赤豆的雌激素样作用及其对人类乳腺癌MCF-7细胞孕激素受体水平的影响

目的：评价赤豆的雌激素样作用及其对人类乳腺癌MCF-7细胞孕激素受体水平的影响。方法：采用富含雌激素受体的雌激素依赖性人乳腺癌细胞株MCF-7细胞，分别以E-SCREEN法观察赤豆提取物对其增殖的影响，以RT-PCR法、Western blot法观察赤豆对孕激素受体mRNA和蛋白表达的影响，并以雌激素受体拮抗剂ICI182,780为工具药来评价赤豆提取物发挥雌激素样作用的机制。结果：与溶剂对照组比较，赤豆（10～200 μg·mL^-1）能显著促进MCF-7细胞的增殖，100 μg·mL^-1时作用达到最大；赤豆提取物能明显诱导MCF-7细胞孕激素受体(PR)基因mRNA和蛋白的表达，以上作用均能被雌激素受体拮抗剂所完全拮抗。结论：赤豆提取物具有雌激素活性，此作用是通过雌激素受体(ER)介导的。     

重楼提取物对乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响

目的:检测重楼提取物对乳腺癌MCF-7细胞增殖情况的影响。方法:使用醇回流提取方法和半仿生方法提取重楼的提取物,然后将提取物作用于乳腺癌细胞MCF-7细胞,使用MTT方法检测乳腺癌MCF-7细胞的增殖情况。结果:本研究中高浓度的重楼提取物对乳腺癌细胞MCF-7的增殖具有明显的抑制作用,浓度最大的重楼提取物对MCF-7细胞的增殖情况影响最为明显,而且,作用时间为48 h时对MCF-7增殖的抑制效果更为明显。两种提取方法相比较,半仿生方法提取的重楼提取物对乳腺癌细胞MCF-7的增殖抑制作用要优于醇回流提取方法提取的重楼提取物。结论:重楼提取物对人乳腺癌MCF-7细胞的增殖具有一定的抑制作用,而且半仿生方法提取的重楼提取物对人乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制效果更为明显。     

安坤种子丸对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜雌孕激素受体表达的影响

目的:观察安坤种子丸对胚泡着床障碍小鼠雌、孕激素受体表达的影响,探讨其对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜容受性的影响及作用机制。方法:筛选有规律动情周期的雌性小鼠,随机分为正常组、模型组和中药组,每组25只。用安坤种子丸先期对中药组小鼠进行灌胃,雌、雄合笼后观察雌鼠阴栓情况,之后各组选取有阴栓者20只并计为妊娠第1天(D1),雄鼠及其余雌鼠刎除。妊娠第4天对中药组和模型组注射米非司酮进行干预,制成胚泡着床障碍模型;于妊娠第5、6天处死小鼠,留取子宫标本。检测子宫雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)的表达;同时统计分析各组间妊娠率、平均着床胚泡数及胚泡着床率等指标的变化。结果:安坤种子丸可以提高胚泡着床障碍小鼠子宫内膜ER、PR的表达,妊娠率、平均着床胚泡数及胚泡着床率等指标虽低于正常组(P0.05),但显著高于模型组(P0.01)。结论:安坤种子丸可以提高雌鼠子宫内膜上ER、PR的水平,一定程度上改善着床障碍小鼠子宫内膜容受性,促进胚泡着床。     

淫羊藿素对雌激素依赖性乳腺癌MCF-7细胞作用的影响

目的:探讨淫羊藿素(ICT)对雌激素依赖性乳腺癌MCF-7细胞的作用.方法::以在37℃、5％ CO2培养箱培养的人乳腺癌MCF-7为研究对象,用不同浓度的淫羊藿素单独作用及与雌二醇联合作用,测定人乳腺癌MCF-7细胞的增殖率,并检测该过程中雌激素受体ERα的表达情况.结果:当ICT浓度大于1×10-10mol·L-1时单独使用能促进ERα阳性人乳腺癌MCF-7细胞增殖,能诱导ERα基因的表达;淫羊藿素与雌二醇联合作用抑制MCF-7细胞增殖,抑制ERα的表达.结论:淫羊藿素与雌二醇联合作用具有抑制E2诱导的人乳腺癌MCF-7细胞增殖作用;淫羊藿素与雌二醇联合作用可抑制ERα基因的表达.     

