吸烟对肺泡巨噬细胞凋亡的影响

目的：观察吸烟或不吸烟者肺泡巨噬细胞凋亡的变化。方法：对吸烟或不吸烟者肺泡巨噬细胞进行染色观察及流式细胞仪ＤＮＡ分析。结果：吸烟者肺泡巨噬细胞生存时间延长,吸烟组存活率为（７６．３±１２．５）％,不吸烟组为（５５．４±１１．６）％,两者差异显著（Ｐ＜０．０５）。荧光染色吸烟组凋亡细胞百分率为（３８．６±１１．５）％,不吸烟组凋亡细胞百分率为（５９．４±１２．１）％。流式细胞仪观察凋亡细胞百分率吸烟组为（１１．５±１０．４）％,不吸烟组为（２９．１±８．６）％。吸烟组巨噬细胞凋亡较不吸烟者明显减少。结论：烟雾中某些成分可能通过抑制巨噬细胞凋亡,在肺气肿的发病中起重要作用。     

白念珠菌菌血症诱导小鼠皮质胸腺细胞凋亡

采用白念珠诱导小鼠胸腺内细胞凋亡,对其发生部位和累及的胸腺内细胞表型进行了研究。结果发现：静脉注射白念珠菌入小鼠体内６ｈ后,开始出现胸腺细胞凋亡;１２ｈ、１８ｈ和２４ｈ胸腺凋亡细胞百分率不断增加;ＣＤ３＾＋和ＣＤ８＾＋细胞百分率均较对照组有明显的下降;胸腺内细胞凋亡主要发生在皮质区,而髓质区别少。表明白念珠菌能诱导小鼠胸腺细胞凋亡（主要是未成熟ＣＤ３＾＋ ＣＤ４＾＋ ＣＤ９＾＋细胞及少量成熟的ＣＤ     

烧伤血清对腹腔巨噬细胞凋亡的影响

目的 探讨体外培养的腹腔巨噬细胞（Ｍ）经烧伤血清刺激后的凋亡情况。方法制作３０％体表总面积（ＴＢＳＡ）Ⅲ 度烧伤大鼠模型,分离其伤后２４ ｈ血清。流式细胞术检测体外培养的Ｍ经烧伤血清刺激后的凋亡情况并与正常大鼠 进行对照。结果烧伤大鼠血清诱导Ｍ凋亡明显增加,这种作用随刺激时间的延长和烧伤血清浓度的增加而加强,与 对照组比较有显著差异（Ｐ＜０．０１）。结论烧伤血清可能在烧伤后Ｍ功能失调中起重要作用。     

菌丝相和酵母相白念珠菌ERG11基因部分序列差异性的研究

目的研究白念珠菌菌丝相和酵母细胞氟康唑作用的靶酶编码基因(ERG11)碱基序列上的差异,从而探讨两相细胞之间的差异性.方法分别抽提7株来自同一母体、依次对氟康唑逐渐耐药的白念珠菌菌丝和酵母相的基因组DNA,根据ERG11编码序列设计一对引物,对ERG11基因的第403位点至第701位点的298的碱基序列进行PCR扩增,经PCR产物直接测序比较两相ERG11基因碱基序列上的差异.结果7株白念珠菌的菌丝相与酵母相细胞间的ERG11基因碱基序列在该片断上无差异.结论菌丝相和在酵母相白念珠菌ERG11基因的部分碱基序列是无差异的.     

巨噬细胞中诱导型一氧化氮合酶来源的NO对共培养HL-60细胞凋亡的影响

目的 研究巨噬细胞中诱导型一氧化氮合酶（iNOS）来源的一氧化氮（NO）时共培养HL-60细胞凋亡的影响。方法 以脂多糖（LPS）和у-干扰素（INF-у）诱导RAW264．7巨噬细胞iNOS基因的表达产生过量NO为实验模型，通过噻唑蓝（MTT）试验、蛋白质印迹分析、荧光分析、流式细胞术（FCM）、透射电镜和DNA琼脂糖凝肢电泳等分析技术．观察NO对共培养的HL-60细胞存活率、Bcl-2和Bax蛋白表达、Caspase-3活性和细胞凋亡（apoptosis）的影响。结果 RAw264．7巨噬细胞中iNOS来源的NO对共培养HL一60细胞能造成氧化损伤，降低细胞的存活率；Bel一2表达明显下降。而Bax表达增加；激活Caspase-3和促进DNA的降解。结论 巨噬细胞中iNOS来源的NO在诱导细胞凋亡中发挥重要的作用。     

