在宫颈液基细胞学中检测念珠菌的染色方法比较

目的比较在宫颈液基细胞学（TCT）中检测阴道念珠菌的三种病理学染色方法。方法采用巴氏染色、PAS染色、六胺银染色对本院21例念珠菌性阴道炎的宫颈液基薄层细胞片进行染色对比。结果上述三种方法均可显示宫颈液基薄层细胞片中的念珠菌,其中巴氏染色中念珠菌呈现隐约的嗜伊红色到灰棕色,较难辨别;PAS染色法显示的念珠菌呈紫红色;六胺银染色显示的念珠菌呈黑褐色,在镜下极易辨认。结论六胺银法是显示宫颈液基薄层细胞片中阴道念珠菌的最佳方法。     

Crocott六胺银染色的应用及体会

目的crocott六胺银染色在确诊真菌感染性疾病中的应用。方法对20例真菌感染患者的组织切片进行crocott六胺银染色。结果三种常见的真菌均被着色,菌丝和孢子呈黑色,细胞核呈红色。结论crocott六胺银染色作为显示真菌的染色方法,具有特异性强、灵敏度高、稳定性好的特点。     

荧光染色技术在艾滋病患者活检标本病原学诊断中的应用

目的探讨快速真菌与抗酸分枝杆菌荧光技术在艾滋病患者活检标本病原体诊断中的应用价值及意义。方法选取艾滋病患者500例活检标本,采用快速真菌荧光染色及六胺银、PAS染色对300例可疑真菌感染的活检标本进行检测,采用抗酸分枝杆菌荧光染色及萋尼抗酸染色对200例可疑结核的活检标本进行检测,并对检测结果进行对比。结果（1）快速真菌荧光镜检法检出阳性205例（阳性率68.3%）,六胺银染色法检出阳性209例（阳性率69.7%）,PAS染色法检出阳性97例（阳性率39.5%）,快速真菌荧光染色与六胺银染色检出阳性率差异无统计学意义（P>0.05),但高于PAS染色法;（2）抗酸分枝杆菌荧光染色检出阳性179例（阳性率89.5%）,萋尼抗酸染色法检出阳性117例（阳性率58.5%）,抗酸分枝杆菌荧光染色阳性率高于萋尼抗酸染色法,两者差异有统计学意义（P<0.01）;（3）荧光染色比常规特殊染色操作更快速、简便、显示更清晰。结论艾滋病患者并发机会性感染病原体种类多样,普通的特殊染色阳性率不高并且费时费力,而快速真菌及抗酸荧光染色特别是抗酸荧光染色的阳性率明显增高,为活检组织诊断真菌及结核分枝杆菌感染提供一种快速、准确、经济、对比更清晰的染色方法,能够为真菌感染及结核病患者诊断提供可靠的指导依据,值得在病原体诊断工作中广泛使用。     

高碘酸作为氧化剂在六胺银染色中的应用

真菌感染是临床上较常见的感染性疾病,近年来,随着抗生素、免疫抑制剂和激素等的广泛应用,真菌感染有不断上升的趋势,因而快速准确检出真菌对明确诊断、指导临床用药治疗及改善预后有着重要意义。对于石蜡组织切片内的真菌,常规苏木精-伊红(HE)染色着色较浅或者不着色,因此观察真菌比较困难,特别是真菌数量较少、菌体较小的时候更难辨认,所以我们采取特殊染色的方式对真菌进行观察和诊断。六胺银染色法和过碘酸雪夫染色(PAS)法均对真菌有良好的显色效果,而六胺银染色比PAS染色的效果更敏感,对各种霉菌均着色,使菌丝和孢子呈明显的黑褐色,颜色形态对比清晰,在镜下极易辨认,也有利于长久保存。六胺银染色法和PAS染色法中第一步也是关键一步是使用氧化剂将真菌细胞壁内的多糖氧化成醛基,这决定了染色效果的好坏。目前临床上常用的氧化剂是5%铬酸水溶液,铬酸的配制需要用到三氧化铬,然而三氧化铬为高毒致癌物,危险性极大,吸入后可引起急性呼吸道刺激症状,严重者甚至发生化学性肺炎;口服则刺激和腐蚀消化道,引起恶心、呕吐、腹痛、血便等,重者出现呼吸困难、紫绀、休克、肝损害及急性肾功能衰竭等;长期接触三氧化铬会接触性皮炎、铬溃疡、鼻炎、鼻中隔穿孔及呼吸道炎症等。此外,三氧化铬作为助燃物极易引起燃爆,并且对水体容易造成污染,危害环境[1]。为了寻求更好的氧化剂替代,故本实验探索将高碘酸作为氧化剂使用时的实验条件。     

