人类睾丸精原细胞瘤组织中P_（53）基因突变和Rb基因蛋白产物表达的缺失

采用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹和ＤＮＡ聚合酶链反应－单股构造多态性分析法对１７例人睾丸精原细胞瘤组织标本的抗癌基因Ｒｂ表达的蛋白产物和Ｐ_（５３）基因外显子５～８的突变进行检测，发现有３例标本的Ｒｂ基因表达的蛋白产物缺失，有４例标本的Ｐ_（５３）基因有点突变，对照的正常人睾丸组织和视网膜组织均呈Ｒｂ基因蛋白产物表达阳性，对照的正常人睾丸组织中未发现Ｐ_（５３）基因突变。本结果提示人睾丸精原细胞瘤的发生与抗癌基因Ｒｂ蛋白产物表达的缺失和Ｐ_（５３）基因的突变有关。     

组织芯片技术检测人睾丸基因TDRG1在睾丸肿瘤组织中的表达

目的:探讨人睾丸基因TDRG1在睾丸肿瘤组织中的蛋白表达及其病理学意义。方法:运用组织芯片技术、免疫组化法检测人睾丸特异基因TDRG1在睾丸肿瘤组织和正常睾丸组织中的表达。结果:15例正常人睾丸对照组中11例(73.3%)TDRG1蛋白表达为阳性;26例精原细胞瘤中7例(26.9%)TDRG1蛋白表达为阳性,7例畸胎瘤中4例(57.1%)TDRG1蛋白表达为阳性。而12例胚胎癌中10例(83.3%)TDRG1蛋白表达为阳性,10例卵黄囊瘤中8例(80.0%)TDRG1蛋白表达为阳性。精原细胞瘤实验组与正常人睾丸对照组相比较,两组间具有极显著性差异(P<0.01)。畸胎瘤实验组与正常人睾丸对照组相比较,两组间具有显著性差异(P<0.05)。而胚胎癌组和卵黄囊瘤组与正常人睾丸对照组相比较,没有显著性差异(P>0.05)。结论:TDRG1蛋白在精原细胞瘤和畸胎瘤的表达水平较正常对照睾丸组织显著降低,TDRG1可能为候选的抑癌基因。     

骨组织恶性肿瘤与癌基因mdm2、c-myc和抗癌基因p53关系的研究

作者采用分子分杂交技术分析了１８例骨组织恶性肿瘤及瘤旁组织中癌基因ｍｄｍ２、ｃｍｙｃ和抗癌基因ｐ５３的变化，使用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术分析了ｐ５３基因第７外显子点突变，结果显示，骨组织恶性肿瘤中ｍｄｍ２、ｃｍｙｃ癌基因有扩增与过表达，抗癌基因ｐ５３有突变、重排、缺失。在１０例骨肉瘤标本中发现ｍｄｍ２扩增仅存在于转移的病例中。这些结果表明：癌基因ｍｄｍ２、ｃｍｙｃ与抗癌基因ｐ５３参与骨组织恶性肿瘤的发生和发展，其中ｍｄｍ２扩增与骨肉瘤转移密切相关。     

骨组织恶性肿瘤癌基因mdm2,c—myc和抗癌基因p53关系的研究

作者采用分子分杂交技术分析了１８例骨组织恶性肿瘤及瘤旁组织中癌基因ｍｄｍ２、ｃ－ｍｙｃ和抗癌基因ｐ５３的变化，使用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术分析了ｐ５３基因第７外显子点突变，结果显示，骨组织恶性肿瘤中ｍｄｍ２、ｃ－ｍｙｃ癌基因有扩增与过表达，抗癌基因ｐ５３有突变、重排、缺失。     

p53、Rb、C－myc及Ki－ras基因在人肺癌组织中转录水平表达研究

ｐ５３、Ｒｂ、Ｃ－ｍｙｃ及Ｋｉ－ｒａｓ基因在人肺癌组织中转录水平表达研究王国丽，周清华，孙芝琳大量实验证明原癌基因的激活及抗癌基因的失活与肿瘤的发生密切相关。本文采用ＲＮＡ斑点杂交技术对６１例人肺癌组织中ｐ５３、Ｒｂ两种抗癌基因的表达进行研究，并同时...     

