天花粉蛋白抑制TCR介导的JurkatT细胞蛋白酪氨酸磷 …

研究天花粉蛋白抑制Ｔ细胞增殖的作用机理。方法以抗ＣＤ３的ＭｃＡｂ刺激ＪｕｒｋａｔＴ细胞增殖，以＾３Ｈ－ＴｄＲ同位素掺入法观察Ｔｋ对其抑制作用。用免疫沉淀和免疫印迹法测定胸浆蛋白酪氨酸磷酸化情况。     

淋巴细胞经TCR－CD3活化增殖作用的分析

本文探讨了抗ＣＤ３单抗诱导的淋巴细胞活化增殖及有关影响因素。实验结果表明：①淋巴细胞内钙升高是淋巴细胞活化增殖的重要条件，ＣＤ３ＭｃＡｂ引起的早期胞浆游离钙迅速升高主要由内质网释放钙离子所致，而淋巴细胞增殖不仅需要细胞内钙释放，还需要细胞外钙内流；②ＧＴＰ结合蛋白是淋巴细胞激活过程的一重要环节，经Ｇ蛋白作用物霍乱毒素作用后，淋巴细胞ＤＮＡ合成显著降低；③新霉素和ＰＳＳ可抑制ＰＬＣ和ＰｋＣ的活性，对淋巴细胞ＮＤＡ合成造成剂量依赖性抑制作用。此外，抗ＣＤ３ＭｃＡｂ诱导的淋巴细胞ＤＮＡ合成需要辅佐细胞的存在，高度纯化的Ｔ细胞对ＣＤ３ＭｃＡｂ的刺激不发生增殖反应。     

CD28复合刺激信号对人外周血T淋巴细胞c-Re1的影响

报道ＣＤ２８信号传导对正常人外周血Ｔ淋巴细胞原癌基因ｃ－Ｒｅ１的影响。用免疫磁珠阴性选择法从外周血单个核细胞中分离出Ｔ淋巴细胞，经ＣＤ２８单克隆抗体及ＰＭＡ复合刺激，提取胞核和胞浆蛋白， 分别用于与ｃ－Ｒｅｌ抗血清或磷酸化酪氨酸的单克隆抗体做免疫沉淀反应和／或ＳＤＳ－ＰＡＧＥ，用ｃ－Ｒｅｌ抗体作为探针。最后用放射自显影技术显示ｃ－Ｒｅｌ的存在和酪氨酸的磷酸化。采用ＣＴＬＬ法测定Ｔ细胞上清液的ＩＬ－２量。研究结果表明：ＣＤ２８的复合刺激促进ｃ－Ｒｅｌ的诱生、核内转移和酪氨酸成酸化，并使活化的Ｔ细胞ＩＬ－２的产生增加。这些结果证明ＣＤ２８依赖的酪氨酸磷酸化的Ｔ细胞途径与ｃ－Ｒｅｌ有直接的相关。     

PLCγ1的SH_2氨基末端区是TCR诱导的PLCγ1磷酸化的基础

酪氨酸（Ｔｙｒ）磷酸化激活的ＰＬＣγ１可催化磷酯酰肌醇水解生成ＩＰ３和ＤＧ,作为第二信使调节Ｔ细胞活化过程中细胞反应子的表达。ＰＬＣγ１的ＳＨ２功能域能结合磷酸化Ｔｙｒ及其附近氨基酸来启动蛋白反应。作者认为ＰＬＣγ１ＳＨ２功能域的氨基末端区在ＴＣＲ诱导的ＰＬＣγ１Ｔｙｒ磷酸化过程中是必不可少的。作者设计了ＰＬＣγ１ＳＨ２功能域氨基突变型Ａｒｇ５８６和羧基突变型Ａｒｇ６９４、Ａｒｇ６９６,并采用在ＰＬＣγ１磷酸化过程中的表位标记法来分析ＳＨ２功能。作者发现ＰＬＣγ１谷胱甘肽Ｓ转移酶ＧＳＦＳＨ２功…     

CD28复合刺激信号对人外周血T淋巴细胞c—Rel的影响

报道ＣＤ２８信号传导对正常人外周血Ｔ淋巴细胞原癌基因ｃ－Ｒｅｌ的影响。用免疫磁珠阴性选择法从外周血单个核细胞中分离出Ｔ淋巴细胞，经ＣＤ２８单克隆抗体及ＰＭＡ复合刺激，提取胞核和胞浆蛋白，分别用于与ｃ－Ｒｅｌ抗血清或磷酸化酪氨酸的单克隆抗体做免疫沉淀反应和／或ＳＤＳ－ＰＡＧＥ，用ｃ－Ｒｅｌ抗体作为探针。最后胜放射自显影技术显示ｃ－Ｒｅｌ的存在和酪氨酸的磷酸化。采用ＣＴＬＬ法测定Ｔ细胞上清液的ＩＬ－２     

