肝癓口服液含药血清对转化生长因子α诱导人肝癌细胞SMMC-7721增殖和凋亡的研究

目的 :观察肝疒徵 口服液含药血清对转化生长因子 (TGFα)诱导人肝癌细胞增殖和凋亡的影响。方法 :采用血清药理学方法 ,以病理鼠血清作对照 ,应用MTT比色法观察中药鼠血清对TGFα诱导人肝癌细胞SMMC 772 1增殖的抑制作用。用流式细胞术检测中药血清对肝癌细胞凋亡和细胞周期的影响。结果 :中药血清对TGFα诱导的肝癌细胞SMMC 772 1增殖有明显的抑制作用 ,抑制效应呈时间依赖性。中药血清能促进肝癌细胞凋亡 ,使细胞滞留于G0 1 期 ,降低S期细胞百分比和增殖指数。结论 :肝疒徵 口服液含药血清能够抑制TGFα诱导的人肝癌细胞增殖 ,促进其凋亡。     

肝疒徵口服液含药血清对转化生长因子α诱导人肝癌细胞SMMC-7721增殖和凋亡的研究

目的:观察肝疒徵口服液含药血清对转化生长因子(TGFα)诱导人肝癌细胞增殖和凋亡的影响.方法:采用血清药理学方法,以病理鼠血清作对照,应用M TT比色法观察中药鼠血清对TGFα诱导人肝癌细胞SMMC-7721增殖的抑制作用.用流式细胞术检测中药血清对肝癌细胞凋亡和细胞周期的影响.结果:中药血清对TGFα诱导的肝癌细胞SMMC-7721增殖有明显的抑制作用,抑制效应呈时间依赖性.中药血清能促进肝癌细胞凋亡,使细胞滞留于G0/1期,降低S期细胞百分比和增殖指数 .结论:肝疒徵口服液含药血清能够抑制TGFα诱导的人肝癌细胞增殖,促进其凋亡.     

肝症口服液含药血清对转化生长因子α诱导人肝癌细胞SMMC—7721增殖和凋亡的研究

目的：观察肝症口服液含药血清对转化生长因子（TGFα）诱导人肝癌细胞增殖和凋亡的影响。方法：采用血清药理学方法,以病理鼠血清作对照,应用MTT比色法观察中药鼠血清对TGFα诱导人肝癌细胞SMMC－7721增殖的抑制作用。用流式细胞术检测中药血清对肝癌细胞凋亡和细胞周期的影响。结果：中药血清对TGFα诱导的肝部细胞SMMC－7721增殖有明显的抑制作用,抑制效应呈时间依赖性。中药血清能促进肝癌细胞凋亡,使用胞滞留于G0／1期,降低S期细胞百分比和增殖指数。结论：肝症口服液含药血清能够抑制TGFα诱导的人肝癌细胞增殖,促进其凋亡。     

肝症口服液含药血清对TGFα诱导SMMC-7721细胞增殖和ERK蛋白的影响

目的观察肝症口服液含药血清对TGFα诱导人肝癌细胞增殖和信号传导因子ERK影响.方法采用血清药理学方法,以病理鼠血清作对照,应用MTT比色法观察中药鼠血清对TGFα诱导人肝癌细胞SMMC-7721增殖的抑制作用.用免疫组化方法检测中药血清对信号传导因子ERK蛋白表达影响.结果中药血清作用24 h对SMMC-7721细胞抑制率达25%,P＜0.05;作用48 h抑制率达30%,P＜0.001;中药血清作用24 h对1μg·L-1 TGFα诱导的SMMC-7721细胞增殖抑制率为12.3%,P＞0.05;作用48 h抑制率为16%,P＜0.05;中药血清作用24 h对5μg·L-1TGFα诱导的SMMC-7721细胞增殖抑制率为8.9%,P＞0.05,作用48 h抑制率为17.2%,P＜0.001.中药血清对TGFα诱导的肝癌细胞SMMC-7721增殖有明显的抑制作用,抑制效应呈时间依赖性.中药血清能抑制ERK蛋白在细胞核中的表达.结论肝症口服液含药血清能够抑制TGFα诱导的人肝癌细胞增殖,阻断TGFα在细胞内的信号传导.     