肺泡巨噬细胞凋亡对肺间质纤维化的影响

目的了解肺泡巨噬细胞的凋亡对肺间质纤维化进展的影响。方法收集一组肺间质纤维化患者的肺泡巨噬细胞（AM）,与正常组进行对比,检测两组AM产生细胞因子的活性;然后以干扰素-γ（IFN-1）诱导肺间质纤维化患者AM凋亡,对照诱导前后AM凋亡情况,同时检测诱导前后AM产生细胞因子的活性。结果肺间质纤维化患者AM培养上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-8（IL-8）水平均明显高于对照组（P〈0．01）;AM的诱导凋亡率较自然凋亡率明显增高（P〈0．01）;诱导后AM产生细胞因子的活性明显低于诱导前的AM（P均〈0．01）。结论在肺间质纤维化的早期,利用IFN-γ诱导其AM凋亡,就可抑制AM产生细胞因子TNF-α、IL-6、IL-8等,从而控制肺泡炎,阻止肺间质纤维化的进程。     

小鼠腹腔吞噬细胞对二相性白念珠菌的吞噬研究

目的 :探讨腹腔吞噬细胞对二相性白念珠菌的吞噬作用。方法 :分别用小鼠腹腔中性粒细胞 (PMN)、巨噬细胞 (MФ)对二相性白念珠菌进行吞噬 ,计算吞噬率、吞噬指数。结果 :PMN对孢子相白念珠菌的吞噬率、吞噬指数分别为 1 6 1± 4 93、0 1 8± 0 0 5 ,对菌丝相白念珠菌的吞噬率、吞噬指数分别为 1 0 5± 3 2 8、0 1 1± 0 0 3,PMN对孢子相白念珠菌的吞噬作用强于对菌丝相白念珠菌的吞噬作用 (P <0 0 0 1 ) ;MФ对孢子相白念珠菌的吞噬率、吞噬指数分别为 2 9 8± 6 98、0 34± 0 0 7,对菌丝相白念珠菌的吞噬率、吞噬指数分别为 2 1 2± 5 38、0 2 3±0 0 6 ,MФ对孢子相白念珠菌的吞噬作用强于对菌丝相白念珠菌的吞噬作用 (P <0 0 0 1 )。结论 :中性粒细胞、巨噬细胞对孢子相白念珠菌的吞噬能力强于对菌丝相白念珠菌的吞噬能力     

rmuIFN-γ增强巨噬细胞抗白念珠菌活性的研究

目的 研究重组小鼠γ干扰素(rmuIFN-γ)对巨噬细胞抗白念珠菌活性的调节作用。方法 分别将不同浓度的rmuIFN-γ与小鼠腹腔巨噬细胞共同培养2～5天，然后测定巨噬细胞的抗白念珠菌活性。结果 rmuIFN-γ可增强巨噬细胞的抗白念珠菌活性，并呈剂量依赖性，但随着与巨噬细胞共同培养时间的延长，其增强效应渐降低。结论 rmuIFN-γ具有增强巨噬细胞的抗白念珠菌活性的作用。     

白念珠菌菌血症诱导小鼠皮质胸腺细胞凋亡

采用白念珠菌诱导小鼠胸腺内细胞凋亡 ,对其发生部位和累及的胸腺内细胞表型进行了研究。结果发现 :静脉注射白念珠菌入小鼠体内 6h后 ,开始出现胸腺细胞凋亡 ;1 2h ,1 8h和 2 4h胸腺凋亡细胞百分率不断增加 ;CD3+和CD8+细胞百分率均较对照组有明显的下降 ;胸腺内细胞凋亡主要发生在皮质区 ,而髓质区则少。表明白念珠菌能诱导小鼠胸腺细胞凋亡 (主要是未成熟CD3+CD4+CD8+细胞及少量成熟的CD3+CD4- CD8+细胞 )     

松油烯-4-醇对白念珠菌PLB1、SAP2基因表达的影响

目的:观察中药抗菌成分松油烯-4-醇对白念珠菌磷脂酶B1(PLB1)和分泌型天冬氨酸蛋白酶2(SAP2)基因表达的影响.方法:将白念珠菌分为实验组和对照组,实验组用松油烯-4-醇作用12 h,对照组不做任何处理,提取两组白念珠菌总RNA,进行RT-PCR扩增,比较两组PLB1和SAP2的相对表达量.结果:用松油烯-4-醇作用后的白念珠菌PLB1和SAP2基因的相对表达量均高于没有用药的白念珠菌(P＜0.05).结论:松油烯-4-醇作用于白念珠菌可短时间内增加PLB1、SAP2 mRNA的表达.     

