大鼠骨组织脱钙浅得

将大鼠的胫骨去掉周围软组织,经固定后置于5％的硝酸溶液中。每隔1—2小时用针刺组织,以能顺利刺入骨组织内为脱钙终点。脱钙完毕投入流水中冲洗24小时。再将组织置于70％酒精三份中,各1小时。进入常规脱水程序,最后透明、浸蜡、包埋。 切片染色时由于经过脱钙剂处理的组织酸化,染     

浅谈病理教学切片制作技术

目的以同一慢性肾盂肾炎组织进行病理教学切片取材、切片制作和常规医检取材,并进行切片制作比较,以探讨病理教学切片取材、切片制作技术的可行性和可靠性。方法昆明医学院第二附属医院病理科提供医检肾脏组织,分2组取材进行切片制作：（1）教学组：病理教学切片要求每个蜡块连续切片150-200片;取材范围为2cm×1cm,组织块厚0．4cm;切片制作全部手工操作,要求组织块固定、冲洗、脱水、透明、浸蜡、切片均与常规医检制片不同。（2）医检组：主要用于病理诊断,取材范围为1cm×1cm,组织块厚0．2cm;切片制作快而好,可用全自动脱水机固定、脱水、浸蜡;切片数量HE染色3～5片,特殊染色和免疫组化10～20片。结果病理教学切片与常规医检切片效果均符合中华医学会切片制作要求。结论病理教学切片制作技术可行、可靠。     

小鼠创伤愈合新生皮肤组织切片的制备

目的 探索有效的小鼠创伤愈合新生皮肤石蜡组织切片制作方法.方法 控制HE组织切片制作中关键步骤时间来对比不同方法之间的制片效果.结果 采用4%多聚甲醛中加0.04%戊二醛固定.中性PBS液冲洗组织切片10min,70%酒精过夜,80%、90%、95%酒精脱水各2h,无水乙醇脱水1h,在二甲苯中透明共15min,4步浸蜡法制作出的组织切片形态完整,质量较好.结论 摸索的新方法较一般常规组织切片制作方法不仅节省时间,更重要的是克服了一般常规方法制作出的新生皮肤组织切片组织破碎的问题,且重复性好.     

快速石蜡制片改良法(40例体会)

一、方法及步骤: 1.取材约0.5×0.5×0.2cm大小组织块。 2.用10％福尔马林固定液加热70—80℃1—2min,或用以下固定液(95％酒精75ml,甲醛20ml,冰醋酸5ml,此液有固定兼脱水作用)。 3.丙酮加热脱水(50℃以下) 1—2min。 4.迅速吸水纸吸一下入二甲苯加热70—80℃,透明,1—2min。     

骨组织脱钙后除酸方法的改进

骨、牙齿及其他钙化的组织 ,在制作切片前必须先经有机酸 (蚁酸、醋酸、甲酸 )及无机酸 (硝酸、盐酸、硫酸 )稀溶液浸渍脱钙后 ,还需经 2 4h流水冲洗除酸后才能常规脱水、浸蜡、切片、HE染色[1] 。此种方法除酸时间较长 ,而且染色效果并不十分理想。笔者经过大量的反复实践 ,探索出一种有效、方便、易掌握的快速除酸方法 ,染色效果比较满意 ,现报道如下。1　方法与结果　　将骨及钙化组织锯成 1.2cm× 1.2cm× 0 .3cm薄片 ,10 %甲醛固定 ,10 %硝酸脱钙 ,水洗 1min ;置入 2 %氢氧化钠液浸 10min ,流水冲洗 10min除酸 ;梯度乙醇脱水后再进行…     

皮肤石蜡半薄切片制作的方法与体会

１方法取材固定：取材组织块边长不大于３，厚度在３ｍｍ以下，用１０％中性福尔马林固定４～２小时。脱水透明：用５０％、７５％、８５％各级酒精分别处理半小时，再放入９５％酒精Ⅰ、Ⅱ液中各脱水１小时，然后在无水酒精Ⅰ、Ⅱ液中分别脱水１小时。用松节油Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ...     

