中药平颤方加褪黑素对PD模型大鼠行为和前脑多巴胺及其代谢的影响

目的 观察中药平颤方加褪黑素(MT)对N-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致帕金森病(PD)模型大鼠行为学和前脑多巴胺(DA)及其代谢产物含量的影响,探讨中药与MT联合治疗PD的疗效及作用机制.方法 SD大鼠60只,分5个组:对照组、模型组、MT组、中药组、中药+MT组.模型组和各治疗组大鼠腹腔注射MPTP建立PD模型,用爬杆法和迷宫实验测量大鼠行为学改变和智力状况,用高压液相电化学法测定前脑DA、高香草酸(HVA)及二羟基苯乙酸(DOPAC)含量.结果 PD模型大鼠出现不同程度爬杆能力下降和智力减退,与模型组相比各治疗组大鼠行为学异常可部分改善(P＜0.01);模型组DA、HVA、 DOPAC含量均较对照组显著降低(P＜0.01),各治疗组DA、HVA、DOPAC含量较对照组低,但较模型组明显增高(P＜0.05,P＜0.01).结论 平颤方与MT联合通过调节大鼠前脑DA神经元活性从而改善PD症状.     

补肾止颤方联合埋针疗法对帕金森病模型大鼠Bcl-2及Bax表达的影响

目的观察补肾止颤方联合埋针疗法对帕金森病(PD)模型大鼠中脑黑质区Bcl-2及Bax蛋白的影响,探讨补肾止颤方联合埋针疗法对PD大鼠神经元细胞凋亡的保护作用。方法采用蛋白酶抑制因子(PSI)皮下注射法制作慢性PD大鼠模型,HE染色观察各组大鼠中脑黑质区病理形态学改变,免疫组织化学方法检测Bcl-2及Bax蛋白在中脑黑质区表达的变化。结果 PD模型组大鼠Bcl-2及Bax表达均较假手术组明显增高,中脑黑质区病理改变严重;补肾止颤方联合埋针疗法治疗后的PD大鼠Bcl-2表达明显增高,Bax表达明显降低,中脑黑质区病理变化明显改善。结论补肾止颤方联合埋针疗法能明显提高PD模型大鼠中脑黑质区Bcl-2蛋白的表达及抑制Bax蛋白激活,从而抑制黑质细胞凋亡以发挥脑保护作用。     

电针与锌合用对帕金森病模型大鼠DA能神经元恢复的调节

目的 探讨电针与小剂量锌合用对帕金森病(PD)模型大鼠DA能神经元结构和功能恢复的调节作用.方法 选取SD大鼠100只,将6-羟基多巴胺注入中脑右侧黑质制备单侧黑质损毁的PD大鼠模型,将模型大鼠随机分成模型组、0Hz组和120 Hz电针组、120 Hz+锌组和锌组,另设有假手术组,共6组.治疗或观察6个星期,观察治疗前后PD模型大鼠行为学变化,黑质酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞的形态、数量以及黑质多巴胺能神经元凋亡的情况.结果 与模型组比较,锌组、120 Hz组以及120 Hz+锌组大鼠行为学明显改善(P＜0.05或0.01),大鼠损毁侧TH阳性神经元数明显增加,DA能神经元凋亡数显著减少(P＜0.05或0.01).与120 Hz组比较,120 Hz+锌组大鼠损毁侧黑质TH阳性神经元数的增加及凋亡细胞百分比的减少也有统计学意义(P＜0.05).结论 电针与小剂量锌合用治疗PD模型大鼠在使DA能神经元结构和功能恢复方面具有较好的神经保护作用.     

