标准化大鼠心肌梗死模型的制作

目的 探讨建立标准化大鼠心肌梗死模型的制作方法.方法 大鼠麻醉后,经口腔插管连通动物呼吸机,开胸结扎其冠状动脉.于术后4周静脉注射氯化钾处死大鼠,取出心脏,观察心脏外形及梗死瘢痕,并在进行HE染色后于显微镜下观察其病理变化.结果 此法制作心梗模型的成功率为100%,术后动物存活率为90%左右.术后4周取出的心脏,左心室明显扩大,缺血区心室壁变薄塌陷,颜色比周围心肌浅,心腔内膜纤维化.结论 本实验建立的制作心梗模型的方法 确实有效、简单易行.而本实验建立的标准化心肌模型可进一步用于心室重构机制和治疗方面的研究,甚至对各相关领域研究的相互参考和借鉴都能起到重大作用.     

改良冠脉结扎法提高大鼠心梗模型存活率方法探讨

目的 探讨提高冠脉结扎法大鼠心梗模型制作存活率方法.方法 大鼠麻醉后,经口腔插管连通动物呼吸机,开胸结扎其冠状动脉.于术后4周麻醉处死大鼠,取出心脏,观察心脏外形及梗死瘢痕,并在进行HE染色后于显微镜下观察其病理变化.结果 此法制作心梗模型的成功率为100%,术后动物存活率为96.7%.术后4周取出的心脏,左心室扩大变...     

成功建立小鼠心肌梗死模型的探讨

目的:探讨如何成功建立小鼠心肌梗死模型,提高动物的存活率。方法:采用结扎冠状动脉左前降支方法建立小鼠心肌梗死模型,术后4周取出心脏对心肌进行TTC和HE染色检测。结果:通过对常规手术方法进行改进,术后2周小鼠存活率由40%提高到75%。心肌颜色、心电图特异性改变及心肌TTC和HE染色证明制模成功。结论:正确使用麻醉药、顺利气管插管、准确结扎冠状动脉、减少出血与肺损伤及术后观察和护理是保证制模成功的基础。     

大鼠心肌梗死模型建立方法选择及心电图表现

目的 探讨构建心肌梗死模型的大鼠左冠状动脉结扎位置及心电图特点.方法 SD大鼠经麻醉后,气管切开插管及连通呼吸机,打开左侧胸腔后分别在距离左心耳尖端约2 mm水平处(低位结扎组)与在距主动脉根部约3 mm处(高位结扎组)结扎左冠动脉,假手术组除不结扎冠脉外步骤同低位结扎组,术前术后分别行心电图检查,且4周后取出心脏行病理学检查及测定心肌梗死面积.结果 高位结扎组大鼠心肌梗死面积约55.5％,总存活率13.3％;低位结扎组大鼠心肌梗死面积约36.2％,总存活率66.7％;假手术组大鼠无心肌梗死,存活率100％.大鼠体表心电图在非心肌梗死者QRS -T波群呈成“M”型波,在心肌梗死者R波与T波融合成高大的帐篷状单波,无明显ST段.4周后心肌组织形态学特点符合心肌梗死的病理改变.结论 距大鼠主动脉根部约3 mm结扎左冠状动脉,不能满足实验需要;距离左心耳尖端约2 mm水平结扎左冠状动脉,能满足实验需要;大鼠的体表心电图无明显ST段.     

