Rh弱D型1例报告

弱 D是只能与某些抗 -D发生凝集 ,或只能经抗球蛋白试验证明的 D抗原 [1 ]。笔者在对无偿献血者的 Rh血型检定中 ,发现 1例弱 D,现报告如下。一般资料　　献血者 ,女 ,学生 ,汉族 ,首次参加无偿献血 ,ABO血型为 O型。血型血清学检查1　诊断试剂　抗 -D试剂 :A为德国 Biotest的抗 -D(单克隆 Ig M+Ig G) ,B为上海血液中心提供的抗 -D(单克隆 Ig M+Ig G) ,C为苏州大学提供的抗 -D(单克隆 ( Ig M+Ig G)。抗球蛋白试剂 (抗 -Ig G-C3d)由上海血液中心提供。聚凝胺试剂由本室自配。2　血清学检查2 .1　献血者红细胞与抗 -D的反应见表…     

107177名无偿献血者中检出弱D9例

本站自1997年开始检测无偿献血者RhD血型,至2005年3月,107177名无偿献血者中检出Rh阴性258名,占0.24%,其中弱D9名,占Rh阴性献血者的3.5%,报告如下。1材料与方法1.1试剂初筛试剂抗-D(Ig M)(Baso公司);确证试剂抗-D1(IgG,991018,20011102,20040408);抗-D2(IgG Ig M,991117,BMK0207C,BMD0302D);木瓜酶/抗球蛋白,抗-C、-c、-E、-e;筛选细胞(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),谱细胞(Ⅰ~Ⅹ)(上海血液中心)。1.2血型血清学方法盐水法、木瓜酶法、抗球蛋白法均严格按文献[1]方法要求操作。盐水法初筛结果为阴性后,同时用木瓜酶法、抗球蛋白法进一步确认。结…     

细胞浓度对血型血清学试验灵敏度的影响

目的探索在常用血型血清学试验细胞浓度范围内,浓度的上限和下限对直接血凝试验及间接抗球试验的检测灵敏度是否有影响。方法采用单克隆Ig M及Ig G抗-D分别与1%、2%、3%、4%、5%、6%的R1R2细胞反应,通过试管法结合流式细胞术,检测抗体与不同浓度红细胞的反应效价,以及同一抗体浓度下不同浓度红细胞的抗体结合效率的差异。并采用酶联免疫吸附(ELISA)方法对单克隆抗体浓度进行定量。结果单克隆Ig M抗-D及Ig G抗-D的效价随着红细胞浓度的下降而依次降低,在常用血清学红细胞浓度范围内,2%红细胞与两类抗体的反应效价皆是5%的4倍。在相同抗体浓度下,细胞结合抗体平均荧光强度(MFI)随细胞浓度下降而升高。其中当Ig M、Ig G抗-D浓度分别为(25.50±1.1)μg/m L和(2.71±0.08)mg/m L时,2%红细胞结合Ig M抗-D及Ig G的MFI分别比5%红细胞高出104.2%和67.8%。结论在常用血型血清学试验细胞浓度范围内,血型血清学试验检测灵敏度随红细胞浓度下降而升高。     

一例B_m~h类孟买型的鉴定

类孟买型是红细胞上缺乏H抗原的一种罕见表型,目前研究证实a1,2岩藻糖基转移酶基因(FUT1)的突变导致类孟买型[1,2]。国内已发现多例类孟买型,我们在无偿献血人群中发现1例Bhm类孟买型。一、材料和方法1.样本先证者为无偿献血员,男,汉族,32岁,因ABO血型正反定型不一致而进一步试验。先证者家系见图1。图1献血者家系2.血型血清学检查(1)试剂:单克隆抗A、抗B(上海血液生物医药有限责任公司),抗AB、抗H、抗Lea、抗Leb(加拿大TITUS公司);(2)红细胞吸收释放试验:2管1 m l洗涤3次的献血者压积红细胞,分别与1 m l混合的人源标准血清抗A、抗…     

