海珠益肝胶囊对小鼠免疫性肝损伤的影响

目的:进一步证实海珠益肝胶囊对肝损伤小鼠的保肝降酶作用。方法:来用卡介苗 脂多糖(BCG LPS)造成免疫性肝损伤模型小鼠,观察本品对血清中ALT、AST活力单位、肝脾脏器系数和肝脏病理组织学损伤程度的影响。结果:药物能降低血清中ALT、AST活力单位(P<0.01);减小肝脾肿大及脏器系数(P<0.01);减轻肝组织病理损伤程度。结论:海珠益肝胶囊对BCG LPS所致肝损伤小鼠有明显保肝降酶作用。     

海珠益肝胶囊抗乙型肝炎病毒疗效观察

目的:观察海珠益肝胶囊的抗乙型肝炎病毒作用。方法:应用海珠益肝胶囊治疗慢性乙型肝炎患者73例,并设赛若金对照组37例。结果:治疗组HBeAg、HBV DNA的阴转率为50％、59.7％,HBV DNA定量水平明显下降,与对照组疗效相当。结论:海珠益肝胶囊能够抑制乙肝病毒的复制,有较好的抗乙肝病毒作用。     

海珠益肝胶囊抗鸭乙型肝炎病毒的实验研究

目的:研究海珠益肝胶囊对鸭乙型肝炎的抗病毒作用.方法:使1日龄北京麻鸭感染鸭乙型肝炎病毒(DHBV),7天后用Dot-EIA法筛选出DHBsAg强阳性鸭.随机分成5组:海珠益肝胶囊大、中、小3个剂量组、以生理盐水灌胃的模型组和以无环鸟苷(ACV)灌胃的对照组.每组6只,各组雏鸭均灌胃10天.用药前、用药5天、10天及停药后3天分别采血,采用斑点杂交法检测血清DHBV DNA.结果:用海珠益肝胶囊5天、10天时鸭血清DHBV DNA其OD值均明显低于给药前,差异有显著性意义(P＜0.05).与对照组相比,差异无显著性意义(P＞0.05).结论:海珠益肝胶囊有一定的抑制DHBV DNA复制的作用.     

海珠益肝胶囊对慢性乙型肝炎患者血清肿瘤坏死因子-α及可溶性白细胞介素-2受体的影响

目的：观察海珠益肝胶囊对慢性乙型肝炎患者TNF—α及sIL-2R的影响，并探讨其机理。方法：选择慢性乙型肝炎患者60例，随机分为海珠益肝胶囊组及干扰素组，治疗3个月，并同健康体检者作对照研究，观察治疗前后血清TNF-—α及sIL-2R的变化。结果：海珠益肝胶囊组及干扰素组治疗后血清清TNF—α及sIL-2R水平较治疗前显著下降(P＜0．01)；两组治疗后TNF—α及sIL-2R水平差异无显著性意义(P＞0．05)。结论：海珠益肝胶囊及干扰素均可降低血清TNF—α及sIL—2R的水平，通过影响细胞因子水平，发挥抗病毒作用，是海珠益肝胶囊抗病毒作用的机制之一。     

海珠益肝胶囊对慢性乙型肝炎患者TNF-α、sIL-2R的影响

我们采用国家十五攻关的科研用药海珠益肝胶囊治疗慢性乙型肝炎，观察患者血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）、可溶性白细胞介素2受体（sIL-2R）的变化并与干扰素治疗的患者和健康体检人员进行了比较。     

海珠益肝加味方对免疫性肝损伤小鼠细胞因子的影响

目的:观察海珠益肝加味方对刀豆球蛋白A(Con A)诱导建立的免疫性肝损伤小鼠细胞因子IL-4、IL-6、INF-γ、TNF-a的影响,探讨其作用机制。方法:将40只昆明小鼠随机分为正常组、模型组、醋酸强的松组、海珠益肝加味方组,采用尾静脉注射Con A建立免疫性肝损伤小鼠模型,眼球取血,检测小鼠血清IL-4、IL-6、IFN-γ、TNF-α的水平。结果:与正常组比较,模型组小鼠外周血IL-4、IL-6水平明显降低(P<0.01),IFN-γ、TNF-α水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,醋酸强的松组、海珠益肝加味方组小鼠外周血IL-4、IL-6的水平明显升高(P<0.01),IFN-γ、TNF-α水平显著降低(P<0.05)。结论:海珠益肝加味方能升高免疫性肝损伤小鼠细胞因子IL-6、IL-4的分泌水平,降低IFN-γ、TNF-α的水平,恢复Th1/Th2细胞之间的平衡,具有保护肝细胞的作用,可能是其作用机制之一。     