PAS染色方法及应用

目的 探索PAS染色的方法和条件.方法 新鲜组织取材后,投入固定液内固定、脱水、透明、浸蜡、包埋.常规切片,脱蜡至水.入0.5%～1%高碘酸氧化,Schiff氏液避光染色,0.5%偏重亚硫酸钠(钾)浸洗,Harris苏木精染色,1%盐酸酒精分化,1%氨水返蓝,常规脱水,二甲苯透明,中性树胶封固.结果 PAS阳性物质呈紫红色或红色颗粒,胞核呈浅蓝色,其他物质呈淡粉红色.结论 PAS染色的条件要求较为具体,且限制条件较多,但针对性染色效果好.     

提高皮肤脂肪组织切片质量的体会

制作皮肤脂肪组织切片的关键步骤是脱水和浸蜡。若将皮肤脂肪组织脱水、透明后 ,加倍延长浸蜡时间 ,可提高皮肤脂肪组织切片的质量。现将制片体会介绍如下。1　方法1.1　取材　所取组织块长 2 .5ｃｍ、宽1.5ｃｍ、厚 0 .2ｃｍ。1.2　固定　用 10 %福尔马林液固定 6～ 12ｈ。1.3　脱水、透明和浸蜡　脱水 :70 %乙醇 1ｈ ,80 %乙醇 1ｈ ,95 %乙醇 1道、2道各 1ｈ ,10 0 %乙醇 1道、2道各 1ｈ。透明 :二甲苯 1道、2道各 2 0ｍｉｎ。浸蜡 :苯蜡 1ｈ ,软蜡 1ｈ ,纯蜡 8～ 12ｈ ,浸蜡 :温度为 5 8～ 6 0℃。2　结果本组 4 80例标本中成功 4 72例 ,…     

试论如何更好地在大批量组织切片制作中掌握和利用时间

组织切片在医学教学、科研、医院诊断及治疗疾病中有广泛应用,常需大批量制作,需要耗费制作者大量的精力及时间。制作一张组织切片需要经过取材、固定、脱水、透明、包埋、切片、烤片、脱水、染色、再脱水、再透明、封片等过程,是相当烦琐复杂的。因为石蜡组织切片制作时耗时耗资,各种制作流程所需的时间比较固定,比如说固定的时间、脱水的时间、透明的时间等,安排不好的话往往会在半夜里制作。笔者在制作时取哺乳动物的新鲜组织或器官,经4%的多聚甲醛固定24小时,然后脱水、透明、经石蜡固定后包埋在蜡块里,放在冰箱或放在温度适宜的环境中…     

病理HE切片制片中的技术改进

病理ＨＥ切片技术是临床病理检验和病理学教学中不可缺少的一个组成部分 ,切片的好坏将会直接影响到诊断结果和教学效果[1] 。为了使切片质量不断提高 ,笔者在平时的制片中通过反复推敲 ,对一些环节如烤片和透明过程等加以改进 ,取得较为满意的效果 ,现介绍如下。1　材料和方法将取材组织经常规 10 %甲醛溶液固定 ,流水冲洗 ,酒精依次脱水 ,二甲苯溶液透明和石蜡浸蜡 ,最后进入包埋切片[2 ] 。将切取的石蜡片 (3μｍ～ 4 μｍ)平摊于 4 5℃左右的恒温水箱中 ,及时捞片 ,置于晾干架上 ,以 2 2 0Ｖ ,4 50Ｗ电吹风对组织切片热吹风 3～ 4ｍｉｎ…     

骨组织切片染色方法的改良

骨组织检查可分为骨组织切片法和骨组织磨片法两种，磨片法因组织厚薄不均匀，并对骨的各层结构有损坏而应用较少，因此，常常使用１０％硝酸酒精脱钙和石蜡切片ＨＥ染色，但结构显示受一定限制。笔者用５％硝酸甲醛脱钙后Ｍａｌｌｏｒｙ染色获得良好效果，现报告如下。１　材料和方法新鲜羊骨一段锯成２ｃｍ长，置于５０～６０℃水浴４～５天使骨组织上附着软组织脱落干净，流水冲洗２４小时，凉干，用５％硝酸甲醛脱钙２～３天后再放入稀铵水１小时（隔半小时换一次），流水冲洗２４小时，直至大头针易刺进。常规脱水、透明、包埋、切片，…     

