Cyr61在卵巢上皮性癌中的表达及其与血管生成关系的研究

目的 探讨高半胱氨酸蛋白61(Cysteine-rich 61,Cyr61)在卵巢上皮性癌中的表达及其与血管生成的关系。方法 用逆转录PCR的方法半定量检测40例卵巢癌及10例正常卵巢组织中Cyr61 mRNA的表达,用免疫组化方法检测该40例卵巢上皮性癌及10例正常卵巢组织中Cyr61蛋白及微血管密度(MVD)的表达。结果 卵巢上皮性癌中,Cyr61mRNA及蛋白表达均高于正常卵巢组织,MVD蛋白表达也高于正常卵巢组织,差异均有显著性,并与肿瘤浸润发展有一定相关性,且MVD随Cyr61表达增强而升高。结论 Cyr61的过度表达在卵巢上皮性癌的发生、发展、浸润过程中起重要的作用,而且生物学行为与血管生成密切相关。     

VEGF,KDR,MMP-1及转录调节因子Ets-1在卵巢癌组织中表达

[目的]从分子水平观察肿瘤血管生成相关因子VEGF、VEGF受体KDR、基质金属蛋白酶1(MMP-1)以及转录调节因子Ets-1在卵巢上皮性癌中表达规律并揭示其因子间相关关系,为解释促血管生成因子间内在规律提供依据.[方法]利用原位杂交和免疫组织化学染色法检测87例卵巢上皮性癌中VEGF、KDR、MMP-1以及Ets-1等因子mRNA和蛋白表达规律.[结果]VEGFmRNA和蛋白主要分布在癌细胞胞浆中,阳性率分别为77.1%(67/87)和70.1%(61/87);KDRmRNA和蛋白主要在内皮细胞上表达,其表达率与VEGF表达率间存在密切的相关关系(r=0.892);MMP-1在肿瘤细胞和间质血管内皮细胞中表达,尤其在血管新生处表达明显;Ets-1主要分布在内皮细胞中,其表达率与KDR和MMP-1表达率间相关系数分别为0.9004和0.873.[结论]VEGF、KDR、MMP-1以及Ets-1是参与卵巢上皮性癌血管生成的重要因子,为抗肿瘤血管治疗新的治疗靶点.     

卵巢上皮性癌组织中PTTG的表达与微血管密度和bFGF的关系

目的:探讨垂体肿瘤转化基因(PTTG)在卵巢上皮性癌组织中的表达及其与微血管密度(MVD)计数和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)蛋白表达的关系。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)技术,检测42例卵巢上皮性癌组织中PTTGmRNA的表达;应用免疫组织化学法,检测PTTG和bFGF蛋白的表达,CD34标记血管内皮细胞并计数MVD。以18例卵巢良性上皮性肿瘤和12例正常卵巢组织进行对照。结果:卵巢上皮性癌组织中PTTG高度表达,并与手术病理分期和淋巴结转移正相关,P值均<0.05;PTTG的表达与年龄、病理类型或组织学分级无关,P>0.05。卵巢上皮性癌组织中PTTG的表达与bFGF蛋白表达及微血管密度正相关,P值均<0.05。结论:卵巢上皮性癌组织中PTTG高度表达参与了卵巢上皮性癌的发生及演进过程。PTTG可能通过激活bFGF蛋白表达促进新生血管生成而促使卵巢上皮性癌发生转移。     

