四甲基偶氮唑盐比色法测定白细胞介素-2活性及淋巴细胞增殖反应

用改良MTT(四甲基偶氮唑盐)比色法检测白细胞介素-2(IL-2)活性和淋巴细胞转化反应,并与~3H-dT掺入法相比较。结果表明,改良MTT比色法具有简单、快速、敏感的优点,不仅适用于检测IL-2,同时也可用于淋巴细胞转换试验。在与~3H-dT掺入法平行试验时发现,两者平行相关(相关系数均>0.90)。本法无需接触同位素,便于推广应用。     

四甲基偶氮唑盐比色法测定Vero毒素-1的CD50

目的 测定Vero毒素-1对Veto细胞的毒性。方法 用四甲基偶氮唑盐比色法测定Vero毒素-1对Vero细胞的毒性。结果 Vero毒素-1的CD50为1pg。结论 四甲基偶氮唑盐比色法方法简便，灵敏度高，且没有同位素的污染，是测定Veto毒素-1对Vero细胞毒性的一个简便方法。     

四甲基偶氮唑盐比色法测定脑源性神经营养因子生物学活性的研究

目的:探索四甲基偶氮唑盐（methylthiazolyl tetrazolium,MTT）实验方法的最佳条件,并检测脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor,BDNF）的生物学活性。方法:根据MTT法的测定原理,采用三因素（细胞数量、MTT浓度、MTT染色时间）三水平的正交实验设计;并依据MTT的最优条件测定BDNF的生物活性。结果:MTT比色法检测SH-SY5Y细胞活性的最优条件为:每孔细胞数:（0.2×108个/L,100μl）,MTT的染色时间（6小时）,MTT的剂量（5g/L）。在ATRA诱导SH-SY5Y细胞产生TrkB受体后,随着BDNF浓度的增加,吸光值也增加,当BDNF浓度增加到50μg·L-1后,随着BDNF浓度的增加,吸光值增加并不显著。结论:建立了MTT比色法的最佳条件,并应用于BDNF细胞因子的活性检测中,在BDNF浓度为50μg·L^-1时,可以得到很好的量效关系     

应用四唑盐比色法对5种骨水泥的细胞毒性的测试

0　引言　应用细胞培养法对牙科材料的生物相容性进行评价是一种简便、有效、经济的方法 .近年来 ,国内外有许多学者报道用 MTT检测细胞活性 ,并认为用 MTT法可以代替活细胞计数、同位素标记进行细胞毒性试验 .我们应用 MTT法对 5种骨水泥的细胞毒性进行了评价 ,并对有关问题进行了讨论 .1　材料和方法1.1　测试材料　 1号 :生物水泥 ,2号 :羟基磷灰石人工骨 ,3号 :氰基丙烯酸酯骨水泥 1号 (自制 ) ,4号 :氰基丙烯酸酯骨水泥 2号 (自制 ) ,5号 :氰基丙烯酸酯骨水泥 3号 (自制 ) .阴性对照采用珊瑚 ,阳性对照采用聚氯乙烯 .1.2　实验步骤…     

骨肉瘤化疗药物体外四甲基偶氮唑盐药敏的实验研究

目的探讨卡铂(CBP)和其它抗骨肉瘤基本药物对OS-732细胞株的抑制作用.方法应用体外四甲基偶氮唑盐药敏试验,选用CBP、顺铂(CDP)、阿霉素(ADM)和氨甲喋呤(MTX),参考临床所能达到的血浆最大理论浓度设定不同浓度梯度,观察它们对OS-732细胞株的抑制率.结果上述药物在体外均有一定的抑瘤作用,其中以CDP、CBP、CDP+ADM和CBP+ADM的抑制率较好(平均值分别为82 86%、80.85%、81.92%和82.30%),4组间的差别无显著性意义(P＞0 05);ADM次之(66.63%);MTX最差(30.57%),与前5组比较差别均有显著性意义(均P＜0.01).结论临床使用的几种抗骨肉瘤药物对OS-732细胞株均有一定的抑制作用,CBP的效果与CDP相似.     

四唑盐比色法评价聚乳酸、聚乙醇酸及其共聚物的细胞毒性

目的 评价聚乳酸、聚乙醇酸及其共聚物的细胞毒性。方法 采用能快速评定细胞增殖率和细胞毒性的比色分析方法-MIT比色法，分别检测对聚乳酸、聚乙醇酸细颗粒对小鼠胚胎成纤维细胞相对增殖率的影响，评价其细胞毒性。结果 参照美国药典的评价标准，两类医用高分子材料均呈现较高的细胞相对增殖率，其细胞毒性为1级，即无细胞毒性。结论 聚乳酸、聚乙醇酸无细胞毒性。     

MTT比色法的改良及其在LAK细胞活性检测中的应用

目的：改良四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法,并用来检测淋巴因子激化的杀伤细胞（LAK细胞）活性。方法：在MTT代谢产物甲瓒DMSO溶解后的最佳吸光度测定及效靶细胞不同孵育时间的比较等方面进行研究。结果：MTT代谢产物甲瓒DMSO溶解后的最佳吸光度为510nm,效靶细胞最佳孵育时间为4h。结论：改良的MTT比色法优于常规的MTT比色法。     

