槐耳清膏对结肠癌SW480细胞增殖能力影响及其机制探讨

目的：探索槐耳清膏对体结肠癌SW480细胞增殖能力影响及其机制。方法：采用噻唑蓝（MTT）比色法检测槐耳清膏对SW480细胞增殖能力的作用,并探求最佳作用浓度;将体外培养细胞随机分为常氧组（NC组）、低氧组（HC组）和低氧槐耳组（HH组）,逆转录聚合酶链反应（RT PCR）检测各组血管内皮生长因子（VEGF）mRNA表达水平,Western blot检测蛋白表达水平。结果：槐耳清膏对SW480细胞抑制率随药物浓度增加而上升,1 mg/mL时抑制率最大（66.7%）,与氟尿嘧啶组（浓度为10μg/mL）相比无统计学意义。HH组和HC组VEGF mRNA表达均显著高于NC组,分别为4.71±0.07,4.54±0.02和1.19±0.03（P〈0.05）,但HH组与HC组比较差异无统计学意义。HC组VEGF蛋白表达显著高于NC组,分别为0.66±0.03和0.38±0.02（P〈0.05）,HH组较HC组VEGF蛋白表达均显著下降,分别为0.37±0.03和0.66±0.03（P〈0.05）。结论：槐耳清膏可抑制SW480细胞增殖,1 mg/mL时抑制率最大。其机制为槐耳清膏下调细胞内VEGF蛋白表达,从而抑制肿瘤生长。     

槐耳清膏能抑制裸鼠肺癌细胞的增殖活性

目的:探讨槐耳清膏对裸鼠异种肺癌移植瘤模型的抑瘤作用。方法:构建裸鼠异种肺癌移植瘤模型,给予该模型鼠槐耳清膏处理。将裸鼠随机分为实验组和对照组,分别给予槐耳清膏(剂量分别为1、3、5、7 g/kg)、0.9%NaCl溶液各0.2 mL灌胃,每3 d给药1次,持续给药3周。观察裸鼠肿瘤体积的变化及裸鼠体质量变化,比较瘤体质量,显微镜观察移植瘤组织病理变化和Ki-67阳性细胞比率。结果:裸鼠接种肺癌细胞14 d后,接种部位均出现肿瘤生长。槐耳清膏1、3、5、7 g/kg剂量组抑瘤率分别为(1.73±12.99)%、(6.68±11.34)%、(46.24±9.17)%、(35.05±12.15)%。与对照组相比,槐耳清膏5 g/kg(P=0.0044)和7 g/kg(P=0.0215)剂量组抑瘤率显著升高。槐耳清膏5 g/kg体质量组瘤重较对照组有降低趋势,但差异无统计学意义。Ki-67免疫组化染色显示,与对照组相比,槐耳清膏3、5、7 g/kg剂量组肿瘤细胞增殖率显著下降,其中7 g/kg组Ki-67阳性率最低(24.8%,P0.001)。结论:槐耳清膏能抑制裸鼠体内肺癌细胞的增殖活性,从而抑制肿瘤生长。     

槐耳清膏在体外抑制人成骨肉瘤Saos-2细胞相关实验研究

目的 探讨槐耳清膏抑制人成骨肉瘤Saos-2的作用效果和机制.方法 对数期生长人成骨肉瘤Saos-2细胞分为槐耳清膏2、8、16 g/L组和空白对照组,分别采用槐耳清膏2、8、16 g/L和生理盐水进行处理,分别于处理12、24、36 h后,采用MTT法检测各组肿瘤细胞体外增殖情况,采用RT-PCR法检测各组肿瘤细胞趋化因子受体4(chemokine receptor 4,CXCR4)基因表达情况,采用Western blot检测各组肿瘤细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白表达水平.结果 槐耳清膏16 g/L组12、24、36 h时细胞增殖抑制率分别为(23.30±0.10)％、(43.20±0.53)％、(51.70±0.76)％,8 g/L组分别为(7.10±0.08)％、(34.90±0.33)％、(37.40±0.35)％,2 g/L组分别为((1.20±0.12)％、(2.97±0.11)％、(5.30±0.17)％,空白对照组分别为(0.30±0.11)％、(1.10±0.09)％、(1.50±0.15)％),除8 g/L组24 h时与36 h时比较差异无统计学意义外,其余各组各时间点两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05);槐耳清膏16 g/L组在12、24、36 h细胞CXCR4基因和VEGF蛋白表达水平明显高低于槐耳清膏2、8g/L组和空白对照组(P＜0.05),槐耳清膏8 g/L组低于2 g/L组和空白对照组,2 g/L组低于空白对照组(P＜0.05);槐耳清膏2、8、16 g/L组36h时CXCR4基因和VEGF蛋白表达水平低于12、24 h,24 h时低于12h时(P＜0.05).结论 槐耳清膏在体外能抑制人成骨肉瘤Saos-2细胞的增殖、生长和转移,其作用机制可能同抑制血管生成、调节CXCR4表达有关.     