液氮冷冻大鼠左冠状动脉前降支中上1/3所支配区域建立心肌梗死模型

目的探讨大鼠左冠状动脉前降支中上1／3所支配的区域液氮冷冻处理后对心肌形态学及心功能的影响，以建立适合移植干细胞再生修复心肌梗死研究的一种新的大鼠心肌梗死模型制作方法。方法80只雄性SD大鼠，随机分为3组即：冷冻组、结扎组、对照组。大鼠麻醉后，行气管插管连通动物呼吸机，打开胸廓暴露心脏，用特制的直径为0．6cm冷冻头置入液氮中冷冻降温后迅速冷冻大鼠左冠状动脉前降支中上1／3所支配的区域，或结扎左冠状动脉前降支中上1／3处。分别于处理后1d、3d、7d、14d、28d观察心脏病理组织学变化，并于处理28d后检测心功能的变化。结果在液氮冷冻大鼠心脏后，大鼠心肌组织出现凝固性坏死，继而有肉芽组织长人梗死灶内，最后形成疤痕。用液氮冷冻法可成功复制心肌梗死大鼠动物模型。与冠状动脉结扎法相比较，操作简单，手术时间短，死亡率低．心肌梗死面积变异小。结论液氮冷冻法作为一种复制心肌梗死模型的方法，有其自身的优势．可用于心肌梗死发生机制和干细胞治疗等方面的研究。     

冠脉显色指导下冠脉结扎法在制作大鼠心肌梗死模型中的应用

目的:显示大鼠左侧冠状动脉的走行情况,探讨冠脉显色指导下冠脉结扎法制作大鼠心肌梗死模型在模型死亡率、成功率及稳定性方面的优势。方法:8只SD大鼠处死后取出心脏,行主动脉插管后肝素盐水灌洗冠状动脉,1%、2%、3%、4%不同浓度37℃琼脂糖凝胶行主动脉根部灌注,确定最佳琼脂糖凝胶浓度;101只雄性SD大鼠行琼脂糖凝胶主动脉灌注,显示出大鼠冠状动脉的分布走行情况;分析冠脉走行情况,制定结扎策略,比较高位结扎法、低位结扎法在大鼠存活率、结扎成功率、梗死灶稳定性方面的优劣。结果:2%37℃琼脂糖凝胶主动脉灌注能清楚的显示冠状动脉在心脏表面的走行;大鼠冠脉的走行可见分为4种类型;60只雄性SD大鼠分别按高位结扎、低位结扎的方法能制作稳定的大鼠心梗模型。结论:冠脉显色指导下冠脉结扎法能制作出稳定的大面积和中等面积大鼠心肌梗死模型。     

电凝烧灼冠状动脉制作大鼠心肌梗死动物模型

【目的】探讨一种新的大鼠心肌梗死模型制作方法。【方法】大鼠麻醉后，经口腔插管连通动物呼吸机，切开胸廓暴露心脏，电凝烧灼其左冠状动脉前降支。然后于12h，2d和2周后将大鼠处死，取出心脏，显微镜下观察其病理变化。对照组使用冠状动脉结扎法制作心肌梗死模型。【结果】在电凝烧灼大鼠冠状动脉后，大鼠心肌组织出现凝固性坏死，继而有肉芽组织长入梗死灶内，最后形成疤痕。用电凝烧灼法可成功复制心肌梗死大鼠动物模型。与冠状动脉结扎法相比较，操作简单，手术时间短，死亡率低。【结论】电凝烧灼法作为一种复制心肌梗死模型的新方法，有其自身的优势，可用于心肌梗死发生机制和治疗等方面的研究。     

电凝烧灼冠状动脉制作大鼠心肌梗死动物模型

[目的]探讨一种新的大鼠心肌梗死模型制作方法.[方法]大鼠麻醉后,经口腔插管连通动物呼吸机,切开胸廓暴露心脏,电凝烧灼其左冠状动脉前降支.然后于 12 h, 2 d和 2周后将大鼠处死,取出心脏,显微镜下观察其病理变化.对照组使用冠状动脉结扎法制作心肌梗死模型.[结果]在电凝烧灼大鼠冠状动脉后,大鼠心肌组织出现凝固性坏死,继而有肉芽组织长入梗死灶内,最后形成疤痕.用电凝烧灼法可成功复制心肌梗死大鼠动物模型.与冠状动脉结扎法相比较,操作简单,手术时间短,死亡率低.[结论]电凝烧灼法作为一种复制心肌梗死模型的新方法,有其自身的优势,可用于心肌梗死发生机制和治疗等方面的研究.     

