中药芪红合剂对肾间质纤维化模型大鼠肾组织中CTGF表达的影响

目的 观察中药芪红合剂在肾间质纤维化过程中对致纤维化因子结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响,探讨其可能的肾保护作用机制.方法 采用单侧输尿管结扎(UUO)致肾间质纤维化的动物模型,40只雄性Wistar大鼠随机分为4组:假手术组(A组)、手术模型组(B组)、芪红合剂组(C组)、依那普利组(D组).术后14d处死各组大鼠,收集血清测定血肌酐(Scr)、尿素氮(Bun)水平,取结扎侧肾组织分别用HE、Masson染色,采用免疫组化方法检测肾组织中结缔组织生长因子(CTGF)的表达,并用计算机图像分析系统进行分析. 结果 模型组大鼠肾组织中CTGF的表达较假手术组显著升高,两治疗组较模型组明显降低.模型组大鼠血肌酐、尿素氮水平较假手术组明显增高,两治疗组较模型组显著下降.结论 中药芪红合剂可降低大鼠血尿素氮、血肌酐水平,并可通过抑制CTGF的表达,而起到减轻肾间质纤维化病变程度的作用,推测其抑制CTGF表达上调的作用可能是其抗肾小管间质纤维化的作用机制之一.     

中药芪红合剂对肾间质纤维化模型大鼠肾皮质中bcl-2表达的影响

目的:探讨凋亡相关基因bcl-2在肾小管损伤及间质纤维化过程中的表达以及扶正活血化瘀中药芪红合剂在肾小管损伤及间质纤维化过程中的肾保护作用及可能的作用机制。方法:采用单侧输尿管结扎致肾间质纤维化大鼠模型,将大鼠随机分为4组:假手术组、模型组、中药芪红合剂组、依那普利组,术后10d处死各组大鼠,收集血清测定尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)水平,结扎侧肾组织行HE、Masson染色,Masson染色分析肾间质纤维化程度,免疫组化半定量检测各组大鼠肾组织中bcl-2、FN的蛋白表达。结果:模型组bcl-2、FN的蛋白表达及肾间质纤维化面积明显高于假手术组,BUN、Cr水平均显著升高(P<0.05);中药芪红合剂组、依那普利组较模型组bcl-2的蛋白表达显著上调,FN的蛋白表达及肾间质纤维化面积明显降低,BUN、Cr水平均显著下降(P<0.05)。结论:中药芪红合剂可能通过增强凋亡调控基因bcl-2蛋白表达的上调而减轻肾小管损伤及间质纤维化。     

福辛普利对肾间质质纤维化模型大鼠的实验研究

目的探讨福辛普利对肾间质纤维化的防治作用。方法采用单侧输尿管结扎法致肾间质纤维化的动物模型,以福辛普利为阳性对照,测血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、血浆血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）,免疫组化和原位杂交方法分别检测肾组织中基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）、纤维连接蛋白（FN）和TIMP-1mRNA的表达。结果福辛普利能降低血Scr、BUN、AngⅡ水平,显著抑制TIMP-1表达上调,减轻肾间质纤维化程度。结论福辛普利有早期防治肾间质纤维化作用。     

肾络通对肾间质纤维化实验大鼠病理及基质金属蛋白酶系统的影响

目的观察肾络通对实验大鼠肾间质纤维化的拮抗作用并探讨其作用机理。方法用单侧输尿管结扎方法复制大鼠肾梗阻模型,将其随机分为缬沙坦组、肾络通组、肾络通加缬沙坦组与模型组,并设假手术组。观察梗阻侧肾脏组织形态学改变、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及其基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)在蛋白及基因水平的表达并与假手术组比较。结果模型组及各治疗组与假手术组比较均呈现程度不同的病理损害,MMP-1、TIMP-1表达均有显著增高(P<0.05),且TIMP-1表达明显高于MMP-1表达。各治疗组与模型组比较,MMP-1表达无明显差异(P>0.05),TIMP-1表达却明显减少(P<0.05)。治疗各组间比较,TIMP-1表达肾络通加缬沙坦组明显低于缬沙坦组(P<0.05),其他组间均无明显差异(P>0.05)。结论输尿管梗阻后肾组织呈现程度不同的病理损害,可能与MMP-1/TIMP-1表达明显失衡有关。肾络通及缬沙坦对其有一定的抑制作用,且肾络通与缬沙坦联合用药,其作用比单一用药更强。     

