三种活力碘稀释剂的杀菌效力观察

目的选择一种对人体无毒无害且能增强杀菌效力的适宜的碘伏稀释剂。方法模拟几种溶剂(自来水配制、蒸馏水配制、生理盐水配制)的碘伏溶液,经5倍、10倍、20倍稀释再加进三种标准菌株(金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌)在5个时间(5、10、15、30、60min)段取出含有菌的碘伏溶液各1ml做培养。37℃48h培养后,行菌落计数以此观察杀菌效力。结果用生理盐水配制的碘伏溶液在5min内能快速全部地杀灭一切革兰氏阴、阳性球菌和杆菌。用蒸馏水配制的碘伏溶液在5min能快速地杀灭革兰氏阴、阳性球菌和杆菌。杀菌作用没有生理盐水强,在高浓度稀释时,5min内还有少许铜绿假单胞菌存活。用自来水配制的碘伏溶液,是不能杀灭所有微生物的,特别是能引起化脓性感染铜绿假单胞菌,在高稀释度的碘伏溶液中消杀15min时还有菌存活。结论生理盐水和蒸馏水是理想的碘伏稀释剂,既不影响药物的杀菌效力,对人体也无毒无害。     

没食子酸与5种抗生素联用对铜绿假单胞菌的体外抑菌活性

目的:研究没食子酸与5种常用抗生素联用对铜绿假单胞菌的体外抑菌活性。方法:收集铜绿假单胞菌标准菌株和10株临床分离菌株,采用琼脂平板稀释法分别测定没食子酸和5种常用抗生素(头孢他啶、氨曲南、左氧氟沙星、磷霉素和头孢曲松)对铜绿假单胞菌的最小抑菌浓度(MIC);以MIC为始浓度,采用棋盘式微量稀释法测定没食子酸分别与5种抗生素单用及联用对铜绿假单胞菌的抑菌作用,以部分抑菌浓度指数(FICI)评价其联用效果;并以临床分离菌株IRPA 314为目标菌株,采用时间-抑菌曲线进行验证。结果:5种抗生素均能降低没食子酸对11株铜绿假单胞菌的MIC,FICI均在0.188¹.000内,呈现较好的协同或相加作用。在时间-抑菌曲线中,没食子酸与5种抗生素联用24 h时比单用时抑菌浓度的lg值均降低了2.0851.000内,呈现较好的协同或相加作用。在时间-抑菌曲线中,没食子酸与5种抗生素联用24 h时比单用时抑菌浓度的lg值均降低了2.085³.416,均表现为协同作用。结论:没食子酸分别与头孢他啶、氨曲南、左氧氟沙星、磷霉素、头孢曲松联用对铜绿假单胞菌的体外抑菌作用表现为协同或相加作用。     

奥美拉唑对耐氧氟沙星的铜绿假单胞菌主动外排泵的抑制作用

目的 研究奥美拉唑作为主动外排泵抑制剂提高铜绿假单胞菌对氧氟沙星的敏感性.方法 二倍稀释法筛选临床分离的铜绿假单胞菌,测定耐氧氟沙星菌株对主动外排泵抑制剂碳酰氰基-对-氯苯腙(CCCP)和加入奥美拉唑后的敏感性.将CCCP和奥美拉唑分别加入铜绿假单胞菌培养液,分为单纯培养的铜绿假单胞菌组、铜绿假单胞菌 CCCP组、铜绿假单胞菌 奥美拉唑组,用RP-HPLC测定分别加入CCCP和奥美拉唑后的0.17、0.50、0.75、1、3、8、15、30、60 min时铜绿假单胞菌菌体内摄取氧氟沙星的含量.结果 在不同时间点,铜绿假单胞菌 CCCP组和铜绿假单胞菌 奥美拉唑组菌体内摄取的药量均显著高于铜绿假单胞菌组.结论 奥美拉唑作为主动外排泵抑制剂,可增强铜绿假单胞菌对氧氟沙星的敏感性.     