海南地区O型献血者ABO血型抗体效价检测分析

目的:通过检测海南地区O型献血者血清中Ig M抗A(B)与Ig G抗A(B)抗体的效价,了解海南地区O型献血者Ig M类及Ig G类抗体效价分布情况,分析不同抗体间效价关系,为海南地区O型通用血的安全性和可行性提供实验依据。方法:采集80份O型健康献血者的全血标本,采用试管法测定Ig M抗A、抗B抗体,采用微柱凝胶法测定Ig G抗A、抗B效价。采用两因素方差分析、配对t检验以及相关分析,进行不同抗体类型间比较。结果:Ig M抗体效价分布于4-1024,Ig G抗体效价分布于2-2 048。Ig G抗A抗体效价显著高于Ig M抗B、Ig G抗B、Ig M抗A的效价(P0.05),且Ig M抗A与Ig M抗B、Ig M抗B与Ig G抗B、Ig G抗A与Ig G抗B存在正相关(P0.05)。结论:海南地区O型献血者抗体效价偏高,用于异型输注的O型悬浮红细胞应先通过初筛Ig G抗A效价,再进行Ig M抗A、抗B与Ig G抗B抗体效价检测,可显著提高O型通用血筛选的合格率,并降低检测成本。     

微板法血型自动检测几个影响因素的探讨

笔者采用微板法血型自动检测方法［1］,对自配红细胞的保存时间、加样顺序、血型板的洁净程度,作了较详细的探讨。并通过19223例的血型检测,正反定型相符达到99.99%,准确率达到100%。从而完善微板法血型自动检测,节约了耗材和开支。 1 材料与方法 1.1 仪器与试剂 AT-PLUS2全自动加样系统(HAMILTON公司瑞士),HT-Ⅲ酶标仪和T.S温控孵育振荡仪(Anthos 公司奥地利),ModelTJ-6平板式离心机(BECKMAN公司美国),96孔U型板(购自上海血液中心参比实验室)。抗-A、抗-B单克隆抗血清（购自长春生物制品研究所）,标准4%A、B红细胞（购自澳斯邦公司）自配试剂红细胞（A型和B型红细胞分别取自筛选后的3人份新鲜ACD抗凝血,洗涤混合后配成4%的红细胞）。96孔洗板机（TECAN,A-5082购自奥地利） 1.2 实验操作程序①利用自动加样仪加样,正定：25μl标准血清+25μl样品细胞（4%）,反定：25μl样品血浆+25μl试剂细胞（4%）;②振荡孵育28℃、400r/min、8min、3accel;③平板离心400r/min、1min;④振荡悬浮28℃、1000 r/min、2min、2 accel;⑤静置5～10min;⑥判读：扫描点数15、测定波长620nm。（借助于AUSFINE判读软件） 1.3 实验例数：19223例;实验组：微板法;对照组：纸片法。     

一种使用抗RhD单抗测定临床用免疫球蛋白制品抗-D能力的竞争性放射免疫测定法

作者建立了一种使用单克隆抗-D的竞争性放射免疫测定法,利用标记的抗-D单抗和未标记的抗-D制品竞争结合抗原,从而测定预防用免疫球蛋白制品的抗-D能力。采用三种人单克隆抗-DFog-1,Brad-3和Brad-5作为~(125)I标记标准,对多种抗-D制品进行了检测,并将检测结果与自动分析法进行了比较。 首先需通过红细胞稀释曲线求得放射免疫法(RIA)中应采用的红细胞浓度。以确保一定抗原浓度。红细胞以1:1为起始浓度,进行5倍连续稀释,将110μl各稀释度的红细胞分别与10μl~(125)I标记的单克隆抗-D于37℃孵育1小时,洗涤。离心后,用γ-计数器测定结合到细胞上的放射活性,以结合的放射百分数对     

