细胞色素C的不均一性和抗原性

细胞色素C是从猪牛等动物心肌或从酵母中提取的具有激活细胞呼吸作用的生化药物,在细胞呼吸中起着重要的电子传递作用。早在1886年MacMunn就发现了细胞色素,当时称肌血红素,1925年Kellin再次发现,并正式命名为“细胞色素C”。1941     

体积─排阻色谱法检测细胞色素C中的大分子蛋白

以葡聚糖凝胶G50作填料,用体积—排阻色谱法分离细胞色素C中的大分子蛋白。经豚鼠过敏试验证实,此大分子蛋白具有致敏性,当制品中大分子蛋白的量超过10％时,过敏试验呈阳性反应。此法快速、简便、重现性好,可检测细胞色素C中的致敏性杂质。     

体积─排阻色谱法检测细胞色素C中的大分子蛋白

以葡聚糖凝胶G50作填料,用体积—排阻色谱法分离细胞色素C中的大分子蛋白。经豚鼠过敏试验证实,此大分子蛋白具有致敏性,当制品中大分子蛋白的量超过10％时,过敏试验呈阳性反应。此法快速、简便、重现性好,可检测细胞色素C中的致敏性杂质。     

用重组酵母细胞生产疫苗

一些实验室已成功地用携带由必需的启动子和酵母顺序的终止密码限制的HBsAg基因的质粒转化酵母细胞(酿酒酵母或啤酒酵母)。裂解的酵母细胞经一系列层析分离,得到高度纯化的HBsAg。酵母产生的HBsAg是非糖基化的(约50～75%的血源性HBsAg也是非糖基化的),但它与血源性HBsAg有相同的氨基酸序列。在接种者中,其激发的抗体应答在数量和质量上与血源性HBsAg相同,并对动物和人群提供与血源性HBsAg相同的保护效果。预计由酵母制备的乙型肝炎疫苗很快可在一些国家中获准使用。相反,转化的原     

鸵鸟心脏细胞色素C的制备及性质

目的从鸵鸟心脏中分离提纯细胞色素C(cyt.c)并对其理化性质、活性进行考察。方法在酸性条件下从鸵鸟心脏中提取细胞色素C粗制品后 ,在离子交换色谱柱上进行纯化 ,用HPLC法、IEF法及SDS PAGE法检测所得细胞色素C纯度 ,用SDS PAGE法测定其分子质量 ,用IEF法测定其等电点。用药典方法进行含量测定、活力测定。结果经纯化后所得样品具有等电点均一性 ,达到了高效液相纯及SDS PAGE凝胶电泳纯。测得分子质量为 1 1 6kDa ,等电点为 1 0 1 0。单位重量鸵鸟心的细胞色素C产量为 92～ 1 47mg/kg,鸵鸟细胞色素C的平均活力为 81 5 0 %。结论鸵鸟心的细胞色素C含量丰富 ,用同样的工艺过程 ,单位重量原料的产量高于猪心 ,且有着比猪心细胞色素C更高的活性。     

细胞色素C的多相性和抗原性

<正> 细胞色素C是从猪牛等动物心肌或从酵母中提取的具有激活细胞呼吸的生化制剂,在细胞呼吸中起着主要的电子传递作用。早在1886年Mac Munn就发现了细胞色素,当时称肌血红素,1925年Keilin在英国再次发现,并正式命名为“细胞色素C”,1941年Klas首次应用于临床,至今已有40多年的历史,它的结构、理化性质已逐步搞清。1961年Margoliash等首先搞清马心细胞色素C的结构,次年Matsuba-ra等搞清了人细胞色素C的结构,至今最少有     

静脉注射细胞色素C发生过敏性休克1例

细胞色素C连续用药中发生过敏而致死者已有报告。我们最近遇见1例皮试阴性而在静脉注射后数分钟发生过敏性休克。患者男,30岁。因半年前头部外伤后,经常发生头晕、记亿力减退。曾应用细胞色素C30mm加50％葡萄糖液20ml静脉注射。中断用药7天后,症关未缓解。继用细胞色素C治疗,经皮试阴性     

植物细胞色素P450基因与功能研究进展

细胞色素P450是一种血红素结合蛋白,在生物界广泛存在.自从1958年从小鼠肝脏微粒体中分离到第一个细胞色素P450以来,对细胞色素P450的结构、分子克隆、基因表达机制、功能鉴定及其应用方面的研究取得了重大进展.文章简要总结了植物细胞色素P450基因克隆和功能研究的最新进展.     