MPTP诱导小鼠帕金森病亚急性模型和慢性模型的比较

目的探讨对比1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病(PD)小鼠亚急性模型和慢性模型的行为学及组织病理学变化。方法亚急性模型C57/BL小鼠腹腔注射MPTP 25 mg/kg,每天1次,连续注射7 d;慢性模型C57/BL小鼠腹腔注射MPTP 25 mg/kg,每周注射2次,连续注射5 w。通过爬杆实验和悬挂实验检测小鼠的行为学变化;应用高效液相色谱法检测纹状体内多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)的含量;应用免疫组化染色法检测中脑黑质酪氨酸羟化酶(TH)的表达。结果与对照组相比,慢性组小鼠行为学改变明显,而亚急性组小鼠无明显改变。在爬杆实验中,慢性组小鼠爬杆所用的时间长于亚急性组;悬挂实验中,慢性组小鼠悬挂时间低于亚急性组。两组小鼠纹状体DA含量明显降低(P<0.05),但慢性组与亚急性组相比DA含量降低程度更明显(P<0.05);而5-HT含量未见明显改变(P>0.05);中脑黑质致密部TH阳性细胞减少方面,亚急性组下降至对照组28%,慢性组下降至对照组的17%;慢性组HE染色切片中的神经细胞凋亡最多,而亚急性组神经细胞相对凋亡较少。结论 MPTP的PD小鼠慢性模型与亚急性模型相比,具有更明显的与人类PD相似的临床症状,是以后进一步研究PD病理生理学机制的潜在稳定模型。     

天麻素注射液对帕金森病大鼠的保护作用

目的观察天麻素注射液对帕金森病(PD)大鼠的保护效应及探讨其部分机制。方法将60只大鼠随机分为假手术组、天麻组及模型组,各20只。其中天麻组及模型组接受纹状体内多位点注射6-羟基多巴胺(OHDA)以建立PD模型,造模成功后模型组接受0.2 g·kg~(-1)·d~(-1)生理盐水肌肉注射,天麻组接受0.2 g·kg~(-1)·d~(-1)天麻素注射液肌肉注射,持续干预14 d直至处死。比较各组干预前后行为学变化,纹状体组织中Bcl-2、Bax蛋白及mRNA的表达变化。结果 1接受PD模型造模后的大鼠旋转次数明显较假手术组增多(P0.05),经过天麻素注射液治疗后大鼠旋转次数明显减少(P0.05)。2接受造模的大鼠纹状体内Bcl-2蛋白/mRNA水平低于假手术组,Bax蛋白/mRNA水平显著高于假手术组(P0.01),经过干预后天麻素组纹状体内Bcl-2蛋白/mRNA水平较模型组明显升高(P0.05),Bax蛋白/mRNA水平明显下降(P0.05)。结论天麻素可明显改善PD模型大鼠的临床症状,其机制可能与通过升高纹状体Bcl-2降低Bax含量有关。     

高压氧联合抗震颗粒对帕金森病大鼠的神经保护作用研究

目的 探讨高压氧(HBO)联合抗震颗粒对帕金森病(PD)大鼠的神经保护治疗作用.方法 将采用6-羟基多巴胺(6-OHDA)成功制作的PD大鼠模型,随机分为模型组(A组)及HBO联合抗震颗粒组(B组),用分光光度计检测两组谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性及丙二醛(MDA)含量的变化;用免疫组化法测定黑质酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元、胶原纤维酸性蛋白(GFAP)及Bcl-2、Bax蛋白的表达.结果 B组GSH-Px、SOD活性明显升高,MDA含量降低(P<0.05).TH阳性神经元及Bcl-2蛋白表达升高(P<0.01或P<0.05)、GFAP平均光密度及Bax蛋白的表达降低(P<0.01或P<0.05).结论 HBO联合抗震颗粒治疗PD大鼠,能抑制大鼠脑部氧化应激反应,提高大鼠的抗氧化及抑制细胞凋亡功能,是一种有效的神经保护和治疗措施.     