实验性肝纤维化大鼠基质金属蛋白酶-2和组织型金属蛋白酶抑制剂-1mRNA表达及姜黄素的作用

目的探讨大鼠肝纤维化过程中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、组织型金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）mRNA表达及姜黄素汤对其的影响。方法复制大鼠四氯化碳（CCl4）肝纤维化模型,分别以高、中、低剂量姜黄素处理,检测血清透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）、三型前胶原（PCⅢ）和四型胶原（IVC）水平,检测肝组织纤维化程度和MMP-2及其抑制因子TIMP-1mRNA表达。结果CCl4成功诱导肝纤维化大鼠模型,姜黄素治疗能够降低血清肝纤维化指标及肝组织纤维化程度,姜黄素可以抑制CCl4诱导的MMP-2和TIMP-1mRNA表达,并能恢复MMP-2／TIMP-1的动态平衡。结论姜黄素可以通过减少MMP-2及其TIMP-1表达抑制肝纤维化。     

高血压大鼠肾脏基质金属蛋白酶及组织型基质金属蛋白酶抑制剂表达与活性的变化

[目的]研究在卒中易感型自发性高血压大鼠（stroke-prone spontaneously hypertensive rat,SHR-SP）肾脏中,基质金属蛋白酶（Matrix metalloproteinases,MMPs）-2,-9以及组织型基质金属蛋白酶抑制剂（tissue inhibitors of matrix metalloproteinases,TIMPs）-1,-2的表达与活性的变化.[方法]分别采用40只7周龄雄性SHR-SP大鼠及10只同周龄雄性Wistar-Kyoto大鼠作为高血压组与阴性对照组.观察期间定期测量各组大鼠无创鼠尾压.6个月后,处死存活大鼠留取血液及肾脏标本,测定血清肌酐及尿素氮浓度,采用组织病理染色观察两组大鼠肾脏组织学改变,采用明胶酶谱法分析存活大鼠肾脏MMP-2和MMP-9蛋白活性,并采用逆明胶酶谱法及蛋白质印迹分析TIMP-1和TIMP-2蛋白表达和活性.[结果]（1）明胶酶谱分析显示：SHR-SP肾脏中MMP-2活性较WKY组明显增高[（3.28±1.17） vs.（1.26±0.62）; P＜ 0.01].（2）逆明胶酶谱分析显示：高血压大鼠肾脏TIMP-2的活性明显高于WKY组[（1.12±0.43） vs.（0.78±0.34）,P＜0.05].（3）蛋白质印迹结果显示：高血压组大鼠肾脏TIMP-1、TIMP-2表达较对照组高[（TIMP-1：（3.44±0.13） vs.（2.31±0.15）,TIMP-2：（6.44±0.49）vs.（4.94±0.68）,P＜0.01].[结论]SHR-SP肾脏组织中MMP-2及TIMP-2的活性增高,TIMP-1及TIMP-2的表达均明显升高.     

中药芪红合剂对肺间质纤维化模型大鼠肺组织中TGF-β1表达的影响

目的:探讨中药芪红合剂在肺间质纤维化过程中的作用及其机理。方法:采用气管内注射博来霉素A5建立肺间质纤维化的大鼠模型。将40只Wistar大鼠随机分为4组:假手术组、模型组、泼尼松治疗组、芪红合剂治疗组,每组10只。给各组大鼠灌胃相应的生理盐水或药物,术后15d处死各组大鼠,取两肺组织,一部分行石蜡包埋切片,HE染色,观察病理改变,另一部分采用ELISA法定量测定TGF-β1。结果:与假手术组比较,模型组大鼠肺组织有明显的纤维化改变,TGF-β1的含量显著升高(P<0.01);与模型组比较,泼尼松治疗组和芪红合剂治疗组大鼠肺组织中TGF-β1含量显著下降(P<0.01)。结论:中药芪红合剂可能通过降低肺组织中TGF-β1的含量而减轻肺间质损伤及纤维化改变。     