卵巢上皮性肿瘤中基质金属蛋白酶MMP-9及其组织抑制剂TIMP-1 mRNA的表达及意义

目的:探讨基质金属蛋白酶(MMP-9)及其组织抑制物(TIMP-1)mRNA与卵巢上皮性癌的发生、发展及侵袭、转移的关系.方法:采用RT-PCR技术检测38例卵巢上皮性癌、15例卵巢交界性上皮性肿瘤、16例卵巢良性上皮性肿瘤及11例正常卵巢组织中MMP-9及TIMP-1 mRNA的表达,并分析其与各临床病理参数的关系.结果:MMP-9 mRNA在卵巢上皮性癌及卵巢交界性上皮性肿瘤组织中的阳性表达率分别为76%、44%及表达水平(分别为154.14±4.42,96.87±3.04)均显著高于卵巢良性上皮性肿瘤及正常卵巢组织(分别为13%,9%和8.26±2.67,2.341.02;P均＜0.05);且MMP-9mRNA在晚期卵巢上皮性癌组织中的阳性表达率和表达水平明显高于早期(P＜0.05).TIMP-1 mRNA在卵巢上皮性癌及卵巢交界性上皮性肿瘤组织中的阳性表达率(分别为68%,38%)及表达水平(分别为126.35±3.81,90.62±5.54)均显著高于卵巢良性上皮性肿瘤及正常卵巢组织(分别为13%,9%和8.32±2.02,2.63±1.35;P均＜0.05);TIMP-1mRNA在卵巢上皮性癌组织中的阳性表达率和表达水平与各临床病理参数均无相关性(P＞0.05).结论:MMP-9mRNA的高表达及MMP-9/TIMP-1平衡的调节失衡导致卵巢上皮性肿瘤的发生、发展;MMP-9mRNA的高表达对卵巢上皮性癌的预后有意义.     

PTEN基因突变及mRNA表达与卵巢癌病理生物学特征的关系

目的:研究抑癌基因PIEN突变和mRNA表达在卵巢癌发生和演进中的作用.方法:利用PCR-SSCP方法检测正常卵巢(n=5)、上皮性卵巢囊肿(n=5)、卵巢交界性肿瘤(n=9)、卵巢癌(n=60)中PIEN外显子5的突变,采用RT-PCR检测这些组织中mRNA表达,比较PTEN基因突变和mRNA表达与卵巢癌临床病理特征的关系.结果:仅在上皮来源的卵巢癌中发现5例(7.1%)PTEN基因外显子5突变,PTEN基因mRNA在卵巢交界性肿瘤和卵巢癌中的表达水平低于正常卵巢和卵巢囊肿(P＜0.05),PTEN基因mRNA表达与卵巢癌的临床病理分期呈负相关(P＜0.05),而与组织分化程度呈正相关(P＜0.05),PTEN基因mRNA表达在卵巢内膜样癌中表达最低,显著低于浆液性或粘液性卵巢囊腺癌(P＜0.05).结论:卵巢癌中存在PTEN基因外显子5突变及mRNA表达下调.PTEN基因mRNA表达下调与卵巢上皮性恶性肿瘤,特别是内膜样腺癌的发生和病理生物学行为关系密切.因此,PTEN基因有望作为反映卵巢癌病理生物学行为的客观分子指标.     

CLN3基因在卵巢浆液性癌中的表达

[目的]探讨CLN3基因在卵巢浆液性囊腺癌中的表达特点及与其生物学行为的关系.[方法]采用半定量RT-PCR方法和Western blot方法检测45例卵巢浆液性肿瘤(良性浆液性肿瘤11例,交界性肿瘤11例,浆液性癌23例)和12例正常卵巢组织中CLN3基因表达情况.[结果]卵巢浆液性囊腺癌组织中CLN3 mRNA表达为3.04 0.58,交界性卵巢浆液性囊腺瘤组织中表达为1.63 0.43.均明显高于正常卵巢组织和卵巢浆液性囊腺瘤(P＜0.01);卵巢浆液性囊腺癌组织CLN3 mRNA表达高于交界性卵巢浆液性囊腺瘤(P＜0.01);卵巢浆液性囊腺癌患者Ⅰ/Ⅱ期与Ⅲ,Ⅳ期、G1/G2与G3及有无腹水间比较差异有显著性(P＜0.05).[结论]CLN3基凶与卵巢浆液性癌的发生发展和预后可能有关,可作为卵巢浆液性癌重要的牛物学标志物.     