槐耳浸膏对骨肉瘤 MG63细胞凋亡、迁移和侵袭的影响

目的探讨槐耳浸膏对体外骨肉瘤MG63细胞的凋亡、转移和侵袭的影响。方法不同浓度的槐耳浸膏（0、1.0 mg/ml、2.0 mg/ml和4.0 mg/ml）作用于体外培养的骨肉瘤MG63细胞24 h、48 h和72 h。采用细胞增殖与毒性检测方法（ CCK-8法）,测定槐耳对细胞活力的影响;通过流式细胞仪检测槐耳对细胞周期及凋亡的影响;采用细胞划痕实验观察槐耳对细胞迁移能力的影响;通过Transwell实验检测槐耳对细胞侵袭能力的影响。结果和对照组相比,2.0 mg/ml和4.0 mg/ml浓度的槐耳作用于骨肉瘤MG63细胞24 h、48 h、72 h后可以抑制细胞的活力（ P均＜0.01）;流式细胞仪分析结果显示,槐耳可以将大鼠MG63细胞周期阻滞于G2期（ P均＜0.01）,可以促进大鼠MG63细胞凋亡（ P均＜0.01）;细胞划痕实验显示,槐耳可以抑制MG63细胞的迁移能力（ P均＜0.01）;Transwell实验结果显示,槐耳可以抑制MG63细胞的侵袭能力（ P均＜0.01）。结论槐耳可以促进骨肉瘤MG63细胞的凋亡,抑制细胞的迁移和侵袭能力。     

槐耳浸膏诱导肝癌细胞凋亡的实验研究

目的:探索槐耳浸膏抑制肝癌细胞增殖的机理,为槐耳浸膏在临床上治疗肝肿瘤提供理论依据。方法:将MHCC97H肝癌细胞株分别与DMEM,槐耳浸膏(1 mg／ml,3 mg／ml,5 mg／ml,10 mg／ml)及5-FU(10μg／ml)作用24 h、48 h、72 h,在流式细胞仪上分别测定其细胞凋亡率。结果:不同浓度槐耳浸膏组在每一时段上诱导肝癌细胞凋亡率明显高于对照组。其凋亡率的升高有明显的剂量相关性。槐耳浸膏高浓度10mg／ml组的凋亡率与5-FU组相当。槐耳浸膏诱导肝癌细胞凋亡的作用随时间的延长而增加。结论: 槐耳浸膏能明显诱导肝癌细胞的凋亡,从而抑制肝癌细胞的增殖,为临床治疗肝肿瘤提供了依据。     

RNA干扰生存素基因表达对肺腺癌细胞增殖及凋亡的影响

目的采用RNA干扰技术探讨生存素（survivin）对人肺腺癌细胞增殖及凋亡的影响及其可能的分子机制。方法采用脂质体介导将pGCsi—shsurvivin与pGCsi质粒转染人肺腺癌细胞株A549,经G418筛选获得稳定抑制survivin表达的肺腺癌细胞模型;Westernblot检测转染细胞survivin、p21、鼠双微体基因2（MDM2）蛋白表达;M,丌比色法检测阳性细胞克隆的增殖活性;流式细胞仪检测各组细胞凋亡。结果成功构建稳定抑制survivin表达的肺腺癌细胞模型。与对照组相比,反义组p21表达及细胞凋亡率显著增加,而MDM2表达及细胞增殖显著降低。结论下调A549细胞survivin表达后,细胞增殖降低而细胞凋亡增加,其作用机制与p21表达增加和MDM2降低有关。     

土贝母含药血清对人肺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察土贝母含药血清对人肺癌细胞增殖、凋亡的影响,初步探讨其作用机制.方法 采用灌胃SD大鼠土贝母水提物的方法制备其含药血清.应用不同浓度(0.0％、2.5％、5.0％、10.0％、20.0％、40.0％)含药血清处理人肺癌A549和H1299细胞.采用MTT、免疫荧光法观察含药血清对人肺癌细胞增殖的影响,采用流式...     