基质金属蛋白酶及其基质金属蛋白酶组织抑制剂与肾脏疾病

纤维化的基本特征为细胞外基质(ECM)的过度沉积。目前认为纤维化是由于ECM合成增加和降解受抑制的综合结果。细胞外基质的合成与降解受多种因素的影响,基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)及其基质金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinase,TIMPs的平衡是降解过程中主要调节因素。目前MMPs/TIMPs在器官纤维中的作用日益受到重视。本文拟就MMPs,TIMPs与肾脏疾病的关系综述如下。     

扛板归对肝纤维化大鼠肝组织基质金属蛋白酶-1基质金属蛋白酶-2及基质金属蛋白酶抑制剂-1表达的影响

目的:研究中药扛板归对二甲基亚硝胺诱导的肝纤维化大鼠肝组织中MMP -1,MMP -2及TIMP -1蛋白表达的影响.方法:用二甲基亚硝胺诱导大鼠肝纤维化模型,不同浓度扛板归干预后,取肝脏常规制片并HE染色,观察各组大鼠肝组织病理学改变,免疫组织化学方法检测各纽大鼠肝组织MMP -1,MMP -2及IMP -1蛋白表达的情况.结果:扛板归高、中剂量组中大鼠肝组织MMP -2及TIMP -1蛋白表达较模型组明显降低(P＜0.05),扛板归高、中剂量组中大鼠肝组织MMP-1蛋白表达较模型纽明显升高(P＜0.05).结论:扛放归具有显著的抗肝纤维化作用,其机制可能通过提高MMP -1表达,降低TIMP -1,MMP -2蛋白的表达而调控细胞外基质的代谢.     

基质金属蛋白酶-1及其组织抑制剂-1在子宫内膜异位症中的表达

目的 :评价基质金属蛋白酶 1(MMP 1)和基质金属蛋白酶组织抑制剂 (TIMP 1)在子宫内膜异位症 (EMs)中的表达 ,明确二者的相关性 ,探讨它们在EMs的发生、发展中的作用。方法 :用免疫组化检测MMP 1及TIMP 1在EMs的异位内膜组织 (6 4例 )及在位内膜组织 (4 0例 )中的表达 ,并与同期 32例子宫正常内膜组织进行对比。结果 :MMP 1在在位及异位内膜中均高表达 ,与正常内膜组织中的表达相比有统计学意义 (P <0 0 1) ;TIMP 1在异位及在位内膜中均呈低表达 ,与正常内膜组织中的表达有统计学意义 (P <0 0 1) ;异位内膜较在位内膜TIMP 1表达降低 (P <0 0 1)。结论 :异位内膜组织中的MMP 1过表达 ,而TIMP 1表达下降 ,两者间的比例失调使异位内膜组织更具侵袭性 ,这在EMs的发病机制中起着重要作用     

羟苯磺酸钙对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响

目的:评价羟苯磺酸钙对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化影响,并探讨其作用机制。方法:21只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、肾间质纤维化组(UUO组)及羟苯磺酸钙组(CDT组),分别采用病理及免疫组织化学方法观察UUO术后14 d大鼠梗阻侧肾脏的组织学变化和MMP-9、TIMP-l表达情况。结果:与Sham组相比,UUO组大鼠肾间质纤维组织面积显著增加(P<0.01),MMP-9、TIMP-1表达均有显著增高(P<0.01)。与UUO组相比,CDT组大鼠肾间质纤维组织面积减少,MMP-9表达增强、TIMP-1表达减弱(P<0.01),UUO组和CDT组大鼠左肾MMP-9/TIMP-1与肾间质纤维化面积成负相关,且有统计学意义(P<0.01)。结论:羟苯磺酸钙可缓解输尿管梗阻导致的肾间质纤维化,其机制可能与其调节MMP-9/TIMP-1紊乱、改善基质代谢有关。     