国产METIS 150全自动血型仪参数优化与性能验证

目的对国产METIS 150全自动血型仪进行试验参数优化和性能验证。方法用已知血型标本,分别对标本红细胞稀释法、红细胞悬液加量、试剂红细胞加量、抗-A/抗-B/抗-D稀释倍数及加量、标本血浆加量等可选参数进行预选,以结果正确率最高为依据确定优化参数;优化血型仪参数后,用已知标本对ABO定型和Rh(D)筛查结果的准确性、重复性和方法敏感性进行验证。结果离心条件、反应温度、振荡方式、吸液、注液、洗针等六项厂家推荐参数适当;标本红细胞12μl+300μl盐水制备悬液,25μl/孔红细胞悬液+25μl抗-A、抗-B原液,正定型结果正确率可达100%;25μl/孔红细胞悬液和1∶10稀释抗-D 25μl/孔,Rh(D)筛查结果正确率可达100%;血浆70μl/孔+试剂红细胞25μl/孔,反定型结果正确率可达100%。参数优化后,ABO定型和Rh(D)筛查结果准确率达100%,4份A2B亚型定型正确,4份疑难血型提示结果疑问,1年时间检测全部献血者标本30 694份血型结果无错误。结论参数优化后,METIS 150血型仪检测血型的结果准确可靠,可用于临床供血标本的血型检测。     

不同容量一次性加样针对全自动Addcare ELISA检测的影响

目的评价不同容量一次性加样针对全自动Addcare ELISA检测结果的影响,特别是加样量属微量的试验。方法分别用300μl和800μl的一次性加样针分配纯水10μl、50μl和100μl,称重并计算相对误差和精密度;各选一份HBsAg、抗-HBs、抗-HCV、抗-HEV IgM以及抗-HEV IgG室内定值弱阳性质控品,在全自动Addcare ELISA 600分析系统分别用300μl和800μl一次性加样针进行检测,计算该五个项目各孔间S/CO值和CV值,并进行统计学分析。结果两种容量加样针分配10μl、50μl和100μl纯水的相对误差E和精密度CV均达到移液器国家计量基准,使用300μl容量加10μl和50μl的准确度明显优于800μl(P0.05),加100μl差异无统计学意义(P0.05),使用300μl容量三种加样量的CV值均小于800μl;两种容量加样针检测抗-HBs、抗-HCV和抗-HEV IgM的S/CO值有显著差异(P0.05),HBs Ag和抗-HEV Ig G无显著差异(P0.05),使用300μl容量加10μl项目各孔间S/CO值的CV值明显小于800μl。结论不同容量一次性加样针对加样量10μl和50μl的检测项目影响较为明显,在使用全自动Addcare ELISA检测时,应当选择适当容量的加样针以满足微量样本分配准确度和精密度的要求。     

不同容量一次性加样针对全自动Addcare ELlSA检测的影响

目的 评价不同容量一次性加样针对全自动Addcare ELISA检测结果的影响,特别是加样量属微量的试验.方法分别用300μl和800μl的一次性加样针分配纯水10μl、50μl和100μl,称重并计算相对误差和精密度;各选一份HBsAg、抗-HBs、 抗-HCV、 抗-HEV IgM以及抗-HEV IgG室内定值弱阳性质控品,在全自动Addcare ELISA 600分析系统分别用300μl和800μl一次性加样针进行检测,计算该五个项目各孔间S/CO值和CV值,并进行统计学分析.结果两种容量加样针分配10μl、50μl和100μl纯水的相对误差E和精密度CV均达到移液器国家计量基准,使用300μl容量加10μl和50μl的准确度明显优于800μl(P<0.05),加100μl差异无统计学意义(P>0.05),使用300μl容量三种加样量的CV值均小于800μl;两种容量加样针检测抗-HBs、抗-HCV和抗-HEV IgM的S/CO值有显著差异(P<0.05),HBsAg和抗-HEV IgG无显著差异(P>0.05),使用300μl容量加10μl项目各孔间S/CO值的CV值明显小于800μl.结论不同容量一次性加样针对加样量10μl和50μl的检测项目影响较为明显,在使用全自动Addcare ELISA检测时,应当选择适当容量的加样针以满足微量样本分配准确度和精密度的要求.     

