肾母细胞瘤组织中碱性成纤维细胞生长因子和纤维细胞生长因子受体表达分析

肾母细胞瘤 (ＮＢＴ)是婴幼儿泌尿系最常见的恶性肿瘤。我们采用ＲＴ ＰＣＲ技术对ＮＢＴ组织中碱性成纤维细胞生长因子 (ｂＦＧＦ)和纤维细胞生长因子受体 (ＦＧＦＲ)基因进行定量分析 ,探讨其临床意义。资料与方法　 38例ＮＢＴ标本、2 2例肾癌癌旁组织标本 ,均经病理学诊断证实为ＮＢＴ。患儿年龄 1～ 3岁。实验方法 :总ＲＮＡ提取。ｂＦＧＦ、ＦＧＦＲ引物由北京奥科生物有限公司合成。引物序列采用ｐｒｉｍｅｒｐｒｅｍｉｅｒ 5 .0软件处理系统设计 ,并以 β ａｃｔｉｎ为内参照。ＲＴ ＰＣＲ试剂购自大连宝生物有限公司 ,采用 2 0 μ…     

人工关节无菌松动界膜中破骨细胞分化因子受体免疫阳性的多核巨细胞

人工关节置换术后最重要的并发症是假体周围骨溶解导致的假体无菌松动 ,松动的机理还不完全清楚。随着骨代谢研究的进展 ,调节破骨细胞形成和功能的肿瘤坏死因子家族 (ＴＮＦｓ)新成员 :骨保护蛋白 (ＯＰＧ)、破骨细胞分化因子 (ＲＡＮＫＬ)及其受体 (ＲＡＮＫ)相继被发现 ,它们在人工关节置换术后无菌松动中的作用成为人工关节研究的新热点[1] 。本研究拟建立界膜多核巨细胞分离培养法 ,并初步探讨ＲＡＮＫ在多核巨细胞上的表达。1.资料和方法 :(1)界膜多核巨细胞分离培养 :人工髋关节置换术后无菌松动病人的界膜经手术翻修取得。新鲜界膜…     

与妇科有关的心身障碍

与妇科有关的心身障碍ＰｓｙｃｈｏｓｏｍａｔｉｃｄｉｓｏｒｄｅｒｓｒｅｌａｔｅｄｔｏｇｙｎｅｃｏｌｏｇｙＦＡＢＩＯＦＡＣＣＨＩＮＥＴＴＩ，ＫＯＥＮＤＥＭＹＴＴＥＮＡＥＲＥ，ＬＯＲＥＤＡＮＡＦＩＯＲＯＮＩ，ＩＳＡＢＥＬＬＡＮＥＲＩ，ＡＮＤＲＥＡＲ．ＧＥＮ...     

神经生长因子对脊髓损伤后神经元N-甲基-D-天门冬氨酸受体和一氧化氮生成的影响

我们用原位杂交法通过检测神经生长因子 (ＮＧＦ)作用于损伤脊髓前后Ｎ 甲基 Ｄ 天门冬氨酸受体 (ＮＭＤＡＲ) 1及固有型一氧化氮 (ＮＯ)合酶 (ｎｃＮＯＳ)ｍＲＮＡ的表达变化来探讨ＮＧＦ保护损伤脊髓的机理 ,现报道如下。一、材料和方法1 .动物及分组 :Ｗｉｓｔａｒ大鼠 65只 ,体重 2 0 0～ 2 50 ｇ ,雌雄不分 ,随机分成 3组 :正常组 :5只 ,不作手术 ,作为测量脊髓ＮＭＤＡＲ1和ｎｃＮＯＳ的正常数值 ;生理盐水 (ＮＳ)组 :30只 ,经蛛网膜下腔导管注入生理盐水 ;ＮＧＦ组 :30只 ,经导管注入ＮＧＦ。2 .动物模型的建立 :以 1 0 ｇ× 2 .5ｃ…     

