高效液相色谱法同时测定复方丁卡因擦剂中氢化可的松和丙酸睾酮的含量

目的建立高效液相色谱同时测定复方丁卡因擦剂中氢化可的松和丙酸睾酮的方法。方法采用Alltima C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-纯水为流动相,梯度洗脱,流速1.0 m L·min~(-1),检测波长242 nm。结果氢化可的松和丙酸睾酮在各自浓度均与峰面积呈良好的线性关系,r分别为1.000和0.9998;精密度和稳定性良好,RSD均<2.0%;氢化可的松和丙酸睾酮的平均回收率均>100%(n=3),RSD均<1.5%,表明回收率良好。结论该方法准确、简单、快速,可同时测定复方丁卡因擦剂中氢化可的松和丙酸睾酮的含量。     

以睾酮为探针的HPLC法测定CYP3A1酶活性的方法学研究

目的:建立以睾酮为探针测定大鼠CYP3A1酶活性的方法。方法:采用高效液相色谱法,以咪达唑仑为内标,样品用乙酸乙酯萃取后重溶进样,进行睾酮特异代谢物6-β-羟基睾酮(6-β-OHT)浓度测定的方法学研究。色谱柱为HypersilBDSC18,流动相为甲醇-Na2HPO4水溶液(pH8.25)(60:40),流速为1mL.min-1,检测波长为254nm。结果:6-β-OHT检测浓度线性范围为1.25～100μg.mL-1(r=0.9998),最低定量限为1.25μg.mL-1;萃取回收率为83.9%～87.4%(RSD≤8.82%),相对回收率为100.4%～103.4%(RSD≤7.05%);平均日内、日间RSD均<10%;样本室温放置4h稳定性良好。结论:所建立的方法快速、简便、重复性好,适用于体外定量测定睾酮及其代谢物6-β-OHT,也可用于体外评估CYP3A1酶的活性。     

HPLC法同时测定氯霉素氢化可的松搽剂中氯霉素和氢化可的松的含量

目的 建立同时测定氯霉素氢化可的松搽剂中氯霉素和氢化可的松的含量测定方法.方法 采用高效液相色谱法.色谱柱为Agilent TC-C18,流动相为甲醇-水(60∶40),流速为1mL·min-1,检测波长为240nm.结果 氯霉素和氢化可的松浓度分别在19.06～762.36μg·mL-1和2.01～80.52μg·mL-1内线性关系良好,r分别为0.9997和0.9999;平均回收率分别为101.8%和102.0%,RSD分别为1.46%和1.24%(n=9).结论 该方法简单、快速、准确,可用于同时测定氯霉素氢化可的松搽剂中氯霉素和氢化可的松的含量.     

HPLC法测定复方环丙沙星滴耳液中环丙沙星和氢化可的松的含量

建立HPLC法测定复方环丙沙星滴耳液中盐酸环丙沙星和氢化可的松的含量.采用Luna C18色谱柱,流动相为甲醇-乙腈-0.34%磷酸二氢钾(251560),流速1.0mL·min-1,检测波长240nm.盐酸环丙沙星(按环丙沙星计)和氢化可的松的线性范围分别为0.1110～0.555mg·mL-1,0.0108～0.0540mg·mL-1;平均回收率分别为100.6%(RSD=0.2%)、99.8%(RSD=1.1%).本法简便、快速、准确,专属性强,分离效果好.     

HPLC测定黄体酮氢化可的松霜中黄体酮和氢化可的松的含量

目的 建立黄体酮氢化可的松霜中黄体酮和氢化可的松含量测定的高效液相法.方法采用C18色谱柱,,流动相为乙腈-水(11),检测波长为240 nm,流速为1.0 mL·min-1.结果黄体酮浓度在8.012～40.06μg·mL-1内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 91),平均回收率为99.56%(RSD%为1.47%).氢化可的松浓度在59.43～138.67 μg·mL-1内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 94),平均回收率为100.19%(RSD%为1.28%).结论 本法简便、快捷,结果准确,适用于该制剂的质量控制.     

HPLC法测定丁酸氢化可的松乳膏中丁酸氢化可的松的含量

目的 建立丁酸氢化可的松乳膏的含量测定方法.方法 采用高效液相色谱法,用Waters Sunfire C18色谱柱(150mm×4.6mm),以水-乙腈-冰醋酸(50∶50∶0.5)为流动相,流速为1.0mL·min-1,检测波长为240nm.结果 丁酸氢化可的松在5.3727μg·mL-1～80.5901μg·mL-1范围内呈良好线性,r=1.0000(n=7).平均回收率为100.66%(n=9,RSD=0.6%).结论 本法简便,准确性、稳定性和重复性好.     

