近十年78例新发阵发性睡眠性血红蛋白尿症的临床分析

目的　研究九十年代阵发性睡眠性血红蛋白尿症 (PNH)患者的临床特征 ,以增加对PNH新的认识 ,指导PNH的诊断及治疗。方法　对 1990年 1月至 1999年 11月我院诊断的 78例新发PNH患者的临床表现、实验室检查及治疗情况进行了回顾性分析。结果　①与八十年代的病例相比 ,新发PNH患者的发病年龄有所增大 (中位年龄由 2 7岁升至 34岁 ) ;女性病例增多 (由 18 5 %升至 38 5 % ) ;无血红蛋白尿发作病例增多 (由 2 4 2 %升至 38 5 % ) ;血栓形成发生率仍较低 (3 0 %对 6 4 % )。②所有患者均无家族遗传史。③部分患者表现类似骨髓增生异常综合征 :骨髓有 2 - 3系病态造血(19 2 % ) ,染色体核型异常 (12 2 % ) ,姊妹染色单体分染阴性 (8 9% ) ;部分患者表现类似再生障碍性贫血 :骨髓增生减低 (12 3% ) ,Ham’s试验阴性 (34 2 % )。但 10 0 0 % (2 5 / 2 5例 )患者外周血红细胞及粒细胞CD5 5或CD5 9表达异常 ,可作为鉴别诊断的特异性指标。④ 83 8%患者对肾上腺糖皮质激素为主的治疗有效 ,但易复发 ,1年复发率为 5 4 2 %。 8例对肾上腺糖皮质激素治疗效果差或有依赖的难治性、复发性PNH用低剂量化疗 (MP方案 :马法兰 2 - 6mg·d 1;强的松 0 5mg·kg 1·d 1)治疗有效率为 6 2 5 % ,而且均未出现严重的骨髓抑     

羟基喜树碱治疗难治复发性阵发性睡眠性血红蛋白尿症的临床分析

目的 观察应用羟基喜树碱为主治疗难治复发性阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)的疗效.方法 15例患者均采用羟基喜树碱为主联合治疗,配合输血、对症、支持治疗.结果 15例患者化疗均有效,所有患者肾上腺糖皮质激素的用量较化疗前减少.15例患者经治疗后4例进步,11例明显进步.10例依赖输血者中8例脱离输血.未发现严重的不良反应.13例溶血指标明显好转.结论 应用羟基喜树碱治疗难治复发性PNH是较为安全、有效的方法.     

阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者骨髓正常细胞及异常克隆分析

目的 分析阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）患者骨髓正常细胞（CD59^ )及异常克隆细胞（CD59^－）的细胞构成。方法 骨髓有核细胞免疫荧光标记后用流式细胞术分析。结果 （1）PNH患者骨髓正常及异常克隆的细胞组成在有核细胞水平是显著不均衡的，正常的CD59^ 细胞以淋巴细胞窗内细胞为主，异常的CD59^－细胞则以粒细胞窗及原始细胞窗内细胞为主。（2）PNH患者骨髓CD59^ 正常细胞群所含CD59^ 细胞总数较异常者显著减少，淋巴细胞窗及粒细胞窗内CD59^ 细胞均较异常者显著减少，前者减少更为显著。结论 PNH患者骨髓正常细胞及异常克隆的细胞构成在有核细胞水平及CD59^ 细胞水平都有显著差异，正常造血呈衰竭状态。因此，在考虑用患者自体骨髓体外净化去除异常克隆后回输给患者重建造血时，应对正常造血细胞作进一步处理，否则正常造血细胞可能不具备重建造血的能力。     

MA方案与PAC方案治疗难治性或复发性PNH疗效分析

陈发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）常规治疗手段有：肾上腺皮质激素、雄激素、免疫抑制剂等。但治疗效果不理想，对激素无效或依赖而成为难治性或复发性PNH。我们研究了肾上腺皮质激素联合雄激素、环孢菌素A（PAC方案）与米托恩醌联合阿糖胞苷（MA方案）治疗难治性或复发性PNH的临床疗效，并进行对比。现报道如下。     