3－酮－地索高诺酮对雌、孕及雄激素受体亲和力选择性的实验研究

采用体外放射配体受体结合法测定３－酮－地索高诺酮（ＫＤＧ）与兔子宫胞浆雌激素受体（ＥｃＲ）、孕激素受体（ＰｃＲ）和大鼠腹侧前列腺胞浆雄激素受体（ＡｃＲ）结合的亲和力，并以左旋１８－甲基炔诺酮（ＬＮＧ）作对照，从受体水平探讨ＫＤＧ对当体激素受体的选择性。结果表明：ＫＤＧ对ＰｃＲ有很高的亲和力，是ＬＮＧ的１．５倍；对ＡｃＲ的亲和力很低，仅为ＬＮＧ的０．７４倍；对ＥｃＲ几乎没有亲和力，受体亲和力选择系数也明显高于ＬＮＧ。由此可见，在ＬＮＧ甾核结构中Ｃ１１位引入次甲基合成的ＫＤＧ，其受体亲和力选择性更专一。     

3－酮－地索高诺酮对雌、孕及雄激素受体亲和力选择性的实验研究

采用体外放射配体受体结合法测定３－酮－地索高诺酮（ＫＤＧ）与兔子宫胞浆雌激素受体（ＥｃＲ）、孕激素受体（ＰｃＲ）和大鼠腹侧前列腺胞浆雄激素受体（ＡｃＲ）结合的亲和力，并以左旋１８－甲基炔诺酮（ＬＮＧ）作对照，从受体水平探讨ＫＤＧ对当体激素受体的选择性。结果表明：ＫＤＧ对ＰｃＲ有很高的亲和力，是ＬＮＧ的１．５倍；对ＡｃＲ的亲和力很低，仅为ＬＮＧ的０．７４倍；对ＥｃＲ几乎没有亲和力，受体亲和力选择系数也明显高于ＬＮＧ。由此可见，在ＬＮＧ甾核结构中Ｃ１１位引入次甲基合成的ＫＤＧ，其受体亲和力选择性更专一。     

血管内皮生长因子反义寡核苷酸及抗KDR抗体对人肝癌细胞系HHCC的生长抑制作用

本研究采用ＶＥＧＦ反义寡核苷酸 (ｏｌｉｇｏｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ,ＯＤＮ)抑制ＶＥＧＦ分泌及抗ＫＤＲ抗体封闭ＫＤＲ的方法 ,观察它们对体外培养的肝癌细胞系ＨＨＣＣ细胞生长情况的影响 ,以探讨ＶＥＧＦ及其受体在肝细胞癌中的作用。材料与方法1.细胞株 :人肝癌细胞株ＨＨＣＣ由第四军医大学病理学教研室 86 3课题组保存并提供 ,培养于含 10 0ｍｌ/Ｌ胎牛血清的ＲＰＭＩ 16 40培养液中。2 .寡核苷酸及抗体 :ＯＤＮ由上海生工合成 ,ＰＡＧＥ电泳纯化。反义ＯＤＮ为针对ＶＥＧＦ第 3外显子单链区第 37 5 5共 19个碱基设计而成 ,…     

丹参主要活性成分防治骨质疏松症分子机制研究进展

丹参作为目前临床治疗骨质疏松症的常用中药之一?已有大量研究表明其具有防治骨质疏松症的作用? 现代药理学研 究发现?丹参及其活性成分可以从骨质疏松症进展的多个环节进行干预:促进间充质干细胞向成骨细胞分化?促进成骨细胞 的增殖和矿化作用?抑制成骨细胞的凋亡?纠正体内氧化应激状态促进骨形成?调节骨髓微环境成骨与成脂分化的平衡?抑制 破骨细胞的分化、增殖及骨吸收作用等? 涉及的信号通路?包括成骨细胞相关的ＢＭＰ/ Ｓｍａｄｓ 信号通路、Ｗｎｔ/ β￣ｃａｔｅｎｉｎ 信号通 路、ＥＲＫ 信号通路和ＰＩ３Ｋ/ ＡＫＴ 信号通路?以及破骨细胞相关的ＯＰＧ/ ＲＡＮＫＬ/ ＲＡＮＫ 信号通路及其下游的ＭＡＰＫｓ、ＮＦ￣κＢ 和 Ａｋｔ 信号通路? 为探讨丹参在体内抗骨质疏松作用的确切机制?以及为研究和开发抗骨质疏松新型药物?笔者就近年报道的 丹参主要活性成分防治骨质疏松症的分子作用机制作一综述?     

