大鼠急性缺血性肾衰竭不同时段肾功能变化

目的观察大鼠肾脏缺血/再灌注损伤（IRI）模型不同时段肾功能、肾脏/体重指数变化情况。方法建立大鼠肾脏IRI模型,监测大鼠术后不同时段血清尿素氮（BUN）、肌酐（SCr）、血钾及肾脏/体重指数,了解IRI大鼠肾功能变化情况。结果 （1）术后12 h肾脏/体重指数显著升高,至手术后48 h达高峰,于手术后72 h开始回落。（2）术后6 h血清BUN、SCr、血钾显著升高,至术后48 h达高峰,从术后72 h开始回落。结论 IRI大鼠模型手术后肾脏/体重指数、血清BUN、SCr、血钾均有不同程度的升高,高峰期均在术后48 h,提示肾功能损害最严重是在手术后48 h。     

原位肝移植缺血再灌注损伤对大鼠肾脏组织细胞凋亡的影响

目的对比研究大鼠原位肝移植缺血再灌注损伤对肾脏组织细胞凋亡的影响。方法参照Kamada"二袖套法",建立Wistar大鼠原位肝移植动物模型,并以假手术组大鼠为对照组。分别于术后1、3、6、12、24h处死两组动物,检测血清尿素氮(BUN)和肌酐(CREA)水平变化。应用免疫组化(SP)法检测肾脏凋亡细胞的Fas蛋白表达,应用流式细胞技术检测肾脏细胞凋亡。结果肝移植组及对照组中BUN及CREA从术后1h开始上升,12h时达到高峰。两组肾脏组织细胞术后1h即出现细胞凋亡,12h时达到高峰。结论原位肝移植缺血再灌注损伤可致肾脏细胞凋亡,是肾脏细胞早期死亡的主要形式。     

盐酸曲美他嗪预处理对大鼠肾脏急性缺血再灌注损伤的影响

目的：观察盐酸曲美他嗪（ TMZ）预处理对大鼠肾组织急性缺血再灌注损伤（ IRI）的影响。方法选择SD大鼠90只,随机均分为A、B两组：A组给予TMZ 10 mg／kg灌胃5 d后,建立缺血再灌注（IR1）、缺血再灌注后处理（IPO1）、假手术（S1）模型;B组生理盐水灌胃5 d后,建立缺血再灌注（IR2）、缺血再灌注后处理（IPO2）、假手术（S2）模型。检测各组末次恢复肾脏血供0、6、12、24、48 h后血清SCr、BUN、NGAL、IL-18水平;HE染色光镜下观察缺血-再灌注石蜡包埋切片肾组织损伤形态学改变。结果 IR1组与IPO1组相比,在各时间点各指标均无显著性差异。 IR1组与IR2组相比,在6 h时IR2组的NGAL、IL-18、肾小管损伤程度评分上升,12 h时BUN亦上升,24 h时IR2组的各项指标均高于IR1组,48 h时BUN、SCr高于IR1组（P均＜0．05）。 IPO1组与IPO2组相比,在6 h时IPO两组的NGAL明显上升,12 h时除SCr外均上升,24 h时除NGAL外其他指标均高于IPO1组,48 h时BUN、SCr、肾小管损伤评分程度高于IPO1组（ P均＞0．05）。 IR1组与IPO2组相比,在6 h时IPO2组NGAL上升,12 h时除SCr外其他指标均高于IR1组,48 h时SCr仍显著高于IR1组（P均＞0．05）。结论在大鼠肾脏IRI发生之前即预防性使用TMZ可减轻其肾功能损伤。     

铁代谢在大鼠缺血再灌注急性肾损伤后的变化

目的:研究SD大鼠肾缺血再灌注损伤(IRI)后铁代谢的变化特点,探讨IRI后铁调素和铁代谢的变化及意义。方法:雄性SD大鼠48只,随机分为对照组(n=6)和IRI模型组,模型组分别在IRI后1h、4h、8h、12h、16h、20h、24h 7个时间点(n=6/组),检测大鼠血生化及铁代谢指标,以及肝组织铁调素mRNA和肾组织膜转铁蛋白1(FPN1)mRNA和蛋白的表达水平。结果:与对照组相比,IRI组肾组织铁含量、血清铁、铁蛋白在再灌注早期升高(P0.05),并随再灌注时间的延长逐渐下降。IRI组肝组织铁调素mRNA表达水平在再灌注早期明显升高,再灌注4h达峰值后开始下降,而血清铁调素于再灌注8h后升高,并于再灌注16h达峰值后开始下降,两者在再灌注24h后仍高于对照组(P0.05)。IRI组肾组织FPN1 mRNA和FPN1蛋白的表达水平随再灌注时间的延长逐渐下降,两者表达水平明显低于对照组(P0.05)。结论:大鼠肾脏IRI过程中伴有铁代谢的紊乱,铁调素和肾脏FPN1可能参与了IRI过程中铁稳态的调控。     

