BALB/c小鼠可移植性乳腺癌(MA-901)的生长规律及高转移表达

将1例BALB/c小鼠自发性乳腺癌移植到同品系小鼠皮下获成功并连续鼠间传代21代,共移植小鼠234只,成活率达100%,无自发消退现象。该瘤的移植成功率高,潜伏期短且相对稳定,肿瘤生长迅速,实验周期短;脾脏进行性肿大,脾系数与瘤系数呈明显正相关;有高发的自发性肺转移特点;长期传代维持高转移率不变。该移植瘤动物模型的建立对研究肿瘤转移的机制和宿主与肿瘤的关系有一定意义。     

维甲酸诱导BALB／c近交系小鼠腭裂动物模型的实验研究

目的分析维甲酸（RA）在胚胎发育期间对胎鼠的致畸作用,建立维甲酸诱导腭裂动物模型的最佳剂量。方法将特定妊娠期BALB／c近交系小鼠分为对照组和实验组。实验组小鼠一部分在妊娠8d,10d,12d管饲RASOmg／kg,一部分在妊娠10d给予40mg／kg、50mg／kg和60mg／kg三种不同剂量RA;对照组小鼠在妊娠8d,10d,12d管饲等剂量玉米油。观察胎鼠腭裂比率,确定诱导腭裂形成的最佳作用条件。结果RA在不同的发育阶段均可诱导腭裂,妊娠第10天50mg／kgRA诱导腭裂的比率为93．75％（P〈0．05）,诱导腭裂形成的比率最高。结论RA诱导BALB／c近交系小鼠腭裂是一种较为理想的腭裂动物模型,其最佳剂量为妊娠第10天给予50mg／kgRA。     

白花蛇舌草提取物抗小鼠结直肠癌血管生成的实验研究

目的探讨白花蛇舌草乙醇提取物对小鼠结直肠癌血管生成的抑制作用.方法构建32只BALB/c小鼠皮下CT26结肠癌动物模型,随机分为4组,每组8只小鼠,分别为Ⅰ组:对照组生理盐水0.1 mL/(10 g.d),Ⅱ组:白花蛇舌草乙醇提取物90 mg/(kg.d),Ⅲ组:白花蛇舌草乙醇提取物180 mg/(kg.d),Ⅳ组:白花蛇舌草乙醇提取物360 mg/(kg.d).各组小鼠在接种CT-26结肠癌细胞后的第10天开始测量肿瘤的长径(mm)和短径(mm);接种后第12天开始采用灌胃给药法给药,连续给药10 d后停止给药,继续喂养观察至第32 d后处死小鼠,取肿瘤组织用免疫组化法检测微血管密度.结果Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组小鼠的肿瘤体积明显小于Ⅰ组,差异有统计学意义(P<0.05);Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组的肿瘤组织微血管密度分别为(7.83±2.87)、(5.32±1.27)、(1.77±0.70)、(1.87±0.68);Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组肿瘤组织血管数量明显少于Ⅰ组,差异有统计学意义(P<0.05).结论在一定剂量范围内,白花蛇舌草乙醇提取物对小鼠CT-26结肠癌有明显的抑瘤作用,其机理可能是通过抑制小鼠结肠癌血管生成而起到抗肿瘤的作用.     

藤梨根提取液抗肺癌作用的实验研究

目的:观察藤梨根提取液对肺腺癌A549细胞的生长抑制作用,为其治疗肺癌提供实验依据。方法:采用MTT检测法、集落形成试验观察药物对细胞的作用,用流式细胞术检测细胞凋亡,同时分析药物对细胞周期的影响。采用裸鼠移植瘤模型进行体内实验,并绘制移植瘤生长曲线,计算抑制率。结果:各浓度的藤梨根提取液对肺腺癌A549细胞有较强的抑制效应,呈现出明显的时相性和量－效依赖性,流式细胞仪检测结果显示,藤梨根提取液作用后,G0/G1期细胞数增加,细胞出现凋亡,并随药物浓度增大,作用增强。移植瘤体内试验显示,藤梨根提取液高剂量组（按1?000?mg/kg）和低剂量组（按500?mg/kg）的抑瘤率分别为71.40%和40.35％,治疗组移植瘤生长缓慢,体积明显小于对照组（P＜0.01）。结论:藤梨根提取液在体内外对人肺腺癌A549细胞生长均有抑制作用,体外作用与G0/G1期阻滞有关,并有诱导人肺腺癌A549细胞凋亡的作用。     

白屈菜提取物的抗肿瘤作用与免疫调节作用的机制研究

目的 研究白屈菜提取物血根碱对小鼠胃癌细胞的抑制作用及对小鼠免疫力的影响.方法 通过MTT实验、流式实验、细胞迁移实验和细胞侵袭实验研究不同浓度的血根碱对小鼠胃癌细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响;通过皮下注射小鼠胃癌细胞建立BALB/c荷瘤小鼠模型,观察给予不同浓度血根碱灌胃给药30 d后对荷瘤小鼠体重、肿瘤体积、肿瘤...     