猪供心热缺血移植后对细胞凋亡和Bcl-2、Bax、Fas表达的影响

目的:研究供心常温热缺血后细胞凋亡和Bcl2、Bax、Fas蛋白表达的变化。方法:利用猪原位心脏移植实验方法,猪18只随机分为3组,对照组（C,n=6）灌注低温保护液后切取供心,4℃保存4h;热缺血1组（E1,n=6）常温阻断主动脉缺血5min后,灌注低温保护液后切取供心;热缺血2组（E2,n=6）常温阻断主动脉缺血10min后,灌注低温保护液后切取供心。3组低温保存供心4h后分别行原位心脏移植。供心移植2h后取左心室心肌检测心肌细胞凋亡和Bcl2、Bax、Fas蛋白的表达。结果:供心移植2h后,E1、E2组心肌细胞凋亡显著高于C组（P<0.01）,E2组心肌细胞凋亡显著高于E1组（P<0.01）,Bcl2蛋白表达C组高于E1、E2组（P<0.01）,Bax和Fas蛋白表达C组低于E1、E2组（P<0.01）。结论:供心热缺血移植后的心肌细胞凋亡增加,Bcl2、Bax、Fas参与了凋亡发生。     

益肝消癥方对大鼠肝癌前病变肝细胞凋亡因子Bcl-2、Bax mRNA及蛋白质表达的影响

目的:观察益肝消癥方对二乙基亚硝胺诱导的大鼠肝癌前病变肝细胞凋亡因子Bcl-2、Bax mRNA及蛋白质表达的影响。方法:将40只Wistar雄性大鼠随机分为对照组10只、模型组15只和益肝消癥组15只,除对照组外,其余各组大鼠以二乙基亚硝胺腹腔注射诱导肝癌前病变模型,持续14周。第8周起,每天分别以生理盐水、益肝消癥颗粒的水溶剂给予相应组大鼠灌胃给药,第14周末给药后取材,检测大鼠0、7、14周体重,Bcl-2、Bax mRNA及蛋白质表达,观察肝脏病理情况。结果:益肝消癥方可改善肝癌前病变大鼠一般状况、肝脏病理,下调Bcl-2、Bax mRNA、Bax蛋白表达及Bax/Bcl-2比值。结论:益肝消癥方通过Bcl-2/Bax途径抑制肝细胞凋亡,减轻肝星状细胞增殖,从而对大鼠肝癌前病变具有一定改善作用。     

三氧化二砷诱导肝癌HepG2细胞凋亡作用

目的 探讨三氧化二砷（As2O3）诱导肝癌HepG2细胞凋亡作用。方法 应用普通光学显微镜、荧光显向镜和流式细胞仪观察As2O3对HepG2细胞株的形态学改变和诱发凋亡率。结果 As2O3作用于细胞后,可看到较典型的细胞凋亡形态学改变,细胞体积缩小,染色质固综合成斑块状,呈半月型紧贴于核膜周边,核碎裂,凋亡小体形成等,AO/EB荧光染色法显示。细胞凋亡率为4.3%-9.1%.As2O3诱导HepG2细胞凋亡作用呈时间依赖性,最佳浓度为2umol/L。流式细胞仪DNA直方图上呈现典型的亚二倍体凋亡峰。As2O3主要作用于细胞周期的G2/M期。结论 As2O3具有诱导HepG2细胞凋亡作用,存在治疗肝癌的潜在价值。     