刺五加皂甙对肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响

目的研究刺五加皂甙(ASS)对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的诱导作用。方法体外培养人肝癌SMMC-7721细胞，用浓度0.25、0．5、1．0mg／ml的刺五加皂甙作用细胞，于12、24、48h后，用苏木素-伊红(HE)染色法及电镜技术观察凋亡细胞的形态，用琼脂糖电泳显示DNA凋亡梯带。结果ASS不促进肝癌细胞的调亡，且随着剂量和时间的增加诱发凋亡程度增高。结论ASS抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖，诱导细胞凋亡，对指导临床药物治疗肝癌具有重要的意义。     

TGFα—PE40诱导人肝癌SMMC—7721细胞的凋亡

目的　探讨基因重组转化生长因子α－绿脓杆菌外毒素融合蛋白（ＴＧＦα－ＰＥ４０,简称ＴＰ４０）体外诱导人肝癌细胞株ＳＭＭＣ－７７２１凋亡的作用。方法以不同浓度的ＴＰ４０作用于体外培养的肝癌细胞,用流式细胞仪、电子显微镜和琼脂糖电泳的方法分析和检测细胞凋亡。结果在０．０１ｎｇ／ｍｌ浓度时,ＴＰ４０作用于培养肝癌细胞２０小时后,肿瘤细胞的凋亡率为５．６０％;０．０５ｎｇ／ｍｌ时,凋亡率为１７．２２％;０．１ｎｇ／ｍｌ时,凋亡率为 ３７．０４％。电镜显示出典型的细胞核固缩、碎裂征象,琼脂糖电泳呈特征性的“梯状”带。结论　低浓度ＴＰ４０可作为细胞凋亡诱导剂用于肝癌治疗。     

三氧化二砷诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及对OPN表达的影响

目的探讨三氧化二砷（As2O3）治疗肝癌的可行性及机制。方法将一定浓度梯度的As2O3与人肝癌细胞株SMMC-7721孵育后,采用MTT法、荧光显微镜及流式细胞仪检测细胞增殖与凋亡变化,逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测肝癌细胞株中骨桥蛋白基因（OPN mRNA）表达水平。结果As2O3作用后SMMC-7721细胞生长明显受抑,且呈时间-浓度依赖性;荧光显微镜下细胞呈典型的凋亡形态学改变;在流式细胞仪上可见“凋亡峰”,细胞周期阻滞于G2／M期;细胞OPN mRNA表达阳性,OPN mRNA表达水平明显下调。结论As2O3体外能有效抑制肝癌细胞株生长;其机制可能为诱导细胞凋亡、下调OPN mRNA表达。     

肝Zhen口服液对大鼠肝癌细胞凋亡的细胞

目的 观察肝Zhen口服液对二乙基亚硝胺诱导的大鼠肝癌细胞凋亡的影响,并且与乙氧三甲基喹啉和全反式维甲酸进行比较。方法 将大鼠随机分成5组,A组为肝Zhen口服液大剂量预防组、B组为肝Zhen口服液成人等剂量预防组、C组为全反式维甲酸预防组、D组为乙氧三甲基喹啉预防组、E组为病理对照组。第14周末处死大鼠取肝脏,细胞调亡采用透射电镜、末端转移酶标记技术（TUNEL）检测。结果 A组、B组和D组可见凋亡小体。TUNEL染色分级：凋亡细胞数A组、B组、D组与E组相比显著增多（P＜0．05）,C组与E组相比无显著性差异（P＞0．05）。结论 肝Zhen口服液可诱导大鼠肝癌细胞的调亡。     