卵巢上皮性癌组织中结肠癌转移相关基因1的表达及其临床意义

目的:探讨卵巢上皮性癌组织中结肠癌转移相关基因1(metastasis-associated in colon cancer-1,MACC1)的表达及其临床意义。方法:应用RT-PCR和免疫组织化学法检测卵巢上皮性癌组织、卵巢上皮性良性肿瘤组织及正常卵巢组织中MACC1 mRNA及蛋白的表达,分析MACC1蛋白的表达与卵巢上皮性癌患者临床病理特征之间的关系。结果:卵巢上皮性癌组织中MACC1 mRNA和蛋白的表达水平均明显高于卵巢上皮性良性肿瘤组织和正常卵巢组织(P<0.05)。卵巢上皮性良性肿瘤组织与正常卵巢组织之间MACC1 mRNA和蛋白的表达水平无明显差异(P>0.05)。MACC1蛋白的阳性表达率与卵巢上皮性癌患者的临床分期、组织分化程度和淋巴结转移等因素相关(P<0.05)。结论:MACC1蛋白表达与卵巢上皮性癌患者的临床分期、组织分化程度和淋巴结转移相关。MACC1可能参与了卵巢上皮性癌的发生和发展。     

MASPIN、HPA在卵巢癌血管生成中的作用

[目的]研究丝氨酸蛋白酶抑制剂(MASPIN)、乙酰肝素酶(HPA)在卵巢癌的表达和血管生成的作用.[方法]采用免疫组化法对31例正常卵巢组织、35例上皮性卵巢癌标本进行MASPIN、HPA表达检测,CD34抗体标记血管内皮细胞计数微血管密度(MVD).MASPIN真核表达质粒体外转染卵巢癌SKOV3细胞,用细胞免疫化学及半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测转染后卵巢癌细胞中HPA蛋白和HPA mRNA表达变化.[结果]MASPIN在正常卵巢生发上皮细胞和卵巢癌细胞的阳性表达率分别为16.1％(5/31)和57.1％(20/35)(P＜0.05).HPA蛋白在正常卵巢生发上皮细胞未见表达,在卵巢癌细胞的阳性表达率为85.7％(30/35)(P＜0.05);MVD在卵巢癌中增高(P＜0.05).MASPIN蛋白表达与卵巢癌病理类型、临床分期和腹水相关(P＜0.05).HPA蛋白表达与卵巢癌淋巴结转移和腹水相关(P＜0.05).细胞免疫组化及RT-PCR方法均证实转染MASPIN cDNA的SKOV3细胞中HPA表达在各组间差异无统计学意义(P＞0.05).[结论] MASPIN在卵巢癌的发展过程中可能发挥着肿瘤抑制作用,并具有抑制血管生成作用.HPA表达与卵巢癌的恶性生物学行为密切相关.     

细胞外信号调节激酶在卵巢肿瘤的表达

[目的]探讨细胞外信号调节激酶(ERK)在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达及其意义。[方法]应用免疫组织化学技术,检测49例卵巢上皮性癌组织、26例卵巢上皮性良性肿瘤组织及10例正常卵巢组织中ERK1/2蛋白和活性ERK1/2蛋白表达。[结果]ERK1/2在卵巢上皮性癌组织中的表达阳性率为63%,显著高于正常卵巢组织(阴性)和卵巢良性肿瘤组织(27%)(P<0.01)。活性ERK1/2在卵巢上皮性癌中的阳性表达率为65%,明显高于卵巢良性肿瘤组织中的阳性表达率19%(P<0.01)。Ⅲ~Ⅳ期卵巢癌组织中ERK1/2及活性ERK1/2表达水平高于Ⅰ~Ⅱ期,差异有显著性(P<0.05,P<0.01)。病情进展患者活性ERK1/2表达阳性率为82%,较病情未进展者(43%),差异有显著性(P<0.01)。[结论]ERK蛋白的过表达在卵巢上皮性癌患者的发生、发展中可能起重要促进作用,可判断卵巢上皮性癌的病情进展情况。     