自体骨髓干细胞动员治疗心肌梗死

目的探讨基因重组人粒细胞集落刺激因子(rhGCSF)动员骨髓干细胞对急性心肌梗死动物模型的治疗作用。方法将60只SD大鼠随机分成对照组和治疗组,结扎冠状动脉左前降支建立大鼠心肌梗死实验模型。治疗组在复制大鼠心肌梗死模型3h后用经生理盐水稀释的rhGCSF(2mg·L-1)皮下注射10μg·kg-1·d-1,共5d;对照组复制大鼠心肌梗死模型3h后皮下注射等量生理盐水,共5d。在复制大鼠心肌梗死模型24、48h和2周后,两组分别先后各取10只大鼠行在体心功能(±dpdtmax)测定,测定完毕后各组随机选取6只大鼠处死行心脏梗死范围的测量,其余大鼠处死取出心脏行HE染色及CD34+免疫组织化学分析。结果结扎冠状动脉左前降支24、48h和2周后治疗组±dpdtmax均高于对照组(P<0.01);治疗组心脏梗死范围低于对照组(P<0.01)。病理检查显示对照组心肌梗死区周围有较多以中性粒细胞为主的炎症细胞浸润,而治疗组大鼠心肌坏死程度较对照组轻,浸润的细胞以CD34+的单个核细胞为主,并可见新生的心肌细胞生长。结论rhGCSF动员自体骨髓干细胞原位移植可修复梗死心肌、减少梗死范围、提高心功能,可用于急性心肌梗死的治疗。     

大鼠心肌梗死模型制备的改进

目的　改进制备大鼠心肌梗死模型的方法 ,提高术后大鼠存活率。方法　采用戊巴比妥钠腹腔注射麻醉 ,开胸行冠脉左前降支结扎法 ,术后给予呼吸道管理。结果　术后存活率达到 94 % ,3周存活率达到 82 .5 %。结论　采用此法可方便快捷地制备大鼠心肌梗死模型 ,同时有效地提高术后大鼠存活率     

大鼠急性心肌梗死模型的建立

目的建立大鼠心肌梗死模型。方法 SD大鼠麻醉后,用套管针颈部气管穿刺,将导丝从口腔引出,然后经导丝从口腔行气管插管后,连接动物呼吸机。大鼠右侧卧位经第4肋间隙开胸结扎其冠状动脉,观察结扎区域的变化。结果此法制作心肌梗死模型的成功率为95%,术后1周动物存活率为90%。结论本实验大鼠心肌梗死模型获得了成功,手术方法操作简单、模型成功率高,并进行了一定的改进,可以作为大鼠心肌梗死模型的常用方法。     

补气化痰方对大鼠心肌梗死模型心功能及血管新生的研究

目的：观察补气化痰方对大鼠心肌梗死模型心功能及血管新生作用的研究。方法：采用60只正雄性SD大鼠,随机分为治疗组（黄芪瓜蒌薤白半夏汤组）、中药对照组（瓜蒌薤白半夏汤组）、西药对照组（科素亚组）、模型组、正常组,每组12只SD大鼠,结扎前降支建立心肌梗死模型,干预28 d,观察比较各组的大鼠生存率,48 h、28 d心脏超声EF,28 d心肌CD31表达,肝肾功能的变化。结果：28 d内各组大鼠生存率没有差异,28 d治疗组大鼠心脏超声EF较其他各组大鼠EF下降缓慢,有统计学差异,并在免疫组化中结果显示治疗组CD31表达较各对照组及模型组较高,有统计学差异,各组肝肾功能未见明显差异。结论：补气化痰方能有效提高心肌梗死大鼠心脏EF值,其可能的机制是促进梗死后血管新生从而改善心脏功能。     

大鼠趋化素样因子2 mRNA在心肌梗死大鼠心脏中的表达

目的：观察大鼠趋化素样因子2(rCKLF2)的mRNA在心肌梗死后大鼠心脏组织的表达。方法：构建大鼠心肌梗死模型，分别于心肌梗死后1d、3d、1周、2周、3周(每个时间点各5例)，取心肌梗死周边区心肌组织，提取组织总RNA，逆转录后行竞争性PCR，了解rCKLF2 mRNA的表达情况。结果：rCKLF2 mRNA在梗死心肌周边区的表达于术后上调，并呈动态变化，1周达峰值，为正常的6．7倍。结论：CKIF2可能参与心肌梗死的病理生理过程。     