肾上腺糖皮质激素治疗SARS的回顾性分析

目的:了解我院严重急性呼吸道综合征(Severe Acute Respiratory Syndrome, SARS,即非典型肺炎)治疗中肾上腺糖皮质激素的使用.方法:对43例SARS患者进行回顾性研究,分析肾上腺糖皮质激素的初始使用剂量、最高剂量.根据是否在使用初始剂量后需要将肾上腺糖皮质激素加量将患者分为糖皮质激素加量组和非加量组,分别比较两组在临床表现、初始剂量和疗效上的差异.结果:根据初始3天肾上腺糖皮质激素的剂量,甲泼尼龙(甲基强的松龙)的初始剂量为(170.82±15.89) mg*d-1,范围48～500 mg*d-1,最大甲泼尼龙剂量为(291.44±37.63) mg*d-1,剂量范围48～800 mg*d-1.4例未用糖皮质激素.25例用初始剂量激素后未再加量,14例初始剂量激素未能有效控制病情,根据病情追加了糖皮质激素剂量.糖皮质激素加量组甲泼尼龙剂量明显增高,达到病情稳定所需时间也较长,使用糖皮质激素的天数也延长.但两组从病情严重程度并无显著差异.结论:本组患者绝大多数使用亚冲击剂量的糖皮质激素即可获满意疗效,部分患者尚需增加皮质激素剂量,可能与这些患者对糖皮质激素的反应性差有关,而并非病情严重造成.     

地西他滨联合抗CD33单抗治疗难治性急性髓细胞性白血病（附2例报告）

目的探讨地西他滨（DAC）联合抗CD33单抗（GO）治疗难治性急性髓细胞性白血病（AML）的疗效和安全性。方法对2例难治性AML（M4）患者均进行1个疗程的DAC联合GO治疗（具体剂量为DAC：20 mg.m-2.d-1×5 d,第1～5天,GO 9 mg/m2,第6天）,应用骨髓涂片、定期监测血常规评价其疗效。结果经过1个疗程的DAC联合GO治疗后,1例患者未出现疾病进展,骨髓中原幼细胞由35%降至27.5%,巨核细胞由2个/片增加至（200个/片,血小板由减少改善为数量基本正常,临床上血小板恢复正常水平,一般情况良好。另1例在治疗期间高白细胞得以控制,治疗后第15天复查骨髓提示原幼细胞由38.5%降至12.5%,获得部分缓解。2例患者均未出现肝静脉闭塞病（VOD）及其他脏器功能损害表现。结论 DAC联合GO治疗难治性AML安全可行,尤其是对于一般情况差、不能耐受高剂量化疗或高剂量挽救化疗失败的患者,不失为一种新的治疗选择。     

免疫相关性血细胞减少症27例临床分析

目的观察27例免疫相关性血细胞减少症（IRH）或全血细胞减少症（IRP）患者的临床特点,以提高对该病的认识。方法分析27例IRH/IRP患者临床表现、血常规、骨髓象、骨髓单个核细胞抗人球蛋白（BMMNC-Coombs）试验、溶血试验、抗核抗体ANA和ENA抗体谱、T淋巴细胞亚群、染色体核型等以及对肾上腺糖皮质激素、环孢霉素A等免疫抑制剂的治疗反应。结果该组病例临床主要表现为贫血、出血、感染;血象呈三系、两系或一系减少,网织红细胞百分比不低;骨髓增生以活跃或明显活跃为主（81.5%）,红系比例多增高;BMMNC-Coombs试验阳性率为70.4%;6例（22.2%）合并系统性红斑狼疮（SLE）等自身免疫性疾病;对肾上腺糖皮质激素、环孢霉素A等治疗有良好反应。结论 IRH/IRP是由于T淋巴细胞调控异常致B淋巴细胞产生针对骨髓未成熟造血细胞的自身抗体而使血细胞减少,BMMNC-Coombs试验对IRH/IRP的诊断具有较高的灵敏性和特异性,多数患者对肾上腺糖皮质激素等免疫抑制剂反应良好。     

小儿骨髓增生异常综合征22例临床分析

目的探讨骨髓增生异常综合征（MDS）诊断、分型、治疗及预后。方法将22例患者分为四组,分别予糖皮质激素＋维甲酸、环孢菌素、环孢菌素＋雄激素、糖皮质激素＋环孢菌素＋雄激素治疗。结果 22例MDS中难治性血细胞减少（RC）14例,占63.6%,难治性贫血伴原始细胞过多（RAEB）8例,占36.4%。①糖皮质激素＋维甲酸治疗3例,缓解1例,有效率33.3%。②单用环孢菌素治疗3例,缓解1例,有效率33.3%。③环孢菌素＋雄激素治疗9例,缓解4例,有效率44.4%。④糖皮质激素＋环孢菌素＋雄激素治疗7例,缓解4例,有效率55.5%。22例病例中5例获随访,1例转为白血病,转化率20%。结论本组病例的治疗疗效均不是很理想,且易向白血病转化。     

