儿童医院超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的基因型与耐药性分析

目的 探讨儿童专科医院主要临床标本分离出的ESBLs大肠埃希菌基因型和耐药性特点,为应对产ESBLs大肠埃希菌的院内暴发流行寻找可靠的试验证据和抗菌药物选择.方法 收集2008年1月-2011年12月首都儿科研究所附属儿童医院住院患儿的痰液、血液、尿液与支气管肺泡灌洗液标本分离出的产ESBLs大肠埃希菌,进行PCR扩增分析基因型,同时对扩增产物进行DNA序列分析确定基因亚型.结果 109株表型产ESBLs大肠埃希菌中,100株ESBLs基因分型均表达为CTX-M型,基因亚型共发现8种,前3位为CTX-M-14、CTX-M-55和CTX-M-15亚型,其余9株基因型为单一TEM-1β-内酰胺酶基因;产ESBLs大肠埃希菌对亚胺培南敏感率100.0％,CTX-M-1组和CTX-M-9对头孢他啶的耐药率分别为90.7％和13.3％.结论 儿童医院感染性培养标本分离出的产ESBLs大肠埃希菌以CTXM型为主,产ESBLs菌株呈多药耐药,不同基因组间头孢他啶的耐药率有明显差异,碳青霉烯类抗菌药物可作为儿科治疗产ESBLs大肠埃希菌耐药株的首选药物.     

蚌埠地区产超广谱β-内酰胺酶菌株CTX-M型耐药基因的分布

目的 了解蚌埠市部分医院临床分离产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中CTX-M型ESBLs基因分布情况。方法 标本为蚌埠市3所医院2003年4月-2004年4月间，临床分离产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌147株；采用聚合酶链反应（PCR）扩增产CTX-M型ESBLs菌株基因；按Sanger双脱氧末端终止法，用自动测序仪对其进行测序以鉴定基因型。结果 147株产ESBLs菌株中有92株携带CTX-M型ESBLs基因，其中CTX-M-14型52株、CTX-M-3型20株、CTX-M-15型20株。结论 蚌埠市部分医院产CTX-M型ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检出率较高，主要为CTX-M-14型。     

新生儿病房分离产ESBLs大肠埃希菌的TEM、SHV、CTX-M基因检测

目的了解新生儿病房产ESBLs大肠埃希菌的ESBLs的基因型。方法运用多重PCR方法同时检测70株分离自连云港市第一人民医院新生儿病房产ESBLs大肠埃希菌的TEM、SHV、CTX-M基因,并对65株CTX-M阳性菌株中的49株进行CTX-M单基因扩增,将扩增产物测序,测序结果进行网上比对,确定其基因型。结果所检测的70株产ESBLs菌株中,CTX-M单独阳性共55株,CTX-M+TEM同时阳性5株,CTX-M+SHV同时阳性5株;未检出TEM、SHV单独阳性菌株,另有5株菌未检出3种ESBLs基因;测序分析的49株CTX-M阳性菌株中,47株基因型为CTX-M-14,同时检出2株CTX-M-15。结论连云港市第一人民医院新生儿病房的产ESBLs大肠埃希菌基因型以CTX-M型为主,兼有SHV和TEM型;CTX-M型中以CTX-M-14为主;加强产ESBLs菌株基因检测对产ESBLs致病菌的预防控制有一定的指导意义。     

大肠埃希菌胆汁培养分离株ESBLs基因分型报告

目的了解深圳市人民医院来自肝胆外科胆汁培养的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的基因型和耐药性。方法应用PCR及DNA测序方法分别分析产酶株的TEM、SHV及CTX-M编码基因,并分析11种抗生素对产酶株的最低抑菌浓度(M IC)。结果在20株产ESBLs大肠埃希菌中,13株检出CTX-M-14基因;5株检出CTX-M-15基因,1株检出SHV-2 a基因,1株三种基因均未检出。结论该院胆汁培养分离的产ESBLs大肠埃希菌的基因型主要为CTX-M-14。     

