中国汉族人孕烷X受体基因NR1I2的单核苷酸多态性

目的了解中国健康汉族人孕烷X受体基因NR1I2的单核苷酸多态性分布以明确种族差异。方法用PCR扩增后直接测序的方法,检测NR1I2基因2和4外显子及1,2,4和5内含子的单核苷酸突变。结果中国健康汉族人NR1I2基因2和4外显子均未发现已报道的单核苷酸突变,外显子1和内含子1,2,4和5检测到单核苷酸突变9种,分别为-24446C>A,-24381A>C,-24113G>A,252A>G,275A>G,4760G>A,7635G>A,7637C>T和7675C>T,等位基因频率分别为2.4%,20.8%,20.8%,33.3%,31.0%,68.5%,31.7%,1.6%和10.6%,其中7637C>T未见在任何文献和单核苷酸多态性数据库中报道,为新发现突变。结论中国健康汉族人NR1I2内含子1,2,4和5位置检测到9种单核苷酸突变,且突变频率较高,与白人和美国黑人比较,单核苷酸突变的发生位点和发生频率存在显著性差异。     

早发糖尿病家系葡萄糖激酶基因突变的筛查

目的 早发2型糖尿病家系中可能存在MODY2基因（GCK）的致病突变,了解MODY2基因在早发家族性2型糖尿病发病中作用。方法 收集100个2型糖尿病家系,先证者均在40岁前被诊断为糖尿病,且至少还有一个一级亲属在45岁之前被诊断糖尿病。提取先证者血DNA,用PCR产物扩增MODY2基因的所有外显子和外显子／内含子拼接区,将PCR产物直接进行测序。SPSS进行统计分析。结果 在MODY2基因的筛查中发现3个DNA变异,一个在外显子4（ccc—ccg,为杂合的脯氨酸同义突变Pr0145Pro）,一个在外显子7（gcc—gcg,为杂合的丙氨酸同义突变ala233ala）,一个在内含子9（IVS＋8C〉T）。这三个变异等位基因频率分别为0．5％、0．5％、36％。对内含子IVS9＋8C〉T多态性的群体关联研究发现等位基因T在糖尿病组频率显著低于非糖尿病对照组（36％V847％,P〈0．05）,而C等位基因高于对照组（64％V853％,P〈0．05）。结论 MODY2基因内或附近的基因变异不是早发2型糖尿病家系的主要致病原因。     

中国大陆汉族人群CYP3A4基因变异分析

目的：研究中国大陆汉族人群中细胞色素P4503A4（CYP3A4）的基因变异及其分布。方法：140例血样本来自中国大陆25个省份的汉族人口，用聚合式酶链反应．非放射性单链构象多态性（PCR-SS-CP）．直接测序方法检测CYP3A4基因的变异。结果：中国大陆汉族人群存在CYP3A4基因内含子2T4127G变异。140例人群中有31人存在此变异，变异频率为22．1％。中国大陆汉族人群未发现CYP3A4基因13个外显子的变异。结论：中国大陆汉族人群CYP3A4基因存在内含子2的多态性分布，其基因变异不同于其他种族。     

肌肉糖原合酶基因碱基序列的探讨

目的：探讨中国天津地区人群中肌肉糖原合酶基因(GYS1)的XbaⅠ多态性。方法：采用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCR—RFLP)方法对334例2型糖尿病患者(T2DM组)和116例正常对照者(对照组)的GYS1进行XbaⅠ多态性检测，选择A1／A1基因型和A1／A2基因型PCR样品各1例进行测序。结果：在T2DM组中未检出XbaⅠ多态性A2等位基因。在对照组中发现1例A1／A2基因型，没有发现A2／A2基因型，A2等位基因频率为0．0043，A1／A2基因型频率为0．0086。2组之间A2等位基因的频率差别无统计学意义。测序的2例PCR样品碱基序列均有3处与美国国立医学图书馆网站上GenBank公布的人类GYS1内含子14碱基序列有差异。结论：中国天津地区人群中GYS1的XbaⅠ多态性与T2DM无关。测序发现的3处差异很可能与种族不同、基因变异或PCR方法本身的误差有关。     

