两种小鼠胚胎体外发育系统对内毒素敏感性的比较研究

目的 :探讨小鼠 1细胞和 2细胞胚胎体外发育系统对内毒素的敏感性。方法 :获取小鼠 1细胞胚胎和 2细胞胚胎 ,分别与 3个内毒素剂量 (0 .7,7,70EU/ml)组共培养 ,计算各阶段胚胎的发育率。结果 :小鼠 1细胞和 2细胞胚胎的内毒素0 .7EU/ml组 ,从 2细胞至囊胚各期发育率与对照组比较没有显著性差异 (P >0 .0 5 )。内毒素在 7EU/ml水平显著降低小鼠 1细胞胚胎的体外发育率 (P <0 .0 1) ,但对 2细胞胚胎未见明显影响。内毒素在 70EU/ml水平则完全抑制 1细胞和 2细胞胚胎的体外发育 (P <0 .0 1)。培养液中含有内毒素引起碎裂胚胎增多 ,卵裂球退化和轮廓不清。结论 :内毒素对体外培养的胚胎有明显毒性 ,小鼠 1细胞胚胎体外发育试验对内毒素较 2细胞胚胎试验敏感     

IGF-Ⅱ对小鼠2-细胞胚胎体外发育的影响

目的研究胰岛素生长因子-Ⅱ对小鼠2-细胞胚胎体外发育的影响。方法在mKSOM培养液中添加不同浓度的IGF—Ⅱ（insulin—like growth factor—Ⅱ）对小鼠2-细胞胚胎进行体外培养,观察囊胚发育率、孵化率和囊胚细胞数的变化。结果（1）培养到72h,实验组囊胚率显著高于对照组。（2）培养到96h,0．1、1、10ng／ml IGF-Ⅱ添加组的孵化率显著高于对照组和100ng／ml IGF—Ⅱ添加组。（3）进行囊胚细胞计数,实验组与对照组比较,差异无显著性;四个实验组之间比较,差异亦无显著性。结论IGF-Ⅱ浓度为0．1、1、10ng／ml时,能促进小鼠2-细胞胚胎的体外发育。     

小鼠囊胚细胞凋亡和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达与维甲酸的诱导作用

背景：细胞凋亡是维甲酸导致早期胚胎异常发育的原因之一,而半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3介导的细胞凋亡是细胞凋亡的主要途径。 目的：观察维甲酸对体外培养小鼠囊胚细胞凋亡的影响,以及对囊胚细胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达的改变。 方法：获取妊娠3.5 d小鼠囊胚,分别在含0,1和10 μmol/L维甲酸的M199培养基中培养24 h,用带有荧光标记的原位末端标记法观察维甲酸对小鼠囊胚细胞凋亡的效应;并用免疫组织化学S-P法检测维甲酸对小鼠囊胚半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的表达。 结果与结论：所有组均观察到囊胚细胞凋亡和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达,高剂量维甲酸组中囊胚细胞凋亡荧光值,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达的平均吸光度值和阳性面积率均显著升高(P < 0.01)。结果提示维甲酸可促进体外培养小鼠囊胚细胞凋亡和及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达,证实了维甲酸对小鼠胚胎的发育的细胞毒性作用。     

输卵管积水对小鼠胚胎体外发育能力的影响

目的探讨输卵管积水对小鼠胚胎体外发育能力的影响。方法收集人输卵管积水，小鼠促超排卵，收集2细胞胚胎和囊胚，随机分配到含有不同浓度输卵管积水的培养液中，观察胚胎的发育，计算成囊率，囊胚孵出率。结果输卵管积水组的胚胎成囊率和囊胚孵出率低于无积水组，并呈剂量依赖性。结论输卵管积水能显著影响胚胎的早期发育潜能。     

囊胚培养液对小鼠胚胎的毒性:体外生殖辅助医疗器械安全性评价

背景:囊胚培养液是可以支持胚胎从受精卵发育到囊胚阶段的一种重要培养液,其安全性直接影响囊胚的质量。目的:观察囊胚培养液对小鼠胚胎发育的影响。方法:选用B6D2F1品系小鼠,将雌性小鼠进行超数排卵处理,与同品系雄鼠合笼过夜,次日收集1细胞期受精卵,在M16培养液中培养至4细胞期后,检查胚胎发育情况并转移到受试囊胚培养液中继续培养(实验组),5 d后检查囊胚发育情况并计算囊胚形成率。同时,用含有内毒素的囊胚培养液M16培养小鼠受精卵,作为阳性对照组;用已被证实没有胚胎毒性的囊胚培养液M16培养液培养1细胞期受精卵,作为阴性对照组。结果与结论:阳性对照组囊胚形成率为0,阴性对照组囊胚形成率为87.1%,实验组囊胚形成率为87.3%,实验组囊胚形成率大于80%,说明受试囊胚培养液可以支持小鼠受精卵正常发育到囊胚阶段,对胚胎没有毒性效应。     