在无创性通气条件下快速建立小鼠心肌梗死模型的简易方法

目的:探讨建立小鼠心肌梗死模型的快速简易方法,提高动物存活率。方法:使用戊巴比妥钠麻醉小鼠,在无创性机械通气的条件下开胸,将心脏轻轻挤出胸腔后,用手术针钩断冠状动脉的左前降支(LAD),通过观察存活率、心电图改变和组织病理学染色来评价心肌梗死模型是否成功。同时与冠状动脉结扎组进行比较。结果:LAD钩断术后心电图出现ST段抬高,TTC染色可见明显的梗死区域,术后4周心肌发生纤维化;模型组的术后存活率为85%,而冠状动脉结扎组则为54%。结论:应用这种改良的新方法可以快速并成功地建立小鼠心肌梗死模型。     

神经调节蛋白-1对心肌梗死大鼠心脏交感神经重构的保护效应研究

目的观察神经调节蛋白-1(NRG-1)对心肌梗死大鼠心脏交感神经重构的影响。方法 2014年9—12月在武汉大学心血管病研究所完成实验。将18只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组(n=6)、心肌梗死组(n=6)、NRG-1干预组(n=6);以冠状动脉前降支结扎方法建立心肌梗死模型,NRG-1干预组于心肌梗死模型建立后每天经鼠尾静脉给予NRG-1(0.01μg/g)干预,连续7 d;心肌梗死组则给予生理盐水干预,假手术组仅开胸切开心包膜不结扎冠状动脉。所有大鼠均于术后7 d利用Real-time PCR技术和Western-blot技术检测梗死周边区心肌组织交感神经重构标志物——酪氨酸羟化酶(TH)和生长相关蛋白43(GAP43)的mRNA和蛋白水平。结果心肌梗死组梗死周边区心肌组织TH、GAP43的mRNA水平较假手术组明显升高(P<0.05),而NRG-1干预组梗死周边区心肌组织TH、GAP43的mRNA水平均明显低于心肌梗死组(P<0.05)。与TH、GAP43的mRNA水平变化一致,心肌梗死组TH、GAP43的蛋白表达量明显增高,而NRG-1的干预明显降低了TH、GAP43的蛋白表达(P<0.05)。结论NRG-1可降低大鼠心肌梗死后交感神经重构,有利于稳定心电活动,改善心功能,是其发挥心肌保护效应的机制之一。     

脂肪来源的间充质干细胞对大鼠心肌梗死后心功能的保护作用

目的探讨脂肪来源的间充质干细胞(ADSCs)对大鼠急性心肌梗死(AMI)后心功能的影响。方法结扎SD大鼠左冠状动脉前降支制备心肌梗死模型。同种异体ADSCs体外分离、培养、纯化、扩增,在大鼠AMI区域周围进行心外膜下移植。将24只大鼠随机分为3组,每组8只:A组为AMI模型组,只给予前降支结扎;B组为细胞培养基(DMEM)移植组,结扎后心外膜注射DMEM;C组为ADSCs治疗组,结扎前降支后接受ADSCs移植治疗。术后7 d、28 d各组大鼠行心脏超声检测左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(FS),28 d超声检测后行血流动力学测量左室收缩压、左室舒张末压、左心室压力最大变化速率,评价ADSCs移植对AMI后大鼠心功能的影响;心脏组织行TTC染色,观察AMI面积。结果与AMI模型组比较,ADSCs治疗组的LVEF、FS及血流动力学指标明显提高(P0.01)。TTC染色观察心肌梗死面积,ADSCs治疗组心肌梗死面积明显减小(P0.01)。结论 ADSCs可减少AMI的面积,改善心功能。     

大鼠心肌梗死动物模型的制备

目的建立一种稳定可重复的大鼠急性心肌梗死动物模型。方法SD大鼠经口气管插管,呼吸机辅助呼吸,开胸结扎冠脉左前降支。术后28 d行心脏超声,血流动力学及组织病理学检查。结果大鼠术后存活率60%;手术组LVEF较假手术组显著降低(P0.01);与假手术组比,手术组的LVSP明显下降(P0.05),±dp/dt显著降低(P0.01),而LVEDP明显升高(P0.01);病理组织学检查可见瘢痕形成,纤维组织增生。结论本文建立心肌梗死动物模型的方法操作简便、重复性好。     

