磷脂酶Cγ1及NF-κB在结直肠癌细胞与基质黏附中的作用及信号转导机制

目的研究磷脂酶Cγ1(PLCγ1)及NF-κB在结直肠癌细胞与细胞外基质黏附中的作用及其信号转导机制.方法 PLC抑制剂U73122用于研究PLCγ1在高转移的人结肠癌细胞LoVo和低转移的SW480细胞中对于细胞-基质黏附的影响.吡咯二硫氨基甲酸酯(PDTC)用于研究NF-κB在结直肠癌细胞与基质黏附中的作用. PLCγ1在结直肠癌细胞中作用的信号转导机制采用蛋白质印迹及凝胶迁移率变动分析(EMSA).结果抑制PLCγ1对SW480细胞与基质的黏附无明显影响.但在LoVo细胞中,PLCγ1和NF-κB的抑制均可显著降低细胞与基质的黏附(P<0.05)并呈剂量依赖性, 且抑制作用可被EGF部分恢复.蛋白质印迹分析显示EGF可刺激PLCγ1的磷酸化.EMSA结果显示,抑制PLCγ1可以抑制EGF刺激的NF-κB的激活.结论EGF-PLCγ1-NF-κB 信号通路在高转移的结肠癌细胞与基质的黏附中发挥重要作用.     

NF-κB/P65、FHIT在结直肠癌的表达及临床病理意义

目的 研究生物标志物NF-κB/P65及FHIT在结直肠癌的表达及肿瘤生物学特点,探讨其与患者无瘤生存时间和总体生存时间的关系.方法 采用PV6000二步法检测359例结直肠癌(其中198例有完整的随访资料)及35例癌旁正常组织NF-κB/P65及FHIT表达的异同.结果 结直肠癌NF-κB/P65的阳性率为67.7%(243/359),FHIT的阳性率为46.0%(165/359).NF-κB/P65和FHIT均与肿瘤的TNM分期、淋巴结转移及远处转移相关(P均＜0.05).FHIT还与肿瘤的肠壁浸润深度及组织学分级呈负相关(r值分别为-0.29和-0.25,均P＜0.05).NF-κB/P65阳性表达组患者的5年生存率显著低于阴性组,而FHIT阳性组患者的5年生存率则显著高于阴性组(x2值分别为23.25和51.13,均P＜0.05).NF-κB/P65与FHIT在结直肠癌的表达呈负相关(r=-0.167,P=0.019).NF-κB/P65在结直肠癌组织中的表达明显高于在癌旁正常组织中的表达,而FHIT在结直肠癌组织中的表达则明显低于在癌旁正常组织中的表达(x2值分别为40.78和15.93,均P＜0.05).COX多因素分析的结果 显示,NF-κB/P65是患者无瘤生存时间及总体生存时间的独立预后因子.结论 NF-κB/P65及FHIT在结直肠癌的发生、发展及转移中发挥重要作用,可以作为结直肠癌临床评价肿瘤生物学行为及判断预后的有效指标.     

NF-κB和MMP-9在结直肠癌中的表达及意义

目的：研究核转录因子（nuclear factor of kappa,NF-κB）和基质金属蛋白酶-9（matrixmetalloproteinase-9,MMP-9）在结直肠癌组织中的表达情况,探讨两者在结直肠癌发生发展中的作用及其与结直肠癌临床病理特征的关系。方法：采用免疫组织化学SP法检测47例结直肠癌癌组织、癌旁组织及近端正常组织中NF-κB和MMP-9蛋白的表达情况,并比较各组组织中两种因子蛋白表达的差异。结果：NF-κB蛋白在癌组织的阳性率明显高于癌旁组织及近端正常组织（P〈0.01）,且NF-κB蛋白的表达与结直肠癌细胞分化程度、临床分期及淋巴结转移相关（P值分别为0.032、0.01和0.026）,而与性别、年龄、肿瘤大小、部位及浸润深度无相关性;MMP-9蛋白在癌组织的阳性率明显高于癌旁组织及近端正常组织（P〈0.01）,且MMP-9蛋白的表达与淋巴结转移相关（P〈0.05）。结直肠癌中NF-κB与MMP-9表达呈正相关（r=0.489,P〈0.01）。结论：NF-κB和MMP-9的高表达与结直肠癌的淋巴结转移密切相关,二者可作为评估结直肠癌淋巴结转移的重要生物学指标。     