肌肉糖原合酶基因Xba Ⅰ变异的种族差异

目的：研究中国天津人群中肌肉糖原合酶基因（GYS1）的XbaⅠ变异情况。方法：采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法对334例2型糖尿病（T2DM）患者（T2DM组包括188例合并高血压者）和116例健康查体者（正常对照组）的GYS1进行XbaⅠ变异筛查，并经测序证实。结果：在334例T2DM患者中未检出XbaⅠ变异A2等位基因。在116例正常对照组中发现1例A1／A2基因型者，未发现A2／A2基因型者，A2等位基因频率为0．0043，A1／A2基因型频率为0．0086，其频率明显低于国外报道。结论：GYS1的XbaⅠ变异分布存在种族和人群差异，尚不能认为该变异是中国天津人群T2DM及高血压的遗传标记。     

急性冠状动脉综合征患者白细胞介素-6基因多态性的研究

目的探讨白细胞介素-6（IL-6）基因-597G／A及-572C／C多态性在中国汉族人群中的分布频率及与急性冠状动脉综合征（ACS）的关系方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析方法检测了157例ACS患者和168例对照者的白细胞介素-6基因-597G／A及-572C／G基因型。结果ACS组和对照组两组研究对象中-597位点均仅发现C,G基因型；-572位点均存在CC、CG、C,G三种基因型，三种基因型频率依次分别为51．59％、42．68％、5．73％；63．10％、35．71％、1．19％：-572C／G基因型和等位基因频率在两组间分布存在显著差异（P均〈0．02），以CC基因型为参照，暴露于C6＋GC．基因型的OR值是1．60（95％可信区间CI：1．03～2．50，P〈0．02），校正了传统危险因素的影响后，该OR值仍然具有统计学意义195％可信区间（CI）：1．01～2．91，P〈0．051。-572C／G多态性与冠状动脉病变程度无关（P〉0．05）。结论中国汉族人群中可能不存在IL-6基因-597G／A多态性，存在-572C／G多态性，后者可能是中国汉族人群ACS发病的易感基因之一。     

佛山市汉族人群HIFIA基因1790（G→A）多态性研究

目的研究低氧诱导因子-1α基因（HIF1A）第12外显子1790（G→A）单核苷酸多态性在广东佛山市汉族人群中的分布特征。方法随机选取佛山市汉族健康个体90人的血样,提取白细胞基因组DNA,利用限制性片段长度多态性-聚合酶链反应（restriction fragment length polymorphisrm-polymerase chain reaction, RFLP-PCR）技术检测HIF1A基因第12外显子1790（G＋A）的单核苷酸多态性基因型,并分析其基因多态性特征。结果HIF1A基因1790（G→A）单核苷酸多态性的GG、GA和AA基因型频率分别为75．56％、21．11％和3．33％,G、A等位基因频率分别为86．11％、13。89％。广东佛山汉族人群HIF1A基因1790（G→A）单核苷酸多态性等位基因分布频率与日本人群相比差异有显著意义（P〈0．05）。结论广东佛山汉族人群HIF1A基因1790（G→A）多态性以GG基因型分布频率高,具有一定的种族差异性。     

Gβ3基因C825T多态性与抗抑郁药的临床疗效

目的：研究中国南京地区人群中Gβ3基因C825T多态性与抗抑郁药的临床疗效是否存在相关性。方法：采用聚合酶链式反应－限制性片段长度多态性分析（PCR－RFLP）技术对154例抑郁症患者和100例健康志愿者进行基因型分析；用HAMD评定抗抑郁药的疗效。结果：抑郁症患者Gβ3基因基因型频率（CC22．7％，CT31．8％，TT44．8％）等位基因频率（C38．6％，T61．4％）；与正常对照组基因型频率（CC27．0％，CT51．0％，TT22．0％），等位基因频率（C52．5％，T47．5％）比较具有显著性差异（P＜0．001，P＜0．05）；140例抗抑郁药显效者Gβ3基因型频率（CC20．7％，CT31．4％，TT47．9％），等位基因频率（C364％，T63．6％）和14例药物无效者基因型频率（CC42．9％，CT35．7％，TT21．4％），等位基因频率（C60．7％，T39．3％）比较有显著性差异（P＜0．001，P＜0．001）；不同基因型抑郁症患者经4wk SSRI,SNRI类抗抑郁药治疗后，HAMD总分均显著下降，减分率有显著差异（CC与CT比较，P＞0．05；CC与TT比较，P＜0．01；CT与TT比较，P＜0．05）。结论：在中国南京地区人群中Gβ3基因C825T多态性与抑郁症及抗抑郁药疗效有关。     