蝎毒多肽提取物抑制胰腺癌肝转移作用的实验研究

目的探讨东亚钳蝎蝎毒多肽提取物（PESV）对胰腺癌肝转移的抑制作用。方法筛选出高肝转移的胰腺癌细胞亚型MIA PaCa2 3,用Transwell小室模型观察PESV对MIA PaCa2 3细胞体外侵袭能力的影响;尾静脉注射MIA PaCa2 3细胞建立高肝转移率的裸鼠胰腺癌模型,对比PESV和化疗药物吉西他滨（gemcitabine）以及抗血管生成剂TNP 470对裸鼠胰腺癌肝转移的抑制作用。 结果PESV可以抑制MIA PaCa2 3细胞穿过人工基底膜的能力;PESV处理组肝转移抑制率为70％（7/10）,与吉西他滨处理组相近（8/10）,明显高于TNP 470处理组（2/9）。结论PESV作为一种“抗血管-细胞毒”药物对胰腺癌肝转移具有明显的抑制作用。     

狼毒浸出液抗肝癌作用的实验研究

1目的　探讨狼毒浸出液 (YF- 1)对腹水型肝癌 (H2 2 )及淋巴道转移型肝癌 (H2 2 / F2 3 )的抗癌作用及作用机制。 2方法　用 H2 2 ,H2 2 / F2 3 细胞攻击 CFW小鼠 ,并进行 YF- 1治疗 ,观察生存时间、瘤体质量及淋巴结转移程度 ;用狼毒浸出液与 H2 2 ,H2 2 / F2 3 细胞混和培养 ,观察抑瘤率 ;用混合细胞培养液接种至小鼠腹腔 ,观察动物存活情况。 3结果　用 H2 2 ,H2 2 / F2 3攻击后 ,治疗组小鼠平均生存时间长于对照组 (t=3.16 ,3.0 4,P<0 .0 5 )。YF- 1的抑瘤率分别为 6 7.9% ,6 4.6 % .治疗组荷瘤鼠的淋巴结转移率明显低于对照组 (t=3.182 ,P<0 .0 5 )。中和实验中 ,治疗组和对照组的平均存活时间分别为 38.0 ,14.8d,两组比较差异有显著性 (t=3.16 3,P<0 .0 5 )。 4结论　狼毒浸出液对肝癌生长和淋巴结转移有明显的抑制作用     

SCID小鼠和BALB/c裸鼠对两株人体肿瘤细胞系移植敏感性的研究

本文用MDA -MB2 31乳腺癌细胞致瘤块和人肺腺癌 1Ax - 83细胞系 ,在严重联合免疫缺陷 (SCID)小鼠、BALB c裸鼠的乳房垫和腋背侧皮下移植。结果表明 ,SCID小鼠对两株人体肿瘤细胞系成瘤率为 10 0 % (2 1 2 1)高于BALB c裸鼠 57 1% (8 14) ,两者差异显著 (P <0 0 5) ,SCID小鼠比BALB c裸鼠潜伏期明显缩短、且肿瘤生长较快。MDA -MB - 2 31乳腺癌细胞致瘤块移植组 ,SCID小鼠乳房垫接种者肺转移 10 0 % (5 5)、淋巴结转移 2 0 % (1 5) ,腋背侧皮下移植肺转移 50 % (2 4 )、淋巴结未见转移 (0 4 ) ;而BALB c裸鼠乳房垫接种者未见转移 (0 4 ) ,腋背侧皮下接种者仅 2 0 %(1 5)有肺转移。人肺腺癌 1Ax - 83细胞系移植组SCID鼠无自然消退 ,而BALB c裸鼠消退率 50 %(1 2 )。结论 :SCID小鼠比BALB c裸鼠更适宜做某些肿瘤移植模型 ,尤其是乳腺癌原位移植动物模型。     