大蒜素对白假丝酵母菌生物被膜的抑制作用

目的：研究大蒜素对白假丝酵母菌生物被膜（BF）内真菌的抑制作用。方法用FITC-conA标记白假丝酵母菌BF的多糖成分,利用荧光显微镜从形态学上观察大蒜素对白假丝酵母菌BF形成过程的影响。将标本分为5组,分别是对照组（大蒜素浓度为0）、大蒜素0．25 mg/mL组、大蒜素0．5 mg/mL组,大蒜素1．0 mg/mL组、大蒜素2．0 mg/mL组。应用XT T减低法定量检测大蒜素对白假丝酵母菌BF中真菌的杀灭作用。结果在荧光显微镜下可见大蒜素2．0 mg/mL组大蒜素干预白假丝酵母菌BF后的荧光强度较大蒜素0．5 mg/mL组及对照组的荧光强度减弱。大蒜素0．5、1．0、2．0 mg/mL作用于白假丝酵母菌BF 5 h后,XT T减低法光密度（OD）450的值分别为1．87±0．31、1．64±0．25和1．30±0．29,分别与对照组的2．11±0．26比较,差异均有统计学意义（P＜0．05）;0．25 mg/mL的大蒜素作用白假丝酵母菌BF后,OD450值为1．93±0．31,与对照组比较,差异无统计学意义（P＞0．05）。结论大蒜素能杀灭白假丝酵母菌BF内的真菌,对BF有抑制作用。在一定浓度范围内,随着大蒜素浓度的增加,其对BF的抑制作用逐渐增强。     

溶菌酶对白念珠菌芽管形成的促进作用

白念珠菌在血清和蛋清中可形成芽管,加热灭活血清和蛋清中酶成份,芽管形成率则下降,在灭活的血清或蛋清中补加溶菌酶,芽管形成率则恢复或升高。即使在低营养条件下溶菌酶也可提高芽管形成率。溶菌酶在0.2～2.1mg/ml浓度范围内均示提高芽管形成率但不出现杀菌作用。可见溶菌酶具有促进白念珠菌形成芽管的作用。本文首次报告这个发现。     

白色念珠菌分泌型酸性蛋白酶和细胞外磷脂酶活性与其毒力的关系

目的： 探讨临床白色念珠菌感染者不同标本中分离的白色念珠菌分泌型酸性蛋白酶和细胞外磷脂酶活性与其毒力的关系。方法： 分别采用牛奶平板和卵黄培养基法检测白色念珠菌感染者不同标本（痰、血液、鹅口疮、伤口、阴道分泌物）中分离的190株白色念珠菌分泌型酸性蛋白酶和细胞外磷脂酶的活力，分别将产酶株的菌丝相和孢子相菌悬液（5×10⁶ CFU•mL^-1）注射小鼠尾静脉，1个月内观察小鼠死亡率及平均存活时间，以平均存活时间评价菌株毒力。结果：190株白色念珠菌分泌型酸性蛋白酶和细胞外磷脂酶阳性检出率分别为83.68%和85.26%。动物实验结果表明，菌丝相白色念珠菌分泌型酸性蛋白酶和细胞外磷脂酶的活力均显著高于孢子相(P<0.01，P＜0.05)；注射菌丝相白色念珠菌的小鼠死亡率高于注射孢子相的小鼠(P<0.05)，且平均存活期短于注射孢子相的小鼠(P<0.01)。结论：分泌型酸性蛋白酶和细胞外磷脂酶是白色念珠菌重要毒力因子，酶活力可直接地反映其毒力和致病性。     

耐药白色念珠菌弥散性感染小鼠模型的建立

目的为新药筛选建立耐药白色念珠菌弥散性感染小鼠模型。方法对免疫抑制ICR小鼠静脉注射临床耐氟康唑白色念珠菌CaR,通过临床症状、生存情况、组织载菌量、组织病理、细胞因子分析以及药物治疗等方法对模型评价。结果 CaR感染小鼠在接种后第1天出现死亡,相比临床药敏菌株Ca S感染组,16 d观察期内动物死亡率无显著性差异(CaR,90.7%;Ca S,86.2%,P=0.158),但观察早期CaR组死亡比Ca S组快。感染第4天,不同组织均可检测到念珠菌,并发现与Ca S组相比,肾、脑组织载菌量具有显著性差异。真菌引起的典型肉芽肿样是肾、脑、心的主要组织病理学特征。利用流式细胞仪检测肾组织细胞因子,IL-1α、IL-6、TNF-α、IFN-γ等细胞因子变化显著,与Ca S组比较,IL-1α和IFN-γ显著升高,TNF-α显著下降。CaR和Ca S感染小鼠给予10 mg/kg氟康唑治疗,死亡率分别为83.3%、37.5%,具有显著性差异。结论本研究成功建立了耐药白色念珠菌弥散性感染小鼠模型,有望成为抗感染新药研发的重要工具。     

