紫杉醇、5-氟脲嘧啶抑制肝癌细胞BEL-7402生长和诱导凋亡的比较

目的 研究紫杉醇、5-氟脲嘧啶(5-Fu)抑制肝癌细胞BEL-7402增殖和诱导凋亡的效果。方法 采用ATP生物发光法检测肝癌细胞株的药物敏感性,以流式细胞术、形态学方法分析细胞凋亡和细胞周期。结果 BEL-7402对紫杉醇高度敏感,对5-Fu低度敏感,抑制作用均存在剂量、时间效应。紫杉醇组3种浓度诱导细胞凋亡率均明显高于无药对照组(P<0.05),但低于5-Fu组(P<0.01);紫杉醇组细胞死亡率显著高于5-Fu组(P<0.05)。紫杉醇诱导凋亡率随药物浓度降低而增加,而5-Fu诱导凋亡率随药物浓度降低而降低。结论 紫杉醇可抑制BEL-7402肝癌细胞增殖和诱导凋亡。5-Fu抑癌以诱导细胞凋亡为主,紫杉醇则以引起细胞坏死为主。     

阿霉素诱导人肝癌细胞株HCC－9204肝癌细胞凋亡的实验研究

阿霉素诱导人肝癌细胞株ＨＣＣ－９２０４肝癌细胞凋亡的实验研究张晓东，王文亮（西安病理学教研室西安７１００３３）关键词肝细胞瘤；凋亡；阿霉素中图号Ｒ７３－３作者应用抗癌药阿霉素（ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ）成功地诱导培养的人肝癌细胞株ＨＣＣ－９２０４肝癌细胞...     

表阿霉素、多西紫杉醇、5-氟脲嘧啶序贯对乳腺癌细胞凋亡的影响

v目的：探讨表阿霉素（epirubicin， Epi）、多西紫杉醇（taxotere， Tax）和5-氟脲嘧啶（5 Fluorouracil， 5 Fu）序贯对乳腺癌细胞（MCF 7）凋亡的影响，为确定最有效的化疗方案提供理论依据。方法：采用硫基碱性蕊香红B（sulphorhodamine B， SRB）法分析3种药物序贯对MCF 7的细胞毒作用，中效原则分析药物之间的相互作用，流式细胞仪检测细胞周期和凋亡，Western blot分析p53、bcl 2、bax和p21凋亡相关基因蛋白表达。结果：单一5 Fu产生较低细胞毒作用。序贯应用Epi、 Tax有协同作用和增加5 Fu的细胞毒效果。序贯应用Epi、Tax导致细胞停滞于G1 M期，而5 Fu可加快细胞周期或杀死肿瘤细胞，且可使胸腺嘧啶合成酶（TS）表达减少。Epi、Tax和5 Fu 序贯应用协同作用更明显（CI<1），同时诱导的MCF 7凋亡与雌激素受体（ER）、p53、bcl 2、bax状态无关。结论：Epi、Tax和5 Fu序贯应用可产生高度协同和时间依赖，实验结果对临床制定最有效化疗方案有重要作用。     

DNA断裂损伤在抗癌药物诱导肝癌细胞凋亡反应中的作用

探讨抗癌药物等对ＤＮＡ直接损伤因素所致的ＤＮＡ断裂损伤在凋亡反应中所起的作用。方法；采用定量原位缺口平移技术检测阿霉素等抗癌药物诱导的肝癌细胞凋亡反应中的单位细胞ＤＥＡ断裂损伤程度。结果：高浓度阿霉素在凋亡反应的早期无可检测的ＤＮＡ断裂，也无调讯细胞产生；较低浓度阿霉素在药物作用早期有可检测的ＤＮＡ断裂，同时也有凋亡细胞产生；     