血清学鉴定罕见Rhnull血型1例

笔者在无偿献血者中发现1例缺失D、C、c、E、e抗原的Rhnull型。国际上有14个家族的22例报道[1]。现将结果报告如下。1材料与方法1.1样本来源本中心无偿献血者,女,32岁,否认输血史及生育史,有2次药物流产史。1.2试剂和仪器单克隆抗-A、-B血清(长春博德公司,批号20050306);IgM抗-D血清(苏州大学医学生物技术研究所,批号20041204);IgG IgM抗-D血清(台湾Baso、德国Biotest、法国Diagast公司),人源IgG抗-D血清(中国医学科学院输血研究所),抗-C、-c、-E、-e血清(德国Biotest公司),DianaGel微柱凝胶卡、WADiana全自动配血系统(Grifols…     

四种方法在检测O型孕妇红细胞免疫抗体中的比较

我们采用4种方法对5种R h抗血清和120例孕妇血清IgG抗体进行检测并加以比较,现报告如下。1对象和方法1.1对象2006-08来我院进行抗A-(B)抗体测定的O型孕妇120例,年龄20~36岁,孕期16~38周。将待测血清用二巯基乙醇(2-m e)破坏IgM抗-A(B)后,倍比稀释血清中IgG抗A(B)抗体效价。1.2材料已知抗-D、抗-C、抗-c、抗-E、抗-e血清,由美国公司生产;伯奥木瓜酶,由上海生物科技公司生产;抗人球蛋白血清,由上海血液中心生产;M PT试剂由台湾B aso公司提供;凝胶法:由长春博迅生物技术公司提供包括(谱红细胞1号、2号、3号,凝胶微柱板,离心机,孵育器)…     

M血型检测的影响因素及M抗原与Mur血型的关联性

目的探讨M抗原和抗-M检测的影响因素,了解M抗原与Mur抗原的关联性,调查广东省中山地区人群M血型的发生频率。方法采用微孔板(或试管)盐水法,对该地区581例无偿献血者进行M和Mur血型抗原筛查,观察不同条件下人源性抗-M和单克隆抗-M检测的敏感性。结果该地献血者中M抗原与Mur抗原的发生频率分别为78.0%(453/581)、7.9%(46/581),其中Mur抗原者中M抗原阳性发生频率为100.0%(46/46)。孵育温度越低,抗-M活性越高,孵育时间过短易导致敏感性降低;试剂红细胞越新鲜,敏感性更高。结论M抗原与Mur抗原两者存在密切相关性。M抗原抗体检测最佳孵育温度和时间分别为4℃、15 min,单克隆抗-M试剂应选择效价高的试剂(如1∶16以上),抗体筛选红细胞试剂尽可能选择新鲜的,以纯合子最佳。     

Rh(-)献血者网络的建立与应用

人类红细胞血型 ,由 2 0多种血型系统组成 [1 ] ,Rh血型系统就是其中一种 ,在临床意义上仅次于 ABO血型系统 ,我国汉族人群中仅占 3‰～ 4‰ [2 ]。为了及时给临床提供安全有效的 Rh(- )血液 ,我中心于 2 0 0 1- 10 - 0 1开始对无偿献血者进行常规Rho(D)筛查 ,并建立了 Rh(- )血型献血者档案 ,进一步建立和完善了 Rh(- )无偿献血者网络。1　对象和方法1.1　对象　郑州地区无偿献血者 18336名。1.2　试剂来源　美国 Immuciv公司单克隆 Ig M+Ig G抗 - D试剂。抗人球蛋白血清、菠萝酚干粉由上海血液中心提供。1.3　方法　用美国 Immuciv…     

IgM+IgG型抗-M1例报告

抗 - M是一种室温盐水凝集素 [1] ,这种抗体大多是天然产生的。 Ig M型抗 - M抗体屡有报道 [2 -4] ,而 Ig M+ Ig G型的报道较少。最近笔者在血型鉴定工作中发现 1例具有 Ig M+ Ig G性质的抗 - M抗体 ,现报告如下。临床资料献血者 ,男 ,37岁 ,无输血史。红细胞定型为 B型 ,其血清与 A、B、O细胞反应均呈 4+凝集 ,与自身细胞不凝集。为查明原因 ,做了进一步检查。方法与结果1　血型鉴定　献血者血型为 B,CCDee,N,P1。2　血清中抗体特异性鉴定　采用上海市血液中心血型参比室提供的试剂红细胞检定献血者血清。试验分别在不同温度和不…     