组织芯片技术检测CMTM2在人睾丸肿瘤组织中的表达

目的 探讨CMTM2在人睾丸肿瘤组织中的蛋白表达及其临床病理学意义.方法 运用组织芯片技术、免疫组织化学方法检测CMTM2在人睾丸肿瘤组织和正常组织中的表达.结果 15例正常人睾丸对照组中11例(73.3%)CMTM2蛋白表达为阳性;26例精原细胞瘤中17例(65.4%)CMTM2蛋白表达为阳性;7例畸胎瘤中4例(57.1%)CMTM2蛋白表达为阳性;12例胚胎癌中3例(25.0%)CMTM2蛋白表达为阳性;10例卵黄囊瘤中4例(40.0%)CMTM2蛋白表达为阳性.胚胎癌、卵黄囊瘤组与正常人睾丸对照组相比较,两组间具有显著性意义(P<0.05).而精原细胞瘤实验组以及畸胎瘤实验组与正常人睾丸对照组相比较,没有显著性差异(P>0.05).结论 CMTM2蛋白在胚胎癌,卵黄囊瘤中的表达水平较正常对照睾丸组织显著降低,CMTM2可能为睾丸肿瘤候选的抑癌基因.     

细胞周期调控基因—P21WAF1／CIP1及抑制癌基因失活与膀胱癌的关系

Ｐ２１ＷＡＦ１／Ｃ１Ｄ１基因编码的产物为一种细胞周期蛋白依赖性激酶的抑制蛋白，它通过调控细胞周期的过程，参与细胞的生长、分化、衰老及死亡，在膀胱癌发生中也存在多种抗癌基因（如Ｐ５３、Ｒｂ）的灭活，本文从Ｐ２１基因、蛋白质结构以及参与Ｐ５３、Ｒｂ倡导的细胞ＤＮＡ损伤反应与膀胱癌的关系作一综述。     

细胞周期调控基因-P21WAF1/CIP1及抑癌基因失活与膀胱癌的关系

Ｐ２１ＷＡＦ１／Ｃ１Ｄ１基因编码的产物为一种细胞周期蛋白依赖性激酶的抑制蛋白，它通过调控细胞周期的过程，参与细胞的生长、分化、衰老及死亡，在膀胱癌发生中也存在多种抗癌基因（如Ｐ５３、Ｒｂ）的灭活，本文从Ｐ２１基因、蛋白质结构以及参与Ｐ５３、Ｒｂ介导的细胞ＤＮＡ损伤反应与膀胱癌的关系作一综述。     

P^53抗癌基因蛋白产物在胰腺癌中的表达及临床意义

应用免疫组织化学方法对４３例胰腺癌组织进行Ｐ＾５３抗癌基因蛋白产物的研究。结果发现阳性率为５１．２％。Ｐ＾５３表达与胰腺癌分化程度无关，但与临床分期密切相关。     

应用PCR—SSCP研究胆道肿瘤P53基因的突变

应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法检测了１２例胆道肿瘤的Ｐ５３基因第５、７外显子，结果发现２例胆管癌和１例胆囊癌Ｐ５３基因有突变。采用免疫组化方法对２２例胆管癌和８例癌旁组织Ｐ５３蛋白产物进行了检测，染色阳性者分别为１１例和０。结果提示胆道肿瘤的发生与Ｐ５３基因的突变有关。     

Fas在正常睾丸组织及精原细胞瘤中的表达

目的 :明确Fas在正常睾丸组织及精原细胞瘤中的表达情况。　方法 :采用免疫细胞化学、原位杂交、反转录PCR(RT PCR)法检测 8例正常睾丸组织及 34例精原细胞瘤组织中Fas蛋白及FasmRNA的表达。　结果 :免疫组织化学方法发现在正常睾丸组织中的 3类主要细胞 (Leydig细胞、Sertoli细胞及生殖细胞 )中均有Fas分子表达 ;免疫组织化学和原位杂交方法在精原细胞瘤中检测到Fas表达阳性率分别为 41.18%和 38.2 4% ,表达水平明显减低或丧失 ,多呈现小片状或点状表达 ;RT PCR方法证明正常人睾丸组织中有FasmRNA的表达。　结论 :Fas在精原细胞瘤中的表达明显减少或丧失可能是精原细胞瘤形成及进展的原因。     

