恩诺沙星对小鼠肝微粒体细胞色素P450影响的研究

恩诺沙星(errofloxacin,EF)是动物专用药,有抗菌谱广、杀菌力强、速效等特点,广泛应用于兽医临床[1].细胞色素 P450(P450)是最重要的肝微粒体混合功能氧化酶,对阐明药物代谢及相互作用和指导临床用药有重要意义.已有大量研究报道,EF 可抑制鸡、猪、鱼等 P450 [2-3],而对小鼠 P450 研究较少,且 EF 对其 CYP2B6、2C9 的影响尚未见报道.本文以小鼠为研究对象,观察 EF 对小鼠 CYP2B6、2C9 等 P450 酶系的影响,从而揭示药物与机体的相互作用,同时也为临床合理用药提供理论参考.     

五味子乙素对小鼠肝细胞微粒体细胞色素P-450的诱导作用

五味子乙素系从中药五味子分离出的成分之一,有抗肝损伤和解毒作用,同时亦引起小鼠肝脏重量增大。经进一步研究,发现五味子乙素对正常小鼠肝脏每克组织中水分、蛋白质、RNA、糖原及总脂含量均无明显影响,但在整个肝脏中上述成分含量均显著增加。每克肝组织中DNA含量稍降低,整个肝脏中DNA含量则无明显变化。对部分切除肝脏的小鼠再生肝,五味子乙素能明显引起整个肝脏中蛋白质,PLNA和DNA含量以及细胞核分裂数增加。此外,五味子乙素能显著促进~(14)C-苯丙氨酸掺入肝脏蛋白质,并使肝细胞微粒体细胞色素P-450及蛋白质含量显著增加。以上结果表明,五味子乙素对药酶有诱导作用,其引起的肝脏增大主要系肝实质细胞体积增大,同时伴有肝细胞增生。五味子乙素引起的肝脏增大似非病理性损害的表现,而是由于诱导药酶同时出现肝细胞肥大的表现。     

五味子乙素对小鼠肝细胞微粒体细胞色素P-450的诱导作用

五味子乙素系从中药五味子分离出的成分之一,有抗肝损伤和解毒作用,同时亦引起小鼠肝脏重量增大。经进一步研究,发现五味子乙素对正常小鼠肝脏每克组织中水分、蛋白质、RNA、糖原及总脂含量均无明显影响,但在整个肝脏中上述成分含量均显著增加。每克肝组织中DNA含量稍降低,整个肝脏中DNA含量则无明显变化。对部分切除肝脏的小鼠再生肝,五味子乙素能明显引起整个肝脏中蛋白质,PLNA和DNA含量以及细胞核分裂数增加。此外,五味子乙素能显著促进¹⁴C-苯丙氨酸掺入肝脏蛋白质,并使肝细胞微粒体细胞色素P-450及蛋白质含量显著增加。以上结果表明,五味子乙素对药酶有诱导作用,其引起的肝脏增大主要系肝实质细胞体积增大,同时伴有肝细胞增生。五味子乙素引起的肝脏增大似非病理性损害的表现,而是由于诱导药酶同时出现肝细胞肥大的表现。     

葛根素对小鼠和大鼠肝微粒体细胞色素P450的影响

葛根素(puerarin)是豆科植物葛根的主要有效成分,具有扩血管、抗血小板、降血压、降血糖、改善微循环等作用,广泛用于心脑血管疾病的防治[1].因联合用药日益普遍,使药物间的相互作用倍受重视.肝微粒体细胞色素P450(cytochrome P450, CYP)是参与药物代谢的重要酶系,药物对CYP活性的影响是药物间相互作用的重要机制之一.本研究探讨了葛根素腹腔注射对小鼠和大鼠肝微粒体CYP活性的影响.     

灯盏细辛注射液对小鼠肝微粒体细胞色素P450含量的影响

目的:研究灯盏细辛注射液对小鼠肝微粒体细胞色素P450含量的影响。方法:小鼠分为空白对照组、阳性对照组(苯巴比妥钠80mg/kg,i.p.,共7d)、灯盏细辛注射液正常剂量组、高剂量组(10、30mg/kg,i.p.,共14d)。用紫外分光光度法测定细胞色素P450及其同工酶的活性。结果:灯盏细辛注射液两剂量组小鼠肝微粒体的蛋白含量和细胞色素P450含量较空白对照组增高,对肝重指数基本无影响;可抑制红霉素-N-脱甲基酶(ERD)的活性(P<0.01),而对氨基比林-N-脱甲基酶(AMD)基本无影响(P>0.05);苯巴比妥钠组肝重指数、蛋白含量和细胞色素P450含量与其他各组比较均升高(P<0.05),对氨基比林-N-脱甲基酶、红霉素-N-脱甲基酶活性均有诱导作用(P<0.01)。结论:灯盏细辛注射液对小鼠肝微粒体蛋白、细胞色素P450含量有一定影响,对CYP3A可能有抑制作用,对氨基比林-N-脱甲基酶活性基本无影响。     