乳腺癌MCF-7细胞系转移亚克隆的筛选及其生物学特性研究

目的将乳腺癌MCF-7细胞接种SC ID鼠,筛选具有高转移潜能的转移亚克隆,阐明其生物学特性。方法接种培养的乳腺癌MCF-7细胞,取接种的SC ID鼠肺组织做原代细胞培养,将获得的细胞命名为LM-MCF-7。对该细胞进行生物学鉴定,研究其形态学、生长、细胞周期、染色体和乳腺癌特异性标志物等特征,与其亲本MCF-7细胞进行比较,检测二者肿瘤转移相关蛋白表达的差异。将LM-MCF-7细胞回接SC ID鼠,观察其成瘤和转移的能力。结果在接种MCF-7细胞第68天时处死SC ID鼠,经肺组织原代细胞培养,成功获得了MCF-7细胞的转移亚克隆LM-MCF-7。在形态学上LM-MCF-7细胞为典型的上皮样多角形;应用流式细胞仪检测分析显示,G0/G1期细胞为53.40%,S期细胞为17.10%,G2+M期细胞为23.20%;细胞群体平均倍增时间为20 h±14 h;染色体分析显示为人源性异倍体,其数量为16~123条;免疫细胞化学检测显示,乳腺癌特异性标志物CA15-3在LM-MCF-7细胞中呈阳性反应;W estern印迹检测结果显示,与MCF-7细胞相比,LM-MCF-7细胞中肿瘤转移抑制基因nm23和细胞周期相关蛋白p27的表达水平明显下调,而与细胞运动有关的肌球蛋白轻链激酶(MLCK)及抗细胞凋亡蛋白bc l-2和survivin的表达水平明显上调。将该细胞株接种SC ID小鼠,与亲本MCF-7细胞相比,成瘤时间由7.4 d±1.3 d缩短至5.0 d±0.0 d,在肺脏、肾脏、脾脏、骨髓、淋巴结和心脏等脏器有广泛转移。结论LM-MCF-7细胞株是乳腺癌MCF-7细胞的转移亚克隆,具有高转移潜能。     

中药白山片抗肺癌作用的实验研究

白山片具有清热解毒，扶正祛邪，化瘀散结和提高机体免疫力等功能，本文观察了白山片对小发鼠移植瘤Ｌｅｗｉｓ肺癌的抑制作用。实验组的肿瘤明显缩小，抑制率为４０％￣６１．６％，而阳性对照组５－氟脲嘧啶 抑制率为５０．２％，在超微上白山片激活淋巴细胞增生观察到自然杀伤性淋巴细胞攻击破坏癌细胞，破坏癌细胞膜系统，使癌细胞裂解、崩溃，诱导癌细胞内产生大量溶酶体，使其溶解、变性、坏死。     

紫杉醇长循环纳米胶束联合vMIP-ⅡN端肽逆转乳腺癌细胞耐药的研究

目的探讨紫杉醇长循环纳米载药胶束联合病毒巨噬细胞炎性蛋白Ⅱ（vMIP-Ⅱ）N端肽（NT21MP）对乳腺癌紫杉醇耐药细胞株（MCF-7/PR）耐药性的影响。方法采用磺酰罗丹明B（SRB）染色法检测乳腺癌耐药细胞株MCF-7/PR的存活率;细胞划痕及Transwell实验检测紫杉醇纳米载药胶束联合NT21MP对乳腺癌耐药细胞迁移、侵袭能力的影响;流式细胞术分析细胞凋亡、周期;Western blotting实验检测细胞凋亡、耐药及上皮间充质转化相关蛋白水平表达。结果相对于紫杉醇组,紫杉醇纳米胶束更有效地抑制细胞增殖、迁移和侵袭,凋亡蛋白Bax、caspase3的蛋白表达水平上调,抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平下调,且耐药相关蛋白MRP、P-gp和EMT相关蛋白Vimentin、Slug表达水平下调,E-cadherin表达上调（P < 0.01）;相对于紫杉醇纳米胶束组,紫杉醇纳米胶束与NT21MP联合组对细胞增殖、迁移、侵袭、细胞周期的抑制,以及抗凋亡和逆转耐药作用更明显（P < 0.01）。结论紫杉醇纳米胶束可有效发挥逆转乳腺癌细胞耐药性的作用,且以紫杉醇纳米胶束联合多肽药物NT21MP作用更明显。     