蒙花苷对MCF-7雄激素受体的影响

目的:观察蒙花苷对MCF-7细胞雄激素受体(AR)的影响。方法:培养MCF-7细胞,给予不同浓度(0,2,6.7,20,66.7,200μg/mL)蒙花苷处理后,CCK-8检测细胞活性,real-timePCR检测细胞ARmRNA的表达。结果:与空白组相比,经蒙花苷处理后,MCF-7活性无明显抑制(P0.05),ARmRNA呈先升高后降低趋势,其中当蒙花苷浓度为6.7μg/mL时AR表达量最高,66.7μg/mL时表达量最低。结论:蒙花苷对MCF-7细胞AR表达具有双向调节作用,这种作用与浓度有关。     

补胞汤对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜容受性的影响

目的:观察补胞汤对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜容受性的影响.方法:选用SPF级妊娠ICR小鼠随机分为假模型组、模型组和中药组,采用注射米非司酮建立胚泡着床障碍小鼠模型.从Pd1(妊娠第1日) 至Pd7,中药组每日给予补胞汤中药灌胃1 mL(0.4g生药/mL),假模型组和模型组则予等量生理盐水灌胃.Pd4 上午7-8时,模...     

育阴灵对小鼠子宫雌孕激素受体的影响

实验采用放射受体分析方法，测定了灌服滋阴补肾方育阴灵后小鼠子宫胞浆雌孕激素受体的含量等指标。实验中育阴灵组和生理盐水对照组的实验结果显示分别与小鼠动情期和动情前期的子宫雌孕激素受体含量及子宫重量的水平相一致。从分子水平进一步证实了其促排卵的作用。     

槲皮素对乳腺癌细胞MCF-7增殖及凋亡的影响

槲皮素具有广泛的生理及药理活性 [1] ,因其扩张冠脉、调血脂、降低血管通透性被作为心血管药物而在临床广泛应用。已有文献报道槲皮素在体外对肿瘤的化学预防和治疗作用及其机制[2 ,3 ] 。此前 ,已对槲皮素抑制 DMBA (二甲基苯并蒽 )诱导的 SD大鼠乳腺癌的发生及增殖进行了研究并探讨机制 [4,5]。本实验采用 ER(雌激素受体 )阳性的乳腺癌细胞株 MCF- 7,初步观察槲皮素在体外对该细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响 ,为进一步探讨其作用机制及其应用于临床治疗乳腺癌提供部分依据。1　材料与方法1 .1　药物与细胞系 :Quercetin (槲皮素 ,…     

仙灵脾对大鼠卵巢中雌孕激素受体和Fas、Bcl-2的影响

目的：建立下丘脑-垂体性闭经动物模型,并采用中药仙灵脾进行处理,观察仙灵脾的治疗效果及可能机制。方法：40只雌性大鼠建立下丘脑-垂体性闭经动物模型后,随机分为4组：对照组、诺雷德组、仙灵脾组、雌激素组,每组10只。给药28天后处死模型,取出卵巢,用原位杂交技术检测雌、孕激素受体和Fas和Bcl-2的含量。结果：诺雷德组卵巢组织中雌、孕激素受体水平较对照组均有下降（P〈0.05）,雌激素组和仙灵脾组卵巢雌激素受体均较诺雷德组有显著增高（P〈0.05）,仙灵脾组卵巢组织中孕激素受体较诺雷德组有显著增加（P〈0.05）。诺雷德组中Fas水平显著高于对照组,仙灵脾组Fas水平较诺雷德组有显著降低（P〈0.05）,雌激素组则没有显著变化。诺雷德组Bcl-2水平显著低于对照组,仙灵脾组处理后则显著高于诺雷德组（P〈0.05）,而雌激素组无明显变化。结论：诺雷德下调卵巢雌孕激素受体表达,提高Fas表达,降低Bcl-2表达,仙灵脾可通过提高雌孕激素受体水平,降低异常增高的Fas表达,恢复异常降低的Bcl-2表达,修复卵巢功能。     