磷脂酶C—γ1和γ2在PDGF促成纤维细胞克隆形成中的不同作用

目的 探讨磷酯酶Cγ1和γ2（PLC－γ1和γ2）在血小板源性生长因子（PDGF）诱导小鼠成纤维细胞克隆形成信号传导中的作用。方法 将全长PLCγ2cDNA亚克隆进真核细胞表达载体，转染小鼠成纤维细胞株PLC－γ1－／－和PLC－γ1^ / ，使PLC－γ2在成纤维细胞中表达，同时以未插入目的基因的空载体转染这两种细胞作为实验对照。用有限稀释法随机挑选几个单细胞克隆，经Western Blotting鉴定其PLC－γ2表达量，转染细胞及其相应对照被用来测量克隆形成能力。结果 PLC－γ2可在PDGF的作用下活化，对克隆形成有显的正调控作用，而PLC－γ1基因对克隆形成无任何影响。并且γ2利于细胞低密度时的存活，因而，PLC－γ2可显促进低密度细胞的克隆形成,γ1可能有相反作用。结论 PLC－γ1和γ2在PDGF诱导小鼠成纤维细胞克隆形成中的有不同作用。     

PPARγ和NF-κB在肺纤维化中的表达与意义

目的：观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ (PPARγ)和核因子-κB (NF-κB)在肺纤维化患者肺组织中的表达情况,探讨其在肺纤维化发病中的作用。方法：采用免疫组织化学方法检测16例肺纤维化患者与10例正常对照肺组织标本中PPARγ、NF-κB的表达情况。结果：肺纤维化组PPARγ的阳性表达记数为0.35±0.08,低于正常对照组的0.42±0.04 (P<0.05)。肺纤维化组NF-κB的阳性表达记数为0.51±0.11,高于正常对照组的0.38±0.04 (P<0.05)。肺纤维化组的PPARγ和NF-κB的表达呈负相关(P<0.05)。结论：肺组织中PPARγ的表达减弱、NF-κB的表达增强在肺纤维化的发病过程中起作用,为临床治疗肺纤维化提供了新思路。     

转录因子NF-κB在HIV-1表达中的作用

NF-κB／Rel转录因子是由P50和P65组成的同源二聚体以及异源二聚体。它参与许多基因产物的表达和激活，NF—κB／Rel蛋白家族在炎症反应(如调控合成多种炎症细胞因子，趋化因子，粘附因子，细胞表面受体，急性期蛋白等)、免疫、应激、细胞生长及癌症发生与生长等诸多生物学过程中的作用受到越来越多的关注。近年来，人们     

NF-κB在炎症及脓毒症中的作用

炎症是机体对致炎因素引起的局部损伤产生以防御反应为主的应答性反应。感染导致的全身炎症反应综合征常发展为脓毒性休克。病原菌及其产物可以激活炎症基因,从而激活细胞因子网络系统,释放一系列炎症介质和抗炎介质,     

磷脂酶Cγ2对自身反应性B细胞的调控作用

目的应用基因敲除小鼠模型研究磷脂酶Cγ2对无能B细胞产生的调节机制.方法采用流式细胞术分析野生型和PLCγ2缺失型小鼠无能B细胞的表型;同时用末端转移酶标记技术检测无能B细胞凋亡;溴脱氧尿嘧啶核苷掺入标记技术研究无能B细胞增殖情况.结果 PLCγ2缺失小鼠与PLCγ2野生小鼠相比,无能B细胞数量显著减少(P<0.01),无能B细胞凋亡率显著增加(P<0.01),而无能B细胞增殖率无明显差异(P>0.05).结论 PLCγ2信号提供了存活信号,PLCγ2参与了无能B细胞的调控过程.     