细胞色素P450诱导剂对大鼠肝微粒体内HP450的影响

组胺受体可分为Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３３型,常用［３Ｈ］新安替根标记Ｈ１受体。肝中富含新安替根结合蛋白［１］,但它不是Ｈ１受体［２］,氨基酸序列分析表明其与ＣＹＰ２Ｄ亚家族成员相似,尤与ＣＹＰ２Ｄ１极相似,且可被ＣＹＰ２Ｄ１抗体识别,它可能是ＣＹＰ２Ｄ亚家族...     

复方丹参滴丸对大鼠肝微粒体细胞色素P450含量的影响

目的探讨复方丹参滴丸对大鼠肝微粒体细胞色素P450含量的影响。方法利用细胞色素P450在铁蛋白的铁原子被还原与一氧化碳形成复合物时出现一特异性吸收峰,在波长大约450 nm处呈现最大吸收,450~490 nm波长的消光系数经精确测定为91 nm-1cm-1,可定量测定细胞色素P450。结果复方丹参滴丸能诱导大鼠肝微粒体细胞色素P450的活性,且其作用随给药时间的延长而增强。结论复方丹参滴丸虽然作为OCT药品,但在长期服用或配伍应用时亦应当慎重。     

复方丹参滴丸对大鼠肝微粒体细胞色素P450含量的影响

目的探讨复方丹参滴丸对大鼠肝微粒体细胞色素P450含量的影响。方法利用细胞色素P450在铁蛋白的铁原子被还原与一氧化碳形成复合物时出现一特异性吸收峰，在波长大约450nm处呈现最大吸收，450-490nm波长的消光系数经精确测定为91nm^-1cm^-1，可定量测定细胞色素P450。结果复方丹参滴丸能诱导大鼠肝微粒体细胞色素P450的活性，且其作用随给药时间的延长而增强。结论复方丹参滴丸虽然作为OCT药品，但在长期服用或配伍应用时亦应当慎重。     

地高辛联合氨氯地平对大鼠肝微粒体细胞色素P450的影响

目的研究地高辛合用氨氯地平对大鼠肝脏组织药物代谢酶活性的影响,探讨两药合用后对药物代谢的影响,为临床合理用药提供理论依据。方法雄性大鼠40只,随机均分为空白对照、地高辛、氨氯地平、地高辛+氨氯地平组,每天给药1次,7d后处死。分别测定细胞色素P450和细胞色素b5含量,丙氨酸氨基转移酶、红霉素N-脱甲基酶、氨基比林N-脱甲基酶和7-乙氧基香豆素脱烃酶的活性。结果灌胃给药7d,地高辛、氨氯地平及联合用药对红霉素N-脱甲基酶活性均有明显抑制作用,联合用药的抑制作用未见增强。结论地高辛与氨氯地平合用对细胞色素P450酶系抑制作用未见增强。     

复方丹参滴丸对大鼠肝微粒体细胞色素P450含量的影响

目的探讨复方丹参滴丸对大鼠肝微粒体细胞色素P450含量的影响.方法利用细胞色素P450在铁蛋白的铁原子被还原与一氧化碳形成复合物时出现一特异性吸收峰,在波长大约450 nm处呈现最大吸收,450～490 nm波长的消光系数经精确测定为91 nm-1cm-1,可定量测定细胞色素P450.结果复方丹参滴丸能诱导大鼠肝微粒体细胞色素P450的活性,且其作用随给药时间的延长而增强.结论复方丹参滴丸虽然作为OCT药品,但在长期服用或配伍应用时亦应当慎重.     