自拟方联合米非司酮对子宫肿瘤抑制效果及雌孕激素受体的影响

目的观察中药自拟方联合米非司酮对子宫肌瘤的抑制效果及其对雌孕激素受体的影响。方法将150例子宫肌瘤患者随机分为A、B、C 3组,各50例,分别在手术前3月采用自拟方联合米非司酮、单用米非司酮、不给予任何药物治疗,并于药物治疗3月前后比较子宫与肌瘤体积、外周血清性激素水平,手术后取标本检测肌瘤组织雌孕激素受体表达情况。结果与C组相比,A、B组药物治疗后子宫体积、肌瘤体积显著减少(P<0.05),雌二醇(E2)显著降低(P<0.05),ER表达显著下降(P<0.05),PR表达无显著性差异,A组孕酮(P)、黄体生成素(LH)、促卵泡生成素(FSH)水平显著下降(P<0.05);与B组相比,A组药物治疗后子宫体积、肌瘤体积显著减少(P<0.05),E2、P、LH、FSH均显著降低(P<0.05),ER表达显著下降(P<0.05)。结论中药自拟方联合米非司酮治疗子宫肌瘤有较好的抑制肌瘤作用,其机制可能在于降低机体雌孕激素水平、减少雌激素受体表达。     

丹栀逍遥散对人乳腺癌MCF-7细胞株裸鼠移植瘤的影响

目的:研究丹栀逍遥散对MCF-7乳腺癌细胞株裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制。方法:体外培养MCF-7人乳腺癌细胞,将MCF-7细胞悬液接种于裸鼠腋下,建立裸鼠皮下移植瘤模型。雌性裸鼠分为4组,即模型组,丹栀逍遥散高、中、低剂量(17.98,8.99,4.50 g·kg~(-1))组,每组8只,每日ig给予丹栀逍遥散连续15 d,模型组ig等容积的生理盐水。比较给药各组肿瘤质量抑制率,采用苏木素和伊红(HE)染色法观察给药各组对肿瘤组织形态学影响,采用Tunel染色法观察给药各组对肿瘤细胞凋亡的影响。结果:与模型组比较,丹栀逍遥散高、中剂量组对肿瘤组织质量有显著抑制作用(P0.05,P0.01),可改善肿瘤组织形态学,增加肿瘤组织被Tunel染色的细胞数目,增加肿瘤细胞凋亡率(P0.01)。结论:丹栀逍遥散能够抑制MCF-7荷瘤裸鼠肿瘤组织生长,其作用机制可能与其促进肿瘤细胞凋亡有关。     

补骨脂素逆转人乳腺癌耐药细胞株MCF-7多药耐药性研究

人乳腺癌细胞产生多药耐药性(multidrugresistance,MDR)是肿瘤化疗失败的主要原因之一。已知某些中药具有钙拮抗作用,且药物作用较温和,能逆转MDR从而提高化疗效果,具有很好的应用和开发前景。补骨脂是补益药中少有的钙离子通道拮抗剂,本实验选用其主要成分之一的补骨脂素为研究对象,进行逆转人乳腺癌细胞株耐药性的研究,为今后进一步开发有效耐药逆转剂打下基础。材料和方法1·材料实验用细胞株MCF-7(人乳腺癌细胞株)及MCF-7/ADR(用长春新碱诱导的MCF-7多药耐药细胞株)由北京大学提供。RPMI-1640由GIBCO公司出品,P-170单抗购于…     