美兰染色法在马拉色菌检测中的应用

目的　评价美兰染色和派克墨水染色在马拉色菌检测中的应用。方法　应用美兰染液、派克墨水染液对花斑癣、马拉色菌毛囊炎、头皮屑三种疾病临床标本进行检测 ,比较两种方法的染色效果、检出阳性率。并应用上述两种染色法对马拉色菌和念珠菌染色 ,比较它们对马拉色菌染色的特异性。结果　美兰染液将孢子或菌丝染为深蓝色 ,派克墨水染液将孢子或菌丝染为浅蓝色 ,两种染色法与背景区分均较明显。美兰染色和派克墨水染色对三种疾病中马拉色菌的检出阳性率分别为 96 %和 94 % ,两种方法对马拉色菌的检出阳性率无显著性差异 (P>0 .0 5 )。美兰对马拉色菌和念珠菌均能染色 ,派克墨水对马拉色菌能染色 ,对念珠菌不能染色 ,具有一定特异性。结论　两种染色方法均可用于马拉色菌的临床检测 ,但派克墨水染色法更具特异性     

自控微波技术在肾穿刺活检六胺银染色中的应用

【目的】应用MICROMED自控微波仪以缩短六胺银染色法显示肾小球毛细血管或肾小球囊壁基底膜的染色时间 ,提高染色质量。【方法】对 46例肾穿切片染色实验分别采用自控微波仪和家用微波炉的处理作对照 ,以此促进六胺银染色 ,显示肾小球毛细血管或肾小球囊壁基底膜。【结果】应用家用微波炉加热的在 5次实验中 ,每次都出现六胺银染液变黑 ,所有的六胺银染液均不能重复使用 ,其中 2 9例有不同程度的银沉淀和银膜背景 ,优质片为 37% ( 17/ 4 6 )。应用自控微波仪对上述 46例肾穿的连续切片染色的实验中 ,均没出现银沉淀或银膜背景 ,优质片为 10 0 % ( 46 / 4 6 )。六胺银工作液染色常规需用 90min缩短至 6min。【结论】应用自控微波处理仪促进肾穿活检快速基底膜染色 ,较家用微波炉不仅可以大大加快染色速度 ,而且节省试剂 ,染色质量更加稳定可靠 ,是目前最为理想的一种快速染色方法。     

盐水法与革兰染色法在阴道念珠菌检测中的比较

念珠菌阴道炎是临床常见的疾病,其中80%为白念珠菌,在阴道分泌物中找到念珠菌孢子和假菌丝即可确诊[1].目前,临床对念珠菌的检测方法并未统一,其检出率也各有不同.本文观察了盐水法与革兰染色法在阴道念珠菌检测中的情况,现报道如下.     

真菌荧光染色在侵袭性真菌感染病理学诊断中的应用研究

目的：评估真菌荧光染色法在侵袭性真菌感染（IFIs）石蜡包埋组织病理切片中的应用价值。方法：经真菌培养确诊，同时行组织病理学检查的55例真菌感染患者，其中马尔尼菲篮状菌感染30例，取其石蜡包埋切片分别行过碘酸—希夫（PAS）染色、六胺银（GMS）染色及真菌荧光染色，采用McNemar检验对3种染色方法的检出率进行比较分析。结果：55例样本中，真菌荧光染色检出43例（78.2%）,GMS染色检出37例（67.3%）,PAS染色检出23例（41.8%），真菌荧光染色检出率显著高于GMS染色及PAS染色（P<0.01）;30例马尔尼菲篮状菌感染中，真菌荧光染色检出21例（70.0%）,GMS染色检出14例（46.7%）,PAS染色检出6例（20.0%），真菌荧光染色检出率显著高于GMS染色及PAS染色（P<0.01）。结论:真菌荧光染色在IFIs真菌病理学诊断中检出率高于PAS染色和GMS染色，是组织病理学诊断IFIs的快速、高效的方法。     

几种显示新型隐球菌的组织病理学染色方法的应用比较

目的 比较几种显示新型隐球菌的组织病理学染色方法.方法 采用苏木精-伊红染色(HE)法、PAS染色法、阿尔辛蓝染色法和六胺银染色法对我院尸体剖验的7例新型隐球菌病病例的肺、脑组织进行了染色.结果 上述方法均町显示肺、脑组织中的新型隐球菌,其中在HE染色中,新型隐球菌旱现隐约的淡粉红,轮廓不很明显,较难发现;阿尔辛蓝法显爪的新型隐球菌夹膜呈蓝色;PAS法显示的新型隐球菌呈紫红色;六胺银法显示的新型隐球菌呈黑褐色,菌壁四周深黑,中间为空白区,镜下极易辨认.结论 六胺银法是显示新型隐球菌效果最好的方法.     