无偿献血人群中34例ABO血型正反定型不符原因分析

为了保障输血安全,根据我国《血站基本标准》要求,血液血型必须做正反定型,确保血型准确无误,实际工作中常遇到正反定型不一致,笔者就本站出现的34例正反定型不一致进行总结,报告如下。1临床资料1.1一般资料2002~2006年郑州地区340 211无偿献血者出现34例正反定型不符的标本。1.2试剂与仪器抗-A、抗-B单克隆抗血清(长春博得生物技术有限公司);抗-AB、抗-H、抗-M、抗-N、抗-A1以及谱细胞(上海血液中心);A型红细胞、B型红细胞、O型红细胞(本中心自制);RSP全自动加样系统(瑞士TECAN公司);STAR或AT全自动加样系统(瑞士H am ilton公司…     

1例类孟买ABmh血型的鉴定

类孟买血型是一种罕见的血型,血清学表现与常规ABO血型有很大差异。在我站无偿献血人群中,1例红细胞与抗A、抗B均不凝集,血清凝集ABO细胞。经进一步检测,证实为类孟买ABmh血型,现报告如下。1材料与方法1.1标本来源献血者,胡某,21岁,籍贯福建蒲田市,在血型鉴定过程中,其正反定型符合O型,但血清凝集O型红细胞。重新采集外周静脉血,收集唾液,进一步做血清学试验。1.2试剂试剂红细胞和标准抗血清(上海血液中心),鼠抗人单克隆抗-Lea、抗-Leb抗体(加拿大Titus公司)。1.3ABO定型正定型中增加抗-A1、抗-AB、抗-H,反定型增加自身细胞,血清学…     

6例同种免疫孕妇血清中IgG抗-D亚类的定量分析

Rh抗原是仅次于ABO血型系统的与新生儿溶血病(HDN)有关的重要抗原,其引发的HDN的严重程度远甚于ABO HDN。造成Rh HDN的抗体比较复杂,常见的有抗-D,-E,-C等。我们对6名因抗-D引发Rh HDN的患儿的母亲血清中IgG抗-D亚类作了定量分析,以探讨IgG抗-D各亚类与Rh HDN的关系。1材料与方法1.1样本2003-2005年大连市妇产医院送检新生儿(出生<2天)及其母亲的血样至本中心,经诊断新生儿均患抗-D所致HDN。患儿母亲均有流产、死胎等不良妊娠史。1.2仪器与试剂标准红细胞(2%-5%)、酶处理红细胞均由本室自制,抗球蛋白试剂(加拿大Dominion…     

定量检测输入Rh-D阴性者的D阳性红细胞结合的肌注单克隆IgG抗-D

研究输入Rh(+)红细胞的Rh(-)个体注射抗-D后D+红细胞之清除,可以评价单克隆人抗-D预防Rh新生儿溶血病的效果。为了探讨体内D+红细胞被抗-D致敏的水平是否与其被清除有关,作者采用一种流式细胞仪定量检测D+红细胞上结合的抗-D。此法可以测大量D-红细胞中的少量D+红细胞上被血浆中低浓度抗-D致敏后结合的IgG分子数。 选择12名D-男性志愿者,分别肌内注射300～600μg抗-D(IgG_3或IgG_1),测定血浆中抗-D浓度后,再静脉注入3ml~(51)Cr标记的D+红细胞。然后在不同时间采血样测定红细胞寿命,再在0、6分及3小时分别     

血清中IgG红细胞血型抗体定量检测方法初探

目的探索建立同种免疫患者血清中IgG红细胞血型抗体定量的吸收放散-ELISA技术。方法采用阴性红细胞平行操作,作为空白对照,通过吸收、放散纯化血清中IgG抗体,用ELISA方法测定放散液中IgG抗体浓度,换算成血清中抗体浓度。采用该方法对8名孕妇血清中的同种抗体(抗-D、抗-E各4例)进行定量检测。结果ELISA法测定4名孕妇血清中IgG抗-D浓度范围为(1.086—54.712)μg/ml,IgG抗-E浓度范围为(0.080—7.646)μg/ml。结论本研究初步建立的简便、实用的血清IgG红细胞血型抗体定量方法,可用于准确测定孕妇血清中IgG特异性抗体的浓度。