紫龙金对人乳腺癌细胞系MCF-7增殖及凋亡的影响

目的观察复方中药紫龙金对人乳腺癌细胞系MCF-7增殖的抑制作用及对其凋亡的诱导作用,探讨紫龙金治疗乳腺癌的作用机制。方法依据培养液紫龙金浓度的差异,实验共设4组:(1)对照组:不加紫龙金干预的1640培养液;(2)紫龙金低浓度组:1.5 mg生药/mL紫龙金培养液;(3)紫龙金中浓度组:3 mg生药/mL紫龙金培养液;(4)紫龙金高浓度组:6 mg生药/mL紫龙金培养液。采用细胞计数法绘制生长曲线及四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度紫龙金对MCF-7细胞增殖能力的影响,并应用流式细胞术、Hoechst 33342核染色法及DNA梯度形成法测定紫龙金诱导凋亡的作用。结果(1)与对照组比较,紫龙金各剂量组的细胞计数在各时间点(24、48、72、96、120、144 h)明显减少,其差异均有统计学意义(P0.05);紫龙金各剂量组间的生长抑制率差异除低、中浓度组间在24、72 h无统计学意义外(P0.05),各剂量组间两两比较在不同时间点(24、48、72、96、120、144 h),其差异均有统计学意义(P0.05)。紫龙金对MCF-7细胞的增殖抑制作用呈时间依赖性和剂量依赖性;(2)紫龙金使细胞阻滞在G_0/G_1期;(3)中、高浓度紫龙金诱导MCF-7细胞凋亡,并形成DNA ladder。结论紫龙金能抑制人乳腺癌细胞MCF-7细胞增殖,并诱导细胞凋亡,从而起到抗肿瘤的作用。     

疏肝舒乳颗粒对人乳腺癌MCF-7细胞的毒杀作用研究

目的研究疏肝舒乳颗粒(SGSR)对人乳腺癌MCF-7细胞的细胞毒性作用。方法应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法,在试管内研究SGSR对MTTOD值的影响,检测SGSR对MCF-7细胞的毒杀作用。结果SGSR各浓度组光密度值均低于对照组,说明不同浓度的SGSR对MCF-7癌细胞均有一定的杀伤作用。特别是4,1,0.25 g/m l浓度组,其对癌细胞的杀伤率分别达到99.9%,99%,95.55%,差异有显著性(P<0.01)和很好的剂量效应曲线,杀伤率明显高于β-胡萝卜素(β-CA)和SGSR加β-CA浓度组。结论研究结果现显示,S6SR在试管内对MCF-7乳腺癌细胞有明显的毒杀作用,起效机制除了对肿瘤细胞的直接杀伤作用外,其抗突变、抗有丝分裂作用也可导致DNA链断裂,达到干扰基因转录而产生抗癌作用。SGSR不仅可作为治疗乳腺增生性疾病的药物,也可作为乳腺癌放、化疗时的辅助用药。     

四物汤及其组方中药的药物血清对MCF-7细胞体外增殖和细胞周期的影响

目的:探讨四物汤及其组方的四味中药的药物血清对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞体外增殖、细胞周期和凋亡的影响,评价其植物雌激素活性.方法:正常性未成熟雌性SD大鼠,体重70±5g,按体重均衡和随机的原则分为7组(正常对照组、己烯雌酚组、四物汤组、熟地组、白芍组、当归组和川芎组),每天分别早、晚两次灌胃给药,给药均持续4d,第5d腹主动脉取血,分离血清,0.22p.m微孔滤膜过滤,-20℃贮存备用.应用MTT法检测药物血清对MCF-7细胞增值率、流式细胞技术检测细胞周期和凋亡率.结果:白芍、当归和川芎等中药的药物血清均可显著促进MCF-7细胞体外增殖(P＜0.01),熟地可促进MCF-7细胞体外增殖(P＜0.05),熟地、当归和川芎等中药的药物血清均可显著促使MCF-7细胞S期细胞数和细胞增殖指数PI增加(P＜0.01),白芍的药物血清均可促使MCF-7细胞增殖指数PI增加(P＜0.05),而在本实验条件下四物汤复方的舍药血清使MCF-7细胞数略有增加,但无统计学意义(P＞0.05);白芍、当归、川芎和四物汤的药物血清均可显著抑制MCF-7细胞的凋亡(P＜0.01);结论:熟地、白芍、当归和川芎等中药有植物雌激素活性,本实验配伍比例条件下,四物汤复方的植物雌激素活性弱于其组方的各味中药.     