达拉菲尼对小鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨达拉菲尼对小鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)的保护作用及机制。方法:将24只C57BL/6小鼠随机分为4组:假手术组(sham组);缺血再灌注组(IRI组),夹闭双侧肾蒂30 min再灌注24h;达拉菲尼组(DAB组),仅与IRI组在相同时间灌胃给予相同量的达拉菲尼;达拉菲尼预处理+缺血再灌注组(DAB+IRI组),灌胃给予达拉菲尼2h后进行IRI造模,每组6只。收集小鼠IRI 24h后的血清及肾脏组织。采用相应试剂盒检测各组肾功能血清肌酐(SCr)和血尿素氮(BUN)水平,HE及PAS染色比较各组肾脏病理学改变,Western Blot及qRT-PCR检测肾小管损伤标志物中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)和肾损伤分子1(KIM-1)的蛋白及mRNA水平,qRT-PCR检测炎症因子白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的mRNA水平,免疫组织化学染色检测肾脏组织中TNF-α蛋白表达,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测肾组织细胞死亡情况,Western Blot检测肾脏组织中程序性坏死(necroptosis)通路相关的受体相互作用蛋白1(RIP1)、受体相互作用蛋白3(RIP3)、磷酸化的受体相互作用蛋白3(pRIP3)、混合系列蛋白激酶复合物(MLKL)、磷酸化的混合系列蛋白激酶复合物(pMLKL)蛋白水平。结果:与sham组相比,IRI组SCr、BUN水平升高(P0.05),肾组织病理损伤严重,小管损伤标志物NGAL和KIM-1蛋白和mRNA水平升高,炎症因子IL-6以及TNF-αmRNA含量增加,肾脏组织TNF-α蛋白表达升高,肾脏组织细胞死亡增多,RIP1、RIP3、pRIP3、MLKL以及pMLKL蛋白表达增加;与IRI组比较,DAB+IRI组减轻肾功能、肾组织损伤,减少NGAL、KIM-1的蛋白和mRNA表达水平,下调IL-6和TNF-αmRNA水平,减少肾脏组织中TNF-α蛋白表达,抑制RIP3、pRIP3及pMLKL的蛋白表达(P均0.05),而RIP1和MLKL蛋白改变不明显。DAB组与sham组间各指标无统计学差异。结论:达拉菲尼通过抑制RIP3介导的程序性坏死从而对小鼠肾脏缺血再灌注损伤起保护作用。     

p21和PCNA在大鼠肾缺血再灌注损伤中的表达及氟伐他汀对其表达的调节

目的 探讨大鼠肾缺血再灌注损伤(renal ischaemia reperfusion injury,IRI)中细胞周期抑制蛋白p21和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)在肾小管上皮细胞中表达的动态变化及氟伐他汀(Fluvastatin)对p21和PCNA表达的影响.方法 将90只大鼠随机分为3组:假手术组(sham组),IRI组,Fluvastatin 治疗组(Flu组),每组30只.术前3 d给予Fluvastatin(2 mg/kg)灌胃.用微血管夹夹闭双侧肾血管,一小时后松开,造成缺血再灌注肾病模型,术后0、24、48、72 h、5 d和7 d处死大鼠,取肾脏做组织学检查,检测p21和PCNA在肾组织内表达的部位、程度.结果 (1)大鼠肾脏缺血再灌注后Flu组各时间点的血清尿素氮、肌酐水平均低于IRI组(P＜0.05).组织学检查Flu组有所减轻.(2)PCNA在IRI组72 h表达最强,此后逐渐下降,7 d最低;Flu组PCNA表达在24、48 h少于IRI组(P＜0.05),72 h、5 d、7 d PCNA的表达与IRI组比较无统计学意义.(3)p21在Sham组低表达;IRI组24 h表达开始升高,72 h开始下降(P＜0.05).Flu组24 h、48 h表达比IRI组更为显著(P＜0.05).结论 p21和PCNA两者的动态平衡与肾小管上皮细胞DNA的复制和修复密切相关.氟伐他汀可以进一步增强p21的表达,并使PCNA的表达受到抑制,从而发挥肾保护作用.     