超声对细胞增殖与凋亡的影响

由于超声对生物组织细胞特有的理化作用,使其研究前景广阔.不同超声条件在细胞水平的生物效应可表现出很大的差异,甚至截然不同的双重性.了解超声条件对细胞生长的影响,对利用超声促进组织修复、防止组织过度增生以及避免超声对组织的损伤有着十分重要的意义.本文就超声对细胞增殖与凋亡影响的研究进展作一综述.     

丹参及细胞因子对成纤维细胞增殖和细胞凋亡的影响

本文探讨了丹参注射液、人重组白细胞介互２（ＩＬ－２）和重组干扰素α－２ｂ（ＩＦＮ）对体外培养成纤维细胞增殖的作用。结果表明ＩＦＮ和ＩＬ－２均可促进成纤维细胞的增殖，发挥丝裂原作用。丹参则显著抑制细胞增殖活性，使成纤维细胞崩成圆形或块状结构，内含细胞器，线粒体和内质网变性，呈曲型的细胞凋亡改变，提示丹参通过抑制成纤维细胞增殖，促使细胞凋亡，发挥抗纤维化作用。     

D-柠檬烯对K562细胞增殖及凋亡的影响

本研究探讨D-柠檬烯对K562白血病细胞增殖的影响及机制。应用MTT试验观察不同浓度D-柠檬烯作用后K562细胞增殖的改变；应用细胞形态学检查、流式细胞术、DNA琼脂糖凝胶电泳观察和检测细胞凋亡。结果表明：在0．125-1．0mmol／L浓度范围内，D-柠檬烯对K562细胞增殖的抑制作用呈现剂量依赖的关系。典型的细胞形态学改变、DNA琼脂糖凝胶电泳梯形条带及流式细胞仪检测出亚G1峰共同证实了D-柠檬烯能诱导K562白血病细胞凋亡。结论：D-柠檬烯抑制K562细胞的增殖并呈剂量依赖的方式，使细胞滞留于G1期，诱导其凋亡。     

薏苡仁酯对结肠癌SW480增殖和凋亡的影响

目的观察薏苡仁酯对结肠癌SW480增殖和凋亡的影响。方法结肠癌SW480细胞分为4组,其中A组为对照组,B,C,D组分别在培养基中给予5,10,20mg／L薏苡仁酯处理。采用噻唑蓝比色法检测4组细胞生长情况,流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况。结果作用24h后,B,C,D组的抑制率分别为16．43％,22．51％,31．24％,呈剂量依赖关系,与A组比较差异均有统计学意义（P〈O．05）;给药后24hD组细胞G0～G,期比例较A组增高,S期细胞比例较A组降低（P〈O．05）;D组24,48h凋亡率明显高于A组,差异有统计学意义（P（0．05）。结论薏苡仁酯可在体外直接抑制结肠癌细胞的增殖,诱导凋亡,在结肠癌中药防治中有一定作用。     

二氢杨梅素对乳腺癌细胞MCF-7增殖、凋亡的影响

目的研究二氢杨梅素(DMY)对乳腺癌细胞MCF-7增殖、凋亡的影响。方法 2014年3月至2015年2月,该院采用99%纯度的DMY为抑制剂,以乳腺癌MCF-7细胞为研究对象,采用MTT法、流式细胞术法和免疫细胞化学来分析乳腺癌细胞MCF-7增殖、凋亡的情况。结果当使用浓度大于20μg/mL的DMY处理细胞时,出现了抑制效果,但效果不佳;当用40与80μg/mL的DMY时,明显地抑制了乳腺癌细胞MCF-6的增殖,且有不同程度的敏感性。当DMY为80μg/mL时,其IC50为226.9μg/mL。抑制率和IC50分别与0μg/mL DMY比较,差异有统计学意义(P0.05)。40与80μg/mL的DMY处理乳腺癌细胞MCF-6可以诱导其周期阻滞在G2/M期(P0.01),并表现出明显的细胞凋亡现象,同时,G0/G1期也受到阻滞,S期细胞比例降低明显,差异有统计学意义(P0.05);当使用浓度大于20μg/mL的DMY时,PCNA阳性率有所下降,当浓度为40μg/mL的DMY时,乳腺癌细胞MCF-6的PCNA阳性率明显下降(P0.01),尤其浓度为80μg/mL的DMY时,阳性率为10.00%。与0μg/mL DMY比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论对乳腺癌患者采用DMY可以有效抑制癌细胞快速增殖,加速器凋亡,减缓患者病情,疗效突出。     