电刺激小脑顶核对缺血心脏神经肽Y水平的影响

目的观察预先电刺激小脑顶核对心肌梗死大鼠心脏神经肽Y水平的影响。方法Wistar大鼠随机分为：心肌梗死组,结扎左冠状动脉前降支;电刺激组,预先电刺激小脑顶核1h再予以左冠状动脉结扎组;小脑顶核毁损组,毁损小脑顶核5d后电刺激小脑顶核1h再行左冠状动脉结扎组。各组又分心肌梗死后1、7和21d3个时间点。另设假手术组。各组于相应时间点处死大鼠后,取心肌梗死区和非梗死区组织标本,应用ELISA.法测定神经肽Y水平。结果与假手术组比较,心肌梗死第1天非梗死区与梗死区心肌组织中神经肽Y水平升高（P〈0.05）,而第7和21天无明显改变（P〉0.05）;电刺激小脑顶核可显著降低心肌梗死后第1天非梗死区与梗死区心肌组织神经肽Y水平（P〈0.05）;毁损小脑顶核后,则以上作用消失。电刺激小脑顶核对心肌梗死后第7和21天非梗死区与梗死区神经肽Y水平无明显影响（P〉0.05）。结论电刺激小脑顶核可降低心肌梗死大鼠早期心脏梗死区或非梗死区神经肽Y水平。     

大鼠冠心病心肌梗死模型制备的新方法

目的通过结扎大鼠左心室回旋支末梢血管,探索一种制作大鼠心肌梗死模型的新方法。方法将90只SD大鼠随机分为对照组(10只)和模型组(80只),大鼠经腹腔注射10%水合氯醛麻醉后,颈部行气管切开插管术,呼吸机维持呼吸。对照组只开胸不结扎;模型组开胸结扎左心室回旋支末梢血管,术后笼中饲养4周,观察大鼠形态、行为学、呼吸改变,心电图、梗死心肌表现,组织病理学HE切片,并对其成活率进行统计,描述模型制作成功的标准。结果经过上述方法造模后,模型组大鼠形态、行为学、呼吸改变符合冠心病心力衰竭特征,心电图表现符合冠心病心肌梗死的动态演变过程,梗死心肌表现符合心肌梗死室壁瘤特征,组织病理HE染色示心肌坏死符合冠心病心肌梗死特征。且术后成活率(即造模成功率)达到83.75%,各项指标符合临床冠心病心肌梗死标准。结论结扎大鼠左心室回旋支末梢制作大鼠心肌梗死模型,方法简单、稳定快速,造模成功率高、可控性好,与临床冠心病心肌梗死相似度高,是一种理想的造模新方法。     

心肌梗死后小鼠心肌Bax和Bcl-2的表达

目的研究心肌梗死后小鼠心脏中Bax和Bcl-2的表达。方法雄性C57BL/6小鼠40只随机分为2组:对照组(10只)和实验组(30只),实验组结扎冠状动脉左前降支建立心肌梗死模型,对照组仅在冠状动脉前降支处穿过缝线,不做结扎。术后4周对2组小鼠进行心肌取材,Western blot方法检测Bax和Bcl-2蛋白在心脏表达的差异。结果实验组小鼠术后4周存活率为53.3%(16/30),对照组为100%(10/10)。Bax和Bcl-2在对照组心肌均有表达,在实验组小鼠心脏远离梗死区(N)、心肌梗死周边区(B)、梗死区(I)的表达逐渐增加(P<0.05),且B区、I区Bax/Bcl-2比值高于N区及对照组(P<0.05)。结论 Bax和Bcl-2在心肌梗死后心脏中呈高表达,且Bax/Bcl-2比值在心肌梗死区及周边区显著增加,提示凋亡可能在心肌梗死后心脏重构中发挥重要作用。