丙型肝炎病毒1b基因型核心蛋白对HepG2细胞Bax与Bcl-2基因表达的影响

目的研究丙型肝炎病毒（HCV）1b基因型核心蛋白（C）对HepG2细胞B细胞淋巴瘤-2基因（Bcl-2）与Bcl-2相关X蛋白（Bax）表达的影响,以探索1b型HCV C蛋白与HepG2细胞凋亡的关系。方法利用RT-PCR扩增出HCV-1b-C基因,经双酶切后连接pcDNA3.1（-）,成功构建真核表达载体pcDNA3.1（-）/HCV-1b-C。利用脂质体转染HepG2细胞,RT-PCR及Western Blot检测其mRNA及蛋白的表达,RT-PCR及Western Blot检测转染成功后HCV-1b-C对HepG2细胞Bax与Bcl-2表达的影响,并设转染空质粒组及未处理组作对照。结果成功构建真核表达载体pcDNA3.1（-）/HCV-1b-C;瞬时转染HepG2细胞,成功表达HCV C mRNA及蛋白;转染C基因组的Bax的mRNA及蛋白相对表达量减少,与转染空质粒组及未处理组比较差异均有统计学意义（P〈0.01）;转染C基因组的Bcl-2的mRNA及蛋白相对表达量增多,与转染空质粒组及未处理组比较差异均有统计学意义（P〈0.01）。结论 1b基因型HCV C蛋白转染HepG2细胞会导致Bax表达减少及Bcl-2表达增多,降低Bax/Bcl-2比值,可能是抑制HepG2细胞凋亡的机制之一。     

缬沙坦对2型糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及调控基因Bcl-2、Bax的影响

目的：观察缬沙坦对2型糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及其调控基因Bcl-2、Bax的影响。方法：随机选择15只SD雄性大鼠,以高糖高脂饲料喂养6周后,腹腔注射STZ30mg／kg;2周后血糖升高≥16mmol／L者12只,随机又分为2型糖尿病组（n=6）和2型糖尿病缬沙坦治疗组（简称治疗组,n=6）,治疗8周,另选6只健康SD雄性大鼠为空白对照组,查内生肌酐清除率（Ccr）,24h尿白蛋白的排泄率（Uaer）。流式细胞术检测大鼠肾脏细胞凋亡率。免疫组化法检测Bcl-2、Bax的表达。结果：8周后,糖尿病组大鼠肾小球细胞外基质增生,部分肾小管轻度萎缩或管腔扩张,上皮细胞肿胀,胞浆内可见脂肪空泡变性,但治疗组较糖尿病组病变减轻。细胞凋亡率糖尿病组较治疗组高（26．54±2．67VS20．05±2．03,P〈0．05）;Ccr糖尿病组较治疗组低（O．021±0．001VS0．065±0．004ml／min,P〈0．05）,Uaer糖尿病组高于对照组和治疗组（O．150±0．004VS0．081±0．001,0．086±0．002mg,P〈0．05）。治疗组和糖尿病组肾小管均较对照组的Bcl-2和Bax阳性表达高（P-40．05）,治疗组肾小管Bcl-2较糖尿病组的阳性表达高,而Bax阳性表达低（P〈O．05）。结论：缬沙坦通过增加Bcl-2／Bax在肾小管的比例,使糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡率减低,保护肾功能。     

安心颗粒对心力衰竭大鼠细胞凋亡基因Bcl-2及Fas表达的影响

目的探讨安心颗粒防治心力衰竭的作用机制。方法将50只雌性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、卡托普利组、安心颗粒小剂量组、安心颗粒大剂量组,每组10只。采用阿霉素腹腔注射造模,各用药组同时灌胃给药。连续给药6周后,分别用TUNEL法检测大鼠心肌细胞凋亡,用免疫组化法检测大鼠心肌Bcl-2,Fas蛋白的表达。结果安心颗粒能减少心肌细胞凋亡指数,促进Bcl-2蛋白表达,抑制Fas蛋白的过渡表达,其抑制细胞凋亡的作用与卡托普利相当。结论安心颗粒能够上调心肌细胞Bcl-2蛋白、下调Fas蛋白的表达,抑制心肌细胞凋亡,这可能是安心颗粒防治心力衰竭的作用机制之一。     