黄芪对单侧输尿管梗阻大鼠肾小管间质病理损害的作用

目的观察黄芪（AM）对单侧输尿管梗阻（UUO）所致大鼠肾小管间质病理损害的影响，初步探讨黄芪拮抗纤维化的作用机制。方法48只SD大鼠随机分为假手术（Sham）、UUO组和UUO＋黄芪治疗组（AM）、UUO＋氯沙坦治疗组（ARB）。在造模后7、14天处死动物，观察HE染色、Masson染色和PAS染色肾脏病理改变，并对肾小管间质损害进行半定量评定分析。结果与假手术组相比，UUO术后大鼠肾脏病理损害进行性加重，肾小管损伤程度、肾间质相对面积和肾小管萎缩程度评分均明显增高，黄芪干预后各时间点上述指标明显改善，与ARB作用相似。结论黄芪能有效抑制肾小管间质病理损害，减轻和改善UUO大鼠肾间质纤维化。     

延肾胶囊抑制大鼠肾间质纤维化作用的研究

目的　观察延肾胶囊治疗单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化作用并探讨其机理。方法　4 5只Wistar大鼠随机分为假手术组、单侧输尿管梗阻组和延肾胶囊治疗组,分别于术后3d、7d、1 4 d处死动物,观察肾脏间质病变程度,采用免疫组织化学方法检测肾小管间质中TGF- β1和α- SMA的蛋白表达情况。结果　与梗阻组相比,延肾胶囊治疗组大鼠肾间质病变程度明显减轻,而TGF- β1、α- SMA蛋白表达也明显降低(P<0 .0 5 )。结论　延肾胶囊具有明显的抑制肾间质纤维化的作用,能显著降低肾间质中TGF- β1、α- SMA的表达。     

黄芪当归合剂对梗阻性肾病大鼠肾间质纤维化的防治作用

目的 :研究黄芪当归合剂 (A&A)对梗阻性肾病大鼠肾小管间质纤维化的防治作用 ,探讨其抗纤维化作用的可能机制。方法 :采用单侧输尿管梗阻 (UUO)诱导肾间质纤维化的动物模型 ,以目前公认具有肾脏保护作用的血管紧张素转换酶抑制剂 (ACEI)作为阳性对照 ,将大鼠随机分为假手术组 (Sham)、模型组 (UUO)、黄芪当归合剂组 (A&A)、依那普利组 (ACEI) ,术后第 1 0天处死大鼠 ,收集血清测定肌酐、尿素氮水平 ,肾组织用Masson染色后进行图像分析评定各组肾小管间质损害程度 ,免疫组化半定量检测各组肾间质的α 平滑肌肌动蛋白 (α SMA)、转化生长因子 β1 (TGF β1 )、纤维连接蛋白 (FN)和层粘连蛋白 (LN)的表达。结果 :UUO组的肾小管间质损伤指数及α SMA、TGF β1 、FN和LN的表达明显高于Sham组 ,肾小管间质损伤指数与肾间质的α SMA、TGF β1 、FN和LN的表达均呈正相关关系。A&A组、ACEI组的肾小管间质损伤指数及α SMA、TGF β1 、FN和LN的表达均明显低于UUO组 ;两治疗组间比较 ,A&A对TGF β1 表达的抑制作用弱于依那普利的作用 ,而其余各指标差异无显著性。结论 :在单侧输尿管梗阻诱导的肾间质纤维化大鼠模型中 ,中药复方A&A的防治作用与ACEI相似 ,可能是通过减少肾间质肌成纤维细胞的数量、抑制TGF β1 表达     