雌激素受体阴性乳癌细胞株中Cyclin D1和Ki-67表达与细胞凋亡的关系

本研究应用雌激素受体 (ＥＲ)阴性乳癌细胞株ＭＤＡ ＭＢ 435ｓ探讨在ＥＲ阴性乳癌细胞中ＣｙｃｌｉｎＤ1及Ｋｉ 67表达与细胞凋亡的关系。1　材料与方法1 .1　材料ＥＲ阴性乳癌细胞株ＭＤＡ ＭＢ 435购于中科院上海细胞生物研究所 ,凋亡检测试剂盒、ＣｙｃｌｉｎＤ1单抗及Ｋｉ 67单抗购于ＭａｘｉｍＢｉｏｔｅｃｈ公司 ,ＵＳＡ。1 .2　检测指标及方法1 .2 .1　细胞周期和凋亡率测定　将 2× 1 0 5个 /ｍｌ浓度的ＭＤＡ ＭＢ 435ｓ细胞接种于 2 4孔板中 ,再将 1 0 - 8ｍｏｌ/Ｌ的 1 ,2 5(ＯＨ) 2 Ｄ3加入 2 4孔板中 ,于 1、2、3、4、5天作流…     

胆管癌表皮生长因子受体,增殖细胞核抗原的表达

为研究胆管癌组织中表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达及其生物学意义，并探讨ＥＧＦＲ表达与血型Ａ抗原的关系，通过应用免疫组织化学方法（ＡＢＣ法）检测３０例肝外胆管癌。结果发现１５例（５０％）为ＥＧＦＲ阳性，ＰＣＮＡ阳性７例（２３．３３％），对照组５例为非肿瘤胆总管，ＥＧＦＲ、ＰＣＮＡ均为阴性。胆管癌与非肿瘤胆总管组ＥＧＦＲ及ＰＣＮＡ表达率有显著差异，细胞分化差、有胆管外转移的胆管癌ＥＧＦＲ的表达率高于细胞分化好、无胆管外转移病例。胆管癌各组间ＰＣＮＡ表达率均无显著性差异。ＥＧＦＲ表达与血型Ａ抗原无关。结果提示：检测ＥＧＦＲ表达是判断胆管癌增生活性的有效手段，而ＰＣＮＡ尚需进一步研究。     

胃癌表皮生长因子及雌激素受体同步表达的临床意义

胃癌表皮生长因子及雌激素受体同步表达的临床意义何双梧，郭连营，谢尚奎用免疫组化ＡＢＣ法检测１０４例胃癌组织中表皮生长因子受体（ＥｐｉｄｅｒｍａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｒｅｃｅｐｔｏｒＥＧＦＲ）和雌激素受体（Ｅｓｔｒｏｇｅｎｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＥＲ）表...     

前列腺细胞核蛋白的分离纯化

我们曾在前列腺特异抗原 (ＰＳＡ)启动子中雄激素应答元件 (ＡＲＥ)上游鉴定了一长度为 15ｂｐ的顺式作用元件 ,命名为ＲＦＡ[1] 。实验证明ＲＦＡ可显著增强雄激素受体 (ＡＲ)对ＰＳＡ基因的反式激活作用 ,并特异地与前列腺细胞核中某些调节蛋白结合 ,这些蛋白很可能作为辅助活化子参与ＡＲ介导的反式激活作用。我们以ＲＦＡ序列为探针 ,利用ＤＮＡ亲和层析从人前列腺癌细胞ＰＣ 3核蛋白中分离纯化ＲＦＡ结合蛋白 ,并予鉴定 ,为进一步研究提供依据。材料和方法　人前列腺癌细胞株ＰＣ 3由本室保存。ＤＩＧｇｅｌｓｈｉｆｔｋｉｔ购自Ｒｏｃ…     