原花青素对人肝癌细胞SMMC-7721增殖及凋亡的作用

目的探讨葡萄籽提取物原花青素（PA）对人肝癌细胞SMMC-7721增殖和凋亡的影响。方法取对数生长期人肝癌细胞SMMC-7721,分别加人20、40、60mg／L的PA培养24h后,采用MTI＂法检测细胞增殖抑制率、流式细胞仪分析细胞凋亡率,并测定细胞内超氧化物歧化酶（SOD）活力、丙二醛（MDA）和活性氧簇（ROS）等指标。结果20、40、60mg／L的PA对人肝癌细胞SMMC-7721的增殖抑制率分别为（22．7±1．8）％、（38．6±1。9）％、（47．6±2．5）％,细胞凋亡率分别为（19．7±5．1）％、（29．7±2．9）％、（48．5±4．5）％,两者均随PA浓度的升高而增高（P均〈0．01）;与对照组比较,各剂量组人肝癌细胞SMMC-7721中MDA、ROS水平逐渐下降（P〈0．05）;SOD活力逐渐上升（P〈0．05）。结论PA在体外可呈浓度依赖性抑制人肝癌细胞SMMC-7721的增殖及凋亡,其作用机制可能与清除ROS、提高SOD的活性、降低脂质过氧化反应等有关。     

丹参素诱导人肝癌细胞株SMMC7721凋亡的研究

丹参素是传统中药丹参的一种水溶性提取物,具有抗氧化和潜在的抗肿瘤作用。目的：探讨丹参素体外对人肝癌细胞株SMMC7721的诱导凋亡作用及其机制。方法：分别以0mg／L、10mg／L、20mg／L、30mg／L、40mg／L丹参素作用SMMC7721细胞24、48和72h后．采用MTT法检测细胞抑制率。透射电子显微镜观察细胞凋亡形态。AnnexinV-FITC／PI双染法检测不同浓度（O-40mg／L）丹参素和40mg／L丹参素作用不同时间（0-48h）对SMMC7721细胞的凋亡：RT-PCR法检测不同浓度（0-40mg／L）丹参素作用SMMC7721细胞24h后p53mRNA表达。结果：丹参素可呈时间和剂量依赖性地抑制SMMC7721细胞增殖和诱导凋亡：透射电子显微镜下可见典型的细胞凋亡特征。随着丹参素浓度的升高．D53mRNA表达亦明显上调。结论：丹参素在一定浓度范围内可呈时间和剂量依赖性地抑制SMMC7721细胞增殖并诱导细胞凋亡,其机制可能与p53表达上调有关。     

刺五加皂甙对肝癌细胞凋亡的影响

探讨刺五加皂甙（ＡＳＳ）对体外培养肝癌细胞凋亡的影响。采用透射电镜及琼脂糖凝胶电泳观察ＡＳＳ作用肝癌凋亡的形态学改变和ＤＮＡ电泳。电镜观察ＡＳＳ作用肝癌细胞出现异染色体边集,线粒体肿胀等凋亡的改变。ＡＳＳ作用肝癌细胞ＤＮＡ出现典型梯状改变。提示ＡＳＳ促进体外培养肝癌细胞凋亡。且随着时间的增加和剂量加大,诱发凋亡程度增高。     

人肝癌SMMC-7721细胞受体介导内吞高密度脂蛋白-2的逆向胞饮作用

荧光素异硫氰酸酯标记高密度脂蛋白-2保持天然高密度脂蛋白-2的生物活性。人肝癌SMMC-7721细胞与荧光标记无载脂蛋白E-高密度脂蛋白-2在37℃培养3h左右,细胞结合与内吞的荧光强度分别为13.5±0.8和9.2±0.5(±s土)。细胞进一步在37℃培养2h细胞释放的三氯醋酸沉淀和三氯醋酸可溶性荧光强度分别为5.1±0.4和0.67±0.17.4℃培养2h,细胞释放三氯醋酸沉淀荧光强度为0.41±0.16。结果提示:①细胞内吞高密度脂蛋白-2没有经过溶酶体分解途径;②细胞释放高密度脂蛋白-2载脂蛋白是一种取决于温度的逆向胞饮机制。     

