SK-BR-3[人表皮生长因子受体-2(HER-2)高表达型]PI3K/蛋白激酶B(Akt)信号通路中HER-2,PI3K,磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)表达的影响,研究阳和化岩汤的干预机制。方法:制备阳和化岩汤肠吸收液,将乳腺癌细胞株SK-BR-3分为空白组,阳和化岩汤组,LY294002组,LY294002+阳和化岩汤组,阳和化岩汤(125 g·L-1),LY294002 (0. 05 g·L-1),阳和化岩汤+LY294002 (阳和化岩汤125 g·L-1,LY294002 0. 05 g·L-1),用药干预24 h后通过免疫组化、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测HER-2,PI3K,p-Akt蛋白表达,通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测HER-2,PI3K,p-Akt mRNA表达。结果:与空白组比较,LY294002组,LY294002+阳和化岩汤组均能抑制乳腺癌细胞株HER-2,PI3K,p-Akt蛋白及mRNA表达(P 0. 05);阳和化岩汤组能抑制乳腺癌细胞株HER-2,p-Akt蛋白及mRNA表达(P 0. 05),但对PI3K的抑制作用不明显;联用LY294002较单用LY294002具有进一步抑制PI3K表达的作用(P 0. 05)。与阳和化岩汤组,LY294002组比较,LY294002+阳和化岩汤组能够明显抑制HER-2,PI3K,p-Akt蛋白及mRNA表达(P 0. 05)。结论:阳和化岩汤能够抑制乳腺癌脉管生成和侵袭,主要作用机制为通过干预PI3K/Akt通路,降低通路中HER-2,PI3K,p-Akt表达。