可溶性肿瘤坏死因子受体和Fas受体在胰腺癌中的表达及其意义

本研究测定了胰腺癌患者血清可溶性肿瘤坏死因子受体 (ｓｏｌｕｂｌｅｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒｒｅｃｅｐｔｏｒ,ＳＴＮＦＲ)和可溶性Ｆａｓ(ｓＦａｓ)受体的血清水平 ,旨在评估其功能及与临床的关系 ,探讨ｓＴＮＦＲｓ和ｓＦａｓ的生物学意义。一、对象和方法1.对象 :1996年 6月～ 1998年 12月在我院住院的 31例胰腺癌患者 ,其中胰头癌 2 4例 ,胰体癌 5例 ,胰尾癌 2例 ,年龄范围 5 5～ 71岁 ;33名健康人作为正常对照组 ,平均年龄(4 2± 10 )岁 ;胰腺良性疾病 (慢性胰腺炎、胰岛细胞瘤及胰腺囊肿 )患者 2 3例 ,平均年龄 (5 4…     

胃泌素受体拮抗剂抑制胃癌细胞生长的可行性研究

目的　探讨应用胃泌素受体拮抗剂治疗胃癌的可行性。方法　在体外条件下观察胃泌素及其受体拮抗剂丙谷胺对胃癌细胞株ＭＫＮ４５ 的细胞活力、细胞内ｃＡＭＰ浓度及细胞凋亡的影响;在体内条件下观察胃泌素受体拮抗剂丙谷胺对胃癌细胞株ＭＫＮ４５ 移植瘤的面积、重量及胃癌细胞ＤＮＡ 的影响。结果　在体外条件下,胃泌素能促进胃癌细胞株ＭＫＮ４５ 的增殖,细胞内ｃＡＭＰ浓度增高,细胞凋亡百分率降低,而丙谷胺能完全阻断胃泌素的作用。在体内条件下,丙谷胺能抑制胃癌细胞株ＭＫＮ４５ 移植瘤的生长,肿瘤面积、重量及胃癌细胞ＤＩ、ＤＮＡ 含量、ＳＰＦ均低于对照组。结论　胃泌素受体拮抗剂能够抑制胃泌素受体阳性的胃癌细胞生长,有望为胃癌的治疗提供一种新手段。     

血小板活化因子及其受体对颈髓损伤后血脊髓屏障损害的 …

探讨血小板活化因子及其受体对颈髓损伤后血脊髓屏障损害的的分子机制。方法：采用蛛网膜下腔注射ＰＡＦ及静脉注射ＰＡＦ受体拮抗剂ＢＮ５２０２１，应用地高辛标记ｃＤＮＡ探讨针原交技术检测颈髓损伤后颈髓血管内皮细胞细胞间粘附分子－１ｍＲＮＡ和     

BPH组织中雄激素受体与转化生长因子-βⅠ型受体表达的相关性研究

目的探讨雄激素受体（ＡＲ）与转化生长因子βⅠ型受体（ＴＧＦβＲⅠ）在良性前列腺增生（ＢＰＨ）组织中表达的意义及其相关性。方法采用免疫组化法研究两种受体在３１例ＢＰＨ和２２例正常前列腺标本中表达的状况。结果ＡＲ和ＴＧＦβＲⅠ在ＢＰＨ上皮、间质组织中的表达显著高于正常前列腺组织（Ｐ＜００５）;在ＢＰＨ间质组织中ＡＲ和ＴＧＦβＲⅠ的表达呈正相关（相关系数ｒ＝０３５８,Ｐ＜００５）。结论ＡＲ和ＴＧＦβＲⅠ在前列腺增生组织中表达增高,两者之间具有协同作用,提示两者在前列腺中的过表达可能参与了ＢＰＨ的发生和病理过程。     