紫杉醇诱导HL—60细胞凋亡的研究

目的：观察抗微管药紫杉醇对急性白血病细胞株HL－60是否具有凋亡诱导作用,并进一步研究bcl－2基因在此过程中的作用。方法：（1）以紫杉醇处理HL－60细胞,观察细胞生长抑制作用的时间效应和剂量效应,在光镜和电镜下观察细胞形态变化;（2）用流式细胞仪检测药物孵育前后细胞凋亡率（AP）的变化;（3）用RT－PCR法检测药物孵育前后bcl-2基因的表达水平。结果：（1）在一定剂量和时间范围内紫杉醇能抑制HL－60细胞生长;（2）紫杉醇能诱导HL－60细胞凋亡,并显示剂量效应：（3）在紫杉醇诱导HL－609细胞凋亡过程中,bcl－2基因表达水平下调。结论：紫杉醇能诱导HL－60细胞凋亡;bcl-2基因参与了紫杉醇诱导HL－60细胞凋亡的调控。     

表阿霉素和阿霉素诱导人肝癌细胞凋亡

目的　观察和比较表阿霉素和阿霉素诱导肝癌细胞凋亡的作用 ,为临床治疗肝癌的药物选择提供依据 .方法　用 2 0 μmol· L- 1表阿霉素和阿霉素分别作用于人肝癌细胞株HCC- 92 0 4细胞 3h,换液继续培养 8h.用细胞形态学观察、DNA电泳和流式细胞仪判定细胞凋亡情况 .结果　表阿霉素和阿霉素分别作用于 HCC- 92 0 4细胞 11h后 ,细胞形态学改变均符合凋亡细胞特征 .凋亡细胞分别占细胞总数的13.8%和 13.1% .MTT试验示各实验组与空白对照组间比较相差显著 ,表阿霉素和阿霉素相同剂量处理组之间比较无显著差异 .细胞周期检测表阿霉素组 G1 期、G2 期和 S期分别为 5 6 .4% ,10 .4%和 38.2 % ,阿霉素组分别为 6 1.1% ,8.6 %和 30 .3% ,对照组为 31.1% ,6 1.9%和 6 .0 % .结论　表阿霉素和阿霉素均能有效地诱导人肝癌细胞株 HCC- 92 0 4细胞发生凋亡 ,无明显差异 .     

应用快速微量培养人肝癌细胞抗癌药敏试验的临床意义

目的：为肝癌治疗中合理使用抗癌药提供可靠的科学依据。方法：采用改良MTT比色分析法测定35例肝癌细胞原代培养药敏。结果：35例人肝癌细胞抗癌药敏试验有33例获得成功，在六种抗癌药中敏感度最高的为EPB，其后依次为DDP、MMC、5－Fu、MTX和VCR；人肝癌细胞对6种抗癌药敏感性的不同浓度间比较皆有显性。结论：EPB和DDP一般为肝癌化疗的首选药，而VCR几乎没有作用，肝癌细胞对抗癌药有明显的药物浓度依赖性。     

表阿霉素对人肝癌SMMC-7721细胞bcl-2蛋白表达的影响

目的 探讨表阿霉素诱导SMMC-7721细胞凋亡的可能分子机制。方法 采用流式细胞仪间接免疫荧光法检测表阿霉素作用于人肝癌SMMC-7721细胞后bcl-2蛋白的表达。结果 随着表阿霉素的浓度增加，作用于SMMC-7721细胞时间的延长，细胞bcl-2蛋白的表达逐渐降低，SMMC-7721细胞bcl-2蛋白的表达与表阿霉素作用浓度EY时间呈负相关。结论 Bcl-2基因表达下调可能是表阿霉素诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的重要机制之一。     

