透析膜和内毒素对外周血单个核细胞β2-微球蛋白产生的影响

目的　研究不同透析膜和内毒素对尿毒症患者外周血单个核细胞 (PBMC) β2 微球蛋白 (β2 MG)基因表达和蛋白质合成的影响。方法　PBMC与不同透析膜或内毒素孵育后采用细胞原位杂交检测mRNA水平 ,PBMC培养后采用酶联免疫吸附法和放射免疫法测定细胞总白介素 (IL) 1β、白介素 1受体拮抗物 (IL 1Ra)和 β2 MG水平。结果　内毒素刺激后的PBMC阳性颗粒百分比在血透组和正常对照组中均很高 ,而铜仿膜、聚砜膜孵育组和对照组几乎均未见阳性颗粒 ;在未用内毒素刺激情况下 ,铜仿膜、聚砜膜孵育组和对照组PBMCβ2 MG生成量差异无显著性 ;内毒素刺激后的PBMC所产生的 β2 MG要明显高于未用内毒素刺激组 ,铜仿膜 内毒素刺激组具有最高的β2 MG合成量 ;PBMCβ2 MG产生量与IL 1Ra显著相关 ,而与IL 1β则不具有相关性。结论　尿毒症患者PBMCβ2 MG合成水平与炎症反应的强度密切相关 ;IL 1Ra是较IL 1β更佳的衡量炎症反应强度的指标     

透析膜和内毒素对外周血单个核细胞细胞因子产生的影响

目的　研究不同透析膜和内毒素对正常人和尿毒症患者外周血单个核细胞 (PBMC)肿瘤坏死因子 α(TNF α)及其可溶性受体p5 5 (TNFsRp5 5 )产生的影响。 方法　与不同透析膜或内毒素孵育后的PBMC培养后采用酶联免疫吸附法测定细胞总TNF α和TNFsRp5 5水平。 结果　在未用内毒素时 ,铜仿膜、聚砜膜孵育组和对照组PBMCTNF α和TNFsRp5 5生成量无显著差异 ;内毒素刺激后的PBMCTNF α和TNFsRp5 5产生量显著高于相应的未用内毒素刺激组 ,而铜仿膜刺激组又明显高于聚砜膜和对照组 ;尿毒症患者PBMC受内毒素刺激后TNF α和TNFsRp5 5升高幅度明显小于正常人 ;PBMCTNF α与TNFsRp5 5产生量呈正相关。 结论　内毒素和透析膜对尿素症患者PBMCTNF α及TNFsRp5 5合成具有协同作用 ;尿毒症患者PBMC存在着对内毒素刺激反应低下 ;TNFsRp5 5可能是炎症反应的标记物而不是调节剂。     

不同透析膜对血液透析患者外周血核细胞分泌IL—10的影响

目的：探讨白细胞介素－10（interleukin,IL-10）在维持悸 血液透析(maintenance hemodialysis,MHD)患者免疫功能缺陷中的作用,判断其能否作为透析膜生物相容性的评价指标。方法：应用ELISA法检测外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMC）受内毒素细菌刺激后培养上清液中IL－10水平。MHD患者分为CA组和PUS组,另设立尿毒症未透析组（non-hemodialysis,NHD组）和健康对照组。结果：在各组患者的PBMC培养上清液中均未检测到血浆IL－10。经内毒素刺激后,上清液中IL－10水平升高,其中PS组高于CA组,但各组升高幅度均低于健康对照组。结论：应用 较好的PS膜可改善患者的免疫细胞对抗原的反应能力,IL－10可以作为评价透析膜生物相容性的指标之一。     

高分子合成膜和纤维素膜透析器生物相容性的研究

目的：比较高分子合成膜透析器和纤维素膜透析器的生物相容性。方法：利用酶联免疫吸附分析（ELISA）方法和逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）、斑点杂交方法检测了应用铜仿膜（14例）、聚甲基丙烯酸甲酯膜（PMMA）（14例）、聚砚膜（14例）血液透析患者、尿毒症未透析患者（10例）、腹膜透析患者（10例）及正常人（10例）血浆IL－1β、TNFα、IL－6水平及其基因表达。结果：正常人血浆IL－1β、TNFα、IL－6水平很低,外周血单核细胞（PBMC）中未检测到它们的mRNA表达。尿毒症未透析患者血浆IL－1β、TNFα、IL－6水平显著高于正常（P＜0．05）,表达3种细胞因子的mRNA。血液透析患者透析中细胞因子的mRNA表达均较未透析者显著升高（P＜0．05）,其中铜仿膜组IL－1β、TNFα、IL－6mRNA表达显著高于PMMA膜组和聚砚膜组,后两者间无显著性差异。但应用3种透析膜透析过程中IL－1β、TNFα、IL－6的血浆水平无显著性差异（P＞0．05）。结论：铜仿膜的生物相容性较PMMA膜、聚砚膜差,可导致细胞因子基因的过度表达,机体免疫功能紊乱。     