细胞色素C致过敏反应1例

细胞色素Ｃ致过敏反应１例龙岩地区第二医院肿瘤科黄云清细胞色素Ｃ能在体内促进组织氧化还原过程，并对细胞呼吸起激活作用，用前皮试阴性用后发生过敏者少见，现将作者治疗的１例介绍如下。患者女，３０岁。患病毒性心肌炎，给予细胞色素Ｃ１５ｍｇ＋５０％Ｇ·Ｓ４０ｍ...     

细胞色素P450 CYP4A的组织和细胞表达特异性

目的确定细胞色素P450 CYP4A在组织和细胞水平表达是否具有特异性。方法采用Western印迹法分析细胞色素P450 CYP4A蛋白在培养的牛肺动脉内皮细胞、平滑肌细胞及牛肾动脉内皮细胞的表达;采用原位杂交法检测细胞色素P450 CYP4A mRNA在大鼠肺支气管内皮和血管内皮细胞的表达;以14C标记的花生四烯酸(AA)作为反应底物,用荧光高效液相色谱法(HPLC)通过检测牛肺动脉内皮细胞催化外源性AA生成20-羟基廿碳四烯酸(20-HETE)的反应,确定肺动脉内皮细胞是否存在细胞色素P450 CYP4A;将肺动脉内皮细胞破碎并用乙酸乙酯萃取,用荧光物质标记萃取物,用荧光HPLC检测内源性20-HETE,从代谢产物水平确定细胞色素P450 CYP4A的功能蛋白质表达。结果①Western印迹法分析结果表明,细胞色素P450 CYP4A蛋白在牛肺动脉内皮细胞和平滑肌细胞中均有表达,在肺动脉内皮细胞中的表达明显高于平滑肌细胞(积分吸光度值分别为10182±279,5249±167);在牛肾动脉内皮细胞中也有表达,但明显低于肺动脉内皮细胞的表达(积分吸光度值分别为12173±171,17863±207)。②原位杂交结果显示,细胞色素P450 CYP4A mRNA可在大鼠肺支气管内皮细胞和大鼠肺血管内皮均有表达。③用HPLC在牛肺动脉内皮细胞中检测到20-HETE,表明细胞色素P450 CYP4A在肺动脉内皮细胞存在。结论细胞色素P450 CYP4A有其特定的组织和细胞分布,在牛和大鼠肺脏动脉内皮细胞有高表达。     

体外胁迫促进青蒿素在黄花蒿培养细胞中合成的研究

在黄花蒿细胞悬浮培养合成青蒿素的过程中添加微生物刺激剂和微生物胸外酶刺激剂,测定刺激剂对青蒿素合成的影响。采用的微生物刺激剂为霉菌ＡＳ３４,３０９和ＡＳ３,３４６、酵母Ｋluyberomyces fragilis及细菌ＡＳ１,３９８的提取物,微生物胸外酶刺激剂为果胶酶、纤维素酶及半纤维素酶。其中酵母Ｋluyberomyces fragilis提取物和果胶酶对青蒿素生物合成具有明显的刺激作用。用酵母Ｋluyberomyces fragilis提取物（２０％）处理黄花蒿培养细胞３天,青蒿素合成量达到每克黄花蒿干细胞３２０μｇ,比未刺激细胞的青蒿素合成量提高３８％;将果胶酶（０.２％）添加到青蒿素合成培养基中处理黄花蒿培养细胞２天以上,青蒿素合成量达到每克黄花蒿干细胞７４０μｇ,比未刺激细胞的青蒿素合成量提高３.０８倍。     

免疫组化检测肾上腺皮质细胞线粒体两种酶的方法探讨及初步应用

肾上腺皮质细胞线粒体细胞色素P-450 11B羟化酶和P-450 SCC旁链裂解酶是肾上腺皮质激素生物合成过程的关键酶,国外用生化方法(高压波相色谱法,电泳法)定量测定。曾有用免疫组化PAP法对牛肾上腺皮质内的这两种酶作了组织染色法测定。至于毒理学研究中常用动物的这两种酶的免疫组化染色法国内外均未见报道。我们用免疫组化ABC法(抗生物素-生物素法)对大鼠、     

