骨髓间充质干细胞不同移植方法对心肌梗死大鼠心脏的保护作用

目的对比研究经尾静脉和心外膜直视注射移植骨髓间充质干细胞（MSCs）对心肌梗死大鼠的心脏保护作用。方法结扎左冠状动脉前降支制备大鼠心肌梗死模型,采用同种异体MSCs体外分离、纯化、培养和标记,在梗死后2周,A组经尾静脉植入MSCs,B组心外膜直视注射MSCs,C组尾静脉注入等量DMEM培养液为对照。4周后测定心功能,并行免疫组织化学检测。结果移植组心肌组织中可以观察到DAPI标记细胞存在,免疫组化显示阳性标记细胞α-Actin肌动蛋白检测阳性。与对照組相比,A和B组左心功能显著改善（P<0.05）,A和B组梗死面积明显缩小[分别为（45±2）%,（40±4）%和（41±3）%,P<0.05]。结论MSCs经静脉移植和心外膜植入都能够归巢至心肌梗死区,对梗死大鼠的心脏都具有保护作用。     

心肌梗死时骨髓干细胞的动员

心肌梗死导致大量心肌细胞丢失，坏死组织由瘢痕替代，最终会导致心力衰竭，心脏细胞移植是一种有效的治疗手段，但移植细胞的来源一直未彻底解决，新的研究发现骨髓干细胞可分化为心肌细胞，并且骨髓干细胞经动员后可自行归巢于心梗后心肌缺血组织，骨髓干细胞动员有望成为治疗急性心肌梗死的有效方法。     

干细胞动员剂粒细胞集落刺激因子对兔心肌结构及功能的保护作用

目的探讨骨髓干细胞动员剂粒细胞集落刺激因子(granulocyte-colony-stimulating factor,G-CSF)对实验性心肌梗死(心梗)大白兔心脏结构和功能的保护作用。方法大白兔40只,结扎冠状动脉前降支,于心电图上出现R波逐渐降低,ST段弓背向上抬高和病理性Q波时,证明心梗模型成功。将大白兔随机分成两组,每组20只。实验组于心梗模型建立后1 h给予G-CSF皮下注射,连续7 d,对照组建立心梗模型后1h仅注射等量生理盐水。术后24 h及4周心脏超声观察心功变化。处死动物,取出心脏行组织病理学分析,测定两组梗死面积的大小、毛细血管密度以及观察心肌纤维化变化。结果实验组在术后4周时射血分数(EF)、左室短轴缩短率(FS)、左室运动幅度(LVWE)、收缩末左室后壁增厚率(LVWTs)等心功能指标均较对照组有明显的改善,其中射血分数增加13％(实验组为63．40％,对照组仅为50．51％)。HE染色显示,对照组心肌纤维排列紊乱且不规则;实验组心肌纤维排列有序,梗死灶面积较对照组减小了30.2％,毛细血管密度增加了30．7％,Masson染色蓝色的胶原纤维明显少于对照组。结论急性心梗时给予G-CSF,可有效增加梗死区及周围毛细血管密度,缩小梗死面积,减少胶原纤维形成,稳定心脏结构及改善心功能。骨髓干细胞动员剂为急性心肌梗死的内科治疗开辟了一条新途径。     

高龄和青年大鼠骨髓间质细胞移植对缺血心脏心功能的影响

目的　探讨高龄和青年大鼠自体骨髓间质细胞移植是否能改善心功能。方法　从高龄和青年大鼠中获取骨髓间质细胞 ,部分细胞培养后克隆计数 ,其余培养时加以诱导。冠状动脉结扎后制作同源大鼠心肌梗死模型 ,3周后分为高龄细胞移植组、青年细胞移植组和对照组。 5周后再次行心脏超声检查 ,以及检查细胞存活和疤痕区血管增生情况。结果　与青年组相比 ,高龄组骨髓间质干细胞数目以及体外诱导后结蛋白表达率明显下降。移植的高龄细胞可以在疤痕区存活 ,诱导血管新生 ,但未发现心功能改善。结论　高龄大鼠骨髓间质细胞移植未能发现可以改善梗死心肌的心功能 ,可能由于高龄骨髓间质细胞缺乏足够的干细胞数目和较低的诱导分化率。     