天麻钩藤饮对帕金森病大鼠神经行为学及氧化应激反应的影响

目的 观察天麻钩藤饮对帕金森病(PD)大鼠神经行为学及氧化应激的影响.方法 采用6羟基多巴胺(6-OHDA)注射于脑右侧黑质造成单侧PD损毁模型,并用中药天麻钩藤饮(浓度为5.13 g/ml)进行治疗,共给药14 d.同时设立正常对照组、假手术组,观察各组大鼠神经行为学的变化,同时运用化学比色法测定大鼠中脑黑质、纹状体部位活性氧、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的活性.结果 神经行为学方面,模型组大鼠治疗前后旋转圈数无显著差异;天麻钩藤饮组大鼠旋转圈数较模型组显著减少(P＜0.05),且治疗前后比较差异显著(P＜0.05);模型组活性氧、MDA明显升高,GSH、GSH-Px、SOD明显降低,与正常对照组、假手术组比较,差异显著(P＜0.05或P＜0.01);而天麻钩藤饮对其均有明显的改善作用(P＜0.05).结论 天麻钩藤饮可以明显改善PD大鼠的神经行为学变化,并可以提高机体的抗氧化和清除自由基的能力.     

人14-3-3γ基因转移对帕金森病大鼠多巴胺能神经元的保护作用

目的 探讨14-3-3γ转基因疗法对帕金森病模型大鼠的治疗作用及可能机制. 方法 用携带人14-3-3γ基因的重组腺病毒(Ad)感染帕金森病大鼠模型纹状体后,采用免疫组化方法检测纹状体与黑质酪氨酸羟化酶(TH)的表达、免疫印迹技术检测Caspase 3及14-3-3γ蛋白的表达、高效液相色谱法检测纹状体DA及其代谢产物DOPAC含量变化,并对PD大鼠的旋转行为进行评分. 结果 Ad/14-3-3γ注射PD大鼠纹状体后14-3-3 γmRNA及蛋白均能过表达.Ad/14-3-3γ组黑质TH免疫反应阳性的细胞数和纹状体TH免疫反应阳性的神经纤维光密度值与正常对照侧的比值(0.47±0.12和0.61±0.14)显著高于PBS组(0.16±0.13和0.25±0.12)和LacZ组(0.15±0.09和0.27±0.11)(均P＜0.01).Ad/14-3-3 γ组注射侧大鼠纹状体区DA含量与对侧比值为0.37±0.14,显著高于PBS组(0.15±0.08,P=0.006)和LacZ组(0.19±0.11,P=0.007);其代谢产物DOPAC含量与对侧比值Ad/14-3-3γ组(0.34±0.12)也高于对照组(PBS组为0.13±0.10,LacZ组为0.16±0.09,均P=0.00).Ad/14-3-3γ组注射侧纹状体中Caspase-3的表达与对侧相比显著降低.行为学评估结果显示Ad/14-3-3γ组大鼠平均旋转次数在第2次注射后的第1周、第2周和第6周均低于PBS组和LacZ组(均P＜0.01);而PBS组和LacZ组相比,两组的旋转次数在上述三个时间点均差异无统计学意义(P=0.764,0.779和0.742). 结论 14-3-3γ对PD模型大鼠的多巴胺能神经元有保护作用,是PD基因治疗中非常有前景的候选基因.     

帕金森病大鼠行为学模型实用性研究

目的探讨帕金森病（PD）大鼠行为学模型的实用性及黑质神经元的凋亡特征。方法注射6-羟基多巴胺（6-OHDA）制备大鼠模型,5周后用自制梯子和跑步机模型测试大鼠行为学指标。冰冻切片HE染色观察大鼠黑质神经元的形态特征,对比其凋亡情况。结果在梯子实验中,PD模型大鼠与正常对照组和假手术组大鼠相比,行走速度下降,行走时间延长（P〈0．05）,行走失误率显著增加（P〈0．01）;在跑步机实验中,PD模型大鼠较正常对照组持续爬行时间显著缩短,一定时间内的跌落次数增加（P〈0．01）。组织学观察PD模型大鼠注射药物侧黑质神经元显著减少,凋亡细胞显著增多,胞质染色加深。结论本文造模大鼠在自制梯子和跑步机实验中的行为学改变与黑质神经元凋亡程度相一致,此实验方法可以初步用于PD大鼠模型的鉴定。     