纳米磁诱导肝癌Hep-6细胞凋亡实验研究

目的　研究纳米磁诱导肝癌Hep -6细胞凋亡 ,提供肝肿瘤局部靶向消融新方法。方法　应用电泳 ,扫描电镜 ,透射电镜 ,流式细胞仪检测凋亡。该实验设空白对照组、药物对照组和纳米磁处理组 ,在不同剂量与时间点条件观察纳米磁诱导肝癌Hep -6细胞凋亡率。结果　纳米磁组细胞凋亡率 2 4h时由 2 5 %上升到 5 4% ;3 6h时 ,纳米磁组、表阿霉素组、空白对照组的凋亡率分别为 78% ,5 3 % ,2 % ,各组之间凋亡率差异有显著性 (t =3 0 5 ,P <0 0 5 ) ,凋亡率、药量、与时间呈正相关 (r=0 96,P <0 0 5 )。结论　纳米磁可诱导肝癌Hep -6细胞凋亡 ,可以提供肝肿瘤有效的靶向消融治疗。     

蛋白酶体抑制剂联合表阿霉素杀伤肝癌细胞的研究

目的观察蛋白酶体抑制剂MGl32与表阿霉素（epirubicin，EPI）联合应用对人肝癌HeDG2细胞系体外生长的影响。方法实验分为4组：空白对照组；1μg／mLEPI处理组；1μmol／LMGl32处理组；1／maol／LMGl32＋1μg／mLEPI共同处理组。应用MTT法检测小剂量MGl32与表阿霉素处理后对HepG2细胞的生长抑制作用，流式细胞术检测细胞凋亡。结果MTT法显示MGl32与表阿霉素合用时对HepG2细胞的抑制率增加。流式细胞术测定显示对照组的HepG2细胞凋亡率为（0．87±0．19）％，1μmol／LMGl32处理组细胞凋亡率为（5．53±0．99）％；1μg／mL EPI处理组细胞凋亡率为（13．8±1．37）％：1μmol／LMGl32和1μg／mL EPI共处理组细胞凋亡率增加至（27．0±1．15）％。结论小剂量MGl32与表阿霉素联合应用可增强致HepG2细胞凋亡作用。     

肝细胞刺激因子与阿霉素在人肝癌细胞凋亡的协同作用

目的　研究肝细胞刺激因子（ｈｅｐａｔｉｃ ｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｓｕｂｓｔａｎｃｅ , Ｈ Ｓ Ｓ） 对肝癌细胞凋亡的作用及与化疗药物的相互影响。方法体外培养人肝癌细胞（ Ｑ Ｇ Ｙ－ ７７０３） ,并用不同剂量的 Ｈ Ｓ Ｓ 及 Ｈ Ｓ Ｓ＋ 阿霉素（ Ａ Ｄ Ｒ） 处理,琼脂糖凝胶电泳分析 Ｄ Ｎ Ａ 片段。碘化丙锭染色,流式细胞仪观察细胞死亡率。结果　肝癌细胞在体外经 Ｈ Ｓ Ｓ,阿霉素及阿霉素＋ Ｈ Ｓ Ｓ 处理后,肝癌细胞发生凋亡。结论　 Ｈ Ｓ Ｓ可以诱导人肝癌细胞发生凋亡,阿霉素对 Ｈ Ｓ Ｓ 所致人肝癌细胞的凋亡有协同作用。     

人肝癌细胞凋亡小体超微结构观察

人肝癌细胞凋亡小体超微结构观察张晓东，王文亮（病理学教研室西安７１００３３）关键词肝肿瘤；凋亡；凋亡小体；超微结构中图号Ｒ７３我们应用抗癌药阿霉素（ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ）成功地诱导培养的人肝癌细胞株ＨＣＣ－９２０４肝癌细胞发生凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ...     