甘草水煎液对大鼠肝微粒体细胞色素P450酶活性的影响

目的：观察甘草水煎液对大鼠肝细胞色素P450酶活性的影响。方法：SD大鼠随机分为4组,分别为空白对照组（给予生理盐水）、酶诱导剂组（给予苯巴比妥）、酶抑制剂组（给予西咪替丁）及甘草水煎液组（给予甘草水煎液）,各组动物连续灌胃给药14 d,第15天腹腔注射探针药物非那西丁,不同时间点采集血样后,HPLC法测定血浆中非那西丁浓度,并估算其药代动力学参数。结果：生理盐水组、苯巴比妥组、西咪替丁组及甘草水煎液组非那西丁的t1/2分别为（104±10）、（178±15）、（86±9）、（90±9）min。结论：甘草水煎液对大鼠肝药酶P450具有一定的诱导作用。     

大鼠肝微粒体细胞色素P450酶系检测方法学研究

目的 :建立大鼠肝微粒体蛋白含量以及肝微粒体细胞色素P4 5 0酶系含量与活性测定的紫外和荧光分光光度方法。方法 :应用差速离心法提取大鼠肝微粒体 ,Lowery法测定肝微粒体蛋白浓度 ,应用紫外和荧光分光光度法测定肝微粒体细胞色素P4 5 0酶系含量及活性。结果 :牛血清白蛋白标准曲线的线性范围为 2 5～ 2 5 0mg·L-1,最低检测限为2 5mg·L-1,相关系数r为 0 .9975 ;紫外分光光度法测定细胞色素P4 5 0和细胞色素b5含量及NADPH CytC还原酶活性的结果显示方法灵敏 ;测定氨基比林N 脱甲基酶、红霉素N 脱甲基酶活性的甲醛标准曲线 ,线性范围为 0 .0 5～ 0 .5mmol·L-1,最低检测限为 0 .0 5mmol·L-1,相关系数r为 0 .9988;测定 7 乙氧基香豆素脱烃酶活性的resorufin标准曲线线性范围为 1～ 8μmol·L-1,最低检测限为 1μmol·L-1,相关系数r为 0 .9998。结论 :紫外和荧光分光光度方法测定大鼠肝微粒体细胞色素P4 5 0酶系中 6种酶的含量及活性的灵敏可靠 ,重复性较好。     

卤酚化合物LM49对大鼠肝微粒体细胞色素P450的影响

目的研究LM49对大鼠肝微粒体蛋白及细胞色素P450含量的影响。方法将大鼠分成空白对照组、溶剂对照组、阳性对照组(苯巴比妥组、地塞米松组、β-萘黄酮组)、LM49低、中、高剂量组。给药后采用超速离心法制备大鼠肝微粒体;BCA法测定大鼠肝微粒体蛋白浓度;Omura and Sato法测定大鼠肝微粒体细胞色素P450的含量。结果 给予不同剂量的LM49后,大鼠肝微粒体的蛋白及细胞色素P450含量均明显降低。低、中、高剂量组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 LM49对大鼠肝微粒体细胞色素P450具有一定的抑制作用,可能引起肝药酶对某些药物代谢的改变。     

灯盏花素注射液对大鼠体外肝微粒体细胞色素P450酶活性的影响

摘 要 目的:研究灯盏花素注射液对大鼠肝微粒体CYP1A2、CYP2C9、CYP2D6、CYP2E1和CYP3A1/2 五个亚型酶活性的影响。方法: 采用大鼠肝微粒体体外孵育法,选用非那西丁（CYP1A2）、甲苯磺丁脲（CYP2C9）、右美沙芬（CYP2D6）、氯唑沙宗（CYP2E1）和睾酮（CYP3A1/2）作为5个亚型酶的探针药物,孵育系统中加入不同浓度的灯盏花素注射液,用HPLC法测定5个亚型酶探针药物代谢产物的生成量,比较空白对照组与不同浓度灯盏花素注射液给药组探针药物的活性,反映灯盏花素注射液对5个亚型酶活性的影响。结果:大鼠肝微粒体体外孵育系统中,灯盏花素注射液对大鼠CYP3A1/2的IC₅₀为29.40μg·ml^-1,K_i为37.78 μg·ml^-1;对CYP1A2、CYP2C9、CYP2D6和CYP2E1的IC₅₀＞200 μg·ml^-1。结论:灯盏花素注射液对大鼠体外肝微粒体CYP3A1/2有弱的抑制作用,对CYP1A2、CYP2C9、CYP2D6和CYP2E1活性无明显影响。     