真菌染色新方法的探索

目的:探索一种真菌染色新方法。方法:对传统染色法与改良染色法进行比较。结果:传统染色法镜下所见,菌丝体与孢子分离,底影不干净,影响观察;改良染色法使真菌孢子不易脱落,菌丝和孢子能保持自然形态,染色干净、清晰。结论:本方法简单、易掌握,非常适用于实验室大批量制片。     

阴道分泌物念珠菌感染检测方法对比分析

目的 分析常规镜检、荧光PCR核酸扩增法和真菌显色培养法在阴道分泌物真菌检测结果的相关性.方法 选取2014-2016年于该院就诊的疑似阴道炎患者,收集镜检阴道分泌物真菌阳性和阴性标本各500例,用荧光PCR核酸扩增法鉴定念珠菌类型,并将100份荧光PCR核酸扩增法检测结果阳性标本进行真菌微生物培养,验证分型结果的正确率.结果 荧光PCR核酸扩增法和常规镜检一致性检验Kappa值为0.632,二者一致性差.500例患者阴道分泌物常规镜检阳性标本,荧光PCR核酸扩增法测得白色念珠菌感染382例(76.4％),光滑假丝酵母菌感染73例(14.6％),热带假丝酵母菌感染10例(2.0％),白色念珠菌合并光滑假丝酵母菌感染3例(0.6％),其他真菌感染32例(6.4％).500例患者阴道分泌物常规镜检阴性标本,荧光PCR核酸扩增法鉴定阳性共152例,其中白色念珠菌130例,光滑假丝酵母菌16例,热带假丝酵母菌6例.荧光PCR核酸扩增法与CHROMAgar快速显色法检测结果比较,差异无统计学意义(x2 =0.131,P=0.936).结论 对于有临床表现而镜检阴性的患者,建议行荧光PCR核酸扩增快速分型鉴定或真菌培养鉴定.     

两种实验室检验阴道霉菌的方法比较

本实验对107例阴道分泌物分别采用氢氧化钾法和氢氧化钠法检测白色念珠菌,并对结果进行了比较,两者的阳性检出率分别为19％和14％,结果显示氢氧化钾法阳性检出率显著,高于氢氧化钠法。     

白色念珠菌分泌型酸性蛋白酶和细胞外磷脂酶活性与其毒力的关系

目的： 探讨临床白色念珠菌感染者不同标本中分离的白色念珠菌分泌型酸性蛋白酶和细胞外磷脂酶活性与其毒力的关系。方法： 分别采用牛奶平板和卵黄培养基法检测白色念珠菌感染者不同标本（痰、血液、鹅口疮、伤口、阴道分泌物）中分离的190株白色念珠菌分泌型酸性蛋白酶和细胞外磷脂酶的活力，分别将产酶株的菌丝相和孢子相菌悬液（5×10⁶ CFU•mL^-1）注射小鼠尾静脉，1个月内观察小鼠死亡率及平均存活时间，以平均存活时间评价菌株毒力。结果：190株白色念珠菌分泌型酸性蛋白酶和细胞外磷脂酶阳性检出率分别为83.68%和85.26%。动物实验结果表明，菌丝相白色念珠菌分泌型酸性蛋白酶和细胞外磷脂酶的活力均显著高于孢子相(P<0.01，P＜0.05)；注射菌丝相白色念珠菌的小鼠死亡率高于注射孢子相的小鼠(P<0.05)，且平均存活期短于注射孢子相的小鼠(P<0.01)。结论：分泌型酸性蛋白酶和细胞外磷脂酶是白色念珠菌重要毒力因子，酶活力可直接地反映其毒力和致病性。     