脂蛋白脂肪酶外显子9基因突变研究

目的 :筛查国人脂蛋白脂肪酶 (LPL)外显子9基因突变和Ser447→stop突变频率 ,并探讨该突变对血脂水平的影响。方法 :依血脂测定结果 ,将169例分为高甘油三酯血症组(HTG组 ) ,48例和正常甘油三酯组(对照组 )121例 ,利用聚合酶链反应 -单链构象多态性和聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性分析技术对待测人群的LPL基因外显子9及其相邻内含子区域进行突变筛查 ,并对典型单链构象电泳图谱携带者进行PCR产物测序。结果 :在169例中检出1例Ser447→stop突变纯合子 ,50例Ser447→stop杂合子 ,未检出其它位点的突变 ;HTG组的Ser447→stop突变检出率 (25.0 % ,12/48)明显低于对照组 (31.4 % ,38/121) ,HTG组的Stop447 等位基因频率(12.5% )明显低于对照组 (16.5% ),两组比较差别均有统计学意义(P<0.01)。结论 :我国人群中LPL外显子9突变种类单一 ,Ser447→stop是一高频率的多态性位点 ,Stop447等位基因可能有轻微的降低血浆甘油三酯的作用。     

Graves病白细胞减少与CTLA-4基因多态性的相关性

目的：探讨天津地区汉族人Graves病（GD）合并白细胞减少，与细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-H4（CTLA-4）基因外显子1第49位点A／G和启动子-318位点C／T二态性的相关性。方法：运用PCR—RFLP技术分析40例GD白细胞减少患者、56例GD白细胞正常患者及60例正常人CTLA-4基因、外显子1第49位点和启动子-318位点基因型．计算并比较各组基因型和等位基因频率。结果：GD组第1外显子第49位点基因型GG和等位基因G的频率明显高于正常对照组，3组人群的CTLA-4基因启动子-318位点的基因型与等位基因的分布差别无统计学意义。GD白细胞减少组与GD白细胞正常组之间基因型、等位基因的分布差别无统计学意义。结论：CTLA-4基因外显子1G49可能是天津地区汉族人Graves病的易感基因，而其与启动子-318位点可能不是天津地区汉族人GD合并白细胞减少的易感基因。     

PECAM-1单核苷酸多态性与中国人群冠心病的相关性

目的研究血小板内皮细胞黏附分子-1（PECAM-1）基因第2外显子单核苷酸多态性（SNP）与中国人群冠心病的相关性。方法选择90例冠心病患者及年龄、性别相匹配的115例正常对照组,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法检测PECAM-1基因型,比较两组基因型及等位基因频率分布。结果冠心病组V／V基因型频率（40．00％）明显高于对照组（23．48％）（P〈0．05）;与对照组相比,冠心病组V等位基因频率（58．89％）明显升高,L等位基因频率（41.11%）明显降低（P〈0．05）;吸烟使V／V基因型者冠心病发病危险度由2．17上升至3．50（P〈0．05）。结论PECAM-1基因第2外显子SNP与中国人群冠心病相关,V／V基因型可能是中国人群冠心病的遗传易患因子。     

脂蛋白脂肪酶基因突变的研究

目的：筛查国人脂蛋白脂肪酶(LPL)基因的突变，并探讨其与高甘油三酯血症的关系。方法：对高甘油三酯血症组(48例)和正常甘油三酯对照组(121例)的各扩增片段进行分析，电泳图谱异常者进行PCR产物测序。对于频率较高的多态性位点，引入限制性核酸内切酶位点利用PCR-RFLP进行鉴定。结果：在高甘油三酯血症人群中，检出2例内含子3受位剪接点上游6bp的C→T转换的突变杂合子，1例外显子5Pm^207→Leu突变杂合子，在全部样品中检出1例Ser^447→stop突变纯合子，50例Ser^447→stop杂合子。结论：天津地区人群中存在着LPL基因突变，除Ser^447→stop外，内含子3和外显子5的突变多与高甘油三酯血症相关，可能是高甘油三酯血症的遗传易感因子。     