金属硫蛋白3对快速老化痴呆模型小鼠海马CA1区神经元细胞凋亡的影响

目的 研究金属硫蛋白3(MT3)对快速老化痴呆模型小鼠(SAMP8)海马CA1区神经元细胞凋亡的影响及其机制.方法 将7月龄SAMP8小鼠随机分成6组,分为痴呆组、3种浓度的MT3组、MT1组、空白对照组.快速老化小鼠对照(SAMR1)小鼠为正常对照组.连续腹腔注射28 d后灌注取脑,进行海马CA1区原位末端标记(Tunel)试剂盒和免疫组化(SP)试剂盒染色.结果 痴呆组海马CA区神经元细胞凋亡指数明显高于正常对照组.高浓度MT3组凋亡指数最低,Bcl-2蛋白表达增强,Bax蛋白表达最低(P＜0.01,P＜0.05).MT3组对Bax蛋白表达的抑制作用强于MT1对照组,而二组对Bcl-2蛋白表达的差异不显著.结论 SAMP8小鼠海马结构存在大量神经元细胞凋亡,MT3通过减少Bax表达和增加Bcl-2表达,减少细胞凋亡,并有浓度依赖关系;且作用强于MT1.     

大鼠帕金森病发病过程中黑质细胞凋亡及其相关基因表达

目的观察帕金森病(Parkinson disease,PD)发病过程中黑质细胞凋亡变化规律,观察相关黑质细胞凋亡基因p53、Bax、热休克蛋白(HSP)的表达。方法通过脑立体定位注射6-羟基多巴胺(6-0HDA)的方法建立大鼠PD模型,采用TUNEL方法、免疫组织化学、尼氏染色等方法,选择术后1、7、14、21 d为研究时点,观察大鼠PD模型形成过程中尼氏细胞、黑质细胞凋亡的数量及相关基因变化情况,并检测黑质细胞p53、Bax、HSP表达情况。结果用TUNEL法发现黑质细胞存在细胞凋亡,与对照组存在显著性差异(P<0.05),各时点黑质细胞凋亡数逐渐增加,尼氏细胞则逐渐减少,随时间增加而升高,p53和HSP则在1 d为最高,其后很快下降,但都高于对照组(P<0.05),Bax蛋白表达逐渐减少。结论PD发病过程中黑质细胞凋亡参与其中,呈现一定变化规律,并受到p53、Bax和HSP的影响。     

刺五加对脑出血大鼠细胞凋亡的影响

目的 观察刺五加(AS)对脑出血(ICH)大鼠脑细胞凋亡及其对凋亡调控蛋白Bcl-2、Bax的影响及对ICH脑组织的保护作用.方法 雄性Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组与治疗组.治疗组又分为AS大剂量组和小剂量组.用胶原酶注入大鼠尾状核建立ICH模型.治疗组给予AS干预,在不同时间点处死大鼠,测定血肿周围组织细胞凋亡、Bcl-2和Bax水平.结果 AS治疗组分别于12 h、1、3、7 d凋亡细胞低于模型组(P<0.01,P<0.05).AS治疗组Bcl-2水平分别于12 h、1、3、7 d表达高于模型组(P＜0.01,P＜0.05).Bax于12 h、1、3、7 d时AS治疗组表达低于模型组(P＜0.01,P＜0.05).结论 AS能明显减少ICH后神经细胞凋亡,升高Bcl-2表达水平,降低Bax表达,保护ICH后神经细胞.     