耐亚胺培南鲍曼不动杆菌对消毒剂抗性试验观察

目的研究临床分离的耐亚胺培南鲍曼不动杆菌对消毒剂的抗性水平。方法采用载体定量杀菌试验方法 ,以铜绿假单胞菌标准株做比较,进行实验室观察。结果含有效氯25mg/L消毒液作用1min,对8株临床分离耐亚胺培南鲍曼不动杆菌,杀灭对数值全部>5.00;含有效氯25mg/L消毒液作用1min,对铜绿假单胞菌标准株杀灭对数值>5.00。含有效碘75mg/L消毒液作用3min,对8株临床分离耐亚胺培南鲍曼不动杆菌杀灭对数值全部>5.00;含有效碘75mg/L消毒液作用3min,对铜绿假单胞菌标准株杀灭对数值>5.00。结论未发现临床分离的耐亚胺培南鲍曼不动杆菌对本院常用消毒剂产生抗性。     

双黄连口服液联合庆大霉素的体外抗菌作用研究

目的研究双黄连口服液和庆大霉素联用对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的体外抗菌作用。方法采用微量溶液稀释法,测定双黄连口服液和庆大霉素分别对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度(MIC);采用棋盘联合药敏试验法,测定双黄连口服液和庆大霉素联用分别对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的部分抑菌浓度(FIC)指数。结果双黄连口服液对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的MIC分别是46.88 mg.mL-1(稀释度1∶32)和375 mg.mL-1(稀释度为1∶4);庆大霉素对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的MIC分别是0.25和1 U.mL-1;双黄连口服液和庆大霉素联用对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的FIC指数均是0.56。结论双黄连口服液联用庆大霉素对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌药敏结果均呈相加作用。     

软皂溶液微生物限度检查方法验证

目的建立软皂溶液的微生物限度检查方法。方法采用培养基稀释法和薄膜过滤法并在稀释剂中加入1%吐温80,通过测定5个规定试验菌株回收率来确定适宜的检查方法。结果培养基稀释法无法消除软皂溶液对金黄色葡萄球菌的抑制作用,可消除对大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、白假丝酵母菌和黑曲霉的抑制作用,用1%的吐温80作稀释剂结合薄膜过滤法可消除对金葡萄球菌的抑制作用。结论软皂溶液霉菌及酵母菌总数可采用培养基稀释法检测;细菌总数及控制菌金黄色葡萄球菌检查需用1%的吐温80 pH=7.0的蛋白胨缓冲溶液作为稀释剂,结合薄膜过滤法检查;控制菌铜绿假单胞菌检查可采用常规法。     

抗菌敷料抗菌功效体外评价研究

目的：评价抗菌敷料的体外抗菌功效。方法：本研究基于模拟临床创面微生物的实际生长状态,构建体外创面模型并建立抗菌敷料抗菌功效评价方法,用以评价抗菌敷料对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌和白色念珠菌的体外抗菌功效。结果：试验样品在12 h内抑制了金黄色葡萄球菌的增殖,在72 h内杀灭对数值未超过1.00;在24 h对铜绿假单胞菌的杀灭对数值达到4.24,随后大幅下降, 在72 h的杀灭对数值降为0.37;在12 h对大肠杆菌的杀灭对数值达到4.10,在其后至72 h内杀灭对数值均大于3.00;在12 h对白色念珠菌的杀灭对数值达到1.11,在72 h的杀灭对数值仅为0.04。结论：该抗菌敷料对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌和白色念珠菌均显示了抗菌效果,其中对铜绿假单胞菌、大肠杆菌的抗菌功效要好于金黄色葡萄球菌和白色念珠菌。     

Sansanmycin A对铜绿假单胞菌体内外抗菌活性的初步研究

目的评价sansanmycin A对临床分离铜绿假单胞菌的体内、外抗菌活性。方法体外试验以微量肉汤稀释法测定sansanmycin A同时对照10种药物对150株铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度(MIC),以平皿计数法测定最低杀菌浓度(MBC);半体内试验以微量稀释法测定sansanmycin A的血清抑菌活性(SBS)和血清杀菌活性(SBA)。结果 Sansanmycin A对铜绿假单胞菌体外抗菌活性与哌拉西林相似,其MIC50和MBC50分别为8和16μg/mL,MIC范围为2~>512μg/mL,MBC范围为2~>512μg/mL,头孢曲松和替卡西林对铜绿假单胞菌的MIC50和MBC50较sansanmycin A高2~4倍。Sansanmycin A对铜绿假单胞菌显示浓度依赖性杀菌作用。Sansanmycin A对铜绿假单胞菌峰时SBS和SBA中位数分别为1:256和1:128。结论 Sansanmycin A对铜绿假单胞菌显示较强的体外和体内杀菌活性,有进一步研究和开发的价值。     

