胃癌组织中H-ras及K-ras基因第12密码子点突变的检测及意义

目的 探讨人胃癌组织中H-ras、K-ras基因第12密码子点突变情况及意义。方法 收集43例胃癌及相应癌旁组织标本。应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）分析法检测H-ras、K-ras基因第12密码子点突变情况。结果 43例胃癌组织中有1例发生H-ras突变（1/43,2．3％）,癌旁组织中未发生突变。K-ras在胃癌及癌旁组织中均未发生突变。结论 胃癌组织中H-ras、K-ras基因第12密码子点突变率低,在胃癌的发生中不起主要作用。     

PCR-SSP法和基因测序检测人胰腺癌细胞株Patu 8988 K-ras基因第12位密码子点突变及其方式

目的检测人胰腺癌细胞株Patu 8988 K-ras基因点突变及其突变方式，明确基因治疗靶点的碱基序列。方法针对K—ras基因第12位密码子点突变方式（CGT、GTT、GAT）设计顺序特异性引物（SSP），对人胰腺癌细胞株Patu 8988进行聚合酶链反应（PCR），扩增产物经12％非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后判断该细胞株有无K-ras基因点突变及其突变方式。逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）扩增人胰腺癌细胞株Patu 8988 K—ras基因，扩增产物直接进行基因序列测定。结果PCR—SSP法检测人胰腺癌细胞株Patu 8988存在K—ras基因点突变，突变方式为GGT→GTT，其结果与基因序列测定完全相符。结论明确了人胰腺癌细胞株Patu 8988 K-ras基因第12位密码子点突变方式（GGP→GTT），为胰腺癌的下一步基因治疗研究打下了坚实的基础；PCR—SSP方法检测K-ras基因点突变简便、快速、经济且特异性高，有望在临床上成为早期诊断和鉴别诊断胰腺癌的实用检测方法。     

胰腺癌K-ras基因12密码子突变率的研究

目的阐明中国胰腺癌患者Ｋ－ｒａｓ基因１２密码子突变频率，为临床应用打下基础。方法两轮ＰＣＲ－ＲＦＬＰ技术对３２例石蜡包埋胰腺癌标本和１５例阴性对照作基因分析。结果３２例胰腺癌标本中３０例检测到Ｋ－ｒａｓ基因１２密码子突变，阳性率为９３．８％，而１５例阴性对照无１例检测到突变。结论中国胰腺癌患者Ｋ－ｒａｓ基因１２密码子突变率高达９０％左右，该突变的有无可作为在基因水平上鉴别诊断胰腺癌的一个可靠标志。     

胰腺癌K—ras基因12密码子突变方式的研究

目的 阐明中国胰腺癌患者Ｋ－ｒａｓ基因１２密码子突变方式。方法 采用３′碱基特异性引物ＰＣＲ技术分析３０例已证明存在突变的胰腺癌ＤＮＡ标本。结果 检测到４种突变方式即ＧＡＴ、ＧＴＴ、ＣＧＴ和ＧＣＴ，比例分别为５２．９％、３２．４％、８．８％和５．９％。结论 中国胰腺癌Ｋ－ｒａｓ基因１２密码子存在４种突变方式，因地区不同可能存在差异。     

K-ras基因点突变在肺癌中的研究进展

Ras基因最初是在和Kirston和Hayvey大鼠肉瘤中首先发现的 ,转导了ras基因的NIH 3T3细胞能发生恶性转化 ,从而确定了其癌基因的地位。进一步研究发现多数人类肿瘤中均有ras基因的突变激活 ,其中最常见于胰腺癌、结肠癌和肺癌[1] 。Ras基因家族由K ras、H ras、N ras三个密切相关的成员组成 ,其中K ras基因与肺癌的关系最为密切 ,现将K ras基因在肺癌中的研究进展综述如下。1　K ras基因的激活与p2 1蛋白K ras基因定位于人类的第 1 2号染色体上 ,含有 4个编码外显子和 1个 5′端非编码外显子 ,共同编码含 1 89个氨基酸组成的ras蛋白 ,因…     

K-ras 基因第1外显子点突变与37例子宫内膜癌临床情况的关系

目的:研究中国子宫内膜癌患者的瘤组织中K-ras基因第1外显子(含第12,13密码子)的突变率,以及突变与子宫内膜癌临床情况的关系,探讨K-ras基因突变在子宫内膜癌发生中的作用.方法:37例子宫内膜癌的石蜡和部分冰冻标本行PCR扩增K-ras基因第1外显子(含第12,13密码子),经PCR-SSCP银染法检测突变.结果:37例子宫内膜癌患者中有12例存在K-ras基因突变,突变率为32.4%(12/37例).FIGO分期Ⅲ期、组织类型为腺鳞癌的患者突变率较高,在细胞低分化、侵肌1/2以上和绝经后的患者中突变比例也较高.石蜡和冰冻组织标本结果一致.结论:K-ras基因突变率在日、美两国内膜癌患者中不同.该组患者中的突变率与日本相似,高于美国.说明此种差异不仅存在于日本和美国患者之间,可能也存在于亚洲人与北美洲人之间.不同的基因背景,生活条件及内源性和外源性雌激素作用可能对K-ras基因突变率有影响,并引起了不同的临床表现.     