抗纤软肝冲剂对肝星状细胞自分泌转化生长因子β1的影响

目的从细胞分子水平研究抗纤软肝冲剂对肝星状细胞(HSC)表达转化生长因子β1(TGF-β1)的影响.方法抗纤软肝冲剂药物血清温育传一代HSC,以0.85%氯化钠溶液和秋水仙碱为对照.免疫细胞化学分析TGF-β1的蛋白合成;半定量RT-PCR法检测TGF-β1mRNA的表达量.结果抗纤软肝冲剂组TGF-β1蛋白表达量为108.41士4.50,mRNA相对表达量为54.41±5.57,明显低于0.85%氯化钠溶液组和秋水仙碱组(P＜0.01)..结论抗纤软肝冲剂能抑制HSC的TGF-β1的基因和蛋白表达,阻断其自分泌放大活化效应,这可能是该方抗肝纤维化的细胞分子学机制之一.     

XAF1基因在肝癌细胞凋亡中的诱导作用

背景：X连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）与凋亡抑制和肿瘤细胞耐药现象密切相关。目的：研究XIAP相关因子1（XAF1）基因抑制人肝癌细胞株Bel-7404和HepG2增殖和诱导凋亡的作用。方法：以腺病毒Ad5／F35为载体,构建重组腺病毒Ad5／F35-XAF1、对照空病毒Ad5／F35-Null和报告病毒Ad5／F35-增强型绿色荧光蛋白（EGFP）,分别以相同感染复数（MOI）感染人肝癌细胞株Bel-7404和HepG2,并设立空白组作为对照。作用48h后,以荧光显微镜检测Ad5／F35-EGFP的感染效率;分别以逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）和蛋白质印迹法检测XAF1 mRNA和蛋白表达;以MTT法检测细胞活力;以Annexin V—FITC／PI双染法和原位末端标记（TUNEL）法检测细胞凋亡率。结果：Ad5／F35-EGFP感染48h后,几乎所有Bel-7404和HepG2细胞均表达EGFP。Ad5／F35-XAF1感染48h后,两种肝癌细胞中XAF1 mRNA和蛋白表达均明显增高．细胞活力呈剂量依赖性地降低,细胞凋亡率显著增加。结论：重组腺病毒Ad5／F35-XAF1在人肝癌细胞株Bel-7404和HepG2中的感染效率高,XAF1在不同的肝癌细胞株中恢复表达后,能显著抑制肝癌细胞增殖并促进其凋亡,有可能成为肝癌基因治疗的新靶点。     

转化生长因子α对人内皮祖细胞分化功能的影响

目的研究转化生长因子α(TGF-α)对人内皮祖细胞(EPC)分化功能的影响并初步揭示其作用机制。方法从健康人外周血中分离EPC,分别用含0、1、10μg/L浓度的TGF-α完全培养基诱导培养。观察各组中EPC分化的形态变化,并利用流式细胞术检测各组EPC培养分化过程中CD34+/CD133+和CD31+/v WF+阳性细胞率,Real-time PCR方法测定各组中EPC分化的内皮细胞特异性基因内皮型一氧化氮合酶(e NOS)和Flk-1/KDR表达差异,并通过测定各组中一氧化氮(NO)含量变化比较EPC分化内皮细胞的功能,Western Blot检测各组EPC分化中TGF-α受体EGFR和血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果用TGF-α诱导培养分离的人EPC,细胞形态能够更快地由干细胞球形分化成梭形;流式细胞仪检测发现与空白对照组相比,1、10μg/L TGF-α组中3天时EPC标记CD34+/CD133+阳性率和7天时分化的内皮细胞标记CD31+/v WF+阳性率均显著增高,差异有统计学意义(P0.05);Real-time PCR检测各TGF-α组EPC分化的内皮细胞特异性基因e NOS和Flk-1/KDR表达量也显著上升(P0.05);1、10μg/L TGF-α诱导培养组中EPC分化的内皮细胞分泌NO含量显著升高(P0.05);1、10μg/L TGF-α诱导培养能够显著促进EPC分化过程中EGFR和VEGF的表达(P0.05)。结论 TGF-α能够显著促进人EPC的增殖分化及分化内皮细胞的功能,并通过与受体EGFR结合刺激VEGF表达发挥作用。     