白介素-1β对小鼠胚胎体外发育及胚胎子宫内膜共培养体系分泌Hb—EGF、αυβ3的影响

目的使用不同浓度的白介素-1β(IL-1β)对小鼠胚胎体外发育进行干预并检测与着床相关因子Hb—EGF、αυβ3的分泌,探讨IL-1β在胚胎着床中的作用。方法将IL-1β稀释成不同浓度,研究其对小鼠2-细胞期胚胎囊胚形成率及囊胚孵出率的影响,并用酶联免疫吸附法检测不同浓度的IL-1β对胚胎子宫内膜共培养体系Hb—EGF、αυβ3表达的影响。结果 2-细胞胚胎体外培养,经含不同浓度的IL-1β培养液干预,培养72h的囊胚率明显高于对照组,有显著性差异(P<0.01)。1ng/ml和10ng/ml组培养96h的胚胎孵出率明显高于对照组,有显著性差异(P<0.05)。100ng/ml组的孵出率与对照组相比,无显著性差异(P>0.05)。胚胎-子宫内膜共培养体系经1ng/ml、10ng/mlIL-1β干预后Hb—EGF、αυβ3蛋白表达上调,与对照组相比,有显著性差异(P<0.05);共培养体系经100ng/ml IL-1β干预后Hb—EGF、αυβ3蛋白表达与对照组相比,无显著性差异(P>0.05)。结论合适的IL-1β可以促进体外培养小鼠胚胎发育及胚胎着床。     

小鼠卵母细胞体外成熟培养系统的建立与优化

目的 探讨激素刺激时间、体外培养时间对小鼠卵母细胞核成熟及不同激活方案对卵母细胞孤雌激活、胚胎发育能力的影响。方法 孕马血清促性腺激素（PMSG）超排处理,在体外培养的不同时间点检测卵母细胞核成熟率（每个处理至少重复3次,3只/重复,以下实验相同）。
分别采用乙醇结合6-二甲氨基嘌呤（6-DMAP）法和SrCl₂ 法激活卵母细胞,胚胎培养液选用CZB［胎牛血清（FBS）或牛血清清蛋白（BSA）］两种,确定最佳激活方案。对不同时间点成熟的卵母细胞进行激活,确定最佳激活卵龄。研究缩短PMSG刺激时间对卵母细胞发育的影响。结果 将
PMSG刺激时间从46h缩短至24h,卵母细胞获得最高核成熟率（97.6% vs 91.9%）的培养时间由14h延长至16h;缩短PMSG刺激时间,核成熟率不受影响,但能显著降低激活率（91.2% vs 37.1%）和囊胚率（20.9% vs 0.0%）。 两种方法体内成熟卵母细胞激活率均高于90%,但囊胚率差异
显著(P<0.05)。卵母细胞体外培养至24~26h时,激活率（89.5%）和囊胚率（21.9%）均达到最高点。结论 建立了一种小鼠卵母细胞体外成熟培养系统,即PMSG超排处理46h、卵母细胞培养24h,CZB（10mmol/L SrCl2）激活2.5h后采用CZB（0.5%BSA）进行胚胎培养。     

人胚胎干细胞系NS1的建立

目的:探讨利用长期冷冻的废弃胚胎建立人胚胎干(hES)细胞系.方法:将临床体外受精(IVF)及精子卵浆内注射(ICSI)周期中剩余冷冻5年以上的废弃胚胎复苏后继续培养至扩张囊胚,链霉蛋白酶去除透明带后采用全囊胚培养法获取原代类胚胎干细胞,再用机械法传代分离纯化hES细胞,命名为NS1.取不同代次的培养细胞,进行碱性磷酸酶染色、转录因子OCT-4、阶段特异性胚胎抗原SSEA-4、肿瘤排斥抗原TRA-1-60、TAR-1-81、核型及体内分化实验对NS1进行全能性鉴定.结果:12枚废弃胚胎在体外继续培养后,有4枚发育为囊胚,最终得到1个干细胞系,经鉴定,这些细胞都具有hES细胞的生物学特性.结论:长期冷冻的废弃胚胎可用来建立hES细胞系.     