食管鳞癌组织中HIF-1α与VEGF及MVD的表达及其意义

目的:探讨缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial cell growth fac-tor,VEGF)在食管鳞癌组织中的表达及其与肿瘤血管新生和临床病理特征之间的关系。方法:应用免疫组化分别检测50例食管鳞癌、30例食管上皮内瘤变和35例正常食管上皮组织标本中HIF-1α、VEGF的表达和微血管密度(microvessel density,MVD)值,分析其相关性及其与肿瘤血管生存和肿瘤临床病理特征之间的关系。结果:食管鳞癌组织中,HIF-1α和VEGF的阳性率及MVD值分别为80%(40/50)、84%(42/50)和71.10±15.02,较上皮内瘤变组[53.3%(16/30)、66.7%(20/30)和49.47±13.78]及正常上皮组[0(0/35)、25.7%(9/35)和24.46±7.50]显著增加,P<0.01。HIF-1α和VEGF的表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移和TNM分期呈正相关,且HIF-1α的表达与VEGF的表达和MVD值呈正相关,P<0.05。结论:HIF-1α可通过上调VEGF的表达促进食管鳞癌的微血管形成,可能在食管鳞癌的发生和发展中起重要作用。HIF-1α和VEGF的过度表达可能成为判断食管鳞癌生物学行为的重要指标。     

卵巢上皮癌组织微血管密度及血管形成相关分子的检测及预后价值

目的 探讨卵巢上皮癌组织微血管密度(MVD)、血管内皮生长因子(VEGF)、血小板反应素1(TSP1)和p53蛋白表达与患者预后的关系.方法 采用免疫组化法检测57例原发性卵巢上皮癌组织中VEGF、TSP1和p53蛋白的表达情况,用CD34免疫染色后计数MVD.对VEGF、TSP1、p53蛋白和MVD与患者复发及生存时间的关系进行回顾性分析.结果卵巢上皮癌组织中VEGF、TSP1和p53蛋白表达阳性率分别为70.2%(40/57)、47.4%(27/57)和61.4%(35/57),MVD为30.3±8.5,MVD、VEGF和TSP1与复发相关(P值分别为0.030、0.025和0.026).高MVD、VEGF和p53蛋白阳性患者的中位生存时间短于低MVD、VEGF和p53蛋白阴性者(P值分别为0.0187,0.010和0.005),MVD、VEGF和p53蛋白是影响预后的危险因素.TSP1是影响患者预后的保护因素,其阳性患者的中位生存时间长于阴性患者(P=0.042).多因素分析表明,MVD和p53蛋白是影响卵巢上皮癌预后的独立因素(P值分别为0.018和0.009).结论 VEGF、TSP1和p53蛋白可能参与了卵巢上皮癌的血管形成,MVD和p53是影响卵巢上皮癌预后的独立因素.     

应用组织芯片技术研究上皮性卵巢癌组织中VEGF的表达及意义

目的：检测人上皮性卵巢癌组织及卵巢良性肿瘤组织中血管内皮生长因子（vascular endothelial growthfactor,VEGF）的表达,探讨二者在卵巢癌演进和异质化过程中的特点及它们之间的关系及意义。方法：应用组织芯片技术和免疫组织化学染色方法对87例石蜡包埋的人上皮性卵巢癌组织和42例卵巢良性肿瘤组织进行VEGF蛋白检测。结果：在卵巢癌组织中VEGF的高表达率为73.6%,而在卵巢良性肿瘤组织中其高表达率为33.3%,两者差异有显著性统计学意义（P〈0.01）;有淋巴结转移者VEGF的高表达率为86.2%,无淋巴结转移者的高表达率为65.5%,两者VEGF的表达差异有统计学意义（P〈0.01）;在有淋巴结转移的肿瘤中MVD明显高于无转移组肿瘤MVD（P〈0.01）。结论：VEGF高表达与上皮性卵巢癌的发生及其病理特征和生物学行为有密切的关系。VEGF可能是影响上皮性卵巢癌中血管生成的重要因素之一。     