转化生长因子β1在食管鳞癌中表达的临床研究

背景：转化生长因子(TGF)-β1在多种肿瘤的发生、发展和凋亡过程中发挥重要作用，但其在食管癌中的作用及其与肿瘤血管生成的关系尚未明确。目的：研究TGF-β1在食管癌中的表达及其与肿瘤血管生成的关系。方法：采用免疫组化方法检测45例食管鳞癌组织和10例正常食管组织中TGF-β1的表达和肿瘤微血管密度(MVD)。应用SPSS10．0统计软件分析TGF-β1的表达与食管癌临床病理参数、预后和肿瘤MVD的关系。结果：正常食管组织黏膜细胞未见异常染色；食管痛患者的TGF-β1表达阳性率为77．8％(35/45)，肿瘤MVD半均值为15．58。TGF-β1的表达与食管癌临床病理参数和预后无关，但与肿瘤MVD显著相关(r=0．428，P=0．003)。结论：TGF-β1的表达与食管鳞癌的发生有关，但与其进展无关。TGF-β1在食管鳞癌的血管生成中可能具有一定作用。     

去甲肾上腺素对THP-1源性巨噬细胞转化生长因子β1表达的影响

目的探讨去甲肾上腺素对人THP-1源性巨噬细胞转化生长因子β1表达的影响。方法不同浓度的去甲肾上腺素（10pmol/L～10μmol/L）作用THP-1源性巨噬细胞24h,运用逆转录多聚酶链反应检测转化生长因子β1mRNA的表达,酶联免疫吸附试验检测转化生长因子β1蛋白的表达。结果100nmol/L、1μmol/L及10μmol/L去甲肾上腺素引起巨噬细胞中转化生长因子β1mRNA水平分别下降9.3%（P〈0.05）、39.5%（P〈0.01）和47.8%（P〈0.01）,1μmol/L及10μmol/L的去甲肾上腺素作用于THP-1巨噬细胞其细胞上清中转化生长因子β1蛋白含量分别下降24.7%（P〈0.01）和32.8%（P〈0.01）。结论应激浓度的去甲肾上腺素能降低THP-1源性巨噬细胞转化生长因子β1基因的表达。     

双萘酰亚胺类化合物诱导SMMC-7721细胞凋亡的研究

目的 观察双萘酰亚胺类化合物(C8)对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞的作用. 方法 四甲基偶氮唑盐法检测C8对SMMC 7721细胞的抑制情况;流式细胞术检测细胞周期和凋亡率;Western blot检测Bcl 2蛋白表达量;流式细胞术分析细胞内Bcl 2蛋白量;酶联免疫法检测Caspase9和Caspase 3表达量. 结果 C8抑制SMMC 7721细胞增殖,半数抑制浓度为15 umol/L.C8作用浓度在10,15、20 umol/L时,SMMC 7721细胞的凋亡比例分别为16.8%、29.4%和35.8%,对照组为2.1%,SMMC 7721细胞的凋亡率明显高于对照组,P<0.01.细胞内Bcl-2蛋白表达水平下降.酶联免疫检测结果表明Caspase 9和Caspase 3被活化.结论 C8可诱导人肝癌SMMC 7721细胞的凋亡,为抗肿瘤药物的研究提供新的化合物.