K-ras基因的临床研究进展

现已发现 ,多种肿瘤有Ras基因的突变 ,包括H Ras、K ras和N Ras基因的突变。Ras基因编码产物为P2 1ras蛋白 ,其本质为膜相关G蛋白 ,具有GTP酶的活性 ,参与信号传导。其中K ras的突变与临床中很多肿瘤的发病有密切关系 ,如胰腺癌、胃癌、小细胞肺癌及胆囊癌等。本文就近年来针对K ras基因的临床研究作一综述。1　K ras基因与胰腺癌胰腺癌是一种高度恶性肿瘤 ,其 5年生存率低于 5 % ,并且近年来患病率有明显上升迹象 ,但其早期诊断十分困难。目前 ,分子生物学研究发现 ,K ras基因是与胰腺癌高度相关的癌基因 ,其第一外显子 12密码子的…     

人口腔粘膜鳞癌中Ha—ras癌基因第12位密码子G→T突变的研究

采用聚合酶链反应和寡核苷酸探针杂交技术，检测２１例口腔粘膜鳞癌组织中的Ｈａ－ｒａｓ癌基因第１２位密码子Ｇ－Ｔ突变，结果有６例存在这种点突变，而１０例正常口腔粘膜组织无１例发生这种突变。提示：Ｈ     

应用寡核苷酸芯片检测白血病患者P53和K-ras基因点突变

目的 研究白血病病例中P53、K—ras基因点突变情况。方法 采用寡核苷酸芯片技术对临床收集的白血病标本进行P53、K—ras突变热点检测。结果 共检测出P53突变8例、K—RAS突变4例。其中P53突变包括ANLL—M3 2例，M2 3例，ANLL—M5、ALL、CML各1例。K—ras突变包括CML3例，ALL1例。结论 P53、K—ras突变在白血病发生、发展中起到一定作用。应用寡核苷酸芯片进行P53、K—ras点突变检测，优缺点并存，具有一定临床实用价值。     

人口腔粘膜鳞癌中Ha－ras癌基因第12位密码子G→T突变的研究

采用聚合酶链反应和寡核苷酸探针杂交技术，检测２１例口腔粘膜鳞癌组织中Ｈａ－ｒａｓ癌基因第１２位密码子Ｇ→Ｔ突变，结果有６例存在这种点突变（２８．６％），而１０例正常口腔粘膜组织无１例发生这种突变。提示：Ｈａ－ｒａｓ癌基因第１２位密码子Ｇ→Ｔ突变可能导致口腔癌中癌基因的激活。并对点突变的临床意义进行了讨论。     

非小细胞肺癌细胞中c—k—ras基因点突变的研究

作者采用聚合酶链反应和限制性片段长度多态分析方法，研究非小细胞肺癌组织中ｃ－ｋ－ｒａｓ基因第１２位密码子点突变情况。．结果发现：２９例被检测标相中５例有点突变，其发生频率为７１．２４％；相同病理分期，点突变阴性患者的临床生存期明显长于点突变阳性者。     

肺癌K-ras基因点突变的研究

目的 :探讨肺癌发生的分子遗传学机理 ,了解肺癌中K ras基因的突变情况。方法 :采用聚合酶链式反应一单链构象多态性 (PCR SSCP)结合银染技术 ,对 3 2例肺癌组织及其相应的癌旁组织中K ras基因第 12、13、61位密码子的突变情况进行检测。结果 :肺癌组织中K ras基因总突变率为 2 5 % ( 8/3 2 ) ,其中腺癌突变率为 40 % ( 4 /10 ) ,鳞癌突变率为 2 3 % ( 3 /13 ) ,大细胞肺癌突变率为 3 3 % ( 1/3 )。小细胞癌突变率为 0 ( 0 /6) ,相应的癌旁组织突变率为 3 1% ( 1/3 2 )。结论 :K ras基因突变与肺癌发生发展有关。     

P^53基因及其突变与肿瘤的关系

Ｐ￣（５３）基因及其突变与肿瘤的关系病理生理教研室周兰综述范维珂审校中图分类号Ｒ７３０．２３１Ｐ￣（５３）基因又称肿瘤抑制基因，是人类肿瘤中最为常见的基因损伤靶位。迄今已报道在３５种人类肿瘤中检测到Ｐ￣（５３）基因的突变或缺失，因而倍受关注￣［１］。...     

