高效液相色谱法测定美林洛尔与人血浆蛋白的结合率

目的建立人标准血浆中美林洛尔(MELE)浓度的测定方法,测定美林洛尔在人标准血浆中的蛋白结合率,并计算相关参数.方法用平衡透析法测定血浆蛋白结合率,用高效液相-荧光检测法测定血浆中药物总浓度及游离药物浓度.结果美林洛尔与人标准血浆的蛋白结合率随药物浓度发生变化约为7.02%～18.75%.MELE与白蛋白结合的表现最大能力βp为0.016μmol·g-1,药物-蛋白复合物的解离常数Kdp为1.734 μmol·L-1,结合常数Kp为1.271 9×103L·mol-1,结合位点n为0.001 6.结论在体外美林洛尔与人标准血浆的蛋白结合率较低,并随着药物浓度的增加结合率下降.     

高效液相色谱法测定布洛芬与人血浆蛋白的结合率

目的:建立人血浆中布洛芬浓度的测定方法,测定布洛芬在人血浆中的蛋白结合率,并计算相关参数。方法:用平衡透析法以高效液相色谱法为检测手段测定血浆蛋白结合率。结果:布洛芬与人标准血浆的蛋白结合率为(95.4±0.3)%。结论:布洛芬与人血浆蛋白为高强度结合。     

高效液相色谱法测定间尼索地平不同对映体在血浆中的蛋白结合率

目的:建立间尼索地平不同对映体在大鼠血浆、人血浆和牛血清白蛋白中蛋白结合率的测定方法,并计算不同种属血浆蛋白的相关参数。方法:采用平衡透析法测定蛋白结合率,用高效液相色谱法测定血浆中药物总浓度及游离药物浓度。结果:R-与S-间尼索地平的血浆蛋白结合率分别为:大鼠血浆为(97.4±8.2)%、(93.0±13.4)%;人血浆为(90.8±10.5)%、(89.2±9.9)%;牛血清白蛋白为(95.3±8.7)%、(91.0±5.7)%。最低定量下限为0.01ng。结论:在体外间尼索地平不同对映体与大鼠血浆、人血浆和牛血清白蛋白结合率很高,R-间尼索地平的结合率及蛋白结合药物的表观最大能力βp均较S-间尼索地平高。随着药物血浆浓度升高,R-间尼索地平结合率下降,S-间尼索地平结合率升高,均有一定的浓度依赖性。     

HPLC-超滤法测定雷公藤红素与家兔、大鼠、人血浆的蛋白结合率

目的:测定雷公藤红素在家兔、大鼠和人血浆中的血浆蛋白结合率。方法:采用高效液相色谱(HPLC)-超滤法分离测定游离药物和血浆蛋白结合药物。以高效液相色谱法测定离体大鼠、家兔和人血浆中雷公藤红素含量,计算血浆蛋白结合率。色谱柱为Diamonsil C18,流动相为乙腈-0.2%甲酸(80∶20,V/V),检测波长为425 nm,流速为1.0 ml/min,进样量为10μl,柱温为40℃。结果:0.52、2.08、8.32 mg/L雷公藤红素在大鼠、家兔和人血浆中的检测质量浓度线性范围均为0.10~16.64 mg/L(r分别为0.999 5、0.999 6、0.999 5);血浆样品精密度试验的RSD均小于15%,在37、25、4℃下1 440 min内稳定性试验的RSD均小于5%。在0.52、2.08、8.32 mg/L质量浓度下雷公藤红素与人血浆的血浆蛋白结合率分别为84.62%、81.24%、83.14%,与大鼠的血浆蛋白结合率分别为79.44%、78.61%、78.15%,与家兔的血浆蛋白结合率分别为67.86%、68.71%、69.23%。结论:雷公藤红素的血浆蛋白结合率与其质量浓度无关;雷公藤红素与人的血浆蛋白结合率较高,其次为大鼠和家兔。     

超滤法结合高效液相色谱法测定人血浆中伏立康唑蛋白结合率

目的：分别建立超滤法和溶剂萃取法处理样品,结合高效液相色谱（HPLC）法测定人血浆中伏立康唑游离型药物浓度C_u和总血药浓度C_t,并计算蛋白结合率。方法：游离型药物浓度采用Millipore Centrifree超滤装置前处理,以外标法测定;总血药浓度测定采用内标法,经蛋白沉淀、溶剂萃取、复溶后测定。结果：游离型药物浓度和总血药浓度的线性范围分别为0.20~12.64 μg·mL^-1和0.02~10.24 μg·mL^-1;游离型药物浓度和总血药浓度的准确度和精密度均在±15%范围内,ICU患者的伏立康唑血浆蛋白结合率为42.4%。结论：本方法前处理方法便捷,选择性强,准确度高,可用于人血浆中伏立康唑蛋白结合率的测定。     