Alpha-突触核蛋白寡聚体致帕金森病小鼠模型的行为学变化

目的观察家族型帕金森病(PD)alpha-突触核蛋白(α-Syn)突变体A53T和A30P寡聚体导致小鼠PD模型的行为学变化,探讨α-Syn寡聚体在体内的神经毒性作用。方法制备野生型α-Syn、家族型突变体A53T和A30P的聚集体,对C57BL/6小鼠进行纹状体注射。培养至第30、60天,进行爬杆实验、悬吊实验、滚轴实验和平衡木实验评估行为学改变。免疫组织化学方法检测黑质多巴胺能神经元改变。结果实验鼠纹状体α-Syn寡聚体注射后30 d出现PD样运动障碍表现,纹状体注射30 d和60 d后,各组小鼠的爬杆实验结果均与对照组无差异(P0.05)。注射30 d后,野生型α-Syn寡聚体组小鼠平衡木实验、悬挂实验、滚轴实验与对照组无差异(P0.05);A53T和A30P组小鼠平衡木时间比对照组长(P0.05),滚轴上时间比对照组小鼠缩短(P0.05),悬挂评分比对照组明显降低(P0.01),与野生型α-Syn寡聚体组相比有统计学差异(P0.05)。注射60 d后,野生型α-Syn寡聚体组小鼠平衡木实验平均通过时间比对照组小鼠长(P0.05)、悬挂实验评分较对照组小鼠降低(P0.05);A53T和A30P组小鼠各项行为学评估与对照组小鼠差异显著(P0.01)、与野生型α-Syn寡聚体组相比有差异(P0.05)。A53T和A30P组小鼠黑质多巴胺能神经元数目下降(P0.05)。结论纹状体注射α-Syn突变体A53T和A30P寡聚体,模型小鼠出现PD样行为学改变和黑质多巴胺能神经元减少。     

加味五虎追风散对鱼藤酮诱导的帕金森病大鼠多巴胺能神经元α-syn及TH表达的影响

目的探讨加味五虎追风散对鱼藤酮诱导帕金森病(PD)模型多巴胺能神经元大鼠黑质区α-突触核蛋白(α-syn)异常聚集及酪氨酸羟化酶(TH)蛋白表达的影响。方法将90只健康SPF级Wistar大鼠随机分为5组:空白组、模型组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组,各16只。颈、背部交替皮下注射鱼藤酮法制备大鼠PD模型。中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组分别给予加味五虎追风散4.15 g/(kg·d)、8.3 g/(kg·d)、16.9 g/(kg·d)灌胃,模型组及空白组用相等体积的蒸馏水灌胃,连续28 d。比较各组黑质纹状体区α-syn聚集情况及TH蛋白含量。结果行为学观察结果:PD造模大鼠不同程度出现捕捉动作减少、皮毛及尾巴时有竖立、中重度震颤、肢体偏瘫等表现。模型组脑黑质区α-syn含量较空白组增加,TH蛋白含量较空白组降低,差异均有统计学意义(P<0.01);中药低剂量组、中剂量组、高剂量组脑黑质区α-syn含量较模型组降低,TH蛋白含量较模型组升高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),其中中药高剂量组脑黑质区α-syn含量均低于中药中剂量组、中药低剂量组(P<0.05),TH蛋白表达均高于中药中剂量组、中药低剂量组(P<0.05)。结论加味五虎追风散对PD大鼠黑质纹状体区α-syn异常聚集具有一定程度的抑制作用,能增加TH含量,对多巴胺能神经元起保护作用。     