骨髓间充质干细胞移植对大鼠肝纤维化的作用

目的探讨骨髓间充质干细胞（MSCs）移植在大鼠肝纤维化形成过程中的作用。方法应用密度梯度离心结合贴壁培养法分离纯化雄性SD大鼠MSCs,分别在四氯化碳诱导大鼠肝纤维化模型的第1天、第6周、第8周以5×10^6的剂量经尾静脉注入同种雌性大鼠体内。各组大鼠均在MSCs移植4周后,评价干预组与对照组的生存状态,并用Scheuer炎症活动度评分法和SchmidM纤维化评分法评价肝脏病理情况。结果第1天移植MSCs,干预组12只大鼠中有6只肝脏炎症活动度评分≤1分,对照组11只中仅有1只,两组Scheuer评分均值分别为1．50和2．55（t=2．894,P=0．009）;SchmidM评分均值分别为0．75和0．82（t=0．217,P=0．83）。第6周移植MSCs,干预组和对照组在炎症活动度方面无明显差异,Scheuer评分均值分别为3．58和3．73（P=0．559）;在纤维化方面,干预组12只大鼠中有3只≥6分,对照组11只中则有7只≥6分,SchmidM评分均值分别为4．75和5．54（t=2．424,P=0．024）;干预组与对照组的腹水发生率分别为25％和45．4％（t=2．241,P=0．036）。第8周移植MSCs,干预组与对照组炎症活动、纤维化程度及腹水发生率均无明显差异,Scheuer评分的均值分别为3．64和3．92（P=0．113）;SchmidM评分均值分别为5．27和5．67（t=1．207,P=0．241）;腹水发生率分别为18．2％和25％（t=0．703,P=0．490）。值得注意的是,对照组有5／12出现异形细胞,而干预组未见一例。结论早期移植MSCs可减轻四氧化碳引起的肝脏炎症,改善大鼠的肝纤维化程度,但对肝硬化无作用,MSCs移植可以减少肝硬化大鼠异形细胞发生的现象值得进一步探讨。     

骨髓间质干细胞移植与心肌再生

骨髓间质干细胞是多能细胞，在体外培养时，通过诱导可分化为肌肉细胞等，新近进行的骨髓间质干细胞移植实验，为治疗心肌梗死提供了一个潜在的，较为光明的前景。     

骨髓干细胞动员对急性心肌梗死后左室重构影响的临床研究

目的 :观察骨髓干细胞动员对急性心肌梗死 (AMI)患者左室重构的影响。方法 :4 8例AMI患者随机分为动员组 (2 5例 )和对照组 (2 3例 ) ,动员组连续 3d给予粒细胞集落刺激因子 (G CSF) 30 0 μg/d ,用2 0 1Tl静息—再分布心肌显像比较两组第 6d、 30d的梗死面积 ,超声心动图观察 72h内和 3个月的左室舒张末期容积指数 (LVEDVI)、收缩末期容积指数 (LVESVI)、室壁运动指数 (WMSI)、射血分数(LVEF)。结果 :动员组治疗后心肌梗死面积明显减少 (0 383± 0 0 77vs 0 5 6 1± 0 0 96 ,P <0 0 1) ,LVESVI减少 [(2 7 4 7± 7 86 )ml/m2 vs (34 5 0± 8 0 8)ml/m2 ,P <0 0 5 ],WMSI减少 (1 10± 0 11vs 2 2 6±0 14 ,P <0 0 1) ,LVEF增加 (0 5 9± 0 0 7vs 0 4 8± 0 0 7,P <0 0 1)。结论 :应用G CSF动员AMI患者自身骨髓干细胞可明显缩小心肌梗死面积及有效防治左室重构     

骨髓干细胞在大鼠肝再生环境中的分化

研究大鼠骨髓干细胞在部分肝切除后肝再生环境中的分化。从部分肝切除模型大鼠的胫骨中提取骨髓细胞,应用流式细胞仪富集骨髓干细胞,以PKH26-GL体外标记后通过门静脉进行自体移植,2周后行白蛋白和角蛋白8免疫组化检查。结果肝板肝细胞间PKH26-GL标记骨髓干细胞表达白蛋白、角蛋白8。提示骨髓干细胞在部分肝切除后肝再生环境中能分化为肝细胞,骨髓干细胞可能参与部分肝切除后的肝再生过程。     

骨髓间质干细胞移植与心肌再生

骨髓间质干细胞是多能细胞，在体外培养时，通过诱导可分化为肌肉细胞等。新近进行的骨髓间质干细胞移植实验，为治疗心肌梗死提供了一个潜在的、较为光明的前景。     

骨髓间充质干细胞在大鼠肝纤维化形成中的作用

研究显示,小鼠肝纤维化模型中给予一定数量的骨髓间充质干细胞(BMSC)能减轻肝纤维化程度,但也有研究持否定观点。本研究通过研究BMSC尾静脉移植后在纤维化肝脏的定位、分化来说明BMSC在肝纤维化大鼠的影响及其机制。     