产CTX-M酶肠杆菌科细菌耐药性及其相关耐药基因研究

目的了解产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肠杆菌科细菌的阳性率、耐药性以及基因型分布。方法采用纸片扩散法检测临床分离大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对18种抗菌药物的耐药性,用聚合酶链反应(PCR)技术检测相关耐药基因并用DNA序列分析确认基因亚型。结果检测菌株中ESBLs阳性56株,阳性率为44.4%;检测菌株对亚胺培南全部敏感,质粒接合试验证实,CTX-M型ESBLs介导的耐药可以水平转移;产ESBLs阳性菌株中有48株扩增到CTX-M型耐药基因,其中CTX-M-3型11株,CTX-M-9型7株,CTX-M-14型25株。结论产CTX-M型ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检出率较高,以CTX-M-14型为多;碳青霉烯类抗菌药物是目前治疗产ESBLs细菌最有效药物。     

某医院CTX-M型超广谱β-内酰胺酶的分子流行病学研究

目的了解某医院产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌检出率,确定其基因型,并对其相关流行病学进行研究。方法收集2004年10月—2005年7月医院临床标本分离的多重耐药大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌134株,按美国临床实验室标准化研究所(CLSI/NC-CLS)所推荐的方法进行表型确证试验,以聚合酶链反应(PCR)法进一步检测CTX-M酶基因型,PCR产物测序并确定其基因型。随机扩增多态DNA(RAPD)对携带CTX-M酶的阳性菌株作流行病学分析。结果112株ESBLs表型阳性的肠杆菌科细菌中90株携带CTX-M基因,共检出3种基因型,即CTX-M-15、CTX-M-3和CTX-M-14。RAPD共测40株菌,19株大肠埃希菌有7种RAPD类型,11株肺炎克雷伯菌有5种RAPD类型,10株阴沟肠杆菌有7种RAPD类型。结论肠杆菌科细菌产CTX-M型ESBLs相当普遍,主要为CTX-M-15、CTX-M-3和CTX-M-14。CTX-M酶存在克隆传播。     

血培养产ESBLs分离株耐药基因初步分型及最低抑菌浓度检测

目的 了解我院导致菌血症的革兰阴性杆菌病原菌中超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的发生率、基因型分布及耐药性。方法 由临床血液培养标本中分离出的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌58株，采用ESBLs表型确证试验筛选出ESBLs阳性菌株，应用PCR法扩增产酶菌株的bla(TEM)、bla(SHV)、bla(CTX-M)基因，进行初步基因分型。琼脂稀释法测定11种抗生素对所有产ESB[鼻菌株的最低抑菌浓度(MIC)。结果 共检出19株ESBLs阳性株，总检出率为32．8％；其中8株检出bla(TEM)基因、7株检出bla(sHV)基因、14株检出bla(CTX-M)基因；所有产：ESBLs株对亚胺培南敏感，其MIC≤1μg／ml。结论 血液感染的大肠埃希菌和肺炎克雷伯ESBLs检出率较高，bla(CTX-M)是最常见基因型。     

产超广谱β-内酰胺酶表型及基因型分布

目的了解淮北地区3所医院,临床分离产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中ESBLs表型和基因分布. 方法用1999年NCCLS推荐的初筛试验,从 147株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中筛选出可疑产ESBLs细菌,并用确证试验加以确认,然后用PCR的方法扩增其基因型. 结果116株大肠埃希菌和31株肺炎克雷伯菌中,共检出69株产ESBLs(46.9%),其中大肠埃希菌51株(42.2%),肺炎克雷伯菌18株(58.1%);将初筛得到的可疑菌株用纸片扩散确证法,头孢噻肟和头孢噻肟/克拉维酸测定,检出69株产ESBLs细菌,而用头孢他啶和头孢他啶/克拉维酸检测ESBLs阳性菌为32株;PCR扩增基因型阳性结果为TEM型 119株、SHV型10株、CTX-M型68株、OXA型18株. 结论淮北地区ESBLs的检出率为46.9%,头孢噻肟检测ESBLs的敏感性明显高于头孢他啶;基因型以CTX-M型为主,有些菌株同时携带≥2种耐药基因.     