NF-κB及其在肿瘤中的作用

细胞核因子κB(nuclearfactorkappaB ,NF κB)是近年来发现的重要转录调控因子。NF κB广泛存在于细胞中 ,具有多种调节作用 ,不仅与机体的免疫应答、细胞增殖、生长分化、细胞周期以及凋亡有关 ,而且与肿瘤的发生发展和侵袭转移有密切关系〔1〕。1　NF κB家族的组成1986年Sen和Baltimore首先发现NF κB并进行描述。最初是从成熟B细胞核抽提物中发现的一种能与免疫球蛋白κ链基因的增强子κB序列特异性结合的核蛋白因子 ,所以称为细胞核因子。最初发现的NF κB是由P5 0和P6 0两个亚单位组成的异源二聚体 ,后来发现存在着一个NF …     

磷脂酶C—γ1在人胚组织中的表达

目的 研究磷脂酶C－γ1（PLC－γ1）在人胚组织中的表达情况。方法 收集人胚组织（包括软骨、软骨膜、骨骼肌）并行石蜡包埋及切片,采用免疫细胞化学ABC染色法观察人胚组织细胞中PLC－γ1的表达情况。结果 PLC－γ1在这几种细胞中均有较强的表达,主要位于胞质中。结论 PLC－γ1相关的细胞内信号传递途径对于人早期胚胎细胞的发育、增殖具有重要的生物学意义。     

NF-κB的研究进展及其在糖尿病中的作用

参与炎症反应和免疫反应的介质纷繁复杂、彼此关联,在体内构成了一个十分复杂的网络体系。而作为众多炎性因子共同的转录调节蛋白——核因子NF-κB的发现,为疾病的防治提供了新的线索。NF-κB是Sen和Baltimore[1]于1986     

WT1与NF-κB在卵巢浆液性肿瘤中的表达及意义

目的 探讨 WT1和NF-KB/p65在卵巢浆液性肿瘤中的表达与临床病理学特征的关系.方法 采用免疫组化Envision二步法检测WT1和NF-κB/p65在卵巢良性浆液性肿瘤(40例)、交界性浆液性肿瘤(40例)和浆液性癌(40例)中的表达情况,分析其表达水平与卵巢浆液性肿瘤临床病理特征的相关性.结果 WT1在卵巢良...     

NF-κB在感染和炎症促进肿瘤发生及发展中的作用

早在十九世纪,Virchow就提出慢性感染和炎症可能引起肿瘤,然而,直到最近,流行病学的调查显示慢性感染和炎症是各种肿瘤发生的重要因素以后,炎症和肿瘤之间的相互关系的研究才得以深入.本文就NF-κB在慢性感染和炎症促进肿瘤发生和发展中的作用及其机制作一综述.     

NF-κB、CXCR4在结直肠癌中的表达及预后意义

目的 探讨结直肠癌中CXCR4、NF-κB的不同表达模式与临床病理因素的关系及其预后意义.方法 运用免疫组织化学方法,检测183例结直肠癌组织中CXCR4在胞浆和胞核的表达情况、NF-κB在胞核的表达情况、以及CXCR4与NF-κB在肿瘤侵袭前缘表达增强现象,并分析其临床病理意义及预后价值.结果 CXCR4在管状腺癌和乳头状腺癌的胞浆阳性率显著高于其它类型的肿瘤(P=0.007),胞核阳性时肿瘤间质淋巴细胞浸润相对较少(P=0.005),年长者(P=0.017)、有饮酒史(P=0.037)或吸烟史者(P=0.032)更常见肿瘤侵袭前缘表达增强现象;NF-κB胞核表达与肿瘤实质淋巴细胞浸润呈正相关(P=0.021),肿瘤侵袭前缘表达增强现象与组织学类型呈负相关(P=0.024).生存分析表明CXCR4肿瘤侵袭前缘表达增强时预后较差.结论 CXCR4、NF-κB在肿瘤主体和肿瘤侵袭前缘存在不同的表达情况并各自有不同的意义,CXCR4肿瘤侵袭前缘表达增强时预后较差.     