骨髓小粒对AA和PNH及RA诊断及鉴别诊断

目的：探讨骨髓小粒对再生障碍性贫血（AA）、难治性贫血（RA）及阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）的鉴别诊断价值。方法：对10例AA、10例RA、10例PNH及10例正常人的骨髓小粒进行研究。结果：AA患者的骨髓小粒中非造血细胞所占比例明显高于RA、PNH和正常人，差异有显著性（P〈0．01）。RA患者的骨髓小粒中原粒加早幼粒比例高于AA、PNH和正常人，并出现病态造血。PNH患者的骨髓小粒表现红系增生。结论：骨髓小粒观察对AA、RA及PNH的鉴别诊断有着重要意义。     

不同剂量糖皮质激素在肿瘤内科临床应用中的疗效和安全性分析

目的 分析不同剂量糖皮质激素在肿瘤内科临床应用中的疗效和安全性。方法 回顾性分析2019年10月至2022年10月济南市中西医结合医院收治的320例进行糖皮质激素治疗的肿瘤患者的临床资料，根据糖皮质激素的给药剂量不同将研究对象分为低剂量组（糖皮质激素30～40mg/d）和高剂量组（糖皮质激素>40～60mg/d），每组160例。两组患者均接受为期15d的糖皮质激素治疗。比较分析两组患者治疗后的临床疗效以及不良反应发生情况。结果 低剂量组患者治疗后的临床总有效率显著高于高剂量组（P<0.05）。两组患者治疗后的高血糖、低血钙、骨髓抑制、水肿、颅内高压以及脊髓压迫发生率比较差异均无显著性（P>0.05）；低剂量组患者的肺内感染、肝功能异常以及放射损伤发生率均显著低于高剂量组（P<0.05）。结论 低剂量糖皮质激素治疗肿瘤患者的临床效果较好，且肺内感染、肝功能异常以及放射损伤发生率较低，后续还需要进一步细分糖皮质激素的给药剂量，以期在达到最大临床疗效的同时减少不良反应的发生。     

CD55,CD59抗原表达在PNH合并全血细胞减少症诊断中的应用

目的 探讨红细胞和粒细胞膜CD55与CD59抗原表达在阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)合并全血细胞减少症(PCP)诊断中的应用.方法采用流式细胞术结合直接免疫荧光法,检测PCP患者病因可疑为PNH的的外周血红细胞和粒细胞膜 CD55与CD59抗原的表达.结果 125例中,PNH32例,非PNH 93例(包括再生障碍性...     

CD16在阵发性睡眠性血红蛋白尿症中的特异性表达

目的:检测中性粒细胞表面分化抗原CD16在阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)中表达,评价其在PNH诊断中的意义。方法:运用流式细胞术检测40名健康体检者及36例初治PNH患者外周血中性粒细胞表面分化抗原CD16,并与CD55、CD59及与传统Ham's试验结果进行比较研究。结果:PNH患者外周血细胞的CD16、CD55及CD59均有不同程度的缺乏,与健康对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);与传统Ham's试验比较其灵敏度高,特异度高。结论:细胞膜上糖基化磷脂酰肌醇锚的锚定蛋白CD16的缺陷与PNH有密切关系,流式细胞术检测PNH患者外周血中性粒细胞CD16可作为诊断PNH的有效辅助检查方法,具有一定临床意义。     

GPI锚定蛋白检测诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿症的临床价值

目的：探讨阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）患者不同外周血细胞GPI锚定蛋白的表达情况,为PNH的诊断和鉴别诊断提供依据。方法：采用流式细胞术检测32例PNH患者外周血各类细胞膜上CD55、CD59、 CD16及CD14的表达百分率。结果： PNH患者外周血红细胞、粒细胞膜上CD55、CD59表达均明显减少,与正常对照组比较差异有显著性（P<0.001）,且粒细胞上CD55、CD59表达率低于红细胞（P<0.05）;血小板CD55、CD59表达率也较对照组减少（P<0.05）;有27例PNH患者的淋巴细胞CD55、CD59表达降低,其缺失率达30%,低于粒细胞和红细胞;CD16在粒细胞上表达量差异很大（34%～83%）,与对照组比较差异有显著性（P<0.001）;在单核细胞上可见CD14表达缺失的PNH克隆,CD14表达比例明显低于正常对照组（P<0.001）。结论： 检测外周各系血细胞CD55和CD59可以使典型PNH的诊断更加可靠,使部分缺乏典型临床表现的PNH明确诊断。检测CD16和CD14对排除PNH具有重要意义。     