止颤汤对帕金森病异动症大鼠DARPP-32磷酸化表达的影响

目的观察止颤汤对帕金森病异动症(LID)大鼠行为学和纹状体DARPP-32(Thr-34)磷酸化表达的影响。方法采用6-羟基多巴胺(6-OHDA)注射于大鼠脑部黑质造成帕金森病模型,进一步予以左旋多巴/苄丝肼腹腔注射制作异动症(LID)模型。实验设立正常组、模型组、西药组及中药小、中、大剂量组,并采用异常不自主运动(AIM)评分及Western Blotting法观察各组大鼠的行为学及DARPP-32(Thr-34)磷酸化的表达情况。结果 AIM评分显示,止颤汤可以缓解LID大鼠的不自主运动行为,长期用药后,中药中剂量组评分明显下降,但与大剂量组相比差异无统计学意义。Western blotting结果显示:模型组大鼠磷酸化DARPP-32(THr34)的灰度值较正常组增高(P0.01);西药组磷酸化DARPP-32(THr34)灰度值与模型组比较,差异无统计学意义。中药大、中、小剂量组大鼠纹状体磷酸化DARPP-32(THr34)灰度值与西药组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。中药中剂量、大剂量组磷酸化DARPP-32(THr34)的灰度值较中药小剂量组降低(P0.05),而中药中剂量组与中药大剂量组比较差异无统计学意义。结论止颤汤可以有效缓解异动症的症状,降低纹状体DARPP-32(Thr-34)磷酸化的表达,可能是止颤汤治疗异动症的作用机制。     

6-羟基多巴胺所致帕金森病大鼠模型稳定性的研究

目的 探讨立体定向注射6-羟基多巴(6-OHDA)建立帕金森病(PD)大鼠模型的方法及其稳定性.方法 利用脑立体定向技术将6-OHDA 注入大鼠右侧黑质致密部(SNc)及中脑腹侧被盖(VTA),经阿朴吗啡(APO)诱导表现为恒定左侧旋转且旋转圈数大于210 r/30 min,视为成功PD大鼠模型.免疫组化方法观察黑质、纹状体区酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元的形态及数量变化,以及高效液相法检测黑质纹状体多巴胺(DA)含量的变化.结果 ①旋转实验检测:80只大鼠中32只旋转圈数大于210 r/30 min,成功率为40%,并且至少可以维持12 w.②免疫组化结果:大鼠模型毁损侧黑质区和纹状体区TH阳性的神经元较对侧及对照组减少(P＜0.01).③高效液相法检测结果:4和12 w模型鼠右侧黑质纹状体中DA 含量均较对照组减少(P＜0.05).结论 6-OHDA 毁损法可有效建立模拟人类PD中晚期的大鼠模型,并且至少可以维持12 w,为研究PD治疗提供稳定的模型.     

补肾止颤方联合埋针对帕金森病大鼠TH、GFAP表达的影响

目的观察补肾止颤方联合埋针对帕金森病(PD)大鼠中脑黑质区酪氨酸羟化酶(TH)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的影响,探讨补肾止颤方联合埋针对PD大鼠神经元细胞的保护作用。方法采用蛋白酶抑制因子(PSI)皮下注射法制作慢性PD大鼠模型,免疫组织化学方法及蛋白印迹法检测各组大鼠中脑黑质区TH、GFAP表达的变化。结果经补肾止颤方联合埋针治疗后的PD大鼠TH蛋白表达明显增加,TH阳性细胞明显增多,GFAP表达明显降低,GFAP阳性细胞明显减少,与模型组相比较有统计学意义(P0.05);而针药结合组与多巴丝肼组相比较,亦有统计学意义(P0.05)。结论补肾止颤方联合埋针可显著增加PD大鼠中脑黑质区TH阳性细胞表达,并有效减少GFAP阳性细胞表达,保护大鼠神经元细胞,增加脑内多巴胺(DA)含量,促进PD大鼠运动功能的恢复。     

缬沙坦对大鼠缺血-再灌注心肌caspase-3活性及凋亡相关基因表达的影响

目的:观察缬沙坦对大鼠心肌缺血-再灌注(I/R)时心肌细胞天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)活性、Bcl-2和Bax蛋白表达的影响.方法:以SD大鼠建立I/R模型,设立I/R组、缬沙坦组和假手术组.用分光光度法检测caspase-3活性,免疫组化法检测心肌组织Bcl-2和Bax蛋白表达,透射电镜观察心肌超微结构的变化.结果:同I/R组相比,缬沙坦组心肌组织caspase-3活性明显降低(P＜0.05),Bax蛋白表达显著降低(P＜0.01),而Bcl-2蛋白表达显著增高(P＜0.01),Bax/Bcl-2显著降低(P＜0.01),心肌细胞超微结构损伤明显减轻.结论:缬沙坦通过抑制caspase-3活性、调控Bax/Bcl-2表达而抑制心肌I/R所致细胞凋亡.     