高效液相色谱法测定鼠肝微粒体中CYP1A2酶的活性及动力学考察

目的:建立以非那西丁为探针的高效液相色谱-紫外检测的实验方法,测定大鼠肝微粒体中CYP1A2酶活性并对其进行动力学考察。方法:采用Shimadzu Shim-Pack VP-ODS柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为:100 mmol·L-1磷酸二氢钠缓冲液(pH 4.3)和乙腈,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,柱温为室温,检测波长245 nm。非那西丁与大鼠肝微粒体在37℃温孵60 min,加入冰甲醇终止,12000 r.min-1离心10 min,取上清进行HPLC分析,以Lineweaver-Burk作图计算Vmax与Km值。结果:非那西丁、对乙酰氨基酚及其内标间乙酰氨基酚三者分离良好且无内源性干扰。对乙酰氨基酚最低检测限50 nmol·L-1,线性范围0.1～10μmol·L-1。日内日间精密度均小于10%。回收率大于75%。动力学考察表明选择甲醇作为终止试剂效果较好,非那西丁在0.2 mg·mL-1大鼠肝微粒体体系中孵育60 min,测得动力学参数Vmax为0.21 nmol·min-1.mgprotein-1,Km为20.39μmol·L-1。结论:该方法稳定,结果能准确地反映CYP1A2酶的活性,可以用于相关动力学研究。     

RP-HPLC法同时测定人血清中内源氢化可的松与可的松的含量

目的:建立测定人血清中内源性氢化可的松与可的松含量的方法。方法:采用迪马Diamonsil C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水-甲醇(51:136:77);流速:1.2 ml·min~(-1);紫外检测波长:245 nm;柱温:30℃;进样量:30μl。结果:氢化可的松在50.0～300.0μg·L~(-1),可的松在10.0～100.0μg·L~(-1)的浓度范围内线性关系良好。氢化可的松与可的松的方法回收率分别为(101.83±1.19)%和(100.52±5.91)%。92名健康者血清中氢化可的松、可的松的浓度分别为(111.60±27.30)和(18.66±4.44)μg·L~(-1),其比值为(6.08±1.10)。结论:本法操作简便,灵敏度高,快速可靠,适用于氢化可的松与可的松含量的测定,为研究人体肝脏11β-羟基类固脱氢酶(11β-HSD)的活性及调整激素治疗方案提供有效的分析手段。     

RP-HPLC测定氧氟沙星氢化可的松滴耳液的含量

目的:建立氧氟沙星氢化可的松滴耳液含量测定的方法。方法:采用RP-HPLC法测定滴耳液中氧氟沙星与氢化可的松的含量。色谱柱为Poresphere C_(18)(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-0.025 mol·L~(-1)磷酸溶液(用三乙胺调pH至3.0)(55:45);流速0.8 ml·min~(-1);检测波长为240 nm;检测灵敏度为0.16AUFS,进样量20μl。结果:氧氟沙星在30～480μg·ml~(-1)浓度范围内,峰面积与浓度的线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为99.8%;氢化可的松在5～80μg·ml~(-1)浓度范围内,峰面积与浓度的线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为99.9%。结论:本方法快速、简便,精密度好,重复性好,可作为氧氟沙星氢化可的松滴耳液的含量测定方法。     

HPLC法同时测定地氯滴眼液中地塞米松磷酸钠及氯霉素含量

目的建立地氯滴眼液中主要成分地塞米松磷酸钠、氯霉素的高效液相色谱含量测定方法.方法色谱柱为Hypersil ODS C18(250 mm×4.6 m,5 μm),流动相为甲醇-0.34%的磷酸二氢钾水溶液(52:48,v/v),柱温25℃,检测波长240nm,内标:0.14 mg·mL-1氢化可的松.结果在0.1004～0.401 6 mg·mL-1范围内,地塞米松磷酸钠线性良好(r=0.999 98),回收率为102.5%,RSD=2.2%(n=9);在1.014 4～4.057 6 mg·mL-1范围内,氯霉素线性良好(r=0.999 98),回收率为101.8%,RSD=1.5%(n=9).结论该实验建立的分析方法灵敏、快速、准确.