血液透析对尿毒症患者的IL-8表达的影响

目的 :了解血透及不同透析膜对尿毒症患者IL - 8表达的影响。方法 :采用酶联免疫吸附试验 (ELISA)测定IL - 8血浆水平及测定PBMC培养上清液IL - 8水平。结果 :正常对照组、尿毒症非透析组及血透治疗组之间的IL - 8血浆水平均有显著性差异 ,聚砜膜组的IL - 8血浆水平低于铜仿膜组及铜氨膜组 ,而铜仿膜组及铜氨膜组之间无显著差异。血透患者透后的IL - 8血浆水平较血透前升高。血透患者的PBMC受LPS刺激后产生的IL - 8多于正常人及尿毒症未透析病人。结论 :血透可引起尿毒症患者IL - 8表达的异常 ,再生纤维素膜 (尤其是铜仿膜 )导致IL - 8血浆水平改变的能力强于聚砜膜 ,测量IL - 8表达有助于评价不同透析膜的生物相容性。     

不同透析膜对血液透析患者外周血单个核细胞分泌IL-10的影响

目的探讨白细胞介素-10（interleukin,IL-10）在维持性血液透析（maintenancehemodialysis,MHD）患者免疫功能缺陷中的作用,判断其能否作为透析膜生物相容性的评价指标。方法应用ELISA法检测外周血单个核细胞（peripheralbloodmononuclearcells,PBMC）受内毒素细菌刺激后培养上清液中IL-10水平。MHD患者分为CA组和PUS组,另设立尿毒症未透析组（non-hemodialysis,NHD组）和健康对照组。结果在各组患者的PBMC培养上清液中均未检测到血浆IL-10。经内毒素刺激后,上清液中IL-10水平升高,其中PS组高于CA组,但各组升高幅度均低于健康对照组。结论应用生物相容性较好的PS膜可改善患者的免疫细胞对抗原的反应能力,IL-10可以作为评价透析膜生物相容性的指标之一。     

不同透析膜对单个核细胞凋亡的影响

为了解不同生物相容性透析膜对外周血单个核细胞 (PBMC)发生凋亡的影响 ,分离正常人PBMC ,分别与铜仿膜 (CU)、gambrane(聚碳酸酯聚乙烯乙二醇共聚物 ,G)膜孵育 ,对照组不接触透析膜。在培养的不同时间 (1 2、2 4、48、72h)收集细胞 ,应用流式细胞术观察凋亡发生的情况。结果 :在细胞孵育 48h后 ,各组PBMC发生凋亡的细胞明显增加 ,特别是铜仿膜组达 (3 6.3 1± 1 .40 ) % ,显著高于另外 2组 (P <0 .0 5 )。提示生物相容性差的铜仿膜更易诱导PBMC发生凋亡。     

透析膜的生物相容性与血透患者细胞因子产生的研究

细胞因子参与了维持性血透（MHD）患者的多种急、慢性并发症的病理过程；细胞因子的合成与分泌，与透析膜的生物相容性有关。本文研究不同透析膜对血透患者外周血单核细胞（PBMC）产生IL－15和TNFa活性水平及基因表达的影响。将15例MHD患者，随机分成铜仿膜（CUP）组和血仿膜（HF）组，分别与15例正常对照组比较。血标本采集于透前及透析开始后5min、60min、240min。经PBMC上清液的孵育（I。PS10pg／ml。·24h）、鼠胸腺细胞增殖、酶联免疫吸附及斑点杂交方法，检测11．－15、TNFa的活性水平及mRNA表达。l结果1．IMHD患者PB…     

氨茶碱抑制哮喘缓解期患儿外周血单个核细胞体外合成IL-4和IL-10的观察

目的：观察氨茶碱对哮喘缓解期患儿体外单个核细胞（PBMC）合成IL－4和IL－10释放的影响以及与血清IgE水平的关系。方法：采集20例缓解期过敏性哮喘患儿PBMC与氨茶碱培养，按不同浓度（0、5、10、20mg/L)分为哮喘对照组（ACG）、处理组1（ATG1）、ATG2和ATG3，同时设立正常对照组（NCG）。采用ELISA检测培养24h后各组PBMC上清液中白细胞介素4（IL－4）、IL－10浓度，同时留取血清测IgE。结果；ACG PBMC合成和分泌IL－4、IL－10、血清IgE明显高于NCG，ACG血清IgE与PBMC上清液中IL－4浓度呈显著正相关，IL－4与IL－10呈正相关。氨茶碱抑制PBMC I-14、IL－10合成，在20mg/L时具有显著性。结论：20mg/L的氨茶碱可以抑制IL－4的生成，发挥抗炎作用，同时氨茶碱可能通过对IL－10的抑制，相应地降低IL－10对IL－4的促进作用，从而增加其抗炎作用。     