淫羊藿苷对不同月龄大鼠肝微粒体细胞色素P450的影响

目的 揭示淫羊藿苷(Ica)对大鼠肝微粒体细胞色素P450的含量及部分亚型的影响,并比较月龄的差异.方法 ig给予6月龄和18月龄的♂SD大鼠Ica( 60 mg· kg -1),4周后取肝脏,用钙沉淀法提取肝微粒体,BCA法测定微粒体蛋白浓度;用一氧化碳还原差示光谱法测定CYP450的含量;用ELISA法测定CYP1 A1、CYPb5的含量;用比色法测定苯胺羟化酶(反映CYP2E1活性)和红霉素-N-脱甲基酶(反映CYP3A活性)的活性;用real - time RT - PCR检测CYP1 A1、CYP2A3、CYP2E1、CYP3A1、CYP3A2和CYP4B1 mRNA的表达.结果 60 mg· kg-1 Ica明显增加了CYP450的总酶和CYP1 A1的含量、CYP3A的活性及CYP1 A1、CYP3A1、CYP3A2 mRNA的表达,降低了CYP2E1的活性及其mRNA的表达;但Ica对上述各指标的诱导或抑制作用在大鼠月龄方面差异不明显;Ica对CYPb5的含量及CYP2A3、CYP4B1 mRNA的表达未见明显影响.结论 Ica对大鼠肝微粒体CYP450总酶、CYPI A1和CYP3A具有诱导作用,对CYP2E1具有抑制作用,该作用未见明显月龄差异.     

微粒体细胞色素P-450的多样性及有关问题

在人们生活的周围环境中,至少存在十万种以上的化合物。不少药物及外源性化合物毒性甚大,有的甚至有致突变、致癌和致畸的危险。机体处理这类有害化合物一般的途径为:     

SM-1对人肝微粒体细胞色素P450亚型酶的抑制作用

目的观察SM-1对人肝细胞色素P450酶系统中7种亚型酶活性的影响。方法在体外将一定浓度的底物或SM-1与人肝微粒体孵育30 min,分为对照组(底物)和实验组(底物和SM-1),以非那西丁、安非他酮、紫杉醇、甲苯磺丁脲、奥美拉唑、右美沙芬、睾酮为CYP探针底物,应用HPLC法检测各探针底物代谢量,计算抑制率,评价SM-1对人肝微粒体CYP1A2、2B6、2C8、2C9、2C19、2D6、3A4酶的抑制活性。结果 SM-1对CYP1A2、2B6、2C8、2C9、2C19、2D6、3A4的抑制率分别是0.05%、3.37%、0.08%、2.07%、4.20%、-0.15%和10.84%。结论 SM-1对CYP3A4可能有抑制作用,临床用药时应注意因CYP酶抑制引起的药物相互作用。     

α—常春藤皂甙和无患子皂甙B对小鼠肝微粒体细胞色素P—450的作用

目的：研究α－常春藤皂甙（Ｈｅｄ）和无患子皂甙Ｂ（ＳａｐＢ）对小鼠肝细胞色素Ｐ－４５０的影响与保肝作用的关系，方法：给小鼠ｓｃＨｅｄ，ＳａｐＢ和Ｈｅｄ＋ＳａｐＢ（１：１．５）检测小鼠肝微粒体细胞色素Ｐ－４５０的含量。结果：Ｈｅｄ２０ｍｇ．ｋｇ＾－１，ＳａｐＢ２０ｍｇ．ｋｇ＾－１和Ｈｅｄ＋ＳａｐＢ２０ｍｇ．ｋｇ＾－１使肝细胞色素Ｐ－４５０分别降低了４０％，５５％和５０％，这种抑制作用在３ｄ后基本恢复     

甘草酸二铵对大鼠肝微粒体细胞色素P450酶含量及活性的影响

目的研究甘草酸二铵对大鼠肝微粒体的蛋白含量、CYP450酶总量和CYP2C6、CYP2C11、CYP2D2活性的影响。方法 Wistar大鼠灌胃给予甘草酸二铵[50 mg/(kg·d)],连续7 d,测定其肝微粒体蛋白含量、CYP450蛋白含量以及CYP2C6、CYP2C11和CYP2D2活性。结果与对照组比较,甘草酸二铵给药组大鼠肝微粒体蛋白含量及肝微粒体CYP450含量差异无统计学意义(P>0.05),CYP2C6、CYP2C11酶的活性差异有统计学意义(P<0.05),CYP2D2酶活性差异无统计学意义(P>0.05)。结论甘草酸二铵可以抑制CYP2C6、CYP2C11酶的活性。