抗TCR/CD3单克隆抗体的免疫增强作用及其应用

抗ＴＣＲ／ＣＤ３单克隆抗体（抗ＴＣＲＭｃＡｂ,抗ＣＤ３ＭｃＡｂ）对Ｔ细胞具有强活化作用,已成为当今最常用的Ｔ细胞活化剂之一。本文从免疫增强角度着重归纳了抗ＴＣＲ／ＣＤ３ＭｃＡｂ激活Ｔ细胞的条件、机制和效应,并简要介绍了其在免疫功能低下疾病中研究应用的现状     

淋巴细胞经TCR—CD3活化增殖作用的分析

本文探讨了抗ＣＤ３单抗诱导的淋巴细胞活化增殖及有关影响因素。实验结果表明：①淋巴细胞内钙升高是淋巴细胞活化增殖的重要条件，ＣＤ３ＭｃＡｂ引起的早期胞浆游离钙迅速升高主要由内质网释放钙离子所致，而淋巴细胞增殖不仅需要细胞内钙释放，还需要细胞外钙内流；②ＧＴＰ结合蛋白是淋巴细胞激活过程的一重要环节，经Ｇ蛋白作用物霍乱毒素作用后，淋巴细胞ＤＮＡ合成显著降低；③新霉素和ＰＳＳ可抑制ＰＬＣ和ＰＫＣ的活性，对     

AC－cAMP－PKA途径对淋巴细胞DNA合成的调节作用

以ＣＤ３ＭｃＡｂ为激动剂，以淋巴细胞体外ＤＮＡ合成为研究手段，探讨了ＡＣ－ｃＡＭＰ－ＰＫＡ信号途径在ＣＤ３ＭｃＡｂ诱导的淋巴细胞活化中的意义。研究结果表明ＡＣ、ｃＡＭＰ和ＰＫＡ在决定细胞对外界刺激的反应中起着重要作用。在淋巴细胞活化早期细胞内ｃＡＭＰ出现一过性升高，随着细胞活化增殖，ｃＡＭＰ降至正常水平以下。活化ＡＣ、升高细胞内ｃＡＭＰ水平可显著降低ＣＤ３ＭｃＡｂ诱导的淋巴细胞ＤＮＡ合成，而ＰＫＩ却能在一定程度上促进淋巴细胞活化增殖。     

天花粉蛋白对T细胞活化的抑制作用与信息传导

目的 观察天花粉蛋白经由ＴＣＲ／ＣＤ３介导的信号传递途径抑制Ｔ细胞活化增殖的效应方法 用各种不同的刺激信号来激活外周血淋巴细胞，然后观察天花粉蛋白对其增殖抑制的影响。接着测定天花粉蛋白对ＣＤ３单抗刺激后Ｔ淋巴细胞内一些信号传导物质变化的影响。结果 天花粉蛋白抑制经由ＴＣＲ／ＣＤ３信号传导途径诱发的淋巴细胞增殖。进而发现细胞内游离钙离子的升高，蛋白激酶Ｃ的转位和细胞内蛋白酪氨酸磷酸化受天花粉蛋白的抑     

CD3ε胞浆区Tyr突变阻断下游的细胞凋亡信号传递

目的 利用稳定表达ＣＤ８ε融合分子的细胞凋亡模型研究其ＣＤ３ε－ＩＴＡＭ中两个酪氨酸的突变对细胞凋亡信号传递及相关基因表达的影响。方法 将稳定表达ＣＤ８ε融合分子及其３种突变分子的Ｔ淋巴细胞分别用抗ＣＤ８单克刺激后,检测４种细胞蛋白酪氨酸的磷酸化和胞浆Ｃａ＾２＋浓度的变化以及细胞凋亡相关基因表达。结果：抗体刺激后,表达ＣＤ８ε的细胞与表达其３种突变分子的细胞相比,其蛋白磷酸化增加,胞浆Ｃａ＾２＋浓     