发酵支原体抗HIV—1免疫致病机理的研究

目的：探讨人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus,HIV)感染过程中伴随的白细胞介素－10（IL－10）水平升高是否与合并发酵支原体（mycoplasma fermentans,M.fermentans)感染有关以及IL－10对人外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中HIV－1复制的作用。方法：采用不同浓度的M.fermentans PG18株,用ELISA法检测其对正常人PBMC及HIV－1感染人PBMC产生IL－10的诱导活性;同时,以HIV－1p24抗原为指标,用ELISA半定量法检测人重组IL－10（rHuIL-10)在体外对人PBMC中HIV－1复制的作用。结果：M.fermentans能显著诱导正常人PBMC及HIV－1感染人PBMC产生IL－10,与正常人PBMC相比,M.fermentans对HIV－1感染人PBMC产生IL－10的诱导活性更强;用rHuIL-10处理的人PBMC在感染后第6天对HIV－1的复制产生了抑制作用,抑制作用随rHuIL-10剂量增加而加强,感染前2d较感染后1d加入rHuIL-10产生的抑制作用显著。结论：M.fermentans与HIV感染过程中IL－10水平升高有关;IL－10可抑制人PBMC中HIV－1的复制;M.fermentans可能通过产生IL－10参与并维持（acquired immunodeficiency diseade,AIDS)较长的潜伏期。     

~(99)Tc-MDP对类风湿性关节炎患者外周血单核细胞产生细胞因子的影响

目的 :探讨“云克”(99Tc MDP)治疗类风湿性关节炎 (RA)的免疫机制。方法 :采用ELISA双抗体夹心法 ,观察“云克”体外对RA患者外周血单核细胞 (PBMC)产生白介素 1(IL 1)和可溶性白介素 2受体 (sIL 2R)的影响。结果 :“云克”有抑制RA患者IL 1的分泌及细菌脂多糖 (LPS)的促分泌作用 ,并对可溶性白介素 2受体的自发分泌及植物血素 (PHA)诱导分泌均有抑制作用。结论 :“云克”对RA的治疗机制可能与其降低IL 1和sIL 2R的作用有关     

不同血液净化方式的尿毒症患者血清中毒素对单核细胞分泌炎症因子的影响

目的观察尿毒症患者血清中毒素对单核细胞分泌炎症因子IL-6和单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的影响,并探讨不同血液净化方式对其的干预作用,为临床合理选择血透方式提供依据。方法将单纯血液透析（HD）组、血液透析联合血液滤过（HDF）组、连续性肾脏替代治疗（CRRT）组血液净化前后患者血清与单核细胞（PBMC）共同培养24h,检测血清中内毒素、同型半胱氨酸（Hcy）、晚期氧化蛋白产物（AOPP）、晚期糖基化终产物（AGEs）和甲状旁腺激素（iPTH）及上清液中IL-6、MCP-1水平,并设健康对照组作对照。结果尿毒症患者组血清内毒素、Hcy、AOPP、AGEs和iPTH的水平明显高于健康对照组（P〈0.01）;血液净化后,HD组中Hcy、AOPP、AGEs和iPTH水平下降不明显,与血液净化前比较差异无统计学意义（P〉0.05）,HDF组和CRRT组Hcy、AOPP、AGEs和iPTH水平显著下降,与血液净化前比较差异均有统计学意义（P〈0.01）。不同血液净化方式血液净化前后患者血清IL-6和MCP-1水平比较,HD组血液净化后IL-6、MCP-1水平稍高于血液净化前,但差异无统计学意义（P〉0.05）;HDF组血液净化后IL-6、MCP-1水平明显低于血液净化前,差异均有统计学意义（P〈0.05）,CRRT组血液净化后IL-6、MCP-1水平均低于血液净化前,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论维持性血液透析患者体内存在多种尿毒症毒素（尤其是中、大分子毒素）潴留状态,HDF和CRRT治疗较HD治疗能更有效地清除中大分子毒素,相应患者血清诱导单核细胞分泌炎症因子的能力明显下降,提示这两种治疗方式可一定程度减轻维持性血液透析患者微炎症状态,为尿毒症患者选择适宜的血液净化治疗方式提供了临床依据。     