应用^99mTc—DTPA清除率测定肾小球滤过率及与传统方法的比较研究

目的为临床准确评估ＧＦＲ提供一定依据。方法我们对３２例慢性肾脏病患者及５例正常志愿者，用９９ｍＴｃ－ＤＴＰＡ的清除率测定肾小球滤过率（Ｔｃ－ＧＦＲ），同时测定血尿素氮（ＢＵＮ），肌酐（Ｓｃｒ），２４小时肌酐清除率（２４ｈＣｃｒ）和采用Ｃｏｃｋｃｒｏｆｔ－Ｇａｕｌｔ公式计算肌酐清除率（Ｃｃｏｃｋｃｒｏｆｔ），并进行比较和分析。结果以上指标与Ｔｃ－ＧＦＲ均存在相关关系；它们检出Ｔｃ－ＧＦＲ下降的敏感性分别是５０％、５８％、６９％和８０％；２４ｈＣｃｒ和Ｃｃｏｃｋｃｒｏｆｔ与Ｔｃ－ＧＦＲ的相关性显著优于ＢＵＮ，Ｃｃｏｃｋｃｒｏｆｔ检出Ｔｃ－ＧＦＲ下降的敏感性显著优于ＢＵＮ。结论传统的指标除ＢＵＮ外均能一定程度地准确反映ＧＦＲ。９９ｍＴｃ－ＤＴＰＡ清除率可以准确，安全，有效地测定ＧＦＲ，适用于某些对ＧＦＲ精确性要求较高的情况。     

男性包皮组织胞浆和核内雄激素受体分析及其初步应用

本文报道以氚标记Ｒ１８８１为特异性配基，直接测定男性包皮组织胞浆和核内雄激素受体（ＡＲ）的方法和结果。成年男性包皮组织直接制备胞浆；粗核沉淀经洗脱后用０．６ｍｏｌ／ＬＫＣｌ溶液抽提核浆。按Ｓｃａｔｃｈａｒｄ作图法分析了１１例样品及６份作为阳性对照的小鼠肝脏组织胞浆ＡＲ和核内ＡＲ。包皮组织胞浆ＡＲ最大受体结合容量（Ｂｍ）为２４．０３±７．１９ｆｍｏｌ／ｍｇ蛋白，解离常数（Ｋｄ）为１５．１３×１０－１０ｍｏｌ／ｌ；核内ＡＲ的Ｂｍ为２０４．３７±１１９．６２ｆｍｏｌ／ｍｇ蛋白，Ｋｄ为６．３８×１０－１０ｍｏｌ／Ｌ。３例完全型对雄激素不敏感综合征患者会阴皮肤活检组织的胞浆ＡＲ和核内ＡＲ均明显低于正常，核内ＡＲ的受体容量仅为６．１１～１１．２２ｆｍｏｌ／ｍｇ蛋白。由于不需经过组织和细胞培养，本方法更简便易行。     

BPH组织中雄激素受体与转化生长因子—βI型受体表达的相关？…

探讨雄激素受体与转化生长因子－βＩ型受体在良性前列腺增生组织中表达的意义及其相关性。方法采用免疫组化法研究两种受体在３１例ＢＰＨ和２２例正常前列腺本本中表达的状况。结果ＡＲ和ＴＧＦ－βＲＩ在ＢＰＨ上皮,间质组织中的表达显著高于正常前列腺组织;在ＢＰＨ间质组织中ＡＲ和ＴＧＦ－βＲＩ的表达呈正相关。     

疼痛刺激神经生长因子基因在大脑皮层的过量表达

本文用福尔马林 (Ｆｏｒｍａｌｉｎ)制作了小鼠疼痛及炎症模型 ,以甘油醛 3 磷酸脱氢酶 (ＧＡＰＤＨ)基因为内参照 ,采用半定量反转录聚合酶链反应 (ＲＴ ＰＣＲ)技术 ,观察了疼痛刺激神经生长因子基因(ＮＧＦｍＲＮＡ)在大脑皮层的变化以及硫酸镁 (ＭｇＳＯ4 )对ＮＧＦｍＲＮＡ表达的影响。材料和方法选用二级成年Ｂａｌｂ/ｃ雌鼠 32只 ,随机分为Ａ、Ｂ二组 ,每组 16只。Ｂ组每只腹部皮下注射 10 %ＭｇＳＯ45 0 0ｍｇ ｋｇ-1[1] ,Ａ组注射等体积生理盐水。 10ｍｉｎ后Ａ、Ｂ二组每只小鼠左后肢掌面皮下注射 5 %Ｆｏｒｍａｌｉｎ 40 μｌ。…