睾丸生殖细胞肿瘤中p53与增殖细胞核抗原表达的关系

为探讨生殖细胞肿瘤的细胞增殖状态及ｐ５３蛋白阳性细胞与肿瘤病理特点的关系、细胞增殖与ｐ５３基因在生殖细胞肿瘤中表达的相互关系，本实验采用免疫组化的方法对１３例睾丸生殖细胞肿瘤石蜡切片进行增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）、ｐ５３蛋白染色。结果显示，浸润性肿瘤组ＰＣＮＡ－ＬＩ显著高于非浸润性肿瘤组（Ｐ＜０．０５）；尽管精原细胞与非精原细胞瘤组ＰＣＮＡ－ＬＩ、ｐ５３表达无显著性差别，但后者的表达高于前者。非精原细胞瘤组中，ＰＣＮＡ－ＬＩ和ｐ５３的表达高度相关（ｒ＝０．６４）。实验结论是：ＰＣ－ＮＡ－ＬＩ和ｐ５３的表达与肿瘤的恶性程度呈正比，且二者表达正相关。     

前列腺癌中P53基因突变及蛋白表达的研究

运用免疫组织化学ＬＳＡＢ法（链菌素－生物素标记法），结合ＰＣＲ－ＲＦＬＰ（ＰＣＲ限制性片段长度多态）、ＰＣＲ－ＳＳＣＰ（ＰＣＲ单链结构多态）技术，探讨了３４例前列腺癌穿刺标本中Ｐ５３蛋白表达及基因（５～８外显子）突变情况，发现３４例前列腺场中７例有Ｐ５３蛋白表达阳性，阳性率为２０．６％。２０例前列腺良性增生及１０例正常前列腺组织中Ｐ５３蛋白表达均为阴性（Ｐ＜０．０５），在前列腺癌高、中分化组及前列腺癌低、未分化组Ｐ５３蛋白表达阳性率分别为５．３％及４０％（Ｐ＜０．０５），在ＰＣＲ－ＲＦＬＰ中提示１例前列腺癌中有Ｐ５３突变，ＰＣＲ－ＳＳＣＰ中提示３例Ｐ５３基因突变（５～６外显子），一例无Ｐ５３基因扩增产物，高度怀疑为Ｐ５３基因的缺失，３４例前列腺癌中，ＣＴ及骨扫描提示有转移者为１０例，其中５例为Ｐ５３蛋白表达阳性，阳性率５０％，与非转移组阳性率比较Ｐ＜０．０５。本研究表明Ｐ５３基因突变参与前列腺癌的发生发展过程，与其转移的生物学行为关系密切。分析了以上不同方法在检测Ｐ５３基因突变中的价值。     

阴茎癌组织中K—ras基因点突变和ras基因产物P21表达的探讨

应用聚合酶链反应结合单链构象多态性分析及免疫组化方法研究２８例阴茎癌Ｋ－ｒａｓ基因第１２位密码子突变和ａｓ基因产物Ｐ２１蛋白的表达情况。结果显示２８例阴茎癌发现３例存在Ｋ－ｒａｓ基因第１２位点突变，１２例标本有Ｐ２１蛋白阳性表达，而癌旁组织Ｐ２１表达阴性，并且Ｐ２１阳性表达率与阴茎癌分化程度和临床分期有关。     

抑癌基因Rb与P16蛋白在骨肉瘤中的表达及其相互关系

为了研究Ｒｂ与Ｐ１６蛋白在骨肉瘤中的表达及其相互关系，作者应用免疫组织化学方法检测了Ｒｂ与Ｐ１６蛋白在４０例骨肉瘤、１８例正常骨组织中的表达。结果发现Ｒｂ蛋白在骨肉瘤标本中的表达低于正常骨组织中的表达；Ｐ１６蛋白在骨肉瘤标本中的表达却高于正常骨组织中的表达，其差异均有显著性意义（Ｐ＜０．０１）。而在骨肉瘤标本中Ｒｂ与Ｐ１６蛋白的表达之间还存在着负相关关系（ｙｓ＝－０．３５５，Ｐ＜０．０５）。且还发现Ｒｂ与Ｐ１６蛋白表达情况与骨肉瘤病人的肿瘤转移无关，而与肿瘤的直径大小有关。作者认为Ｒｂ与Ｐ１６蛋白表达的改变可能与骨肉瘤的发生、发展有关，并在一定程度上反映了Ｒｂ与Ｐ１６基因的异常     