昆明小鼠四倍体胚胎的制作

目的介绍一种简单易行的制作四倍体胚胎的方法。方法取腹腔注射人绒毛膜促性腺激素(hCG)后37～40h的小鼠2-细胞胚胎,应用电融合方法,制作四倍体胚胎。用CZB培养液对四倍体胚胎进行体外培养。结果采用交流电((AC)3V/mm、直流电(DC)140V/mm、脉冲宽度50s、一次脉冲进行融合,融合率为97%,囊胚率为72.7%。结论电融合方法可以应用于制作四倍体胚胎。     

8型解脲支原体对小鼠早期胚胎发育的致病力研究

目的观察不同浓度的8型解脲支原体对小鼠早期胚胎发育的影响,以探讨解脲支原体对早期胚胎发育的致病作用。方法取小鼠2-细胞期胚胎随机分为实验组与对照组,对照组：组1,2-细胞期鼠胚在不含8型UU的HTF培养液中培养;实验组：组2、组3、组4、组5,2-细胞期鼠胚分别在含102CCU/ml～105CCU/ml浓度的8型UU的HTF培养液中培养,在37℃、5%CO2的培养箱中培养72h,每24h在Nikon倒置显微镜下观察记录,通过统计各组的D2评分、4-细胞期胚胎形成率、桑椹期胚胎形成率、囊胚形成率,评价早期胚胎的发育情况。以观察不同浓度8型UU对小鼠早期胚胎发育的影响。结果 8型UU在培养液中的终浓度为102CCU/ml组2-细胞胚胎以后的D2评分、4-细胞期胚胎形成率、桑椹期胚胎形成率、囊胚形成率等各阶段的胚胎发育指标与对照组比较差异均无统计学意义（P〉0.05）,终浓度分别为104CCU/ml、105CCU/ml组2-细胞胚胎以后的各项胚胎发育指标与对照组比较均有显著性差异（P〈0.05）,终浓度为103CCU/ml组的4-细胞期胚胎形成率、囊胚形成率与对照组比较无显著性差异〉0.05,而D2评分、桑椹期胚胎形成率与对照组比较有显著性差异（P〈0.05）,103CCU/ml组的P值均接近0.05显著性差异临界值。结论 UU能够影响小鼠早期胚胎的发育,8型UU≥104CCU/ml时就可阻碍小鼠早期胚胎的发育。随着UU浓度的增高,对早期胚胎发育的影响也增大。     

Level of functioning of siblings and parents of probands of varying degrees of retardation

A further analysis of already published data supports the position that retardates of low ability level less frequently have retarded siblings, retarded parents, and parents low in occupational level than do retardates higher in ability level. The analysis supports the position that there are two types of retarded individuals, persons retarded as a result of gene or chromosomal anomalies, brain injury, etc., who more frequently occur in the lower-level retardate group, and persons whose retardation represents polygenic segregation, who more frequently occur in the higher-level group.     

局部注射辛伐他汀对骨质疏松大鼠股骨髁骨小梁的改建效应

背景：局部注射具有成骨作用的辛伐他汀,可显著增加骨质疏松大鼠股骨颈及股骨髁部的骨密度及力学强度,分析局部注射辛伐他汀对股骨髁骨小梁的影响。 目的：进一步研究骨质疏松大鼠股骨内局部注射辛伐他汀对股骨髁骨小梁的影响。为将辛伐他汀应用于临床骨质疏松局部治疗提供实验基础。 方法：18只雌性SD大鼠双侧卵巢切除后3个月,制备大鼠骨质疏松模型。实验大鼠随机数字表法均分为3组,分别在实验大鼠的右侧股骨髓腔内单次注射辛伐他汀溶液5 mg、10 mg,对照组单纯注射空白载体。分别在注射后1个月处死大鼠并取材。Micro-CT扫描并定量分析骨组织形态变化。 结果与结论：给药后1个月,Micro-CT扫描结果显示,辛伐他汀治疗组的骨微结构参数如骨皮质厚度、骨小梁密度及连接率明显优于对照组。说明疏松骨骼单次注射小剂量辛伐他汀可显著促进股骨髁部骨小梁改建,改善骨骼微结构,可为强化局部、防治骨质疏松骨折的新选择进一步提供实验基础。     

石斛属民族药用植物的分类及生药学研究

中药石斛早在《神农本草经》中就被列为上品,其应用历史悠久,具有养阴生津、补肾益气、润喉护嗓、活血明目、抗癌防老等功效。本文对国内外石斛属民族药用植物的分类及生药学研究进行了综述。     