猪心中细胞色素C分离提纯的研究

以猪心为原料在pH4条件下提取细胞色素C,以凝胶层析法代替离子交换法纯化细胞色素C更具有优越性。还讨论了提取分离纯化过程中可能影响产品质量的一些因索,并对如何改进工艺过程,提高产率和纯度作了分析。     

细胞色素丙的特性和制剂

细胞色素(Cytochrome)是一类以铁卟啉为辅基的结合蛋白质,主要存在于细胞的线粒体中。一般说,细胞色素的含量与组织活动强度成工比,故在心肌、马类的胸肌、昆虫的(?)肌为最多.细胞色素丙(Cytochrome C)是第一个被提出与提纯的细胞色素,为一红色结合蛋白质,溶于水,易溶于酸性溶液,其分子量为13.000(由于来源不同,分子量也略有差异),含铁0.43％.由于铁卟啉与蛋白质的结合点降了18位组氨酸、及80位     

盐析对细胞色素C纯度的影响

<正> 细胞色素 C 的纯度直接影响其注射液的澄明度,它的主要原因是原料中杂蛋白未能除尽所致。细胞色素 C 是含铁卟啉的结合蛋白质,铁卟啉和蛋白质的比例为1:1,猪心或牛心提取的细胞色素 C 含铁量为0.456％。以往几年,我厂生产的细胞色素 C 精品质量不够稳定,部分精品的含铁量不能达到中国药典1977年版     

天竺葵色素通过激活Caspase-8诱导肺癌细胞凋亡作用研究

目的 探究天竺葵色素诱导肺癌细胞凋亡作用及其作用机制。方法 将肺癌A549和H460细胞分别分为6组：空白对照组、低、中、高3个浓度天竺葵色素实验组(细胞使用15,30和60μmol·L^-1天竺葵色素的完全培养基进行培养,各组均培养24 h)、Z-IETD-FMK实验组(细胞使用20μmol·L^-1Z-IETD-FMK的完全培养基培养2 h)和天竺葵色素联合Z-IETD-FMK实验组(细胞使用20μmol·L^-1Z-IETD-FMK的完全培养基培养2 h后,给予60μmol·L^-1天竺葵色素培养24 h)。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞存活率;用流式细胞仪检测细胞凋亡水平;用蛋白质印迹法检测切割型胱天蛋白酶8(Caspase-8)蛋白的表达水平。结果 在A549细胞中,空白对照组、低、中、高3个实验组的细胞存活率分别为(100.00±9.87)%,(86.09±5.41)%,(55.45±6.36)%和(33.64±2.63)%;在H460细胞中,空白对照组、低、中、高3个实验组的细胞...     

细胞色素C的离子交换层析分离

<正> 第一个哺乳动物的粗纯态细胞色素C0.34％Fe),于三十年代中期先后为Theorell和Keilin、Hartree所制得。1945年Keilin、Hartree又对其早先的制备方法进行了改良,用0.145NTCA溶液提取,于硫酸铵浓溶液中     

细胞色素C粗品质量标准探讨

以本质量标准为依据，收购细胞色素C粗品为原料，生产的细胞色素C注射液，一次合格率可达99．5％。     

细胞色素C在脑和冠状动脉血液循环障碍病人综合治疗中的应用

作者对56例心脑综合征患者在常规治疗基础上用0.25％细胞色素C溶液4ml肌注,每日2次,共10～14天。20例作为对照组。两组病人年龄在45～60岁。患者具不同缺血类型的急性脑循环障碍合并心律紊乱,以及冠脉循环障碍。结果表明,用细胞色素C治疗后3～5天,心率和心律转为正常,心电图Q波和倒置     

细胞色素C、线粒体与凋亡

线粒体细胞色素C释放在细胞凋亡过程中起重要作用。细胞色素C释放到胞质后可引发caspase活化级联 ,导致细胞死亡。细胞色素C的释放是线粒体外膜通透性增高的结果。Bcl 2蛋白家族具有调控细胞色素C释放的功能。除细胞色素C外 ,线粒体膜间隙的凋亡诱导因子 (AIF)在凋亡过程中也释放至胞质 ,这两种途径充分保证了细胞死亡程序的有效执行。轻中度暂时性脑缺血后细胞色素C释放至胞质 ,早于DNA片段化