四甲基偶氮唑盐法用干非小细胞肺癌药敏试验条件的筛选

目的 筛选非小细胞肺癌药敏试验的条件,方法 取25例非小细胞肺癌惠的瘤细胞,用四甲基偶氯唑盐(MTT)击观察9种化疗药物．在不同浓度、不同时间对癌细胞的敏感性,结果 9种化疗药物对瘤细咆的敏感性．有随着药精浓度的增加、作用时间的延长而增高的趋势．但每个药物都有各自的特点。结论 非小细胞肺癌细胞MTT法药敏试验的浓度应为临床用药量的计算值,药物作用时间应以48h为宜。     

中药注射液体外肾细胞毒性评价的方法学探讨

目的研究柴胡注射液和丹参注射液在犬肾近端小管上皮细胞（MDCK细胞）和人胚肾细胞（HEK-293细胞）模型的毒性作用,并探讨中药注射液体外肾细胞毒性检测的实验方法。方法选用马兜铃酸A作为阳性对照,将不同厂家和批次的丹参注射液、柴胡注射液的原液及稀释液,与MDCK细胞或HEK-293细胞共同孵育,通过四甲基偶氮唑盐比色法（MTT法）量化细胞毒性,计算相对增殖率,进行中药注射液体外肾细胞毒性评价。结果在MDCK细胞模型中,两批丹参注射4个液稀释浓度下毒性分级显示为0级,一批稀释9、27、81倍后显示为0级,柴胡注射液稀释27、81倍后显示为0级;在HEK-293细胞模型中,一批丹参注射液4个稀释浓度下毒性分级显示为1级,一批稀释9、27、81倍后显示为1级,一批稀释27、81倍后显示为1级;柴胡注射液稀释27、81倍后显示为2级。结论利用肾脏细胞来源的细胞,可尝试建立中药注射液体外肾细胞毒性检测的实验方法。     

几种医用材料的细胞生物相容性评价的实验研究

目的：通过2种体外细胞毒性试验研究，评价几种生物材料的细胞生物相容性。方法：依据ISO10993－1.1997及GB／T16886.1-1997，应用琼脂覆盖法和四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法对聚丙烯酰胺水凝胶、壳聚糖和类金刚石等5种生物材料的细胞毒性进行评价。通过建立MTT比色法的L929细胞生长代谢标准曲线，确定了96孔板适宜的细胞接种数。结果：5种生物材料MTT试验中毒性级均为0级，琼脂覆盖法中材料周围及脱色区内细胞溶解评价（Z／L值）均为0／0。结论：5种生物材料具有良好的细胞生物相容性。     

新型复合盖髓材料的体外细胞毒性研究

目的检测新型复合盖髓材料磷酸钙-硅酸钙-泡铋矿复合水门汀（calcium phosphate-calcium silicate-bis-muth compound cement,CASBi）的体外细胞毒性,并与临床常用盖髓材料的细胞毒性进行比较,为评价新型盖髓材料的生物相容性提供基础依据。方法采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法和琼脂覆盖法,评价CASBi和商品化盖髓材料Dycal、氢氧化钙糊剂（calcium hydroxide,CH）对人牙髓细胞的体外细胞毒性作用。结果 MTT和琼脂覆盖法均显示CASBi的细胞毒性为1级,Dycal和CH的细胞毒性为2级。统计结果显示,MTT实验中,CASBi与Dycal、CH的吸光光度值间存在显著性差异（P〈0.05）。结论新型复合盖髓材料CASBi具有轻微的细胞毒性,对牙髓组织的影响还有待进一步研究。     

新型Ti－Ceramic陶瓷的细胞毒性评价

新型Ｔｉ－Ｃｅｒａｍｉｃ陶瓷的细胞毒性评价何惠明，赵信义，施长溪，郭天文（第四军医大学口腔医学院修复科西安７１００３３）关键词牙科陶瓷；细胞毒性；四甲基偶氮唑盐中图号Ｒ７８３；１我院与西北轻工业学院合作，共同研制了适于钛及钛合金烤瓷的低温瓷粉Ｔｉ－Ｃ...     

LAK细胞对白血病多药耐药细胞的杀伤作用

目的:研究淋巴因子激活的杀伤(LAK) 细胞对白血病多药耐药细胞的杀伤效应。方法:采用改良的四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测LAK细胞对白血病多药耐药细胞株K562/VCR的杀伤率,并与敏感株K562 相比较。结果:LAK 细胞对K562/VCR 细胞的杀伤率明显高于对K562 细胞的杀伤率,并且当效靶比为40∶1 时,这种杀伤率最高。结论:LAK细胞在体外对白血病多药耐药细胞株具有显著的杀伤作用,提示临床上用LAK细胞治疗多药耐药的白血病是可行的     

丹参素增强肝细胞生长及其在药物性肝细胞损伤中的保护作用

以体外培养的小鼠肝细胞为模型，采用四甲基偶氮唑盐（ＭＴＴ）比色法，观察了不同剂量丹参素对肝细胞增殖的影响及其对Ｄ－半乳糖胺（ＧａｌＮ）致肝细胞损伤的保护作用。结果表明：丹参素能直接刺激肝细胞增殖，而且二者之间具有一定的剂量依赖关系；丹参素对ＧａｌＮ引起的肝细胞损伤和坏死也具有保护作用。     