真菌性角膜炎的实验室快速诊断方法分析

目的:探讨真菌性角膜炎快速而有效的临床实验室诊断方法。方法:对2012年6-12月53例临床疑似真菌性角膜炎患者送检的角膜刮片标本,同时进行墨汁-KOH湿片法镜检、荧光染色镜检和真菌培养。以真菌培养为诊断金标准,对墨汁-KOH湿片法与荧光染色法进行方法学比较。结果:32例真菌培养阳性标本,墨汁-KOH湿片法20例阳性,阳性率为62.5%,荧光染色28例阳性,阳性率为87.5%,两者阳性率比较差异有统计学意义(字2=6.125,P=0.025);两种涂片镜检共为阳性的20例,共为阴性的4例。结论:荧光染色法镜检可以提高真菌性角膜炎的阳性诊断率,是真菌性角膜炎快速、简单、有效的临床实验室诊断方法。     

十二指肠溃疡患者胃上皮化生与幽门螺杆菌关系的研究

目的 研究十二指肠溃疡患者胃上皮化生和幽门螺杆菌的关系。方法 收集门诊行上消化道胃镜检查确诊的十二指肠溃疡患者70例，另选胃和十二指肠黏膜正常患者55例为对照组。用快速尿素酶法和幽门活组织检查半定量法检测幽门螺杆菌(Hp)，苏木素一伊红染色和Schiff过碘酸染色半定量法检测十二指肠球部胃上皮化生。结果 十二指肠溃疡患者与对照组相比，十二指肠球部胃上皮化生检出率高；十二指肠球部胃上皮化生检出率和评分与胃幽门部Hp的检出率和评分无相关关系。结论 Hp不是十二指肠黏膜胃上皮化生的决定因素，也不是十二指肠黏膜胃上皮化生范围得以扩展的因素。十二指肠溃疡病本身的一些特点是十二指肠黏膜胃上皮化生的主要因素。     

假丝酵母性阴道炎的病原菌检测及RAPD分析

目的：探讨女性假丝酵母性阴道炎的病原菌种类,分析其随机扩增DNA多态性（RAPD）,为该病的临床诊断及流行病学监测提供依据。方法：刮取106例疑似假丝酵母性阴道炎患者道分泌物,分离培养并鉴定病原菌;利用10种随机引物（RAPD 1~10）对分离病原菌进行RAPD分析。结果：①分离获得假丝酵母72株,其中白假丝酵母56株（77.78%）,非白假丝酵母16株（22.22%）,包括光滑假丝酵母6 株（8.33%）、热带假丝酵母4 株（5.56%）、克柔假丝酵母1 株（1.39%）及其他假丝酵母5 株（6.94%）;②RAPD分析表明：有2种引物（RAPD2和RAPD5）可以获得较清晰、稳定的特异性带型,具有较明显的种间遗传变异性和种内遗传相似性。结论：假丝酵母性阴道炎病原菌以白假丝酵母为主。随机引物RAPD2和RAPD5比较适于白假丝酵母和热带假丝酵母的分型、鉴定。     

盆腔炎院内继发念珠菌性阴道炎的临床分析

目的探索盆腔炎症性疾病（盆腔炎）患者院内继发阴道念珠菌病的临床特点及其防治对策．方法回顾性分析51例住院的盆腔炎继发阴道念珠菌病者的临床资料．结果盆腔炎院内继发阴道念珠菌病的发生率30．18％,以白色念珠菌最为多见,占60．78％,其次为光滑念珠菌,占25．49％,药敏结果显示,白色念珠菌对各药敏感性高,非白念珠菌对唑类耐药明显．抗生素二联以上用药阴道念珠菌病发生率（31．45％）明显高于单药治疗（10％）,3—8月份盆腔炎继发念珠菌发病率明显增多．结论盆腔炎院内继发阴道念珠菌病的菌株构成比及药敏有自己的特点,在防治上应予重视长期使用广谱抗生素和炎热潮湿的环境是其重要诱发因素．     

临床阴道分泌物检测方法的比较

目的:探讨阴道炎五联检法与传统镜检法(湿片镜检)在白带常规检测中的应用比较。方法:采用748例妇科门诊患者的白带标本同时用阴道炎五联检法和传统显微镜镜检法进行检测。结果:五联检测法在乳酸杆菌、白细胞、BV及念珠菌的检出率方面均高于传统的检查方法,其中念珠菌的检出率26.20%明显高于传统检测方法的检出率19.65%,该差异有统计学意义(P0.01);而在滴虫的检出率方面则低于传统检查方法,差异无统计学意义(P0.05)结论:阴道炎五联检法可以较为准确的反映阴道炎病原菌,并且与传统的检验方法具有互补性,因此,联合检测是白带常规检测较为理想的方法。