ＩＧＦ-Ⅱ和ＶＥＧＦ在食管鳞癌中的表达及相关性研究

目的：探讨胰岛素样生长因子Ⅱ（ｉｎｓｕｌｉｎ ｌｉｋｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ Ⅱ,ＩＧＦ Ⅱ）和血管内皮生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅ ｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ）的基因产物在人食管鳞癌组织中的表达及其相关性。方法：应用原位杂交和免疫组织化学法检测６３例人食管鳞癌组织和２２例癌旁正常食管黏膜标本中ＩＧＦ Ⅱ ｍＲＮＡ、ＶＥＧＦ和微血管密度（ｍｉｃｒｏｖｅｓｓｅｌｄｅｎｓｉｔｙ,ＭＶＤ）的表达,对ＣＤ３４阳性组织进行ＭＶＤ计数,对ＩＧＦ Ⅱ ｍＲＮＡ和ＶＥＧＦ的表达采用半定量计数法判定,并结合临床资料进行统计学分析。结果：ＩＧＦ Ⅱ ｍＲＮＡ、ＶＥＧＦ在食管鳞癌组织中的阳性率分别为７６.１９％和６８.２６％,而在癌旁正常组织中的阳性率分别为２２７３％和１８１８％,癌组织和癌旁组织比较差异有显著性（Ｐ＜０.０５）。癌组织ＭＶＤ值为３０.２５３０±５.４５１４,癌旁组织ＭＶＤ值为２０.１１５０±１.６８６０,两者差异有显著性（Ｐ＜０.０５）。ＩＧＦ-Ⅱ ｍＲＮＡ、ＶＥＧＦ和ＭＶＤ表达都与细胞分化程度和淋巴结转移有关（Ｐ＜０.０５）,且ＶＥＧＦ和ＭＶＤ还与肿瘤大小有关（Ｐ＜０.０５）,而与性别、年龄无关（Ｐ＞０.０５）。ＩＧＦ-Ⅱ ｍＲＮＡ和ＶＥＧＦ共阳性表达组ＭＶＤ值为３２.３１５１±５.１９９５,高于ＩＧＦ-Ⅱ ｍＲＮＡ和ＶＥＧＦ共阴性表达组ＭＶＤ值（２２.５０００±１.４７６０）,差异非常显著（Ｐ＜０.０１）,且ＩＧＦ-Ⅱ ｍＲＮＡ在食管鳞癌组织中的表达与ＶＥＧＦ呈正相关（Ｐ＜０.０５）,随着ＩＧＦ-Ⅱ ｍＲＮＡ强度的增加,ＶＥＧＦ表达增强。结论：食管鳞癌组织中ＩＧＦ-Ⅱ基因表达显著增加,并可能诱导ＶＥＧＦ的过表达,且与食管鳞癌的侵袭性生物学行为密切相关。     

卵巢上皮癌中缺氧诱导因子1α与血管内皮生长因子的表达及其相关性分析

 目的　探讨卵巢上皮癌中缺氧诱导因子与血管内皮生长的发病机制,寻求新的治疗方法。方法　选取40例卵巢上皮癌手术标本和10例正常卵巢组织标本,采用免疫组织化学和反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法分别检测各组细胞缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和血管内皮生长因子（VEGF）蛋白和mRNA表达水平,比较它们在卵巢癌组织和正常卵巢组织中的表达情况及相关性。结果　对照组HIF-1α和VEGF蛋白的表达呈无表达或弱表达,而卵巢癌组蛋白表达呈中强阳性,两者比较,差异有统计学意义（P＜0.01）;卵巢癌组中HIF-1α基因和VEGF基因mRNA表达强度的均值分别为1.25±0.99和1.05±0.29。对照组中HIF-1α基因和VEGF基因mRNA表达强度均值分别为0.39±0.19和0.26±0.16。两者差异有统计学意义（P＜0.01）;HIF-1α和VEGF蛋白和基因表达强度在高、中分化肿瘤中的表达具有明显的正相关性（r＝0.785,r＝0.748）。结论　HIF-1α在卵巢上皮癌发生、发展中的作用与促血管生成有关,并提示HIF-1α在基因水平调控VEGF的表达,并和VEGF共同参与卵巢肿瘤的发生、发展。     