DETERMINATION OF MIDDLE MOLECULES IN UREMIC PATIENTS

For the past few years, we have been engaged in isolating and separating middle molecules (MMs) from biologic fluids of healthy persons and uremic patients. Plasma or serum, ultrafiltrate, and peri- toneal outflow dialysate from uremic patients, as well as plasma from healthy subjects, were fractionat- ed by gel chromatography. Plasma or serum was pretreated with a 40 x l cm Sephadex G 50 column or by CXA ultrafilter. Fractionation of MMs was performed on a 100 x I cm Sephadex G 15 column, eluted with NH.HCO:} buffer. UV absorbance was measured at 206 nm, 225 nm, or both. All samples could be separated into about 10 peaks according to elution volume. Peak 2 and peak 3, corresponding to the elution volumes for vitamin B12 and oxytocin, were significantly higher in uremic than healthy sera. These two peaks were regarded as the main fractions containing uremic MMs. MMs measurement was used to: a) evaluate the efficiency of various dialyzers and hemoperfusion, b) evaluate the efficacy of continuous ambulatory peritoneal dialysis (CAPD) and hemodialysis (HD) in the removal of MMs, c) calculate the total quan tity of MMs removed by CAPD, intermittent peri- toneal dialysis and ultrafiltration, and d) assess the efficacy of reused dialyzers. Subfractionation of MMs by thin layer finger prints technic was carried out. Identification of the separated substances is in progress.     

溃疡性结肠炎患者白细胞介素-6活性的研究

对２５例溃疡性结肠炎（ＵＣ）患者ＰＢＭＣ体外诱生白细胞介素 ６（ＩＬ ６）水平进行测定，同时与２０例健康志愿者（ＨＣ）进行对照，结果ＵＣ组与ＨＣ组ＩＬ ６活性分别为２６１４８±８２０１Ｕ／ｍｌ和１００．００±５７．６５Ｕ／ｍｌ，Ｐ＜０．００１。ＵＣ组静止期与轻、中、重度３组比较，ＩＬ ６活性依次为１２１．０６±４３．００Ｕ／ｍｌ，２４０．２３±６１．６０Ｕ／ｍｌ，２７５．８３±７８．４６Ｕ／ｍｌ，３１５．００±１４２．９２Ｕ／ｍｌ。Ｐ分别＜００２，００２，０００１。而静止期与ＨＣ相比，Ｐ＞００５。按病变累及部位，全结肠组与左半结肠组ＩＬ ６活性分别为３１２３３±１０７．３４Ｕ／ｍｌ，２４４．８８±６９．９７Ｕ／ｍｌ，Ｐ＞００５。说明ＵＣ活动期患者ＩＬ ６活性明显高于对照与静止期患者，且随病情加重呈上升趋势。ＩＬ ６活性与病变累及部位无关。提示：观察ＩＬ ６活性，可反映疾病转归。针对ＩＬ ６活性进行调控，为ＵＣ治疗新动向。     

尿毒症透析患者生活质量及其影响因素

目的研究尿毒症血液透析和腹膜透析患者的生活质量及其影响因素，从而为提高尿毒症治疗效果、合理选择透析方法提供依据。方法123例尿毒症患者中血透48例，腹透75例。以肾脏病调查表、Karnofsky指数、工作情况、主观症状调查表及对治疗的满意度为衡量生活质量的指标。结果家庭透析患者生活质量显著高于住院透析患者;腹透患者在治疗满意度显著优于血透患者;糖尿病和老年患者生活质量显著较低。结论我国应大力提倡家庭透析，更多地开展腹膜透析，努力提高病人复职率。     

维持性血液透析患者外周血中性粒细胞预激活gp-91phox基因表达和吞噬杀菌功能异常

目的　探讨维持性血液透析 (HD)患者机体免疫功能下降的原因。方法　用RT PCR方法 ,对HD患者和正常对照者外周血中性粒细胞的 gp 91phox、白介素 (IL) 8、胞内型白介素 1受体拮抗物 (icIL 1ra)和分泌型白介素 1受体拮抗物 (sIL 1ra)基因表达进行研究。细胞吞噬和杀菌功能通过菌落计数以细胞外和胞内活菌下降的百分比表示。结果　健康对照组新鲜分离的中性粒细胞有 gp 91phox mRNA表达 ,而HD患者不表达。HD患者中性粒细胞自发表达IL 8、icIL 1ra和sIL 1ra。HD患者中性粒细胞对金黄色葡萄球菌的吞噬和胞内杀菌能力均明显下降。结论　HD患者中性粒细胞表达 gp 91phox障碍 ,提示烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(NADPH)系统受损。粒细胞自发表达IL 8、icIL 1ra和sIL 1ra ,这种预激活状态与对金黄色葡萄球菌吞噬和杀灭作用下降相一致