胰岛素作用对胰岛β细胞磷脂酶Cγ1表达的影响

目的：观察胰岛素对大鼠胰岛β细胞内磷脂酶Cγ1（PLCγ1）表达的影响.方法：大鼠胰岛分离纯化.通过HE染色观察纯化胰岛的形态特征,采用免疫组织化学方法并结合激光扫描共聚焦显微镜和图像分析技术对胰岛β细胞表达不同时间（0,30,60,120,240min）内的PLCγ1进行半定量分析.结果：PLCγ1在胰腺的内外分泌部均有表达.与0min比较,胰岛素作用30,60min时胰岛β细胞表达的PLCγ1荧光强度有明显降低（P〈0.05）;而在240min时PLCγ1荧光强度与0min比较无明显差别.结论：胰岛素作用60min内可使PLCγ1表达下调;胰岛素-PLCγ1途径参与了胰岛素的信息传递.     

TGFβ1和NF-κB在胃癌组织中的表达及其临床意义

[目的]探讨转化生长因子β1(TGFβ1)和核转录因子-κB(NF-κB)在胃癌组织中的表达与胃癌发生发展之间的关系.[方法]采用免疫组织化学方法检测109例胃癌、48例不典型增生、59例胃良性病变及21例正常胃粘膜组织中的TGFβ1和NF-κB的表达.[结果]在胃癌和不典型增生组织中TGFβ1和NF-κB的表达水平明显高于正常胃粘膜.TGFβ1的表达与肿瘤浸润深度及临床分期有相关性,而NF-κB的表达与肿瘤大小及临床分期有相关性;TGFβ1和NF-κB的表达均与胃癌患者的5年生存率无相关性.在胃癌组织中TGFβ1表达与NF-κB表达之间存在正相关性.[结论]TGFβ1和NF-κB共同参与胃癌的发生发展,且与胃癌的侵袭有一定的关系.     

KiSS-1和NF-κB在食管鳞状细胞癌组织中的表达及临床病理意义

目的 探讨KiSS-1和NF-κB在食管鳞状细胞癌组织中的表达及临床病理意义.方法 应用免疫组织化学方法检测40例食管鳞状细胞癌和5例正常食管粘膜组织中KiSS-1和NF-κB的表达情况.结果 Kiss-1在食管鳞状细胞癌组织中表达降低,与淋巴结转移关系密切(P＜0.05);NF-κB的表达与病理组织分级、淋巴结转移有关(P<0.05);食管鳞状细胞癌中KiSS-1和NF-κB的表达呈负相关(r=-0.676,P＜0.05).结论 Ki s s-l基因的表达减低或者缺失与食管鳞状细胞癌的发生发展及浸润转移有关,Kiss-l基因可能通过抑制NF-κB从而发挥抑制食管癌转移的作用.     

磷脂酶C-γ1对乳腺癌细胞运动作用的影响

目的研究磷脂酶C-γ1(phospholipase C-γ1,PLC-γ1)对乳腺癌细胞生长、黏附和迁移等生物学行为的影响,揭示乳腺癌发生的新分子机制。方法在乳腺癌MDA-MB-231细胞中加入PLC-γ1抑制剂,观察细胞划痕、趋化和黏附运动能力变化,应用Western blot技术检测相应的乳腺癌信号转导通路中整合素β1分子磷酸化的表达。结果 PLC-γ1被抑制后乳腺癌细胞的迁移和黏附运动能力下降,差异有统计学意义(P<0.05);整合素β1的磷酸化表达水平降低。结论 PLC-γ1参与了乳腺癌细胞迁移和黏附运动,可作为乳腺癌分子诊断和靶向治疗的靶点。