The effects of acetylsalicylic acid on proliferation,apoptosis, and invasion of cyclooxygenase-2 negative colon cancer cells

BACKGROUND: Acetylsalicylic acid (ASA, aspirin), the most common nonsteroidal anti-inflammatory drug (NSAID), has been shown to have a protective effect against the incidence and mortality of colorectal cancer. However, the mechanism of its anticancer function remains unclear. The aim of this study was to determine the effects of acetylsalicylic acid on proliferation, apoptosis, and invasion in human cyclooxygenase-2 (COX-2) negative colorectal cancer cell lines. MATERIALS AND METHODS: After treatment with various concentrations of ASA, cell proliferation was measured in the human colon cancer cell line SW480. Apoptotic cells were identified by transmission electron microscopy, acridine orange staining, and flow cytometry. The invasive potential of SW480 cells was detected using an in vitro invasion assay. The production of carcinoembryonic antigen was measured by microparticle enzyme immunoassay. Expression of Bcl2, Bax, CD44v6, and nm23 were evaluated by immunocytochemistry. RESULTS: ASA significantly inhibited the proliferation of SW480 cells and stimulated apoptosis. Production of carcinoembryonic antigen and the invasive potential of SW480 cells were also inhibited by ASA. After treatment with ASA, down-regulation of Bcl2 and CD44v6 expression and up-regulation of nm23 expression were observed in SW480 cells. No obvious effect of ASA was found on Bax expression. CONCLUSION: Our findings reveal that ASA inhibits the proliferation and promotes apoptosis in the human colon cancer cell line SW480. Down-regulation of Bcl2 expression might represent a potential mechanism by which ASA induces apoptosis in this COX-2 negative colon cancer cell line. Our results also suggest that ASA decreases the invasive potential of these colon cancer cells. Decreased CEA content and CD44v6 expression and elevated nm23 expression may contribute to the effect of ASA on invasive potential of SW480 colon cancer cells.     

CDCA3在食管癌中的表达及其对食管癌细胞增殖与凋亡的影响

目的研究细胞周期相关因子(CDCA3)在食管癌组织和细胞中的表达及其对食管癌细胞增殖与凋亡的影响。方法实时荧光定量PCR(qPCR)检测50例食管癌组织及其配对的癌旁组织中CDCA3 mRNA的表达水平,同时检测CDCA3 mRNA在不同食管癌细胞系(Eca109、Kyse-170、TE1)和人食管鳞状上皮细胞系Het-1A中的表达水平;采用si-CDCA3-1、si-CDCA3-2转染Eca109和TE1细胞,另转染si-NC作为阴性对照,MTS法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡变化;Western blot检测CDCA3、CyclinD1和cleaved caspase-3蛋白的表达变化。结果食管癌组织中CDCA3 mRNA的表达高于癌旁组织(P<0.05),Eca109、Kyse-170和TE1细胞中CDCA3 mRNA表达高于人食管鳞状上皮细胞(P<0.05)。沉默CDCA3表达后,Eca109细胞和TE1细胞的增殖率降低,G0/G1期细胞比例增加(P<0.05)。沉默CDCA3表达后,Eca109细胞和TE1细胞的凋亡率增加(P<0.05)。沉默CDCA3表达可降低CyclinD1蛋白表达和增加cleaved caspase-3蛋白表达(P<0.05)。结论CDCA3 mRNA在食管癌组织和细胞系中均高表达,干扰CDCA3的表达可能通过降低CyclinD1蛋白表达抑制细胞增殖,增加cleaved caspase-3蛋白表达促进细胞凋亡,提示CDCA3可能为食管癌的潜在治疗靶标。     