乳腺癌中P21基因产物的表达及其临床意义

目的:通过探讨P21的表达与乳腺癌发生、发展、病理特征、淋巴结转移、预后的关系,为临床诊断和治疗提供新的参考指标。方法:应用免疫组化SABC法检测41例乳腺癌组织中P21基因产物的表达。结果:P21阳性产物染色定位于细胞核中,在乳腺癌中阳性率为80.5%。P21表达与ER、PR、淋巴结转移无相关性,与患者5年生存率密切相关(P>0.05)。结论:P21表达可作为判断乳腺癌预后的一个重要指标。     

21基因在乳腺癌患者复发风险评估中的临床意义

【摘要】 目的 探讨乳腺癌21基因复发风险评分（CRS）与临床病理特征的相关性及其在辅助化疗选择中的意义。 方法 回顾性分析2016年10月～2018年4月我院收治的接受21基因检测的Luminal分型乳腺癌患者162例。采用实时荧光聚合酶链反应（PCR）检测21基因的表达并计算其复发风险评分。据复发风险评分分为低危组（n=51）、中危组（n=80）和高危组（n=31）三组。单因素和多因素Logistic回归分析评估21基因复发风险评分与临床病理特征的相关性及评分等级对辅助化疗选择的影响。结果 单因素分析结果显示肿块大小（2=11528,P=0001）、Ki67表达水平（2=8273,P=0016）、分子分型（2=8864,P=0003）、CK5/6表达水平（2=30915,P＜0001）及组织学分级（2=19513,P＜0001）均影响乳腺癌患者复发风险。多因素条件logistic回归分析结果显示肿块大小（β=1175,SD=0467,Wald=6322,P=0012,OR=3238,95%CI：1296～8093）以及组织学分级（β=0671,SD=0315,Wald=4541,P=0033,OR=1957,95%CI：1055～3629）是21基因复发风险评分危险度分组的影响因素。与低危组比较,中、高危组接受化疗的患者更多（2=46048,P＜0001）。相较于21基因检测之前,低危的浸润性癌有较为明显的治疗决策改变。结论 21基因检测可为早期乳腺癌患者辅助化疗的选择提供参考;分子分型与组织学分级是影响21基因RS的独立影响因素。     

抑制miR-21表达对乳腺癌细胞株MDA-MB-231生存和凋亡的影响

microRNA(miRNA)是一种广泛存在的非编码小分子RNA,在重要生命过程如细胞生长、发育、代谢中等扮演着重要角色,其表达异常与肿瘤的发生发展关系密切,可能发挥促进或抑制癌细胞生长的重要作用。miR-21是一种较早在人体中发现、并且存在相对广泛的miRNA,在多种肿瘤细     

miR-21 targets Fas ligand-mediated apoptosis in breast cancer cell line MCF-7

Over-expression of Fas ligand （FasL） on tumor cell surface can induce the apoptosis of spe- cific activated tumor infiltrating lymphocytes （TILs） via the Fas/FasL pathway, leading to the formation of a site of immune privilege surrounding the tumor mass for escaping immune surveillance and pro- moting tumor proliferation, invasion and metastasis. The blocking effect of miR-21 on FasL-mediated apoptosis in breast cancers was investigated in this study. The expression levels of miR-21 and FasL in human breast carcinoma cell lines were detected by using RT-PCR and Western blotting. FasL as a tar- get gene of miR-21 was identified by Luciferase assay. The apoptosis of Jurkat T lymphocytes induced by MCF-7 cells was determined by flow cytometry. It was found that in four human breast cancer cell lines, FasL expression level in MCF-7 cells was the highest, while miR-21 was down-regulated the most notably. After miR-21 expression in MCF-7 cells was up-regulated, FasL was identified as a target gene of miR-21. When the effector/target （E/T） ratio of MCF-7 cells and Jurkat cells was 10：1, 5：1 and 1：1, the inhibitory rate of apoptosis of Jurkat T lymphocytes induced by MCF-7 cells was 95.81%, 93.16% and 91.94%, respectively. It is suggested that in breast cancers miR-21 expression is negatively associ- ated with FasL expression, and FasL is a target gene of miR-21, miR-21 targeting and regulating FasL-mediated apoptosis will bring us the possibility of a new tumor immunotherapy via breaking tu- mor immune privilege.     