鼠龄对急性心肌梗死大鼠Bcl-2和Bax表达的影响

目的 建立成年和老年Wistar大鼠急性心肌梗死模型,比较鼠龄对大鼠冠状动脉(冠脉)结扎后不同时间点的凋亡指数及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的影响.方法 115只6～24月龄大鼠中,95只结扎冠脉左前降支,80只(成年、老年大鼠各40只)术后存活,根据鼠龄分为老年心肌梗死组(40只)和成年心肌梗死组(40只),按结扎前降支后的1 h、3 h、5 h、1 d和7 d各分为5组(每组8只).假手术老年组和假手术成年组各10只.心肌梗死组分别于冠脉结扎后1、3、5 h和1、7d时记录血流动力学参数,包括心率、左室收缩压(LVSP)、左室终末舒张压(LVEDP)和左室内压最大收缩和舒张速率(±dp/dtmax).采用伊文蓝-红四氮唑(TTC)染色和原位末端标记(TUNEL)法检测心肌坏死和凋亡程度.免疫组化染色检测心肌内Bcl-2和Bax的形成.结果 大鼠心肌在冠脉结扎后的1 h内即有凋亡出现,并且凋亡达高峰的时间老年心肌梗死组较成年心肌梗死组早.在冠脉结扎3 h,老年心肌梗死组与成年心肌梗死组的凋亡指数分别为(51.90±23.15)%与(18.67±17.15)%,差异有统计学意义(P<0.01).Bcl-2蛋白的表达值老年假手术组和成年假手术组分别为(2.7±0.9)分和(1.8±0.8)分,差异有统计学意义(P<0.05).Bax蛋白的表达两组分别为(6.2±2.9)分和(4.2±1.5)分,差异有统计学意义(P<0.05).结论 老年大鼠抵抗心肌缺血的能力差,鼠龄可能会改变Bcl-2和Bax蛋白的表达而增加心肌细胞凋亡.     

黄芪多糖对肝癌HepG2细胞的抑制作用及其机制

目的 研究黄芪多糖(APS)和5-氟尿嘧啶(5-fu)联合使用对肝癌HepG2细胞的生长抑制及其作用机制.方法 用RPMI1640培养液对低分化人肝癌细胞株HepG2进行传代培养,取对数生长期细胞, 分为5组:A组:对照组,不含药物,使用同体积的磷酸盐缓冲液(PBS);B组:APS组,只给予100 μg/mlAPS;C组:5-fu组,只给予100 μg/ml 5-fu;D组:5-fu+低浓度APS组,给予100 μg/ml 5-fu+100 μg/ml APS;E组:5-fu+高浓度APS组,给予100 μg/ml 5-fu+200 μg/ml APS.用噻唑蓝(MTT)法观察APS及5-fu对HepG2细胞增殖的影响;用流式细胞术方法测药物作用后细胞周期变化和细胞凋亡;western-blot检测凋亡相关蛋白表达.结果 APS和5-fu联合使用可抑制HepG2细胞的增殖,效应呈浓度和时间依赖性;APS和5-fu联合使用阻滞HepG2细胞周期于G1期;并可诱导HepG2细胞凋亡;APS和5-fu联合使用,可明显增高肝癌HepG2细胞中caspase-3、caspase-9蛋白的表达,同时检测到抑凋亡蛋白Bcl-2表达显著降低.在只使用5-fu的实验组细胞中均未检测到上述变化.结论 APS和5-fu联合使用能抑制肝癌HepG2细胞株的增殖,其机制之一是影响细胞周期使之阻滞于G1期,激活了细胞凋亡系统,从而诱导细胞凋亡.     

依那普利对心力衰竭大鼠肾细胞凋亡及凋亡基因Bcl-2、Bax的影响

心力衰竭常并发肾功能不全，为心力衰竭的治疗带来困难。但有关心力衰竭易引起肾脏损害的分子机制不清。有报道慢性心脏后负荷增加引起心功能不全时存在肾细胞凋亡，但有关血管紧张素转化酶抑制剂能否减轻心力衰竭并发的肾脏损害未见报道。我们用依那普利对压力负荷性心力衰竭大鼠肾     