小鼠胸腺基质细胞单抗对胸腺细胞及脾细胞增殖的抑制作用

试验两种大鼠抗小鼠胸腺基质细胞（ＭＴＳＣ）ＭｃＡｂｓＰｆ１８－３、Ｒｓ２１－Ｃ６的生物作用。Ｐｆ１８－３ＭｃＡｂ识别分子表达于胸腺细胞、脾脏Ｔ及Ｂ细胞；Ｒｓ２１－Ｃ６只表达于ＭＴＳＣ。加Ｐｆ１８－３或Ｒｓ２１－Ｃ６于ＭＴＥＣＩ与胸腺细胞或脾细胞的体外培养中，在ＣｏｎＡ存在及不存在下，均可抑制ＭＴＥＣ１诱导胸腺细胞及脾细胞的增殖作用。ＣｏｎＡ活化下，其对胸腺细胞增殖的抑制率Ｐｆ１８－３为９６％；Ｒｓ２１－Ｃ６为９１％。对脾细胞的抑制率Ｐｆ１８－３为７５％；Ｒｓ２１－Ｃ６为５１％。Ｐｆ１８－３对单纯ＣｏｎＡ活化的胸腺细胞增殖也有显著的抑制作用，而Ｒｓ２１－Ｃ６无此作用。包被于平皿的固相Ｐｆ１８－３ＭｃＡｂ，对胸腺细胞、脾细胞均有轻度但显著的促增殖作用。故Ｐｆ１８－３ＭｃＡｂ识别的抗原分子（及其配基）参与Ｔ细胞的活化过程。鉴于Ｐｆ１８－３＋细胞的分布有其特异性，分析此抗原分子的功能有重要的意义。     

天花粉蛋白对T细胞活化的抑制作用与信号传导

目的观察天花粉蛋白经由ＴＣＲ／ＣＤ３介导的信号传递途径抑制Ｔ细胞活化增殖的效应。方法用各种不同的剌激信号来激活外周血淋巴细胞，然后观察天花粉蛋白对其增殖抑制的影响。接着测定天花粉蛋白对ＣＤ３单抗剌激后Ｔ淋巴细胞内一些信号传导物质变化的影响。结果天花粉蛋白抑制经由ＴＣＲ／ＣＤ３信号传导途径诱发的淋巴细胞增殖。进而发现细胞内游离钙离子的升高，蛋白激酶Ｃ的转位和细胞内蛋白酪氨酸磷酸化受天花粉蛋白的抑制。结论天花粉蛋白可通过ＴＣＲ／ＣＤ３的信号传导途径抑制Ｔ细胞增殖。     

AC—cAMP—PKA途径对淋巴细胞DNA合成的调节作用

以ＣＤ３ＭｃＡｂ为激动机，以淋巴细胞体外ＤＮＡ合成的研究手段，探讨了ＡＣｃＡＭＰ－ＰＫＡ信号途径在ＣＤ３ＭｃＡｂ诱导的淋巴细胞活化中的意义，研究结果表明ＡＣ，ｃＡＭＰ和ＰＫＡ在决定细胞对外界刺激反应中起着重要作用，在淋巴细胞活化早期细胞内ｃＡＭＰ出现一过性升高，随着细胞活化增殖，ｃＡＭＰ降至正常水平以下，活化ＡＣ，升高细胞内，ｃＡＭＰ水平可显著过性升高，随着细胞活化增殖，ｃＡＭＰ降至正常水平以下，     

抗TCR／CD3单克隆抗体研究应用的现状与展望（一）抗TCR／CD3单克

ＴＣＲ／ＣＤ３复合体是Ｔ细胞功能和特异性的主要调节者，抗ＴＣＲ／ＣＤ３单克隆抗体（抗ＴＣＲ／ＣＤ３ＭｃＡｂ）能模拟其重量性配体，并与之结合，然而这些抗体导致Ｔ细胞呈现两个相反的效应─—Ｔ细胞的活化和抑制，且这两方面在基础研究及临床中都被广泛应用。本文首先归纳概述了抗ＴＣＲ／ＣＤ３ＭｃＡｂ及其体内的免疫抑制机制，并对其在自身免疫病和器官移植领域中的应用进行了综述。     

小鼠胸腺基质细胞单抗对胸腺细胞及脾细胞增殖的抑…

试验两种大鼠抗小鼠胸腺基质细胞ＭｃＡｂｓ：Ｐｆ１８－３、Ｒｓ２１－Ｃ６的生物作用。Ｐｆ１８－３ＭｃＡｂ识别分子表达于胸腺细胞、脾脏Ｔ及Ｂ细胞；Ｒｓ２１－Ｃ６只表达于ＭＴＳＣ。加Ｐｆ１８－３或Ｒｓ２１－Ｃ６于ＭＴＥＣ１与胸腺细胞或脾细胞的体外培养中，在ＣｏｎＡ存在及不存在下，均可抑制ＭＴＥＣ１诱导胸腺细胞及脾细胞的增殖作用。ＣｏｎＡ活化下，其对胸腺细胞增殖的抑制率Ｐｆ１８－３为９６％；Ｒｓ２１－Ｃ６     