动员自体骨髓干细胞对急性心肌梗死大鼠心功能的影响

目的:探讨联合应用粒细胞集落刺激因子（G-CSF）和干细胞因子（SCF）动员心肌梗死大鼠的骨髓干细胞并观察对心功能的影响及探讨其可能机制。方法:雄性W istar大鼠40只经结扎冠状动脉前降支制作心肌梗死模型后随机分为两组。①动员组:皮下注射rh-CSF和rh-SCF。②对照组:皮下注射等量生理盐水。28 d后通过测定血流动力学观察大鼠心功能变化,通过伊文氏蓝-TTC染色方法观察心肌梗死范围的变化。通过HE染色方法、免疫荧光标记染色和双重免疫荧光标记染色观察心肌梗死范围内心肌纤维化、血管和心肌再生的变化。结果:动员组心肌组织梗死范围内成纤维细胞增生程度轻,新生血管和心肌细胞的特异蛋白染色阳性,与对照组比较,动员组左室收缩压显著增大（P<0.05）,舒张末压显著减小（P<0.05）,左室压上升/下降变化最大速率显著增快（P<0.05）。动员组的缺血范围和心肌梗死的范围比对照组均有所缩小（P<0.05）。结论:G-CSF和SCF动员骨髓干细胞可以改善心肌梗死后大鼠的心功能。     

骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死的研究进展

溶栓、经皮冠状动脉介入治疗及常规药物治疗可挽救许多急性心肌梗死患者的生命,但不能从根本上恢复心肌细胞数量。骨髓间充质干细胞(BM-MSCS)是骨髓中一种具有多向分化潜能的细胞,可被诱导分化为心肌样细胞,改善梗死区的血液供应及心肌重构,为心肌梗死的治疗带来了新的希望。本文就BM-MSCS移植治疗心肌梗死的方式,移植的时机及临床应用等方面作一综述。     

自体骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死的进展

心肌梗死可引起心肌细胞的丢失,进而引起心脏功能的下降,是心力衰竭最主要的病因。骨髓间充质干细胞（BM—MSCs）是一类具有横向分化为各系统器官和组织能力的干细胞,能补充丢失的心肌细胞并通过旁分泌等机制增强心功能,为心肌梗死提供一种全新的治疗方法,极具发展潜力。本文对BM—MSCs的分离培养、诱导因素、移植以及临床研究等方面进行了综述。     

骨髓干细胞移植治疗心肌梗死的临床疗效

目的了解心肌梗死（MI）患者行冠状动脉内支架置入术（percutaneous coronary intervention,PCI）后进行骨髓干细胞移植治疗的临床疗效。方法研究对象为2003年5月2005年12月住院的MI患者246例,其中PCI后进行骨髓干细胞移植治疗者48（男44,女4）例,年龄2974（58±9）岁。随机选择年龄相匹配,PCI后未经骨髓干细胞移植治疗的MI者198（男178,女20）例,年龄2570（58±9）岁。采用Judkins方法经股动脉行冠状动脉造影和左室造影。全部病例均经心脏超声检查及随访,其中96例经冠状动脉造影随访（随访率39%）,随访时间130（9.6±6）个月。造影证实原支架内血管直径狭窄≥50%,定为支架内再狭窄。48例PCI后进行骨髓干细胞移植治疗者在冠状动脉造影术前2 h,局麻下选择髂后上棘穿刺抽取骨髓液4080 ml,分离骨髓单个核细胞备用。所有患者入院后详细记录病史,体格检查,于次日晨空腹取肘静脉血检查血脂（标准酶法）、血浆纤维蛋白原（凝血酶法）水平和肝、肾功能等。结果PCI后进行骨髓干细胞移植治疗组与单纯PCI治疗组相比:年龄、性别、吸烟、高血压病、糖尿病、血脂和纤维蛋白原水平,以及冠脉血管病变支数均无显著差异;PCI后进行骨髓干细胞移植治疗组支架再狭窄发生率低（P<0.01）;两组治疗前后射血分数值改善情况均有显著统计学差异（P<0.01）。结论PCI后进行骨髓干细胞移植治疗MI可以降低支架再狭窄率,改善心功能。     

骨髓间充质干细胞修复心肌损伤的研究进展

心肌梗死（MI）具有较高的死亡率,大面积MI后幸存的患者,常因心肌结构重构而逐渐发展为心力衰竭,预后往往欠佳。近来研究发现,骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stemcells,BMSCs）作为多潜能干细胞,对受损的心肌具有积极的修复作用,为改善MI患者的预后提供了一个新途径。本文主要就BMSCs修复受损心肌的相关机制作一综述。     

Ventricular arrhythmias following intracoronary bone marrow stem cell transplantation.