头孢哌酮钠/舒巴坦钠对铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度和防突变浓度研究

目的:研究头孢哌酮钠/舒巴坦钠对铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度(MIC)和防突变浓度(MPC),为控制细菌耐药提供参考。方法:采用肉汤法富集铜绿假单胞菌标准菌株及14株临床分离菌株,采用琼脂平板稀释法考察头孢哌酮钠/舒巴坦钠对铜绿假单胞菌的MIC、MPC值,计算MIC90、MPC90、选择指数(SI)。结果:头孢哌酮钠/舒巴坦钠对15株铜绿假单胞菌的MIC、MPC均为4³2μg/ml,MIC90、MPC90均为32μg/ml,SI为1。结论:头孢哌酮钠/舒巴坦钠在临床治疗浓度下不容易引起铜绿假单胞菌耐药突变菌株的富集。     

金银花水煎液抗绿脓杆菌生物膜作用及其与庆大霉素的协同作用

目的观察金银花水煎液体外抗铜绿假单胞菌生物膜的作用及与庆大霉素的协同作用。方法通过试管稀释法测定金银花水煎液和庆大霉素对铜绿假单胞菌的最小抑菌浓度(MIC),用MTT法建立体外铜绿假单胞菌生物膜并检定金银花水煎液和庆大霉素不同MIC浓度的抗铜绿假单胞菌生物膜的作用。结果金银花水煎液对绿脓杆菌的MIC为125g.L-1,SMIC也为125 g.L-1;庆大霉素对绿脓杆菌的MIC为1.56 mg.L-1,SMIC为25 mg.L-1,与金银花的协同作用对绿脓杆菌的SMIC为1.56 mg.L-1。结论金银花水煎液在体外能抑制铜绿假单胞菌对固体表面的黏附能力及生物膜形成能力,并能破坏铜绿假单胞菌已形成的生物膜,增强庆大霉素对生物膜内铜绿假单胞菌的清除作用。     

In vitro antimicrobial activity of carbapenem antibiotics against Pseudomonas aeruginosa, measured using a low-concentration Mueller-Hinton Agar culture medium]

Ohya et al. noted that the antibacterial activity of carbapenem-family antibiotics against Pseudomonas aeruginosa was significantly enhanced through lowering the basic amino acid concentration in the culture medium. They reported that there was a marked difference in antimicrobial activity of panipenem (PAPM) against Pseudomonas aeruginosa between the culture medium with Mueller-Hinton Agar (MHA) diluted with distilled water and the non-diluted culture medium. We used 2,312 strains of fresh Pseudomonas aeruginosa, isolated from clinical materials, to examine the antibacterial activity of PAPM in non-diluted and diluted culture media. For testing the susceptibility, we employed the Showa disc method and agar plate dilution method. In the Showa disc method, the inhibition diameters of the tested microbial strains showed a larger distribution for both 16-fold and 40-fold diluted MHA, compared to the non-diluted MHA. The MIC values in the agar plate dilution method were also smaller in distribution for the 16-fold as well as the 40-fold diluted MHA, compared to the non-diluted culture media. Approximately 90% of the strains showed decreased MIC values, 2-8 times in the 16-fold diluted MHA and 2-16 times in the 40-fold diluted MHA. From the above results, we confirmed that the in vitro antibacterial activity of PAPM against Pseudomonas aeruginosa was enhanced through lowering the MHA concentration.     

12种实验室保存菌种对常用消毒剂的抗性分析

目的:了解本实验室所存菌种对常用消毒剂的抗性,从而合理使用消毒剂,避免实验室感染。方法:采用悬液定量杀菌试验分别测定75%乙醇、3%过氧化氢、碘伏和533消毒液对12种实验室保存菌种的平均杀灭对数值,采用K-B纸片法测定碘伏和533消毒液对12种菌种及其标准株的最低抑菌浓度(MICs)。结果:碘伏作用1 min时对12种菌种的杀灭对数值均>5.00;而533消毒液需作用8 min、75%乙醇和3%过氧化氢需作用40⁵0 min才能达到同样效果。碘伏和533消毒液对12种菌种的MICs分别为37.250 min才能达到同样效果。碘伏和533消毒液对12种菌种的MICs分别为37.2¹73.6、548173.6、548¹ 307 mg/L,其中533消毒液对12种菌种均表现出比标准株更高的MICs。结论:12种菌种对碘伏均未产生抗性,部分菌种对75%乙醇、3%过氧化氢和533消毒液产生抗性,说明应根据不同的消毒对象选择不同的消毒剂,且配制准确的浓度,才能达到良好的消毒效果。     