17β-雌二醇对老年急性肾衰大鼠肾脏保护作用的研究

目的　观察 1 7β-雌二醇对缺血再灌后急性肾衰 (ARF)大鼠的肾脏保护作用以及对大鼠内皮素 - 1 (ET- 1 )的影响。方法　雄性 Wistar2月龄及 2 4月龄大鼠各 1 5只 ,分为假手术组、未治疗的 ARF组 (未治疗组 )、ARF1 7β-雌二醇 (1 0 0 μg/ kg)治疗组 (治疗组 )。大鼠缺血再灌注后 (包括假手术组 )立即放入代谢笼收集 2 4 h尿 ,测排尿率 (UF)。留尿后 5 h采血测定尿素氮 (BUN) ,肌酐 (Cr)。肾组织内 ET- 1含量采用放免法测定。结果　青年及老龄鼠未治疗组的上述指标较假手术组升高 (P<0 .0 1 ) ,治疗组老年鼠及青年鼠的上述指标较未治疗组降低 (P<0 .0 1 ) ,各组老年鼠 BUN、ET- 1较青年组增高 (P<0 .0 5)。结论　 1 7β-雌二醇对缺血再灌后青年及老年鼠肾脏均有保护作用 ,其机制可能是抑制缺血再灌后 ET- 1的产生。老龄鼠较青年鼠肾储备功能下降 ,ET- 1升高 ,缺血再灌注后肾脏损伤重并且恢复慢     

阿魏酸钠对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的作用

目的建立大鼠肾脏缺血再灌注损伤（IRI）模型，观察阿魏酸钠（SF）对大鼠肾脏是否具有保护作用，并初步探讨其机制。方法32只雄性Wistar大鼠，随机分为4组：①正常组，②假手术组，③模型组，④治疗组，测定各组血清肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）及肾脏组织中丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）水平，观察肾功能变化、组织过氧化情况及机体抗氧化能力；光镜下观察肾脏组织形态学变化。结果模型组各项指标与假手术组相比有显著差异，说明模型制作成功。同时治疗组可明显降低SCr、BUN及MDA含量，并升高SOD水平，与模型组相比有显著性差异，而且肾脏组织的病理改变减轻。结论SF对大鼠肾脏IRI有保护作用，其机制可能与对抗自由基、抗脂质过氧化等作用有关。     

绿茶多酚对高脂-高盐-高糖诱致大鼠高血压性肾损伤的保护作用

目的 研究绿茶多酚(GTPs)对高脂-高盐-高糖诱致大鼠高血压性肾损伤的保护作用.方法 采用高脂-高糖-高盐饲料喂养大鼠建立高血压动物模型,以GTPs为受试物,持续实验12 w.分别在0,4,8,10,12 w末测定血压,12 w末留取大鼠尿液测定尿微量白蛋白(mALB)含量,取血测定血脂、血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)和肾脏组织丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性,并取部分肾脏皮质做病理学检查.结果 高脂-高糖-高盐饲料喂养12 w后,模型组大鼠血压、TC、TG、LDL-C、SCr、BUN、肾组织MDA和24 h尿mALB水平均较正常对照组明显升高(P＜0.05);血HDL-C水平和肾组织SOD、GSH-Px、CAT活性明显降低(P＜0.05);并出现明显的肾脏病理性损伤;GTPs高、低剂量组大鼠血压、TC、LDL-C、BUN和24 h尿mALB水平及高剂量组血TG、Scr、肾组织MDA含量均较模型组降低(P＜0.05),高、低剂量组血HDL-C水平和肾组织CAT活性及高剂量组肾组织SOD活性均明显升高(P＜0.05);肾脏组织病理性损伤减轻.结论 GTPs对高脂-高盐-高糖诱致的大鼠高血压性肾损伤有保护作用,其作用机制与GTPs降压调脂、提高机体肾脏组织抗氧化能力有关.     

大鼠缺氧缺血后海马神经元凋亡及凋亡抑制蛋白XIAP表达的变化

目的 探讨新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后海马CA1区神经元凋亡及X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)表达的变化规律.方法选择48例新生Wistar大鼠为HIBD组,并选择12只新生大鼠分为假手术组(n=6)和正常对照组(n=6).HIBD制模后3h、6h、12h、24 h、48 h、72 h、7 d、14 d处死取材,每次处死6只,采用流式细胞技术检测3组大鼠海马神经元的凋亡率,并应用免疫组织化学染色方法检测各组海马CA1区XIAP的表达变化情况.结果 与假手术组相比,HIBD组缺氧缺血后3h海马神经元凋亡率即开始升高,但差异无统计学意义(P＞0.05);于缺氧缺血后12h凋亡率显著升高(P＜0.05),48 h时达高峰,72 h时开始下降,7d时明显低于高峰水平(P＜0.05),而与假手术组无显著差异,14 d时基本恢复至假手术组水平.正常对照组和假手术组海马CA1区有极少量XIAP阳性表达细胞.HIBD组于缺氧缺血3h时XIAP阳性表达显著升高(P＜0.05),之后逐渐升高,在48 h时达到高峰,72 h时开始逐渐下降,7d时已明显低于高峰水平(P＜0.05),但仍明显高于正常对照组和假手术组水平,在14 d时略高于正常对照组和假手术组,但差异无统计学意义(P＞0.05).XIAP蛋白表达与HIBD后各时间点阳性凋亡细胞出现呈负相关(r=-0.564,P＜0.05).结论 XIAP蛋白的过度表达在脑缺氧缺血后细胞凋亡的调控过程中起着重要作用,对HIBD损伤的脑神经细胞具有保护作用.