CD34、CD59在阵发性睡眠性血红蛋白尿中的表达及意义

目的研究阵发性睡眠性血红蛋白尿（PNH）患者骨髓CD34^＋细胞比率及外周血粒、红细胞CD59表达阳性率并探讨其临床意义。方法采用流式细胞术检测20例PNH患者骨髓单个核细胞（BMMNC）中CD34^＋细胞比率及外周血中粒、红细胞CD59表达阳性率。结果PNH患者CD34^＋细胞比率显著低于正常人（P〈0．01）;其中增生减低组CD34^＋细胞比率低于增生活跃、增生明显活跃组（P均〈0．05）,而后两组之间差异无显著性（P〉0．05）。正常人外周血粒、红细胞CD59表达阳性率均〉95％,其中粒细胞CD59表达稳定性较好;PNH患者外周血粒、红细胞CD59表达阳性率与正常对照组相比均显著减低（P〈0．01）;粒细胞CD59在不发、偶发、频发组中表达逐渐减低且差异均有显著性（P〈0．05）,红细胞CD59表达则在三组之间差异无显著性（P〉0．05）。结论CD34^＋造血干细胞减少可能参与PNH发病;外周血粒、红细胞CD59检测是诊断PNH的特异性及敏感性方法,其中粒细胞CD59缺失程度对判断病情严重与否具参考价值。     

阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者3种GPI锚定蛋白表达的改变

目的 比较阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者血细胞表面3种糖基化磷脂酰肌醇(GPI)锚定蛋白表达情况。方法 流式细胞术检测25例PNH患者粒细胞表面GPI锚定蛋白CD55、CD59和CD87的表达水平，并分析它们在不同疾病状态下的改变。结果 PNH患者粒细胞表面3种GPI锚定蛋白间具有较好的相关性(P均＜0．05)，红细胞表面CD55和CD59也表现出相关(P＜0．01)，但与粒细胞表面CD55和CD59的缺乏情况并不一致。结论 PNH患者同一系血细胞表面GPI锚定蛋白呈平行关系，这有助于对PNH发病机制的进一步了解。     

Reduction of CD55 and/or CD59 in red blood cells of patients with HIV infection.

BACKGROUND: Anemia is a common feature in HIV infection. An increased sensitivity of lymphocytes from HIV patients to lysis by complement has been correlated with a decreased expression of CD55 and CD59 in their surface. The aim of this study was to evaluate CD55/CD59 presence in red cells of HIV patients and explore possible correlations with clinical parameters. MATERIAL/METHODS: CD55/CD59 expression was evaluated in erythrocytes of 37 patients (30M/7F, median age: 39 years) with HIV infection (25 also having hemophilia), 121 controls, and 8 PNH patients using the sephacryl-gel microtyping system. Ham and sucrose tests were also performed. RESULTS: Anemia was present in 14/37 (37%) HIV patients. Interestingly, all HIV patients had deficient CD55 and/or CD59 erythrocytes: 8 (21%) for both CD55 andCD59 and 29 (78%) isolated CD55 and/or CD59 negativity. Deficient erythrocytes did not account for more than 10% of the total in the vast majority of patients. In controls, only 2 (1%) had red cells with double CD55/CD59 negativity and 3 (2%) had isolated deficiency. All PNH patients had a simultaneous CD55/CD59 deficiency. Positive Ham and sucrose tests were found only in PNH. There was no correlation between the presence of deficient CD55/CD59 erythrocytes and anemia, hemolysis, antiretroviral therapy, CD4+ counts, viral load, or concomitant hepatitis C infection in HIV patients. CONCLUSIONS: This study provides evidence supporting the presence of erythrocytes with CD55 and/or CD59 deficiency in HIV. Further studies using molecular techniques will be required to clarify the exact role of this deficiency in HIV patients.     