We describe the appearance of delayed episodes of ventricular arrhythmias in 4 patients out of 72 undergoing intracoronary transplantation of autologous bone marrow mononuclear cells (BMMC) following ST elevated myocardial infarction (STEMI). Two cases with severely depressed systolic function presented electrical storms with monomorphic sustained ventricular tachycardia (SVT) within 2 to 3 days following cell transplantation, even though there were no periprocedural complications. Both patients were implanted with an internal defibrillator (ICD) after ruling out coronary re-occlusion. The remaining 2 patients presented several asymptomatic episodes of non-sustained ventricular tachycardia within one month following cell transfer. Only one of the latter presented syncopal SVT through programmed ventricular stimulation, undergoing ICD implantation afterwards. Neither new arrhythmic episodes nor ICD interventions have occurred during later follow-up of the three ICD patients (639+/-59 days). Information from large multicenter databases and our historical cohort of STEMI patients indicates that the rate of VT occurring within the first weeks after the initial 48 hours of infarction is significantly lower than that observed in our cell-therapy experience. The lack of information regarding the appearance of malignant arrhythmias in patients with severe systolic dysfunction following this type of therapy after STEMI requires us to be extremely cautious. However, any claim of a mechanism related to cell transfer would be completely speculative with the available data. Therefore, our only aim when reporting our findings is to recommend a short but longer stay (2-3 days) following cell transplantation, particularly in patients with a natural tendency to develop arrhythmic events.     

自体骨髓间充质干细胞移植对急性心肌梗死后心功能的影响

目的观察骨髓间充质干细胞（MSCs）经冠脉移植对急性心肌梗死后心功能的影响。方法24只日本大耳白兔,随机分为MSCs移植组（n=12）和培养液对照组（n=12）。从兔股骨抽取骨髓,体外培养MSCs。通过结扎左冠前降支建立急性心肌梗死模型。冠脉结扎后7d,细胞移植组和对照组直接经冠脉注入MSCs和培养液。于心肌梗死前、细胞移植前、细胞移植后1、2和4周对兔进行超声心动图检查。移植后4周处死动物,进行BrdU和第Ⅷ因子相关抗原免疫组化检测。结果移植后2周,MSCs移植组在射血分数（LVEF）和左室收缩末直径（LVESD）方面与移植前和对照组相比有显著改善（P<0.05）;移植4周后,LVEF、LVESD和左室舒张末直径（LVEDD）在MSCs移植组与移植前及对照组相比均有显著改善（P<0.05）。免疫组化检测发现,MSCs移植组BrdU染色阳性,血管计数较对照组明显增多（P<0.01）。结论经冠脉移植的MSCs可在梗死区心肌内存活并逐渐分化成心肌样细胞,促进毛细血管生成,显著改善心功能。     

经静脉移植骨髓间充质干细胞对大鼠急性心肌梗死的影响

目的研究单次与多次经静脉移植骨髓间充质干细胞(MSCs)对大鼠急性心肌梗死的影响。方法选择60只SD大鼠随机分为A组(单次移植MSCs)、B组(多次移植MSCs)、C组(单次移植MSCs对照)和D组(多次移植MSCs对照),每组15只。A组在心肌梗死后第1天、B组在心肌梗死后第1、4、7、10、13天经尾静脉移植MSCs 5×10~6个,C组和D组注射等量培养液。大鼠心肌梗死后4周测定左心功能,并行免疫组织化学检测。结果心肌梗死后4周A组和B组大鼠梗死心肌中均可以观察到4’,6二脒基-2-苯吲哚标记阳性细胞存在。与C组和D组比较,A组和B组大鼠左心功能均明显改善,心肌梗死面积减小,毛细血管密度增高(P<0.05)。与A组比较,B组改善作用更加明显(P<0.05)。结论经静脉单次与多次移植MSCs对大鼠急性心肌梗死均有效,但多次移植效果更好。