姜黄素抑制乳腺癌细胞株Survivin表达及其增殖的影响

目的:探讨姜黄素对乳腺癌细胞株MCF-7中Survivin表达及其增殖的影响。方法:采用CCK-8法检测姜黄素对MCF-7细胞增殖的影响;real-time PCR、Western blot检测姜黄素作用于MCF-7细胞前后,Survivin在m RNA和蛋白水平的表达。结果:姜黄素可显著抑制乳腺癌细胞株MCF-7的增殖,并呈浓度依赖性,姜黄素处理48小时的IC50值为6.4μM。同时Survivine在基因及蛋白的水平表达均显著降低(P0.05),20μM组较10μM组下降明显(P0.05)。结论:姜黄素可以抑制乳腺癌细胞株MCF-7的增殖,其机制可能与下调Survivin表达相关。     

罗格列酮与维A酸联合应用对MCF-7细胞相关蛋白表达的影响

 目的研究PPARγ激动剂罗格列酮(ROZ)与维A酸联合应用对人乳腺癌MCF-7细胞相关蛋白表达的影响,阐明PPARγ激活后的抗肿瘤作用以及相关机制。方法MTT法检测ROZ、维A酸及两者联合应用对MCF-7细胞生长的作用。用荧光染料Hochest33342对细胞单染观察MCF-7细胞凋亡形态。用流式细胞仪检测MCF-7细胞的细胞周期分布。采用Western Blot法测定药物对MCF-7细胞相关蛋白表达的影响。结果ROZ对MCF-7细胞有一定的生长抑制作用,与维A酸合用后能显著抑制MCF-7细胞增殖,且两者呈协同作用(q>1.15)。维A酸能增强ROZ的凋亡诱导作用,表现为核碎裂和核固缩的细胞增多。流式细胞术分析二者合用可导致G1期细胞周期阻滞,S期细胞减少。Western Blot结果显示,ROZ可促进PPARγ、P53、Erk1/2、p-ERK1/2及JNK的表达,抑制ERα、C-myc及p-JNK的表达;与维A酸联合应用时可显著升高PPARγ表达,降低ERα、Bcl-2、C-myc及p-JNK表达的作用增强,并且抑制ERK的磷酸化。结论ROZ与维A酸联合应用可显著抑制MCF-7细胞的增殖,具有协同作用,可通过对Bcl-2、C-myc、P53、ERα和MAPK信号传导通路的影响而发挥抑制细胞增殖、诱导凋亡的作用。     

雌激素受体阴性/阳性MCF-7细胞增殖速度差异及对鸡血藤提取物敏感性的研究

目的明确雌激素受体（ER）阴性、阳性MCF-7细胞增殖速度差异以及不同MCF-7细胞对鸡血藤黄酮类提取物SSCE抗肿瘤作用的敏感性。方法免疫细胞化学（ICC）方法确定3种MCF-7细胞（MCF-7-a、MCF-7-b、MCF-7-luc）ER表达情况,MTT法检测3种细胞的增殖速度以及对SSCE抑制肿瘤细胞生长作用的敏感性。结果 ER（＋）的MCF-7-a、ER（-）的MCF-7-b和MCF-7-luc倍增时间分别为（69.95±9.37）h、（47.17±5.27）h、（44.96±10.33）h,24 h、48 h、72 h各个时间点MCF-7-luc对SSCE的半数抑制浓度均低于另外两株细胞。结论 ER（-）的乳腺癌细胞恶性增殖速度高于ER（＋）的乳腺癌细胞;荧光素酶基因标记的ER（-）MCF-7细胞对SSCE抗肿瘤作用更加敏感;提示ER的表达情况与乳腺癌的恶性增殖程度有关,基因重组可能影响了细胞膜表面蛋白的表达,从而增强了细胞对药物的敏感性。