微透析-高效液相色谱法测定米诺环素大鼠血液和脑内的药动学

目的:研究米诺环素在大鼠血液和脑内的药动学。方法:采用微透析结合高效液相色谱技术,测定米诺环素大鼠血浆蛋白结合率;大鼠尾静脉注射米诺环素,测定给药后10h内不同时间点大鼠血液、海马CA1区中游离药物的浓度。结果:米诺环素大鼠血浆蛋白结合率为82.08%,给药后迅速进入脑组织,在给药后3.83h左右浓度达到峰值,其后缓慢下降,脑组织的游离药物-时间曲线下面积(AUC0-10h)可达血液的62.42%。结论:微透析结合高效液相色谱技术可以测定米诺环素的大鼠血浆蛋白结合率,并实现大鼠血液和脑组织中游离米诺环素浓度的动态监测。结果表明米诺环素易于透过血脑屏障,且能长时间维持较高浓度,从而发挥其神经保护作用。     

吗啡游离浓度测定及人血红蛋白结合研究

目的　建立人血红蛋白溶液中吗啡游离浓度测定方法 ,了解吗啡与血红蛋白的结合率 ,计算相关参数。方法　采用超滤法分离出游离吗啡 ,高效液相色谱法测定游离吗啡浓度 ,以总浓度减去游离浓度的差值与总浓度的比值为吗啡-血红蛋白结合率。结果　吗啡的超滤平均回收率为98 5 % ,测定的精密度为 1 1%～ 1 5 %。在体外 ,吗啡总浓度在 8 5 0× 10 -5～ 1 17× 10 -2 mol·L-1、人血红蛋白浓度在1 2 9× 10 -4～ 8 5 7× 10 -4mol·L-1范围内 ,吗啡与人血红蛋白具单一类型结合部位 ,吗啡 -血红蛋白结合参数 :人血红蛋白结合部位数 (N)为 4 1,吗啡 -血红蛋白结合常数 (K)为 30 4L·mol-1。结论　超滤法结合高效液相色谱法是一种简便、快速的游离药物浓度测定方法 ,适用于药物蛋白结合率试验研究。在体外 ,吗啡与血红蛋白结合率随吗啡与血红蛋白浓度变化     

液相微萃取-后萃取光化学荧光高效液相色谱法测定生物样品中甲氨蝶呤的含量

目的:采用液相微萃取-后萃取光化学荧光高效液相色谱法测定生物样品中甲氨蝶呤的含量。方法:应用自制的液相微萃取装置,在0.05mol.L-1盐酸酸性介质中,甲氨蝶呤以分子状态首先被聚醚砜中空纤维孔壁中的正丁醇萃取,继而被25μL0.05mol.L-1氨水溶液后萃取。后萃取液用等体积的0.2mol.L-1盐酸酸化后,经紫外光照射45min,发生光化学反应,取样20μL进行高效液相色谱分析,在λex=275nm,λem=370nm荧光检测,建立了液相微萃取-后萃取-光化学荧光高效液相色谱法测定生物样品中甲氨蝶呤含量的方法。结果:该方法在血浆和尿液中的浓缩倍数可达20~24倍,线性范围分别为0.05~50mg.L-1和0.01~50mg.L-1,检出限分别为10μg.L-1和5μg.L-1,RSD<11%。通过液相微萃取-后萃取,能有效地去除生物样品中干扰甲氨蝶呤测定的内源性杂质,提高了选择性。结论:该方法将液相微萃取和光化学荧光-高效液相色谱法相结合,为生物样品中甲氨蝶呤的检测提供了一种有效的分离分析方法。     

固相萃取结合高效液相色谱法测定人血浆中酒石酸唑吡坦的浓度

目的:建立固相萃取结合高效液相色谱法测定人血浆中酒石酸唑吡坦浓度。方法:血样经固相萃取法提取,采用大连依利特色谱柱(Hypersil BDS C₁₈),流动相:甲醇-乙腈-水（45∶45∶110）,流速1.0ml·min^-1,柱温:35℃;检测波长:254 nm,内标法定量。结果:血浆中酒石酸唑吡坦浓度在0.511 5⁴.092 0μg·ml^-1线性关系良好,相对回收率大于90%,精密度日间、日内RSD均小于10%。结论:该测定方法简单、快速、准确、干扰小,适用于临床测定酒石酸唑吡坦药物浓度。     