新的基因型CTX-M-82的发现

目的了解湖南地区中南大学三所附属医院产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的检出率,并确定其基因型。方法收集2004年10月-2005年7月临床标本分离的ESBLs表型阳性大肠埃希菌52株,PCR法进一步进行CTX-M酶基因型的检测,PCR产物测序并通过blast分析确定其基因分型。结果经多重PCR扩增,48株携带CTX-M基因,检出率为92.3%。共检出四种基因型,即CTX-M-3、CTX-M-14、CTX-M-15和CTX-M-82。结论大肠埃希菌中CTX-M型超广谱酶相当普遍,主要为CTX-M-14、CTX-M-3、CTX-M-15;其中CTX-M-82为新的基因型,经美国Lahey临床医学中心专家确认并命名,GenBank登录号为DQ256091。     

产ESBLs大肠埃希菌基因型分析

目的 了解医院感染的产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌医院感染的临床分布及其基因型特征。方法用表型确证试验确定临床标本中产ESBLs大肠埃希菌151株，应用PCR方法分别扩增产酶菌株的TEM、SHV和CTX-M3种β-内酰胺酶基因，并对PCR扩增结果及ESBLs株临床分布进行分析。结果PCR扩增结果显示，CTX-M、TEM和SHV基因的阳性率分别为92．10％，49．7％和1．30％；48．3％的菌株同时携带多个基因。产ESBLs大肠埃希菌广泛分布于24个临床科室，其中普外科占23．2％，重症监护病房占10．6％。标本分布较为集中，29．8％来自尿液，24．5％来自呼吸道标本，23．9％来自穿刺液。结论医院感染中，产ESBLs大肠埃希菌的主要基因型是CTX-M，尿液、呼吸道标本、穿刺液是其主要来源，产ESBLs菌分布广泛，需引起重视。     

大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶基因型研究

目的了解医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的基因型和耐药性。方法收集产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的临床菌株30株,应用PCR基因扩增技术及DNA测序方法,分别对其TEM、SHV、CTX-M、VEB、PER编码基因进行分析。结果在30株菌株中有26株为CTX-M型,占86.67%;其中CTX-M-9型共计16株占61.5%,CTX-M-1型8株占30.8%,CTX-M-2型7株占26.9%;同时产CTX-M-1型及CTX-M-2型共4株占15.4%,产CTX-M-2型及CTX-M-9型1株占3.8%,产CTX-M-1型及CTX-M-9型1株占3.8%。结论产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的主要临床流行基因型是CTX-M-9型。     

ICU肺部感染患者分离产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌基因亚型及同源性

目的 分析重症监护病房(ICU)肺部感染患者分离产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的基因亚型及同源性。方法 选取2018年12月-2020年12月从南通大学第二附属医院ICU收治的96例肺部感染患者。检测痰液标本中病原菌特征,聚合酶链式反应(PCR)分析产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌基因亚型,重复序列PCR(Rep-PCR)和多位点序列分型(MLST)分析同源性。结果 96例患者痰液标本中共分离134株病原菌,其中33株大肠埃希菌中产ESBLs菌株检出率为48.48%,42株肺炎克雷伯菌中产ESBLs菌株检出率为40.48%;产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对哌拉西林、头孢唑林、头孢他啶等常用抗菌药物的耐药性均高于非产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌(P<0.05);16株产ESBLs大肠埃希菌基因型共检出1种TEM-1、3种CTX-M和3种SHV,以CTX-M-14亚型和SHV-77亚型最为多见,且属于8种不同ST型,以ST131型为主;17株产ESBLs肺炎克雷伯菌基因型共检出1种TEM-1、3种CTX-M亚型和4种SHV亚型,以SHV-1...     

革兰阴性杆菌产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶调查研究（首次发现产blaCTX-M-14的斯氏普罗威登斯菌）

目的调查某院临床分离的革兰阴性（G^-）杆菌产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）株的流行情况，并确定其基因型。方法收集2004年10月--2005年7月临床标本分离的多重耐药G^-杆菌233株，按美国临床实验室标准化研究所（CLSI）推荐的方法进行ESBLs表型确证试验，聚合酶链反应（PCR）法对表型阳性株进一步进行CTX-M酶基因型的扩增，对PCR产物测序并确定其基因型。结果从大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、弗劳地柠檬酸杆菌和斯氏普罗威登斯菌中检出CTX-M型ESBLs，首次从斯氏普罗威登斯菌中检出CTX-M-14型ESBLs。结论该地区多种G肠杆菌科细菌携带CTX-M型ESBLs，斯氏普罗威登斯菌也能产生CTX-M型ESBLs。     