VEGF及其受体KDR在非小细胞肺癌中的表达及与肿瘤血管形成关系

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(KDR)的表达与非小细胞肺癌(NSCLC)血管形成的关系。方法:分别应用免疫组织化学S-P法和原位分子杂交法检测62例NSCLC组织和16例肺的良性瘤样病变组织中的VEGF和KDRmRNA的表达,并对血管进行染色、计数。结果:62例肺癌组织中46例有VEGF的表达(占74·29%),阳性表达位于肿瘤细胞胞膜及胞质;KDR mRNA在49例中有阳性表达(占79·03%),阳性表达位于肿瘤血管内皮细胞、肿瘤细胞胞膜及胞质。VEGF和KDR mRNA的表达与有无淋巴结转移和临床病理分期密切相关;VEGF和KDR mRNA阳性表达组微血管密度明显高于阴性表达组,P<0·01。结论:VEGF和KDR的表达与NSCLC的发生、发展和转移可能密切相关,可作为评估NSCLC患者预后的一项指标。     

ING4与VEGF在卵巢肿瘤中的表达及其临床意义

目的:研究ING4与VEGF在卵巢癌中的表达及其与卵巢癌发生发展的关系。方法:采用免疫组化SP法检测104例卵巢组织中ING4与VEGF的表达情况,并用CD43标记血管内皮计数MVD。结果:ING4蛋白在正常卵巢组织、卵巢交界性肿瘤组织和卵巢癌组织中表达呈阶梯性降低,三组间差异有统计学意义(P＜0.01),VEGF蛋白在正常卵巢组织、卵巢交界性肿瘤组织和卵巢癌组织中表达呈阶梯形增高,三组间差异有统计学意义(P＜0.01)。ING4的表达随着FIGO分期升高和病理分级的降低表达减弱,各组间有显著差异(P＜0.01)。VEGF的表达随着FIGO分期升高和病理分级的降低表达增强,各组间有显著差异(P＜0.05）。ING4和VEGF在卵巢癌组织中的表达呈负相关（r=-0.29,P＜0.05）。ING4表达阴性者MVD高于ING4阳性者(P＜0.01),VEGF表达阳性者MVD高于VEGF阴性者(P＜0.05)。联合分析表明ING4阴性VEGF阳性组预后比其它蛋白表达组明显较差(P＜0.05)。结论:ING4和VEGF表达与卵巢癌的发生发展和血管生成、转移、预后密切相关。     

Neuropilin-1 and VEGF correlate with somatostatin expression and microvessel density in ovarian tumours

Vascular endothelial growth factor (VEGF), is an angiogenic growth factor, expressed more highly in malignant than benign ovarian tumours. Neuropilin-1, which can act as a VEGF receptor has been shown to be associated with tumour angiogenesis in some cancer systems. Somatostatin (SST), a potentially anti-angiogenic factor, acts via somatostatin receptors that are expressed in ovarian cancer. We used immunohistochemistry to demonstrate expression of Neuropilin-1 in 63 malignant and 35 benign ovarian tumours and compared it to VEGF, Flt, Flk, SST expression and tumour microvessel density (MVD). Neuropilin-1 was expressed in 34/63 malignant and 22/35 benign lesions. VEGF, Flt, Flk and SST were expressed more highly in the epithelium of malignant and the vessels of benign lesions. VEGF expression correlated with SST expression in the epithelium (p<0.001) and the vessels (p<0.001), this co-expression was confirmed by dual immunostaining. The MVD for malignant lesions was higher than benign (p<0.001) and positively correlated to epithelial VEGF expression (p=0.001) and negatively correlated to vascular VEGF expression (p=0.025). These results show that Neuropilin-1 is expressed in ovarian tumours and also show that VEGF and SST are co-expressed in the same tissue compartments raising the intriguing possibility that SST may be important in angiogenesis in ovarian cancer.