外源性子宫珠蛋白基因对宫颈癌HeLa细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨人子宫珠蛋白（UG）基因对宫颈癌Hela细胞系细胞增殖及凋亡的影响。方法构建真核细胞表达载体pcDNA3．1-UG（＋），以脂质体介导法稳定转染体外培养的人宫颈癌Hela细胞，同时转染空载体pcDNA3．1质粒，以未转染细胞为对照，转染成功后分别命名为pcDNA3．1-UG（＋）／Hela组、pcDNA3．1／Hela组、Hela组。应用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）、Western blot方法分析目的基因表达，并采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法和流式细胞术检测细胞增殖和细胞凋亡。结果pcDNA3，1-UG（＋）／Hela组UGmRNA及UG蛋白出现明显的高表达，与对照组细胞相比差异有统计学意义（P〈0．05）；pcDNA3．1UG（＋）／Hela组细胞生长速度明显慢于未转染Hela细胞，其细胞凋亡率与未转染Hela细胞相比差异也有统计学意义；然而pcDNA3．1／Hela组细胞生长速度和凋亡率均无明显变化。结论转染UG基因能诱导Hela细胞凋亡及抑制Hela细胞生长。     

虫草素调节非小细胞肺癌细胞株细胞周期、凋亡及相关抑癌基因的实验研究

目的 研究虫草素对非小细胞肺癌细胞株H358细胞周期、凋亡及相关抑癌基因的调节作用。方法 培养非小细胞肺癌细胞株H358并分组,空白对照组用不含药物的DMEM处理,虫草素组用含有50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L虫草素的DMEM处理,处理24 h后测定细胞周期分布、细胞凋亡率、抑癌基因表达水平。结果 不同剂量虫草素处理后,H358细胞的S期比率、凋亡率及PTEN、p53、p16及Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的mRNA表达水平明显高于空白对照组,G2/M期比率明显低于对照组(P <0. 05),且200μmol/L虫草素处理后,H358细胞的S期比率、凋亡率及PTEN、p53、p16及Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的mRNA表达水平明显高于其他浓度虫草素处理的细胞,G2/M期比率明显低于其他浓度虫草素处理的细胞(P <0. 05)。结论 虫草素处理非小细胞肺癌细胞株能够使细胞周期停滞、细胞凋亡加剧,增加抑癌基因表达是虫草素发挥以上调节作用的分子途径,并呈剂量依赖性。     

利多卡因对肺癌A549细胞增殖、侵袭及AMPK/mTOR/4EBP1信号通路的影响

目的探讨利多卡因对肺癌A549细胞增殖、侵袭及单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/真核细胞翻译起始因子4E结合蛋白1(4EBP1)信号通路的影响。方法设肺癌A549细胞组,5-氟尿嘧啶组(50μmol/L),利多卡因低剂量组(100μmol/L)、高剂量组(200μmol/L),以上各组每组设6个平行孔,培养72 h。试验结束后,采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法测定细胞增殖水平,transwell小室测定细胞侵袭水平,实时荧光定量PCR及蛋白免疫印迹法测定细胞AMPK、mTOR、4EBP1 mRNA和蛋白,以及磷酸化mTOR(p-mTOR)、磷酸化4EBP1(p-4EBP1)蛋白表达水平。结果与肺癌A549细胞组比较,5-氟尿嘧啶组、利多卡因低剂量组、利多卡因高剂量组吸光度值、存活率及mTOR、4EBP1 mRNA和蛋白、p-mTOR蛋白、p-4EBP1蛋白表达水平降低,穿膜数减少(P<0.05),AMPK mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05);与5-氟尿嘧啶组比较,利多卡因低、高剂量组吸光度值、存活率及mTOR、4EBP1 mRNA和蛋白、p-mTOR蛋白、p-4EBP1蛋白表达水平升高,穿膜数增加(P<0.05),AMPK mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05);与利多卡因低剂量组比较,利多卡因高剂量组吸光度值、存活率及mTOR、4EBP1 mRNA和蛋白、p-mTOR蛋白、p-4EBP1蛋白表达水平降低,穿膜数减少(P<0.05),AMPK mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论利多卡因对肺癌A549细胞增殖、侵袭具有明显抑制作用,其机制可能与利多卡因通过激活AMPK表达进而抑制mTOR/4EBP1信号通路的激活有关。