5-氟脲嘧啶、丝裂霉素和表阿霉素诱导人胃癌细胞凋亡的体外研究

目的了解5-氟脲嘧啶、丝裂霉素和表阿霉素分别及联合对人胃癌MGC－803细胞凋亡的诱导作用。方法用一定剂量的5-氟脲嘧啶。丝裂霉素和表阿霉素分别及三药联合与人胃癌细胞株MGC－803共同孵育12h后,应用光镜进行细胞形态学观察。细胞DNA经特异性荧光染色后,用流式细胞仪分析细胞周期变化。结果人胃癌MGC－803细胞经5-氧脲嘧啶、丝裂霉素和表阿霉素作用后,出现典型的细胞凋亡形态学改变,定量分析凋亡细胞发生率分别为10．2％、9．1％和9．7％,而三药联合作用后凋亡细胞的发生率为21．4％。结论5-氟脲嘧啶、丝裂霉素和表阿霉素可诱导人胃癌细胞林凋亡,三药联用可提高凋亡细胞的发生率。     

健脾理气方药抑制HepG2人肝癌细胞增殖及诱导其凋亡的形态学研究

目的：探讨中药复方健脾理气治疗肝癌的作用机制。方法：采用血清药理学方法，制备药物血清。应用MTT法测定细胞增殖抑制率，通过电镜技术检测药物血清作用后对细胞凋亡的影响。结果：药物血清作用24h，中药小剂量组未见明显抑制作用，其余各组均表现出不同程度的抑制作用，中药大剂量组抑制率达8．81％；作用48h，中药小剂量组出现抑制作用,各药物血清组随着作用时间的延长抑制更明显，中药大剂量组抑制率达39．27％,抑制效应呈时间依赖性。药物血清作用48h后，电镜观察，可见肝癌细胞出现典型的细胞凋亡的形态学改变。结论：健脾理气具有明显抑制人肝癌细胞增殖、诱导肝癌细胞凋亡的作用，提示抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡是健脾理气方药治疗肝癌的重要作用机制之一。     

5一FU静脉、腹腔化疗诱导小鼠腹水瘤细胞凋亡研究

为探讨5－Fu静脉和腹腔给药途径诱导小鼠腹水瘤细胞凋亡的规律及其抗肿瘤作用机制，将45只腹腔内接种H22细胞的小鼠随机分为对照、静脉和腹腔内化疗3组。各组于注药后第3、5、7d分别收集腹水细胞行细胞形态观察、DNA电泳分析和流式细胞仪检测。结果显示，化疗组腹水细胞均呈现典型细胞凋亡形态学特征，同时可见细胞坏死。细胞凋亡率呈时间依赖性（P＜0．01），且腹腔内化疗组细胞凋亡率各时间点均明显高于静脉组（P＜0．01），提示5－Fu抗肿瘤作用机制是引起肿瘤细胞死亡和诱导和诱导肿瘤细胞凋亡共同作用的结果：腹腔内化疗效果明显优于静脉化疗。     

紫杉醇联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体对前列腺癌细胞的抑制作用

目的 探讨紫杉醇联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）对前列腺癌细胞的抑制作用。方法 MTT法测定紫杉醇、TRAIL及紫杉醇联合TRAIL作用于LNCAP、Du145、PC3细胞后的细胞生存率，同时，用流式细胞技术测定3种细胞的凋亡率。结果 2ng／ml TRAIL对LNCAP、PC3细胞有明显的抑制作用，但对Du145细胞抑制作用不明显；当TRAIL与紫杉醇联用则对3种癌细胞均显示出明显的抑制作用，且发生在给药24h后，72h时抑制作用最强。TRAIL对3种癌细胞有诱导凋亡作用，5ng／ml较2ng／ml作用强；紫杉醇与TRAIL联用明显增强诱导凋亡作用。结论 紫杉醇与TRAIL联合应用能明显增强对LNCAP、Du145、PC3细胞的抑瘤效果和诱导凋亡作用。     