变性高效液相色谱分析浙江沿海地区ESBLs基因类型研究

目的运用变性高效液相色谱(DHPLC)技术,检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因型,了解浙江沿海地区ESBLs基因型分布情况。方法对171株多药耐药肠杆菌科细菌进行表型确证试验,采用多重PCR对标准菌株和ESBLs表型阳性的临床菌株进行CTX-M扩增,扩增产物经DHPLC分析,通过与标准菌株色谱峰比对进行临床菌株基因分型。结果 171株多药耐药肠杆菌科细菌,有142株临床菌株ESBLs表型阳性,经多重PCR扩增142株肠杆菌科109株携带CTX-M基因,52株为CTX-M-1产物,57株为CTX-M-9产物,检出率达79.80%,其中大肠埃希菌携带CTX-M基因比例最高,其次是肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌;109株临床菌株PCR产物经DHPLC分析检测出4种CTX-M基因型,33株携带CTX-M-3、19株携带CTX-M-15、5株携带CTX-M-9、52株携带CTX-M-14。结论运用DHPLC技术检测出CTX-M型ESBLs菌株有4种基因型,其中CTX-M-14型是CTX-M型ESBLs主要型别;该地区细菌携带CTX-M型ESBLs以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌最多见。     

新生儿大肠埃希菌败血症的药敏分析及ESBLs基因分型

目的 探讨医院新生儿大肠埃希菌败血症的耐药性,并对产ESBLs大肠埃希菌进行基因分型.方法 采用MicroScanWalkaway 96SI全自动微生物分析仪对45株新生儿败血症分离的大肠埃希菌进行鉴定及药敏试验,PCR检测大肠埃希菌的ESBLs基因分型,并采用SPSS13.O进行统计分析.结果 45株大肠埃希菌对亚胺培南敏感性最高,为100.O％,产ESBLs检出率高达57.8％,产ESBLs的大肠埃希菌对氨曲南、头孢菌素类几乎全部耐药,对含酶抑制剂类药物、碳青霉烯类和头霉素类抗菌药物敏感率较高(73.1％～92.3％);对26株产ESBLs菌株进行基因分型,发现11株携带有TEM基因,12株CTX-M- 14基因型,两株CTX-M-1基因型,5株SHV基因型,同时部分菌株携带有≥2种β内酰胺酶基因.结论 医院新生儿败血症分离大肠埃希菌耐药性严重,以产ESBLs株为主,其主要基因型为CTX-M基因,但也存在TEM、SHV等多种基因型.     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌blaCTX-M基因分型及耐药特征研究

目的探讨产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌blaCTX-M基因分型及相应耐药特征,以指导临床抗菌药物的合理应用。方法选取2014年1月到2016年1月医院细菌室分离出的大肠埃希菌69株;对上述菌株进行产超广谱β-内酰胺酶表型及耐药特征的检测;统计产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌检出率及其基因型的分布;对比不同基因型的产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的耐药率。结果 69株菌株中,37株为产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌,其中36株为blaCTX-M型基因,占97.30%;单独检出blaCTX-M-1有10株,占27.78%,单独检出blaCTX-M-9有24株,占66.67%,同时检出blaCTX-M-1和blaCTX-M-9有2株,占5.56%。CTX-M-1菌株和CTX-M-9菌株对亚胺培南的耐药率均为0,对头孢噻肟、头孢曲松、头孢唑林的耐药率均为100%。CTX-M-1菌株对头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南的耐药率均显著高于CTX-M-9菌株(P<0.05)。结论 blaCTX-M是产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌最常见的基因型,且以blaCTX-M-9型为主。blaCTX-M-1型菌株对头孢他啶、头孢吡肟以及氨曲南的耐药性显著高于blaCTX-M-9型菌株。     

ICU血液中大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶基因分型及与整合子之间的关系

目的对医院ICU住院患者血液中分离的大肠埃希菌进行检测及药敏分析,同时测定ESBLs型别及整合子,为指导和治疗大肠埃希菌引起的败血症感染提供依据。方法收集医院2007年5月-2010年5月ICU患者血液中分离的142株大肠埃希菌,采用VITEK-2Compact全自动微生物鉴定仪对菌株进行鉴定及药敏试验,采用WHONET 5.4软件进行药敏结果分析,PCR法检测ESBLs基因型别及其整合子携带率,比较分析各种基因型比率特征和差异。结果 142株大肠埃希菌中ESBLs阳性菌占58.45%,ESBLs阳性菌株中CTX-M基因检出比例最大,检出率为50.6%,其中CTX-M-1基因22株阳性,CTX-M-8基因15株阳性,CTX-M-9基因10株阳性;TEM基因和SHV基因检出率其次,分别占22.7%与16.9%;有8株产≥2种ESBLs,有10株未能确定ES-BLs基因型;83株大肠埃希菌中检出49株携带有intl1基因,携带率达59.03%,未检测到intⅠ2和intⅠ3基因。结论 ICU患者血液中分离的大肠埃希菌产ESBLs率比例高,基因型以CTX-M型为主,携带多种ESBLs基因的菌株也逐渐增多,多伴随携带intⅠ1基因。     