热休克蛋白70对供心细胞Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的探讨热休克蛋白70(HSP70)对大鼠供心心肌细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法Wistar大鼠18只,分为两组:对照组(C,n=9),腹腔注射生理盐水0.5ml,24h后取离体心脏灌注HTK心脏保护液,4℃保存3h后建立Langendorff离体心脏灌注模型,灌注KH液2h;实验组(E,n=9)腹腔注射重酒石酸去甲肾上腺素(溶于生理盐水中)3.1μmol/kg(0.53mg/kg),腹腔注射24h后取离体心脏,处理方法同C组。运用免疫组化SP法测定心肌HSP70含量、Bcl-2、Bax蛋白的含量以及相关生化指标并进行统计学处理。结果HSP70含量E组(17.78±1.82)较C组(5.22±1.05)明显增高(P<0.01),Bcl-2的表达E组(41.88±5.09)较C组(31.36±3.27)明显增多(P<0.01),Bax的表达E组(22.61±3.49)较C组(40.52±4.17)明显减少(P<0.01),Bcl-2/Bax比值E组(1.86±0.11)较C组(0.77±0.01)明显增高。生化指标E组明显优于C组。结论心肌HSP70高表达对供心具有明显的保护效应,其促进心肌抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,减少促凋亡蛋白Bax表达,增加Bcl-2/Bax比率,以此抑制心肌细胞凋亡,从而发挥其对供心心肌细胞保护作用。     

海水对兔眼视网膜细胞凋亡和Bcl-2/Bax表达的影响

实验组兔眼注入0.5 ml实验用人工海水至玻璃体中央部,对照组注入0.5 ml平衡盐溶液.分别于注入后30 min及2、6、12、24 h采用TUNEL法检测视网膜凋亡细胞,免疫组化法检测Bcl-2、Bax的表达水平.结果 对照组视网膜中基本未见TUNEL阳性细胞,实验组视网膜神经节细胞、内核层细胞可见TUNEL阳性细胞,12 h达到高峰.Bcl-2/Bax蛋白的比率在伤后开始升高,2 h组开始下降.认为海水进入眼球后视网膜组织细胞存在异常凋亡,Bcl-2/Bax比率与视网膜细胞数的减少有关.     

一氧化氮对血管平滑肌细胞中Bcl-2、Bax、P53和Fas蛋白表达的影响

一氧化氨能抑制血管平滑肌细胞增殖和诱导其调亡。为深入了解一氧化氨对血管平滑肌细胞的生物学效应及其作用机制。本实验应用ＡＣＡＳ５７０共聚焦激光扫描显微镜系统，通过荧光免疫细胞化学方法，对一氧化氮作用下血管平滑肌细胞中调亡相关蛋白Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ、Ｐ５３及Ｆａｓ的表达进行了定量检测。结果发现，一氧化氮能使血管平滑肌细胞中Ｂｃｌ－２表达降低，而使Ｂａｘ、Ｐ５３和Ｆａｓ表达升高。这些结果进一步证明了一氧化氮能诱导血管平滑肌细胞凋亡。同时，也说明Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ、Ｐ５３和Ｆａｓ可能参与一氧化氨诱导的血管平滑肌细胞增殖抑制及调亡发生。     

益肝乐胶囊治疗酒精性脂肪肝的疗效

目的 探讨益肝乐胶囊治疗酒精性脂肪肝的临床疗效.方法 选择122例酒精性脂肪肝门诊患者,随机分为治疗组和对照组,在常规治疗基础上分别应用益肝乐胶囊和葵花护肝片,疗程均为3个月.治疗前及治疗开始后每2 w详细记录患者临床症状、体征及化验指标.结果 治疗组在降低ALT、AST、γ-GT作用方面明显优于对照组(P<0.05).治疗组临床症状、体征也有明显改善,与对照组比较有显著性差异(P<0.05).结论 益肝乐胶囊治疗酒精性脂肪肝有良好的疗效.     

灵丹王养肝胶囊对小鼠NK细胞活性的影响

目的：研究养肝前囊对NK细胞活性的影响,方法：137C辐射（2．5Gy)后造成机体的免疫功能下降,NK细胞活性降低,分组：不同剂量灵丹王养胶囊10g/kg,5g/kg给药组,黄芪组,对照组,分析治疗前后NK细胞水平,结果：不同剂量灵丹王养肝胶囊给药组与黄氏组,其NK细胞水平平均比对照组为高,以10g/kg组为最佳,其值接正常小鼠NK细胞活性水平,经统计学处理与对照组相比,差别有显著意义。而5g/kg组和黄芪组与对照组比,则无统计学意义。结论：灵丹王养肝胶囊能提高137Cs照射（2．5Gy)小鼠的NK细胞活性,而以剂量10g/kg为最佳。