铜绿假单胞菌耐药率与抗菌药使用量相关性分析

目的：探讨铜绿假单胞菌耐药率与9种常用抗菌药使用量的相关性。方法：采用回顾性调查方法,分别统计我院2003—2007年铜绿假单胞菌的耐药率及9种常用抗菌药的用药频度（DDDs）,用直线回归方法对耐药率与用药频度进行相关性分析。结果：5年来铜绿假单胞菌对9种抗菌药的耐药率全部呈现增长态势,环丙沙星的耐药率最高。耐药率与用药频度的相关性显示,铜绿假单胞菌对环丙沙星、头孢他啶的耐药率与哌拉西林的用量呈显著负相关。结论：铜绿假单胞菌耐药率的上升趋势与抗菌药的大量使用有一定关系,临床应根据细菌耐药性合理选择抗菌药,以减少耐药菌株的产生。     

铜绿假单胞菌对环丙沙星耐药与喹诺酮类耐药基因的关系研究

目的:探讨喹诺酮耐药(QNR)基因介导的铜绿假单胞菌对环丙沙星的耐药性。方法:用K-B纸片法测定30株铜绿假单胞菌对环丙沙星、庆大霉素、哌拉西林、头孢噻肟4种抗菌药物的敏感性。PCR法检测(QNR)基因。结果:铜绿假单胞菌对环丙沙星的耐药率为26.70%,1株环丙沙星耐药性铜绿假单胞菌携带有QNR基因。结论:铜绿假单胞菌对环丙沙星的耐药性与QNR基因有密切相关性。     

2006/2008年铜绿假单胞菌分布及药敏分析

目的：了解医院铜绿假单胞菌分布及其对不同类型抗菌药物的药敏情况,以指导临床合理用药。方法：对2006-01/2008-12医院2094株铜绿假单胞菌的分布及药敏情况进行统计分析。结果：2094株铜绿假单胞菌中,痰标本中分离的占73.4%;铜绿假单胞菌对阿米卡星的敏感率为72.8%,对头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦的敏感率分别为48.3%、42.4%,对美罗培南、亚胺培南的敏感率分别为48.0%、40.3%。结论：加强对铜绿假单胞菌的耐药性监测、合理应用抗菌药物对减少耐药菌的产生具有重要意义。     

我院临床分离的26株铜绿假单胞菌耐药性及其所产β-内酰胺酶的基因型分析

目的:了解我院临床分离的铜绿假单胞菌的耐药性及其所产β-内酰胺酶的基因型。方法:采用VITEK32型全自动细菌鉴定仪对临床分离的26株铜绿假单胞菌进行细菌鉴定,采用琼脂扩散法检测其对16种常用抗菌药物的耐药性,采用聚合酶链反应法对其进行基因检测,靶基因为TEM、SHV、OXA、PER、VEB、GES、CTX-M-1等7种β-内酰胺酶基因,然后对检测的阳性产物进行测序,并对照GenBankDNA序列数据库确定基因类型。结果:26株细菌均鉴定为铜绿假单胞菌,耐药性分析结果表明其对其中12种常用抗菌药物有不同程度的耐药性,通过基因对照确定26株铜绿假单胞菌所产的β-内酰胺酶均为TEM-1型基因。结论:本组26株铜绿假单胞菌所产β-内酰胺酶可能主要为TEM-1型基因,具有多重耐药性。     

2003～2007年我院细菌耐药情况变迁与分析

目的：监测2003～2007年5年来本院临床分离菌对常用抗菌药物的耐药性。方法：Kirby-Bauer纸片扩散法测定临床常见细菌对常用抗菌药物的敏感性。结果：革兰阳性菌中表皮葡萄球菌占首位,肠球菌属的细菌呈逐年上升趋势;革兰阴性菌中大肠埃希菌最多,其余为铜绿假单胞菌、克雷伯菌属,不动杆菌等,分离的细菌均呈现稳中上升的趋势。金葡菌对青霉素类和大环内酯类抗生素已呈高度耐药,大肠埃希菌、铜绿假单胞菌对氨苄西林的耐药率最高,肺炎克雷白杆菌对常用抗菌药物的耐药率均呈升高趋势。结论：我院细菌耐药情况严重,应采取措施控制细菌耐药性的产生和蔓延。