Survivin在睾丸生殖细胞瘤与无精子症患者睾丸组织中的表达

目的：探讨Survivin蛋白在睾丸生殖细胞瘤与无精子症患者睾丸组织中的表达情况及其临床意义。方法：采用免疫组织化学SABC法检测34例男性睾丸生殖细胞瘤和38例男性无精子症患者睾丸组织中Survivin蛋白的表达情况。结果：18例睾丸精原细胞瘤和16例非精原细胞瘤组织标本中Survivin蛋白的表达情况分别为88．9％和62．5％；在38例不同类型无精子症睾丸组织标本中，各组间Survivin蛋白的表达差异有统计学意义（P〈0．05），且表达情况与生精功能障碍严重程度呈负相关（r=-0．675，P〈0．05）。结论：在睾丸生殖细胞瘤和正常睾丸组织中可检测到Survivin蛋白的表达，Survivin蛋白可能是精子发生过程中的一个潜在标志物。     

P53突变蛋白在膀胱癌及癌旁组织中的表达

应用ＡＢＣ免疫组化方法及核仁组成区染色对５５例手术切除的膀胱癌及癌旁脱胱粘膜组织石虹包埋标本进行了Ｐ５３突变蛋白表达的检测及ＡｇＮＯＲ颗粒计数。结果：５５例膀胱癌标本中３３例Ｐ５３突变蛋白高表达，阳性率为６０．０％；５５例癌旁粘膜中１３例Ｐ５３蛋白弱表达。伴有盆腔淋巴结转移的２３例膀胱癌标本中２０例Ｐ５３蛋白高表达，１１例癌旁组织弱表达。     

人骨肉瘤中Rb基因表达的初步研究

为了研究Ｒｂ基因和国人骨肉瘤的关系，作者应用ＬＳＡＢ免疫组织化学染色和原位杂交技术分别检测了Ｒｂ蛋白和Ｒｂ基因ｍＲＮＡ在３０例人骨肉瘤、１５例胎儿骨和１５例正常骨组织中的表达。结果发现，与正常骨和胎儿骨组织相比，骨肉瘤组织中Ｒｂ蛋白和Ｒｂ基因ｍＲＮＡ表达水平均较低，其差异均有显著意义（Ｐ值＜０．０１）。此外还发现，骨肉瘤中Ｒｂ蛋白表达和Ｒｂ基因ｍＲＮＡ原位杂交结果呈正相关（ｒｓ＇＝０．８２５，Ｐ值＜０．００１）。本研究结果提示，Ｒｂ基因的异常导致Ｒｂ蛋白表达水平的降低和骨肉瘤的发生有关。     

Fas配体mRNA在正常睾丸组织及精原细胞瘤中的表达

为明确Fas配体mRNA在正常睾丸组织及精原细胞瘤中的表达情况，采用原位杂交，反转录PCR（RT－PCR）法检测正常睾丸组织8例Fas配体mRNA的表达，采用原位杂交法检测33例精原细胞瘤组织中的Fas配体mRNA的表达。结果RT－PCR方法证明正常人睾丸组织中有Fas配体mRNA的表达；原位杂交法证明8例正常睾丸组织中均有Fas配体mRNA的表达，且表达局限于睾丸Sertoli细胞，正常生殖细胞中无Fas配体mRNA的表达；原位杂交方法在33例精原细胞瘤组织中检测到Fas配体mRNA表达阳性11例，阳性率为33．33％，多呈现小片状或点状表达。提示Fas配体mRNA仅表达于人类睾丸的Sertoli细胞中，Fas配体mRNA在精原细胞瘤组织中的出现可能是精原细胞瘤形成及进展的原因。     

应用PCR－SSCP研究胆道肿瘤P53基因的突变

应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ（ＤＮＡ聚合酶链式反应－单链构象多态性）方法检测了１２例胆道肿瘤（胆管癌７例，胆囊癌３例，壶腹癌２例）的Ｐ５３基因第５、７外显子，结果发现２例胆管癌和１例胆囊癌Ｐ５３基因有突变。采用免疫组化方法对２２例胆管癌和８例癌旁组织Ｐ５３蛋白产物进行了检测，染色阳性者分别为１１例（５０％）和０。结果提示胆道肿瘤的发生与Ｐ５３基因的突变有关。