中国2型糖尿病人中CYP2C8、CYP2C9基因多态性

目的：查明CYP2C9、CYV2C8等抗糖尿病药物主要代谢酶的基因多态性在中国2型糖尿病（T2DM）A-群中的分布频率和分布特征。方法：运用多聚酶链反应．限制性长度多态性（PCR．RFLP）方法和变性高效液相色谱法（DHPLC）对222名中国T2DM患者进行了有功能意义的CYP2C8＊3、CYP2C8P404A和CYP2C9＊3,以及可能存在功能意义的CYP2C8IVs2（-5insertt）突变体等等位基因型检测,并计算了各等位基因的频率。结果：222名中国T2DM患者的CYP2C8基因中未检出CYP2C8＊3、P404A型,CYP2C8IVS2（-5insertt）和CYP2C9＊3等位基因的频率分别为43．0％、2．48％,二者突变等位基因在男、女性别分布中不存在差异（P〉0．05）,同时为CYP2C8IVS2（-5insertt）和CYP2C9＊1＊3基因的频率为6．3％,该联合突变基因型的分布也不存在性别差异（P〉0．05）。结论：中国T2DM患者中CYP2C9＊3的等位基因频率为2．48％;未检出CYP2C8。3和P404A型,CYP2C81VS2（-5insertt）突变体发生频率为43．0％,其是否影响CYV2C8的代谢活力有待于进-步研究。     

E-选择素基因多态性与新疆哈萨克族原发性高血压的相关性研究

目的探讨E-选择素（E-selectin）基因第2外显子＋G98T和第4外显子＋A561C位点单核苷酸多态性在新疆哈萨克族人群中的分布,并分析E-selectin基因多态性与原发性高血压的相关性。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）的分析方法,检测了新疆哈萨克族人群无血缘关系的150例原发性高血压患者和150名对照者E-selectin基因＋G98T位点及＋A561C位点多态性,同时用生化分析仪检测相关生化指标。结果①新疆哈萨克族人群中E-selectin基因＋G98T多态性位点存在GG、GT二种基因型,其中以GG基因型发生频率最高（91．3％）,GT基因型频率次之（8．7％）;同时也存在AA、AC二种基因型,其中以AA基因型发生频率最高（88．0％）,AC基因型频率次之（12．0％）;②E-selectinAc基因型在高血压组和对照组间的分布差异存在显著性（X2=5．31,P〈0．025）。结论新疆哈萨克族人群中存在E-selectin＋G98T和＋A561C两位点单核苷酸多态性,其中A561C基因多态性与原发性高血压具有相关性,C等位基因可能是新疆哈萨克族原发性高血压发病的遗传易感基因。     

中国新疆维吾尔族硫嘌呤甲基转移酶基因突变研究

目的 研究硫嘌呤甲基转移酶(thiopurine S-methyltransferase，TPMT)在新疆维吾尔族中的基因突变频率。方法 用等位基因特异性的PCR方法和限制性片断长度多态性的方法检测4种常见的导致酶活性降低的突变类型：TPMT*2、TPMT*3A、TPMT*3B和TPMT*3C。结果 在160名维吾尔族中发现了1例TPMT*3A(A719G／G460A)杂合子、5例TPMT*3C(A719G)杂合子，TPMT*3A和TPMT*3C的等位基因频率分别是0．3％和1．6％。结论 维吾尔族总的TPMT突变等位基因频率(1．9％)同中国其他民族相近；TPMT*3C是维吾尔族最主要的突变类型。     

内皮型一氧化氮合酶基因多态性与原发性高血压的关系研究

目的:探讨天津市汉族人群内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因G894T和27 bp数目可变的串联重复序列(VNTR)多态性与原发性高血压的关系.方法:对500例研究对象根据血压分为原发性高血压组350例和对照组150例,采用PCR-RFLP对2组eNOS第7外显子G894T及第4内含子VNTR进行基因多态性分型.分析不同基因型与高血压发病的关系.结果:(1)2组eNOS G894T位点2组基因型和基因频率差异无统计学意义(P＞0.05).(2)高血压组eNOS第4内含子VNTR aa+ab基因型及a等位基因频率高于对照组(P＜0.05).(3) eNOS基因G894T和第4内含子VNTR对高血压的发生无协同作用.结论:eNOS基因G894T多态性与原发性高血压无关,而第4内含子VNTR多态性与原发性高血压存在相关性,两者无协同作用.     