胰液K-ras 12密码子点突变检测对胰腺癌诊断的临床价值

目的:探讨胰液中K-ras 12密码子点突变对胰腺癌诊断的临床应用价值.方法:采用内镜下置鼻胰管方法收集20例胰腺疾病的胰液标本,聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)检测胰液K-ras基因第12密码子点突变,与肿瘤标记物CA19-9及CEA检测结果比较.结果:12例胰腺癌患者胰液标本中K-ras突变率为58.3％(7/12);8例慢性胰腺炎患者标本K-ras突变率为12.5％(1/8),胰腺癌胰液K-ras基因突变检测的敏感性为58.3％,特异性为87.5％,阳性预示值为87.5％,阴性预示值为58.3％.同一组病例以血清CA19-9>37 U/ml、CEA>4.5 μg/ml为阳性界值.胰腺癌血清 CA19-9、CEA阳性率分别为58.3％(7/12)、41.7％(5/12).结论:K-ras基因突变与胰腺癌相关性好,胰液中K-ras 12密码子突变率高,特异性强,为胰腺癌早期诊断的初步筛选提供了手段.     

ras基因改变与肺癌的关系(综述)

<正> 自本世纪初在鸡肉瘤中发现具有RNA基因组的逆转录病毒—Rous肉瘤病毒以来,相继又证实病毒感染可使正常细胞转变为癌细胞。并在Rous肉瘤病毒基因组内发现可诱导肿瘤发生的基因—病毒癌基因。随着基因转染和基因杂交技术的发展和应用,在正常哺乳动物细胞基因组中也发现了与逆转录病毒癌基因有同     

肺癌组织中FHIT基因异常表达的研究

目的 检测肺癌组织中ＦＨＴ基因的异常表达。方法 收集手术切除２１例肺鳞癌、１０例肺腺癌及对应的正常肺组织标本,应用逆转录巢式聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）及ＤＮＡ测序技术检测ＦＨＴ基因的表达情况。结果 ３１例正常肺组织中均有ＦＨＩＴ基因的完整表达,１５例（４８％）肺癌标本中存在ＦＨＩＴ基因缺失;肺鳞癌中缺失率为５７％（１２／２１）,肺腺癌中缺失率为３３％）３／１０）。经测序证实,ＦＨＩＴ基因ｍＲＮＡ     

人肺癌,胃癌及肝癌c—Ki—ras第12密码子点突变的研究

以３０例肺癌、４０例胃癌及２２例肝癌石蜡包埋组织提取的ＤＮＡ为模板，经两轮ＰＣＲ扩增－限制性内切酶酶切，用限制性酶切片段长度多态性方法检测ｃ－Ｋｉ－ｒａｓ第１２密码子点突变。     

肺癌组织中的P53蛋白表达及分布特点

运用免疫组织化学方法，使用抗P53蛋白单克隆抗体DO－7，观察了248例肺癌组织中的P53蛋白表达及分布特点。结果发现：（1）135例肺癌组织可见到P53蛋白的表达，其频率为54．44％；（2）P53蛋白表达呈异质性分布，有的癌组织P53阳性染色细胞呈弥慢性分布，有的却呈点状分布，而且染色强度也有差异。这种分布特点可能与P53的功能状态有关。（3）P53蛋白表达与肺癌组织学类型及分化程度无明显相关性。     

p53基因在肺癌患者中的突变

目的　探讨肺癌组织中p5 3基因蛋白表达和肺癌患者血白细胞p5 3基因突变及其相互关系。方法　应用免疫组织化学S -P法检测肺癌组织中p5 3基因蛋白表达及聚合酶链反应 -单链构象多态性分析 (PCR -SSCP)检测其中肺癌患者血白细胞p5 3基因突变。结果　p5 3基因蛋白在 5 1例肺癌组织中的阳性表达率为 5 9% ,其中p5 3蛋白在鳞癌、腺鳞癌和腺癌的表达差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,但有淋巴结转移者 ( 77% )显著高于无淋巴结转移者 ( 4 5 % ,P <0 0 5 ) ,p5 3蛋白在肺癌癌旁正常肺组织及白细胞中均为阴性 ;5 1例肺癌患者中 2 8例血白细胞DNA均未见p5 3基因突变。结论　p5 3基因在肺癌患者血白细胞DNA未见突变 ,p5 3基因蛋白阳性的肺癌患者更易发生淋巴结转移