液相微萃取-非水后萃取-高效液相色谱法测定大鼠体内厚朴酚与和厚朴酚的浓度

目的:建立液相微萃取-非水后萃取(LPME/NBE)-高效液相色谱法同时测定大鼠体内厚朴酚及和厚朴酚浓度的方法.方法:利用自制的液相微萃取装置,以正丁醇为萃取溶剂,以600 r·min-1转速萃取10 min,对大鼠血浆、肝脏和肾脏生物样品中的厚朴酚与和厚朴酚进行分离、萃取、纯化.色谱条件:ODS为色谱柱,甲醇-水(82∶18)为流动相,294 nm为检测波长.结果:厚朴酚与和厚朴酚线性范围分别为0.15～30.0 mg·L-1和0.10～30.0 mg·L-1,r＞0.900;RSD＜7.5%;平均回收率分别为93.7%～114%和90.5%～109%,血浆中检出限分别为30 μg·L-1和20μg·-1,肝脏中分别为25μg·L-1和15 μg·L-1,肾脏中均为10μg·L-1.结论:首次提出液相微萃取-非水后萃取方法,并将其成功应用于中药厚朴酚与和厚朴酚在大鼠体内的浓度测定.液相微萃取-非水后萃取能有效去除生物样品中干扰厚朴酚与和厚朴酚测定的内源性杂质,提高选择性.     

反相高效液相色谱法测定人血清齐拉西酮浓度

目的建立人血浆齐拉西酮浓度的反相高效液相色谱(RP-HPLC)测定方法,用于临床进行药物浓度监测。方法血清样品经乙醚液萃取后,采用高效液相色谱法进行分析。Zorbax Eclipse XDB C18柱分离,流动相采用甲醇-0.03 mol.L-1醋酸铵溶液(70∶30),利用阵列二极管检测器(检测波长254 nm),柱温30℃。结果内源性物质不干扰测定,齐拉西酮的线性范围为10～1 000 ng.mL-1(R2=0.991 7),最低定量限为10 ng.mL-1,基质效应为92.1%～106.7%(n=5),提取回收率为72.3%～80.4%(n=5),日内和日间精密度(RSD)分别为4.7%～6.4%(n=5)和8.9%～12.1%(n=5)。结论建立的RP-HPLC方法简便、灵敏、准确、所需样本量小,可以用于临床血清齐拉西酮浓度测定。     

阿比朵尔人血浆蛋白结合率的测定

目的:建立测定阿比朵尔血浆药物浓度的高效液相色谱法(HPLC),并考察阿比朵尔的人血浆蛋白结合率。方法:采用平衡透析法结合HPLC,对阿比朵尔的人血浆蛋白结合率进行测定。结果:低、中、高3种浓度下,阿比朵尔的血浆蛋白结合率分别为90．1％,91．1％和89．8％。结论:本方法灵敏度高,重现性好,操作简单,能满足药品分析要求。阿比朵尔与血浆蛋白具有较强的结合。     

固相萃取结合高效液相色谱法测定人血浆中格列齐特浓度

目的建立固相萃取结合高效液相色谱法测定格列齐特血药浓度的方法。方法采用固相萃取方法对血浆样品进行前处理。色谱柱为Zirchrom,流动相为乙腈-0.2%冰醋酸(60∶40),紫外检测波长为229nm,柱温为40℃,流速为1.0ml/min,以格列吡嗪为内标测定格列齐特血药浓度。结果格列齐特检测浓度在0.1～10.0μg/ml范围内线性关系良好(r=0.9966),平均回收率为99.96%,日内、日间精密度均在10%以下。结论本方法简单,测定结果准确,干扰小,适用于格列齐特的药动学及生物利用度研究。     

高效液相色谱与串联质谱法测定游离丙戊酸钠与人血浆蛋白的结合率

目的:建立高效液相色谱与串联质谱法,考察丙戊酸钠在人血浆中的蛋白结合率。方法:采用中空纤维前处理技术结合高效液相与串联质谱法,测定游离丙戊酸钠的浓度,采用蛋白沉淀法测定人血浆中总的丙戊酸钠的浓度。结果:低、中、高3种浓度下,丙戊酸钠的血浆蛋白结合率分别为88.27%、89.63%、95.55%。结论:建立的方法经方法学考察能满足药品分析要求。     

用中空纤维液相微萃取-HPLC法测定人血浆中酒石酸美托洛尔的浓度

目的:建立中空纤维液相微萃取-HPLC法测定人血浆中酒石酸美托洛尔的浓度.方法:优化酒石酸美托洛尔液相微萃取法供给相和接受相的浓度、萃取时间、萃取温度、萃取转速和离子强度,血浆样品经中空纤维液相微萃取法萃取后,用HPLC法测定酒石酸美托洛尔的浓度.色谱柱:Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18柱,流动相:甲醇-0.1％磷酸(40∶60),流速:1 ml/min,激发波长:227 nm,发射波长:305 nm,柱温:30℃.结果:酒石酸美托洛尔在2～ 125 ng/ml线性关系良好,低、中、高三种浓度(5、20、100 ng/ml)的日内、日间精密度均＜10％,回收率分别为(87.1±7.3)％、(92.6±5.8)％和(89.1±2.5)％.结论:中空纤维液相微萃取-HPLC法适用于测定血浆样品中酒石酸美托洛尔的浓度.     