骨骼肌铁苏木精块染法

传统的骨骼肌铁苏木精染色 ,均采用片染 ,而且染色步骤繁琐、时间长 ,标本容易脱落 ,难以制作大量的教学切片。为了解决这一难题 ,我室经过多年探讨 ,模索出以下两种方法 ,供同行们参考 :1　方法一①取材及固定 :家兔舌肌或狗膈肌 ,固定于任何常用固定液 2 4ｈ。 (若是Ｂｏｕｉｎ液 ,染色前应先用 70 %酒精溶液去掉黄色 ,若是含有升汞的固定液 ,则先行“脱汞”处理后才染色 )。②组织块用蒸馏水洗后入Ｗｅｉｇｅｒｔ铁苏木精 1～ 2天。③水洗后 ,用 0 .5 %冰乙酸酒精 (70 %酒精 )液分色约 2ｈ。④流水冲洗2 4ｈ。⑤常规脱水 ,石蜡切片 4～ 6…     

石蜡包埋制作全喉大切片的体会

大切片的制作通常用火棉胶包埋，但其过程复杂，且切片太厚（400μm），不便于组织形态观察。我们用石蜡包埋法制作全喉标本切片，效果满意。1 材 料 尸检切取的全喉和手术切除的喉癌标本，按需要从水平、冠状、矢状面三个方向把喉切开，取材的厚度在3cm左右。用15%的甲醛固定。2 方 法2.1 脱钙 对已有钙化的甲状软骨用5%的硝酸水液脱钙，时间限为72h以内，脱钙后用流水充分水洗。2.2 脱水透明 将全喉放在有盖的容器内依次进行脱水与透明。70%、80%、90%酒精各脱水12h。两次100%洒精各脱水6h；两次二甲苯透明各6h。3.3 浸蜡、包埋 经透明后,…     

淋巴结组织切片制作68例探讨

目的:探讨如何提高淋巴结组织切片的制作方法。方法:对68例淋巴结组织按照取材-固定-脱水-透明-浸蜡-包埋-切片-染色-封片的步骤进行制作。结果:所制68例淋巴结组织切片均为3～4um的薄片,并连续成带,包膜完整,无破碎,切片染色均匀,胞核呈蓝紫色,胞浆呈鲜艳的红色,胞核着色适中,组织细胞核仁、核膜结构清晰,色彩对比度强。结论:淋巴结组织切片的制作取材时应剔除周围的脂肪组织,切开组织立即投入lO%福尔马林固定液固定,由70%低浓度的乙醇逐渐向100%高浓度脱水,选用二甲苯做透明处理,浸蜡石蜡的熔点控制在58℃～60℃,进行包埋,常规锋利切片刀切片,采用苏木素染色,伊红复染,中性树胶封片。可取得较高质量的切片。     

提高淋巴结病理切片质量的体会

目的探讨优质合格的淋巴结HE切片的制片技术。方法淋巴结送检标本与其他组织标本在处理上是不同的,淋巴结活检标本离体后需立即固定(首选改进的B-5固定液),取材1.0cm×1.0cm×0.3cm,梯度乙醇从低到高浓度脱水;透明浸蜡同时进行,采用硬脂酸和石蜡混合替代二甲苯效果最佳。切片刀锋利,切片厚薄为2.5~3.0μm;苏木精染色时间短,0.5%~1.0%盐酸分化,严格控制好分化时间,用热水返蓝,伊红染色数秒,梯度乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封片。结果提高淋巴结切片的制片技术,是为了制作切片完整,厚薄均匀,无刀痕及皱褶,组织无挤压。镜下淋巴结结构清晰,皮质、髓质充分展现,色彩艳丽,核膜及核仁结构清楚,核桨对比鲜明。结论经过特殊处理后淋巴结HE切片的制片技术取得很好效果,制片优良率达到95%以上。     