膀胱癌细胞凋亡与多药耐药的实验研究

目的 研究膀胱癌细胞凋亡与膀胱癌多药耐药的关系。方法 用电镜观察几种临床常用的化疗药物阿霉素、顺铂和丝裂霉素在体外诱导膀胱癌细胞的凋亡的形态学特征，免疫组化测定pgp糖蛋白的表达，应用MTT法检测阿霉素、顺铂和丝裂霉素的杀伤率。结果 16例患者中9例有效地诱导出细胞凋亡，7例未诱导出凋亡。电镜观察显示，患者的膀胱癌细胞对化疗药物阿霉素、顺铂和丝裂霉素敏感时，其细胞呈特异性的凋亡形态学特征改变：染色质聚集于核膜呈块状，扩张的线粒体，嵴移位膨胀，凋亡细胞被周围细胞吸收。体外检测显示耐药患者肿瘤细胞抑制率低于30％。结论 研究结果提示多药耐药的产生与膀胱癌细胞凋亡受到抑制有关。     

紫杉醇诱导黑色素瘤细胞凋亡的研究

目的：探讨紫杉醇体外抑制人黑色素瘤细胞（A375细胞）增殖及诱导凋亡作用机制。方法：四甲基偶氮唑蓝（MTT）还原法测定细胞活力；光镜和电镜观察细胞形态变化；流式细胞术（FCM）检测细胞周期和凋亡率。结果：紫杉醇通过诱导细胞凋亡抑制A375细胞生长。并呈时间和剂量依赖性（P〈0．01）；当0．01-1μmol／L紫杉醇作用于培养细胞24h后即可引起猾亡小体等典型细胞凋亡形态学改变；FCM分析显示：紫杉醇在0．001μmol／L即可诱导细胞凋亡，但不影响细胞周期，在0．01μmol／L时使G0／G1期细胞明显减少，在0．1μmol／L以上时使细胞发生G2／M期阻滞。结论：紫杉醇具有抑制A375细胞生长和诱导细胞凋亡作用。不同浓度紫杉醇诱导细胞凋亡的作用机制不同。     

化疗药物不同配伍诱导人胰腺癌细胞株细胞凋亡

目的通过对临床常用化疗药物５－氟尿嘧啶（５－ＦＵ）、丝裂霉毒（ＭＭＣ）、卡铂（ＣＢＰ）、阿霉素（ＡＤＭ）和表阿霉素（Ｅ－ＡＤＭ）相互配伍诱导人胰腺癌细胞株细胞凋亡的观察,探讨化疗药物抑制胰腺癌细胞生长的作用机制,为临床制定合理的化疗方案提供理论依据。方法不同配伍的化疗药物作用于胰腺癌细胞后,以倒置显微镜和荧光显微镜观察其形态变化;以流式细胞仪检测细胞ＤＮＡ含量的变化,计算出凋亡细胞的比例;提取细胞ＤＮＡ,进行凝胶电泳确定细胞凋亡的发生。结果联合化疗可以诱导胰腺癌细胞凋亡,与引起细胞坏死相比,诱导肿瘤细胞凋亡的化疗药物剂量小、作用时间短;随作用时间的延长和药物剂量的增加,凋亡细胞的比例也增加;不同配伍的化疗药物诱导不同胰腺癌细胞株细胞发生凋亡的情况是不完全相同的。结论诱导肿瘤细胞凋亡是化疗药物抑制胰腺癌细胞生长的主要机制,能否诱导胰腺癌细胞发生凋亡可作为判断不同配伍的化疗药物抑制胰腺癌细胞生长能力的重要指标之一。     

热疗联合DDP诱导大肠癌细胞凋亡和bcl—2表达的实验 …

目的：研究热化疗诱导大肠癌（ＬｏＶｏ）细胞凋亡及其与ｂｃｌ－２基因表达的关系，探讨热化疗治疗大肠癌的机制。方法：应用热疗联合顺铂（ＤＤＰ）在不同药物浓度、时间和温度条件下诱导ＬｏＶｏ细胞凋亡，以流式细胞仪检测其凋亡率及ｂｃｌ－２基因的表达。结果：随着药物浓度的升高、作用时间的延长，细胞凋亡率增加；热疗联合ＤＤＰ所致凋亡率大于单纯化疗组和单纯热疗组之和；随着药物浓度的升高，ｂｃｌ－２的表达下凋；各处