膝关节骨性关节炎的关节镜治疗体会

目的我科自2001～2005年4月对59例67膝的骨性关节炎（0A），进行关节镜检查及镜下清理术。方法镜检：膝关节骨性关节炎伴不同程度滑膜炎，滑膜皱壁粘连纤维片，关节软骨不同程度破坏。镜下清除增生滑膜，松解粘连，去除剥脱软骨、修复关节面。结果随访2月～4年，平均1.5年，术后综合评估2月～1年，优良率94％；1～2年，优良率79.2％；2年以上优良率54.8％。结论关节镜对膝关节骨性关节炎诊断能提供了比较全面的资料，并对骨性关节炎早期有良好疗效，具有创伤小、恢复快、并发症少和重复治疗等优点。     

Anatomical study of distribution of valves of the cutaneous veins of adult''s limbs

Since the cutaneous veins of the four limbs have been used as autogenous grafts in the treatment of cardiovascular disorders, knowledge of distribution of the valves is increasingly required depending upon the use. In the gross anatomical study of distribution of valves of the trunci venae, there has been argument about locational relationships between the venous roots and the valves in the vicinity of the roots and the inter-valvular distance. However, there have been only few reports discussing detailed information about valves of the cutaneous veins of the four limbs. The authors observed patterns of distribution of the cutaneous venous valves of the four limbs of cadavers prepared for practice in anatomy. The following parts were excised from each cadaver: the cephalic, basilic, and the great saphenous veins, which originate from the acral venous network and flow into the proximal deep veins, and the venous roots communicating with these veins. An incision was made on each excised vein in the direction of the long axis under observation with a stereoscopic microscope, and the inter-valvular distance and the distance between the valve and the orifice of venous root in the vicinity of the valve were measured. The inter-valvular distance varied with type of the truncus venae, and it varied according to area even in the same truncus venae.     

Pathways of the realization of immunomodulating effects of neurotransmitters

Translated fromByulleten' Eksperimental'noi Biologii i Meditsiny, Vol. 115, N ^o 4, pp. 401–404, April, 1993     

Characterization of sterols of three digenetic trematodes of buffalo

Sterols of three digenetic trematodes were isolated and characterized by infrared and 1H nuclear magnetic resonance spectroscopies, and gas-liquid chromatography and gas chromatography-mass spectrometry. Sterols identified were cholesterol, cholestanol, 24-methylcholesterol, 24-methylcholestanol, 24-ethyl-22-dehydrocholesterol, 24-ethyl-22-dehydrocholestanol, 24-ethylcholesterol and 24-ethylcholestanol.     

Mechanisms of generation of slow components of bioelectric activity in diagnostics of functional state of the gastrointestinal tract

New electrophysiologic devices were used for the diagnostics of the state of excitable structures in the gastrointestinal tract and correction of their motor functions. Bioelectrical and biomechanical activities form the basis of functioning of internal organs. The mechanisms of generation of slow bioelectrical activity that are important for clinical and physiological studies are described. One of these mechanisms is a capacitance parametric transducer converting the energy of contractions into specific electric signals reflecting muscle functions. Another mechanism results from slow oscillations of resting potentials of interrelated excitable cells in large neuromuscular structures of internal organs. The elaborated procedure is efficient for preventing early postoperative paresis of the gastrointestinal tract. Translated fromByulleten' Eksperimental'noi Biologii i Meditsiny, Vol. 128, No. 10, pp. 448–452, October, 1999     

胃小弯侧血管弓的MDCT解剖

目的：研究正常胃小弯侧血管弓及其属支血管的多排螺旋CT表现。方法：回顾性分析51例正常成人的上腹部CT资料,观察胃小弯侧血管弓及其属支血管的显示情况、血管弓形态及其与胃壁的关系。结果：51例均显示胃小弯侧血管弓,血管弓贲门部属支、胃体部属支和幽门部属支分别显示46例、15例和10例;血管弓与胃壁紧邻41例。结论：MDCT检查可良好显示正常胃小弯侧血管弓及其属支血管。     

Assessment of the efficacy of treatment of hemangiomas

Assessment of the aftereffects of cryoexposure and ultrahigh-frequency cryoexposure on hemangioma tissue of various types, cavernous and squamous, showed a higher cryogenic effect in hemangiomatous tissue preexposed to ultrahigh-frequency waves. A quantitative criterion is proposed for assessing the efficacy of the studied methods of exposure. Translated fromByulleten' Eksperimental'noi Biologii i Meditsiny, Vol. 119, N ^o 6, pp. 669–672, June, 1995