高效液相色谱法测定姜黄素清蛋白纳米粒中药物含量与包封率

目的建立测定姜黄素清蛋白纳米粒中主药含量及包封率的方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Hypersil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-4%冰醋酸(55∶45);流速:1.0 mL.min-1;柱温:30℃;检测波长:425 nm;进样量:20μL;采用低温超速离心法分离姜黄素清蛋白纳米粒和游离药物,测定包封率。结果姜黄素在0.102～16.32μg.mL-1浓度范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为(99.96±1.01)%(n=9),以标示量计平均含量为(100.31±0.94)%,平均包封率为(71.13±1.30)%。结论该方法灵敏、简便、准确,适用于姜黄素清蛋白纳米粒药物含量及包封率的测定。     

人血浆中盐酸莫雷西嗪的高效液相色谱法测定及其药物动力学研究

目的建立测定人血浆中莫雷西嗪浓度的高效液相色谱法。方法色谱柱:HypersilODS-2(150mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇∶水∶三乙胺(70∶30∶0.4),v/v/v,pH6.8);检测波长:268 nm;以氯氮平作为内标,测定人血浆中的莫雷西嗪药物浓度。结果莫雷西嗪浓度线性范围为0.04~4 mg/L,回归方程Y=11.42X+1.441,r=0.999 2;回收率96.1%,日内和日间精密度(RSD)分别为4.7%和5.3%,整个测定时间8 min左右。结论该方法简便、快速、准确,适用于临床上莫雷西嗪药物动力学的研究。     

氯化两面针碱人血浆蛋白结合率的测定

目的建立测定人血浆中氯化两面针碱的高效液相色谱法,并研究氯化两面针碱与人血浆蛋白的结合情况。方法离子对试剂萃取技术对样品进行预处理,乙腈-0.15%磷酸(36:64,V:V,用三乙胺调pH值至3.5)为流动相,C_(18)柱(250mm×4.6mm,5μm)为固定相,紫外检测波长271nm,以氯霉素为内标,采用平衡透析法对氯化两面针碱的人血浆蛋白结合率进行测定。结果氯化两面针碱与内标完全分离,样品中其他成份无干扰,在0.03188～2.040mg·L~(-1)范围内线性关系良好,低、中、高3种不同质量浓度的方法回收率>95%,日内、日间精密度均符合方法学要求。低、中、高3种药物浓度的血浆蛋白结合率分别为68.9%、67.4%、67.9%。结论方法简便、快速,结果准确、可靠,能满足生物样品分析要求。氯化两面针碱具有中等强度的蛋白结合率,蛋白结合率与透析液的药物浓度无关。     

高效液相色谱法测定大鼠血浆中阿昔洛韦浓度及其与吉非替尼药物相互作用的研究

由于阿昔洛韦水溶性高,较难用普通高效液相色谱法测定其血浆中的药物浓度.本研究建立并验证了测定大鼠血浆中阿昔洛韦浓度的高效液相色谱方法,并将该方法应用于与吉非替尼的药物相互作用研究中.采用Platisil ODS柱(4.6 mm×250 mm,5μm,迪马科技),检测波长254 nm,蛋白沉淀后再用甲基叔丁基醚萃取进行样...     

平衡透析法测定具栖冬青苷和毛冬青酸的大鼠血浆蛋白结合率

目的建立测定具栖冬青苷、毛冬青酸血药质量浓度的方法,并测定其大鼠体外血浆蛋白结合率。方法采用高效液相色谱法和平衡透析法测定具栖冬青苷、毛冬青酸在大鼠体外血浆中的血浆蛋白结合率。结果低、中、高3种质量浓度,具栖冬青苷在大鼠体外血浆中的蛋白结合率分别为39.72%±2.68%,52.05%±3.35%和52.32%±0.76%;毛冬青酸在大鼠体外血浆中的蛋白结合率分别为55.18%±3.66%,60.79%±2.20%和47.00%±1.59%。结论建立HPLC法对具栖冬青苷和毛冬青酸进行分离,方法简便。体外实验,具栖冬青苷和毛冬青酸与大鼠血浆属中等结合型药物,且蛋白结合率与药物质量浓度无关。