阵发性睡眠性血红蛋白尿患者测定CD55、CD59的意义

本文采用流式细胞技术测定6例阵发性睡眠性血红蛋白尿（PNH）．11例再障-PNH综合征,10例再生障碍性贫血（AA）患者外周血淋巴细胞膜CD55和CD59标记率。6例PNH患者均表现出CD55和CD59下降（P＜0.01）．11例再障-PNH综合征患者也表现出CD55和CD59下降（P＜0.05）。10例再生障碍性贫血患者中8例CD55和CD59标记率在95％以上．2例标记率在85％以上,与对照组相比无统计学意义。结果表明：血细胞膜上糖基磷脂酰肌醇（GPI）“锚”相关蛋白CD55和CD59的缺陷与PNH有密切关系。流式细胞技术测定血细胞膜CD55和CD59可作为诊断PNH的有效方法。     

阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者CD34+CD59-与CD34+CD59+细胞膜EPO、TPO受体后STAT5磷酸化水平的关系

目的 观察阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者骨髓CD34+CD59+和CD34+CD59-细胞膜促红细胞生成素(EPO)受体(EPOR)、血小板生成素(TPO)受体(TPOR)后信号转导通路中信号转导和转录激活因子(STAT)5磷酸化水平.方法 应用流式细胞术分别检测2010年4月至2011年2月天津医科大学总医院血液肿瘤科PNH患者23例及11名健康对照骨髓单个核细胞(BMMNC)经和不经10 U/ml EPO、50 U/ml TPO刺激后CD34+CD59-和CD34+CD59+细胞磷酸化STAT5(P-STAT5)的平均荧光强度(MFI).结果 (1)未加入细胞因子时,PNH患者CD34+CD59-细胞P-STAT5的MFI为31±15,明显低于 CD34+CD59+细胞(74±47,P<0.01)及健康对照组CD34+CD59+细胞(59±23,P<0.05);PNH患者CD34+CD59+细胞P-STAT5的MFI与健康对照组CD34+CD59+细胞比较差异无统计学意义(P>0.05).(2) EPO、TPO刺激后,PNH患者CD34+CD59-细胞P-STAT5的MFI分别为49±24、51±41,明显低于CD34+CD59+细胞(120±82、124±87,均P<0.01)及健康对照组CD34+CD59+细胞(79±47、98±53,均P<0.05),PNH患者CD34+CD59+细胞P-STAT5的MFI与健康对照组CD34+CD59+细胞比较差异无统计学意义,经EPO、TPO刺激后PNH患者CD34+CD59+细胞P-STAT5的增高值分别为49±11、54±43,明显高于CD34+CD59-细胞(17±4、16±6,均P<0.01).结论 体外予EPO、TPO刺激,PNH患者正常克隆造血干细胞(CD34+CD59+)EPO、TPO受体后信号转导通路中STAT5磷酸化水平明显优于异常克隆造血干细胞(CD34+CD59-).

Abstract：

Objective To study the STAT5 phosphorylation levels of erythropoietin receptor (EPOR) and thrombopoietin receptor (TPOR) in CD34+CD59- and CD34+CD59+ bone marrow cells of the patients with paroxysmal nocturnal hemoglobinuria (PNH).Methods The bone marrow mononuclear cells (BMMNC) were extracted from 23 PNH patients treated at our department from April 2010 to February 2011 and 11 normal controls. The mean fluorescence intensity (MFI) of phosphorylated STAT5 (P-STAT5) in CD34+CD59+cells and CD34+CD59-cells with or without the stimulation of 10 U/ml EPO and 50 U/ml TPO were examined by flow cytometry.Results (1)Without stimulation, the P-STAT5 MFI in CD34+CD59- cells of PNH patients was significantly lower than that of CD34+CD59+cells (31±15 vs 74±47, P<0.01). And it was 59±23 in normal control CD34+CD59+cells (P<0.05). No statistic difference existed between the CD34+CD59+cells of PNH patients and the normal control CD34+CD59+cells. (2)Under the stimulations of EPO and TPO, the P-STAT5 MFI was significantly lower in CD34+CD59-cells of PNH patients than that of CD34+CD59+cells (49±24 and 51±41 vs 120±82 and 124±87, both P<0.01). For the normal control CD34+CD59+cells, they were 79±47 and 98±53 respectively (P<0.05).No statistic difference existed between the CD34+CD59+cells of PNH patients and the normal control CD34+CD59+cells. P-STAT5 MFI was elevated after the stimulations of EPO and TPO. The increments of CD34+CD59+cells in PNH patients were significantly higher than those of CD34+CD59-cells (49±11 and 54±43 vs 17±4 and 16±6, both P<0.01).Conclusion Under the in vitro stimulations of EPO and TPO, the STAT5 phosphorylation levels of EPO and TPO receptors in normally cloned hematopoietic stem cells in PNH patients are obviously superior to those in abnormally cloned counterparts.