胆道感染大肠埃希菌产ESBLs菌株基因分型及耐药性

目的探讨胆道感染的病原菌谱及耐药性,并对产ESBLs的大肠埃希菌进行基因分型。方法胆道感染住院手术患者的胆汁行细菌培养和药敏测定,设计特异性引物PCR扩增。结果 240例胆汁标本中分离出细菌200株,真菌25株,培养阳性率达93.75%,其中大肠埃希菌80株,占35.56%;大肠埃希菌部分出现多药耐药,但对亚胺培南、美罗培南及阿米卡星较为敏感,表型确证试验发现20株为ESBLs菌株,PCR检测发现20株均携带有TEM基因,共携带了5个ESBLs基因,其中还有10株CTX-M-9基因型,6株CTX-M-1基因型,有4株OXA-1基因型,5株SHV基因型;部分菌株携带有≥2个β-内酰胺酶基因。结论胆道感染的主要致病菌是大肠埃希菌,医院分离株呈现多药耐药,以产ESBLs株为主,其主要基因型为TEM基因,但也存在CTX-M、OXA、SHV等多种基因型。     

大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌产ESBLs表型与基因型分析

目的 了解医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌发生率及主要基因型分布特点.方法 采用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的纸片扩散法对临床标本中分离的110株大肠埃希菌和94株肺炎克雷伯菌进行ESBLs的表型确定试验,同时分别用聚合酶链反应(PCR)扩增法检测TEM、SHV、CTX-M-1、CTX-M-2、CTX-M-9耐药基因,并对其产物进行序列分析.结果 产ESBLs阳性菌株的检出率分别为:肺炎克雷伯菌占36.2%,大肠埃希菌占42.7%,总检出率为39.7%;ESBLs检出模式以头孢噻肟、头孢噻肟/克拉维酸单组为底物阳性率最高,占阳性菌株的66.7%;单用头孢他啶,头孢他啶/克拉维酸一组为底物,会造成大肠埃希菌68.1%和肺炎克雷伯菌64.7%的漏检;耐药基因型分析显示,TEM、SHV、CTX-M-I、CTX-M-2、CTX-M-9基因检出率分别为54.3%、38.3%、21.O%、24.7%、70.4%,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌均以CTX-M型为主要基因型,占91.4%;同时携带>2种耐药基因菌株占71.6%.结论 医院分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs菌株携带多种耐药基因严重,需引起临床的高度重视.     

产超广谱β-内酰胺酶细菌的分子流行病学研究

目的调查北京医院住院患者2002年1～8月期间产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的分离率、耐药情况和各种基因型的流行分布. 方法采用浓度梯度法对86株大肠埃希菌和132株肺炎克雷伯菌对11种抗菌药物进行最低抑菌浓度测定,采用酶抑制剂增强法对产ESBLs菌株作确认试验;等电点测定及PCR扩增对产ESBLs菌初步分型,然后对PCR扩增阳性产物测序,序列分析进一步确定基因型,并做结合实验. 结果肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌产ESBLs细菌阳性率分别为18.9%和29.1%, ESBLs菌合计的阳性率为22.9%;ESBLs阳性菌对抗生素的耐药率明显高于ESBLs阴性菌;在50株产ESBLs阳性菌株中,TEM型31株(62%)均为TEM-1型;CTX-M型26株(52%),其中CTX-M-14型11株,CTX-M-22型9株,CTX-M-24型 5株,CTX-M-13型1株;SHV型22株,占44%,SHV-1型5株,SHV-12型5株(4株菌被结合实验结果证实含有SHV-12型基因的质粒),SHV-2a型3株(2株菌含有该型基因质粒),2株SHV-2(2)型(2株菌含有该型基因质粒),未分出亚型7株,同时结合实验也证实不含有SHV型基因的质粒. 结论 CTX-M型和SHV型是北京医院产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中流行的基因型.