PAX2小干扰RNA在UUO大鼠体内的筛选与鉴定

目的梗阻性肾病是由于泌尿道机构和（或）功能改变,阻碍尿液的排出,导致肾实质病理和功能损害的临床综合征。病理学特征主要表现为肾小管萎缩和间质纤维化。文中通过RNA干扰（RNA interference,RNAi）技术,筛选及鉴定有效抑制肾间质纤维化大鼠肾组织PAX2基因表达的小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）序列。方法制作单侧输尿管结扎（unilateral ureteral obstruction,UUO）模型,光镜下观察肾组织病理形态学变化;针对大鼠PAX2 mRNA序列全长（mRNA:NM₀01106361）,设计合成4对siRNA干扰序列和阴性对照序列,为了观察体内转染同时合成FAM标记的阴性对照,以invivo jetPEI体内转染试剂为载体转染至UUO大鼠肾被膜下,利用实时荧光定量PCR及Western blot技术检测肾组织PAX2 mRNA及蛋白表达。结果通过HE和Masson染色观察到UUO模型3 d后肾纤维化表现;UUO模型转染3 d后,荧光显微镜观察到肾小管周围存在绿色荧光,4对干扰序列均有不同程度的抑制肾皮质PAX2 mRNA及蛋白的表达,其中siRNA3位点对PAX2干扰效果最强,mRNA及蛋白抑制分别达到55%和81%。结论成功筛选出1对有效抑制肾间质纤维化大鼠肾小管上皮细胞PAX2表达siRNA,为深入研究肾纤维化的发病机制提供新的手段。     

螺内酯对单侧输尿管梗阻后肾间质纤维化调节作用的实验研究

目的探讨螺内酯对大鼠单侧输尿管梗阻模型( U U O )肾间质纤维化的影响。方法 32 只大鼠随机分为假手术组、U U O 组、小剂量螺内酯组( 20 m g/kg·d)、大剂量螺内酯组( 50 m g/kg·d),术前 1 d 开始给予螺内酯或等量蒸馏水灌胃,观察第 14 天血清钾、钠、肌酐水平及血压的变化;以 M asson 染色定量分析方法判定肾间质纤维化程度;以免疫组织化学方法测定转化生长因子 -β1( TG F-β1) 和α- 平滑肌肌动蛋白( α-SM A)的表达并进行定量分析。结果与 U U O 组相比,小剂量螺内酯组、大剂量螺内酯组的血清钾、钠,肌酐,血压均无明显变化( P >0.05);肾小管间质纤维化程度及 TG F-β1 和α-SM A 的表达均明显低于 U U O组( P <0.05)。小剂量螺内酯组和大剂量螺内酯组肾间质纤维化程度、TG F-β1 和α-SM A 的表达差异均无显著性( P >0.05)。结论螺内酯可通过下调 TG F-β1 和α-SM A 减少细胞外基质堆积从而减轻肾间纤维化。     

环氧合酶在单侧输尿管梗阻大鼠肾脏的表达

目的　观察环氧合酶 (COX)的两种同工酶 ,即COX 1和COX 2在单侧输尿管梗阻 (UUO)大鼠术侧肾脏的表达情况。方法　建立左侧输尿管梗阻模型 ,设假手术组为对照。 4周后分别应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)和免疫组织化学方法检测COX 1、COX 2的mRNA水平及蛋白质表达 ,并采用放射免疫法测定术侧肾脏的残余尿液中血栓烷素B2 (TXB2 )浓度。结果　COX 1的mRNA和蛋白水平在两组间差异无显著性。病变组大鼠尿液中TXB2 的浓度急剧上升 ,COX 2的基因表达和蛋白质合成大幅增加 ,病理上呈现明显的肾小管间质纤维化。结论　COX 2参与UUO发生和发展的病理过程     

输尿管结扎对小鼠肾皮质骨架蛋白与炎症因子表达的影响

目的 通过对UUO小鼠肾组织俚一平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）、波形蛋白（vimentin）、炎症介质细胞间粘附分子（intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1）、单核细胞趋化因子（monocyte chemoattractant protein1,MCP-1）表达的研究,探讨肾间质纤维化机制。方法实验取单侧输尿管结扎（UUO）21天小鼠结扎侧肾组织,肾组织α-SMA、Vimentin表达采用免疫组化技术;ICAM-1蛋白质表达采用Western-blotting方法检测;MCP-1基因表达采用反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）方法。结果 UUO模型组小鼠肾小管间质α-SMA、Vimentin的表达较假手术组显著增高,肾组织中ICAM-1蛋白表达、MCP-1基因表达亦较假手术组显著增高。结论 输尿管结扎21天可诱导肾小管间质肌成纤维细胞的大量积聚,可能与肾组织炎症因子的高度表达相关。