miRNA-21对乳腺癌细胞放射敏感性的影响及其机制

目的：观察miRNA-21对乳腺癌细胞放射敏感性的影响,并初步探讨其作用机制。方法：乳腺癌T47D和MDA-MB-361细胞分别给予0.0、2.5和5.0 Gy γ射线照射,CCK8法检测细胞存活率,流式细胞术分析细胞周期进程,实时定量PCR法检测72 h内细胞中miRNA-21表达水平。T47D和MDA-MB-361细胞分别转染anti-miRNA-21序列（anti-miRNA-21组）和阴性对照序列（阴性对照组）,并设置未转染细胞为空白对照组,实时定量PCR法检测各组细胞中miRNA-21表达水平;经0.0和5.0 Gy γ射线照射后,CCK8法检测细胞存活率,流式细胞术分析细胞周期进程。结果：经5.0 Gy γ射线照射后,T47D细胞存活率明显高于MDA-MB-361细胞（P<0.05）;与0.0 Gy照射组比较,5.0 Gy照射组T47D和MDA-MB-361细胞G₂/M期细胞百分率均明显升高（P<0.05）,miRNA-21表达水平均明显升高（P<0.05）。与空白对照组比较,anti-miRNA-21组T47D和MDA-MB-361细胞中miRNA-21表达水平均明显降低（P<0.05或P<0.01）;给予5.0 Gy γ射线照射后,anti-miRNA-21组T47D和MDA-MB-361细胞存活率均明显降低（P<0.05或P<0.01）,T47D细胞G₂/M期细胞百分率明显降低（P<0.05）,而subG₁期细胞百分率明显升高（P<0.05）。结论：miRNA-21表达下调能够增强乳腺癌细胞的放射敏感性,其机制可能与抑制细胞周期G₂/M期阻滞有关。     

TSGF和CYFRA21-1联合检测在乳腺癌中的应用

目的探讨联合检测血清肿瘤相关物质群(TSGF)和CYFRA21-1的水平在乳腺癌的诊断、疗效观察中的价值。方法45例乳腺癌患者及健康对照48人的血清样品,分别用化学比色定量法和电化学发光免疫测定法测定TSGF和CYFRA21-1含量。结果与健康对照组相比,乳腺癌患者血清TSGF和CYFRA21-1的含量明显升高(P<0.05),2项标志物的阳性检出率分别是46.7%和24.4%,二者联合检测阳性率为60.0%,晚期乳腺癌患者TSGF和CYFRA21-1水平明显高于早期患者,乳腺癌患者血清TSGF和CYFRA21-1水平在治疗后与治疗前相比,有显著差异(P<0.05)。结论血清TSGF和CYFRA21-1对乳腺癌的诊断具有一定应用价值,联合检测不仅可以提供乳腺癌的阳性诊断率,对乳腺癌的疗效观察和术后监测也具有重要价值。     

Role of interleukin-8 in the progression of estrogen receptor-negative breast cancer

Background Estrogen receptor (ER) is a very important biomarker of breast cancer. ER deletion has been consistently associated with tumor progression, recurrence, metastasis and poor prognosis, but the biological mechanism is still unclear. ER negative breast cancer expresses high levels of interleukin-8 (IL-8). ER expression can downregulate IL-8 promotor activity. As a multifunctional cytokine, IL-8 has many important biological activities in tumor genesis and development. With the goal of investigating the role of IL-8 in ER-negative breast cancer progression, we applied RNA interference technology to specifically knockdown the IL-8 expression in ER-negative breast cancer cell line MDA-MB-231. Methods Interfering pRNA-IL-8 and the control was transfected into ER(-) MDA-MB-231. The proliferation, cell apotosis, and invasive ability were recorded in transfected, untransfected and negative transfected cells. These cells were injected into nude mice to assess tumorigenicity, proliferation, metastasis and microvessel density (MVD).Results In vitro, decreased expression of IL-8 was associated with reduced cell invasion (P＜0.001), but had no effect on cell proliferation (P＞0.05). In vivo, neutrophils infiltration was significantly inhibited in pRNA-IL-8 transfected cells compared with untransfected and negatively transfected cells (P＝0.001, P＜0.001). Less metastasis was found in transfected cells compared with negatively transfected cells (0% vs 80%, P＝0.048). Nevertheless, we observed less MVD in transfected cells compared with control in nude mice (P＜0.001).Conclusions IL-8 inhibits ER-negative breast cancer cell growth and promotes its metastasis in vivo, which may be correlated with neutrophils infiltration induced by IL-8.