熟地平颤颗粒对帕金森病大鼠行为学及α-突触核蛋白表达的影响

目的观察熟地平颤颗粒对帕金森病大鼠行为学及黑质内α-突触核蛋白(α-syn)表达的影响。方法采用6-羟基多巴胺(6-OHDA)注射于大鼠脑右侧黑质造成偏侧帕金森病(PD)模型。实验设立正常对照组、帕金森病模型组、左旋多巴(LD)组、LD+中药(TCM)组,治疗4周后观察各组大鼠旋转圈数、旋转持续时间以及异常不自主运动(AIM)评分的变化;采用RT-PCR方法检测大鼠黑质内α-syn基因表达情况;免疫组织化学法检测黑质内α-syn、TH蛋白的表达情况。结果与治疗前比较,PD组大鼠旋转圈数差异无统计学意义(P0.05),旋转持续时间较治疗前缩短(P0.05)。与同期PD组比较,LD组第7天、第14天的旋转圈数旋转持续时间均低于PD组,第28天的评分高于PD组(P0.05);与同期LD组比较,LD+TCM组自第21天起的旋转圈数、旋转持续时间评分显著降低(P0.05)。LD组大鼠用药后第14天起的AIM评分逐步增高(P0.01);LD+TCM组治疗前后AIM评分差异无统计学意义。PD组与正常对照组比较α-synmRNA表达增高,Levodopa组与PD组比较,α-synmRNA明显增高,LD+TCM组较LD组α-synmRNA表达显著降低(P0.05)。免疫组化结果显示:PD组较正常对照组α-syn表达增加s TH表达降低;LD组与PD组比较,α-syn表达增加s TH表达降低;LD+TCM组与LD组比较,α-syn表达降低s TH表达增加(P0.01)。结论长期使用左旋多巴可以引起α-syn过表达,进一步加重中脑黑质区的神经损伤,造成行为学症状恶化。熟地平颤颗粒结合左旋多巴治疗PD有明显的增效减毒作用,中药通过抑制α-syn的过表达,减少了黑质多巴胺能细胞的损伤,有效缓解了帕金森病症状。     

Calbindin D28k对帕金森病模型小鼠纹状体凋亡相关蛋白表达的影响

目的观察1-甲基4-苯基1,2,3,6四氢吡啶(MPTP)致帕金森病(PD)模型小鼠黑质多巴胺能神经细胞过表达Calbindin D28k(CB)时,纹状体细胞抗损伤作用机制。方法选择C57BL/6小鼠连续5 d腹腔注射MPTP,构建成功PD模型小鼠30只,随机分为模型组,人类免疫缺陷病毒(HIV)Ⅰ组(注射HIV Ⅰ)和CB-HIV-Ⅰ组(注射CB-HIV-Ⅰ),每组10只,连续6周对各组小鼠行为学检测,Western blot法检测各组小鼠CB,Bcl 2和Bax的表达变化。结果与模型组和HIV-Ⅰ组比较,CB-HIV-Ⅰ组小鼠各时间点移动格子次数,第1、2、5和6周站立次数,第6周时游泳和悬挂时间,差异有统计学意义(P0.05,P0.01);CB-HIV Ⅰ组小鼠中脑黑质中CB的表达量显著升高(P0.05),纹状体细胞中Bcl-2的表达量亦明显升高(P0.01),而Bax的表达量明显降低(P0.01)。模型组和HIV-Ⅰ组上述指标差异无统计学意义(P0.05)。结论黑质多巴胺能神经细胞过表达CB时,纹状体细胞Bcl-2/Bax表达上调,提示其与纹状体细胞抗凋亡能力增强有关。