抗TCR／CD3单克隆抗体研究应用的现状与展望：（一）抗TCR／CD3单克…

ＴＣＲ／ＣＤ３复合体是Ｔ细胞功能和特异性的主要调节者，抗ＴＣＲ／ＣＤ３单克隆抗体（抗ＴＣＲ／ＣＤ３ＭｃＡｂ）能模拟其性配体，并与之结合，然而这些抗体导致Ｔ细胞呈现两个相反的效应－Ｔ细胞的活化和抑制，且这两方面在基础研究及临床中都被广泛应用。本文首先归纳概述了抗ＴＣＲ／ＣＤ３ＭｃＡｂ及其体内的免疫抑制机理，并对其在自身免疫病和器官转移领域中的应用进行了综述。     

McAb共激活T细胞介导肝癌细胞前后的膜分子与TCRVβ基因的表达

Ｔ淋巴细胞活化是一个涉及多种膜表面分子和受体以及一系列相关多肽的复杂过程，为了使Ｔ细胞发挥更好的识别和杀伤癌细胞的功能，采用抗ＣＤ３、ＣＤ２８、ＣＤ８０（Ｂ７１）、ＣＤ２、ＣＤ５８ＭｃＡｂ分别刺激健康人ＰＢＬｓ后作用肝癌细胞，对作用前后ＰＢＬｓ用ＦＡＣＳ进行表型分析，结果发现：作用后ＣＤ３和ＣＤ８分子表达比作用前明显增高，而ＣＤ４分子无显著变化，同时基因家族采用ＲＴＰＣＲＳｏｕｔｈｅｒｎ印迹分析ＴＣＲＶβ基因１～２０亚家族表达水平与特征，健康人ＰＢＬｓ分别加入ＩＬ２、ＰＨＡ、抗ＣＤ３和ＣＤ３＋ＣＤ２８、ＣＤ２８＋ＣＤ８０、ＣＤ２＋ＣＤ５８作用肝癌细胞（ＢＥＬ７４０２）前表达水平平均约为５％，作用ＢＥＬ７４０２后表达水平约为１３％～２５％，其特征为Ｖβ７增高，这提示在癌抗原的参与下ＭｃＡｂ共刺激的Ｔ细胞活化，ＴＣＲ接受ＡＰＣ相应抗原的刺激，具有该ＴＣＲ的淋巴细胞迅速增殖而成为针对抗原的Ｔ细胞克隆，发挥其识别和杀伤癌细胞的作用，这将为肿瘤生物治疗的研究提供分子免疫学依据。     

抗人B7（CD80）分子单克隆抗体的制备及鉴定

为了利用抗Ｂ７ｍＡｂ深入研究Ｂ７分子的作用，我们用融合蛋白Ｂ７Ｉｇ免疫小鼠，用细胞ＥＬＩＳＡ及间接膜免疫荧光法进行筛选，得到了两株抗Ｂ７ｍＡｂ３Ａ２和３Ｂ６克隆，其Ｉｇ类别分别属于ＩｇＭ和ＩｇＧ２ａ型。在功能上３Ａ２能明显抑制抗ＣＤ３ｍＡｂ诱导的Ｂ７分子协同刺激的Ｔ细胞增殖     

抗远缘链或菌OMZ176表面蛋白抗原（220kD）单克隆抗体的制备

采用远缘链球菌ＯＭＺ１７６（ｄ血清型）全菌细胞作抗原，通过免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，细胞融合，杂交瘤细胞的筛选及亚克隆，最终获得抗远缘链球菌ＯＭＺ１７６表面蛋白抗原（２２０ｋＤ）的单克隆抗体（ＷＣ３Ａ６）。结果表明：ＭｃＡｂ的Ｉｇ及亚类鉴定为ＪｇＧ２ａ，ＥＬＩＳＡ效价１：８０００，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ鉴定可见ＭｃＡｂ与２２０ｋＤ蛋白抗原发生特异性结合。与变形链球菌ＭＴ６Ｒ（Ｃ血清型）有弱的交叉反应（ＯＤ值＝０．２３）。     

协同激活分子CD80（B7—1）在诱导人T细胞活化中的作用

现已证实ＣＤ８０（Ｂ７－１）是参与Ｔ细胞活化的重要分子，应用ＣＤ８０基因转染的人乳腺癌细胞观察了Ｔ细胞增殖的影响，结果表明ＣＤ８０分子在抗ＣＤ３模拟的第一信号下能协同刺激Ｔ细胞活化，ＰＭＡ，Ａ２３１８７能明显增强ＣＤ８０的协同作用，且可促进ＩＬ－２，ＩＦＮ－γ等细胞因子的产生。在第二信号的强度固定后，观察了第一信号的强弱对Ｔ细胞活化的影响，结果显示抗ＣＤ３单抗在１００ｎｇ／ｍｌ时刺激Ｔ细胞增殖最强