弓形虫对HPB-ALL细胞及CNE-2Z细胞增殖的影响

目的：探讨弓形虫对HPB—ALL细胞及CNE-2Z细胞增殖的影响。方法：取培养至对数生长期的HPB—ALL细胞和CNE-2Z细胞分别接种于96孔培养板中,加入不同浓度（1×10^4、2×10^4、4×10^4、8×10^4、16×10^4／mL）的弓形虫速殖子作用48h,MTT法检测细胞增殖抑制率。结果：弓形虫对HPB—ALL细胞增殖抑制率依次为14％、20％、33％、38％和39％,除第1组外,其余4组的吸光度值与对照组比较．差异均有统计学意义（P〈0．05）,且实验3、4、5组吸光度值与对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0．01）;弓形虫对CNE-2Z细胞增殖抑制率分别是4％、9％、16％、20％和23％,其中实验4、5组吸光度与对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论：弓形虫逮殖子对体外培养的HPB—ALL细胞和CNE．2z细胞增殖有不同程度的抑制作用．     

蜂毒素体外抑瘤作用的实验研究

目的：研究蜂毒素对建系肿瘤细胞体外生长的抑制作用。方法：通过凝胶色谱法从蜜蜂毒中纯化得高纯度蜂毒素,分别选取SMMC－7721、BEL－7402和Hep-3B三种肿瘤细胞系,以四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法观察蜂毒素对3种肿瘤细胞系的生物抑制作用,以丝裂霉素、长春新碱、华蟾素为对照;并考察了蜂毒素对SMMC－7721细胞系的生长抑制作用的时效关系。结果：蜂毒素的抑瘤作用与剂量呈正相关,抑制率优于对照组药物,蜂毒素对SMMC－7721细胞系各时间点的抑瘤率无显性差异。结论：蜂毒素的体外抑瘤作用明显,而且作用发生迅速。     

维甲酸对宫颈癌细胞耐药株增殖及药物敏感性的影响

目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)对宫颈癌耐药株HeLa/MMC的增殖及药物敏感性的影响及其作用的分子机制。方法:观察ATRA作用下HeLa/MMC细胞的增殖,MTT法观察ATRA对HeLa/MMC药物敏感性的影响,半定量RT-PCR检测mdr1基因的表达情况。结果:①ATRA对HeLa/MMC细胞的增殖有抑制作用,这一作用为非细胞毒抑制作用。②ATRA能提高MMC对HeLa/MMC细胞的杀伤作用,并呈剂量依赖性。③半定量RT-PCR结果显示,ATRA上调了HeLa/MMC细胞mdr1基因的表达。结论:表明ATRA能抑制HeLa/MMC的增殖,提高HeLa/MMC对MMC的敏感性,但这种作用与mdr1基因表达无关。     

三氧化二砷对肝癌细胞株SMMC-7721、HepG2抑制作用的研究

目的 :研究三氧化二砷 (As2 O3)对肝癌细胞株的抑制作用。方法 :用不同浓度的 As2 O3处理人肝癌细胞株 SMMC- 772 1、Hep G2及正常人肝细胞株 L- 0 2 ,应用四甲基偶氮唑盐比色法 (MTT法 )观察 As2 O3对细胞生长的影响 ,并与 3种常用抗癌药羟基喜树碱 (HCPT)、顺铂 (DDP)及 5 -氟脲嘧啶 (5 - Fu)的抑制率进行比较。结果 :低浓度的 As2 O3、HCPT、DDP及 5 - Fu对 SMMC- 772 1、Hep G2两种肝癌细胞株的抑制率分别是 86 .3% ,4 3.2 % ;4 .2 % ,4 2 .1%和 76 .7% ,4 5 .6 % ;19.8% ,18.6 % ,As2 O3的抑瘤作用最强 (P<0 .0 5 ) ,而对正常人肝细胞株的抑制较弱。浓度≥ 2 .0 μm ol/ L 的 As2 O3对 SMMC- 772 1和 Hep G2的抑制作用差异均无显著性 (P>0 .0 5 )。结论 :As2 O3体外试验能有效抑制肝癌细胞株的生长 ,且在一定浓度范围内 ,抑制率具有一定的浓度和时间依赖性     

Caspase3在哇巴因诱导Jurkat细胞凋亡中的作用

目的 探讨哇巴因诱导Jurkat细胞凋亡的机制。方法 四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察哇巴因对Jurkat细胞生长的抑制作用；应用DNA片段分析、流式细胞术观察细胞凋亡；半定量逆转录PCR(RT-PCR)检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase3)基因表达水平；应用westernblot测定caspase3的活性亚单位；比色法检测caspase3活性。结果 哇巴因能诱导Jurkat细胞凋亡，在细胞凋亡过程中，caspase3活性明显升高。结论 caspase3活化参与了哇巴因诱导Jurkat细胞的凋亡过程。