盐酸氨溴索对体外白色假丝酵母菌成熟生物膜的抑制作用及其形态学的影响

目的研究盐酸氨溴索对体外白色假丝酵母菌(Candida albicans)成熟生物膜(biofilm,BF)的影响。方法用微孔板法建立体外白色假丝酵母菌ATCC 90028 BF模型;采用甲基四氮盐(the abated tetrazolium salt,XTT)减低法定量评价盐酸氨溴索对白色假丝酵母菌成熟BF的抑制作用;银染后,倒置显微镜下观察该药对白色假丝酵母菌成熟BF的形态学影响。结果在96孔微量细胞培养板上成功建立白色假丝酵母菌BF模型;1.25、2.5、5、7.5 mg/ml的盐酸氨溴索作用白色假丝酵母菌成熟BF 12 h后,XTT减低法D(450)值分别为(0.63±0.05)、(0.52±0.08)、(0.31±0.05)和(0.11±0.03),分别与空白对照组(0.71±0.07)比较,差异有显著性(P<0.05);0.625 mg/ml的盐酸氨溴索作用白色假丝酵母菌成熟BF后,D(450)值为(0.67±0.04),与空白对照组比较,差异无显著性(P>0.05);不同浓度的盐酸氨溴索作用白色假丝酵母菌成熟BF,组间比较,均有显著性差异(P<0.05)。结论盐酸氨溴索对体外白色假丝酵母菌成熟...     

等离子体体外抑制白假丝酵母菌生长的实验研究

选择白假丝酵母菌ATCC10231 作为实验菌株,以低温等离子体对其进行照射,观察照射后菌落生长情况. 经低温等离子体照射30、60、120、180 s后,在培养基中心照射位置处,出现明显的抑菌环,随着照射时间的延长,抑菌环逐渐增大;连续观察3 d,抑菌环没有改变. 低温等离子体在体外可抑制白假丝酵母菌的生长,为其将来成为治疗白假丝酵母菌感染的一种新手段提供了实验室依据.     

密度感应分子对白色念珠菌生物被膜形成作用的研究

目的:白色念珠菌生物被膜形成受密度感应分子调控,法尼醇和酪醇是白色念珠菌产生的两种密度感应分子?本研究探讨不同生物被膜时相,密度感应分子对白色念珠菌形态及生物被膜形成的作用?方法:体外构建白色念珠菌生物被膜?研究分为法尼醇处理组?酪醇处理组?法尼醇和酪醇联合处理组?对照组?首先采用XTT检测不同生物被膜时相酪醇和法尼醇对白色念珠菌细胞活力的作用?扫描电子显微镜(scanning electron microscopy,SEM)观察酪醇和法尼醇对白色念珠菌生物被膜的作用?同时采用气相色谱-质谱联用(gas chromatography-mass spectrometry,GC/MS)检测白色念珠菌生物被膜法尼醇的产生,高效液相色谱(high press liquid chromograph,HPLC)检测白色念珠菌生物被膜酪醇的产生?结果:XTT结果显示,与对照组比较,酪醇可促进6 h白色念珠菌生物膜活力(P < 0.05),法尼醇抑制早期(3 h和6 h)生物被膜活力(P < 0.05),联合作用组抑制6 h生物被膜活力(P < 0.001)?扫描电镜观察发现,酪醇促进3 h和6 h白色念珠菌细胞的出芽,法尼醇抑制3 h和6 h菌丝形成,两者联合作用以后者对菌丝形成的抑制作用为主?GC/MS及 HPLC结果表明在早期(3 h和6 h)生物被膜,2种密度感应分子产生少且无明显升高趋势(P > 0.05);随着生物被膜成熟(24 h及36 h),酪醇产生明显增多(P < 0.05),法尼醇产生也明显增多(P < 0.05)?24 h生物被膜产生酪醇最多,36 h 生物被膜产生法尼醇最多?结论:酪醇可以促进白色念珠菌出芽和菌丝伸长,促进早期生物被膜形成?法尼醇抑制出芽和菌丝形成,抑制早期生物被膜形成?两者联合作用以法尼醇对菌丝形成的抑制作用为主?     

白色念珠菌磷脂酶B的研究进展

目的介绍近年来对磷脂酶B及其与白色念珠菌毒力关系的研究进展。方法查阅国内外大量关于磷脂酶B的研究文献，并进行详述。结果白色念珠菌是最常见的条件性致病真菌。磷脂酶B是磷脂酶家族中的重要成员，与90％的念珠菌磷脂酶细胞外活性有关，在白色念珠菌的毒力方面起着重要作用。结论磷脂酶B的研究成果将有助于进一步明确白色念珠菌的致病机制、耐药机制，为抗真菌药物的开发及白色念珠菌病的诊断和治疗等方面提供了新的前景。