胃黏膜切片制作中的包埋技术

为胃镜下取得的胃肠黏膜组织制作一张质量高的石蜡切片 ,组织的包埋也是一个关键。现就有关包埋法进行探讨。1　材料与方法　　经胃镜取得黏膜组织后 ,按切片ＨＥ标本的常规制作过程中 ,需注意以下几点。1.1　固定与标记　将组织标本放到滤纸小片上 ,立即置于 10 %甲醛混合固定液中 (40 %甲醛 10ｍｌ加蒸馏水 90ｍｌ与 95 %酒精 2 0ｍｌ)。如送检组织太小 ,为避免脱水后标本不容易看清 ,可用伊红酒精液滴 1～ 2滴作为着色标记。1.2　脱水与透明　用 95 %酒精两道 ,次日用纯酒精两道脱水 ,各 35～4 0ｍｉｎ。用二甲苯两道透明各 10ｍｉｎ。1.…     

常规HE制片中组织脱水不良的再处理

病理技术工作中，组织脱水彻底与否是常规HE制片程序中切片质量优劣的关键。若脱水不彻底，则导致透明不佳，蜡液不能很好地渗透组织块中去，致使切片难以成片。笔者经过长期实践，总结出一个切实可行的处理方法，现介绍如下。 1 方法 将脱水不良的组织蜡块重新溶解，取出组织块放入正丁醇Ⅰ、Ⅱ各1瓶中溶解包裹在组织块表面的石蜡，溶解时间每瓶约5～10 min，然后移入无水酒精Ⅰ、Ⅱ及95％酒精Ⅰ、Ⅱ各1瓶中洗净正丁醇，每瓶酒精清洗时间为1～2 min，然后顺着脱水透明浸蜡的程序重新脱水透明浸蜡。……     

微波技术在乳腺大切片制作中的应用

以往制作乳腺大切片时 ,组织处理程序需要 2周以上的时间 ,因组织块大而且厚 ,常常出现因组织固定不透、脱水不净、浸蜡不足等因素所导致的组织松软 ,出现切片不整、组织散碎和染色不良等现象。利用微波辐射对组织的固定、脱水、透明、浸蜡等程序进行处理 ,效果较好。1　材料与方法1 .1　浙江临安产 YWY781医用微波仪 ,功率 30～ 50 0 W,功率输出分为 8档 ,频率 50 Hz。1 .2　操作步骤 :取乳腺切除标本 ,切成约 8cm×4cm× 1 cm大小的组织块 ,置于 1 0 %福尔马林中过夜 (约 1 5h) ,更换新福尔马林 、 ,置微波仪中各1 5min;流水冲洗 2 0 m…     

骨组织大面积石蜡切片制作技术

制作骨组织大面积(50×20m m)石蜡切片,如按照常规方法,很难获得好的切片标本。笔者在制作兔、人股骨和股骨头切片中摸索出一种简单、实用的石蜡切片技术。与传统技术相比,它具有骨质硬度适中、有利于制成大面积薄切片和骨髓细胞染色佳的特点,现介绍如下。1方法1.1取材除去新鲜骨标本周围不需要的软组织,将骨标本用细齿锯锯成厚度为2～3m m的骨片,用生理盐水洗去锯面骨碎屑。1.2固定将骨片放入20%的福尔马林溶液中,室温下放置24～48小时。1.3硬化与脱脂将固定后的骨片放入80%的酒精中浸1小时→95%的酒精中浸4～5小时→80%的酒精中浸1小时→…     

硬脂酸石蜡混合液代替二甲苯透明的体会

传统的石蜡切片制作过程大都是经过固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。透明通常都采用二甲苯 ,而二甲苯很容易引起组织收缩、变脆和硬化并影响切片质量 ,且对人体有潜在危害。为了去掉有害毒剂二甲苯 ,减少对人体的毒害作用 ,我们在传统常规的石蜡制片基础上进行了改进。经过反复摸索实践 ,取得了满意效果。1　材料与方法1 1　材料　硬脂酸与石蜡按 (1∶3)即 10ｇ硬脂酸30ｍｌ石蜡的比例制成硬脂酸石蜡混合液 ,蜡温5 8℃。1 2　方法　固定、脱水步骤同常规。改进后的透明浸蜡步骤为硬脂酸石蜡混合液 2小时 ,温度为6 0℃。包埋等以后过程…