醛糖还原酶基因多态性同2型糖尿病肾病的相关性

目的：研究醛糖还原酶(AR)基因启动子区C(-12)G多态性同2型糖尿病肾病(DN)发生及发展的相关性。方法：采用PCR-RFLP技术在209例2型糖尿病和84例对照组人群中筛查该位点等位基因及基因型的频率，比较在无肾病组及肾病各组中频率的差异，以推断AR基因是否参与了肾病的发生和进展。结果：G等位基因在肾病组的分布频率是87．2％，高于无肾病组的78．1％和正常对照组的77．4％；GG基因型在肾病组的分布频率是74．4％，高于无肾病组的63．8％和正常对照组的57．1％。结论：AR基因-12位点G等位基因及GG基因型是2型DN发生的独立危险因素。     

血管紧张素112型受体基因多态性与原发性高血压(英文)

目的:在中国人群中检测血管紧张素Ⅱ2型受体(AT_2R)基 因多态性,并通过病例-对照研究揭示其与原发性高血压(EH)的相关性。方法:通过直接测序的方法,对19个高血压个体进行AT_2R基因的单核苷酸多态性(SNP)检测,250例高血压患者和250例正常对照用于检测AT_2R基因多态性是否与EH相关。结果:在AT_2R基因的启动子、内含子、外显子和3’非编码区共检测到9个SNP,其中5个为首次在中国人群中发现,对启动子区最高频的SNP (1334T/C)进行病例-对照研究,显示C~(1334)等位基因频率在男性高血压患者中(17.5％)明显升高(男性正常对照为10.3％,P<0.05)。结论:中国人群AT_2R基因的SNP目录显示基因变异存在种族差异,AT_2R基因启动子区的1334T/C多态性可能与中国人群EH相关。     

白细胞介素-18基因多态性与脑梗死相关性研究

目的探讨白细胞介素-18（IL-18）基因启动子区-137G／C与脑梗死关系及其对血脂、脂蛋白水平的影响。方法运用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）方法检测190例脑梗死患者及对照组210例的IL-18基因型,同时测定血浆脂质、脂蛋白水平。结果IL—18基因-137G／C多态性在两组人群中的分布差异具有统计学意义（P〈0．05）,等位基因频率的相对风险分析发现,C等位基因携带者患脑梗死的风险是G等位基因的1．624倍（OR=1．624,95％CI：1．134—2．324）;携带C等位基因的脑梗死个体血清TC水平显著高于不携带者（P〈0．05）。结论IL-18基因．137G／C多态性与脑梗死发病具有相关性,其中C等位基因可能是脑梗死的遗传易感基因。     

等位基因特异扩增法检测移植患者多药耐药基因多态性

目的：建立等位基因特异扩增法（Allele-Specific Amplification，ASA-PCR）研究移植患者多药耐药基因（multi-drugre—sistancegene，MDR1）多态性。方法：用ASA．PCR对177位肝、肾移植患者的MDR1第26外显子C3435T、第21外显子G2677T／A位点和第12外显子C1236T位点进行基因分型。结果：ASA—PCR测定结果与聚合酶链式反应一限制性片断长度多态性方法（Polymerase chain reaction-Restriction Fragment Analysis，PCR-RFLP）的测定结果一致。177例移植患者DNA标本中，C3435T：CC型69例（39.0％），CT型92例（52．0％），TT．型16例（9．0％）；G2677T／A：GG型39例（22．0％），GT型48例（27、1％），TT．型32例（18．1％），GA型30例（16．9％），AT型24例（13．6％），AA型4例（2.3％）；C1236T：CC型23例（13.0％），CT型88例（49．7％），TT型66例（37．3％）。结论：采用ASA—PCR检测移植患者MDR1多态性准确、方便，可为临床个体化用药提供理论依据。