阴沟肠杆菌AmpC酶的检测及耐药性分析

目的了解阴沟肠杆菌ESBLs和AmpC酶的产生情况及对临床常用抗生素的耐药特征,为临床治疗提供选药参考。方法应用VITEK-60型全自动细菌鉴定仪鉴定细菌,按NCCLS推荐的确证试验测定ESBLs和K-B纸片法测定药敏结果,采用头孢西丁纸片扩散法对阴沟肠杆菌进行产AmpC酶菌株筛;选,并用酶粗提物进行三维试验确证产AmpC酶菌株。结果阴沟肠杆菌产AmpC酶菌株的检出率为6.19%,并且所检测的7株产AmpC酶的阴沟肠杆菌均为同产ESBLs,目前,我们还未检测到单产AmpC酶菌株。AmpC酶阳性菌株与AmpC酶阴性菌株药敏结果显示：前者大多对头孢西丁、头孢唑啉、氨苄西林、哌拉西林、庆大霉素、阿米卡星、环丙沙星呈高度耐药,而后者大多对上述药物敏感,两者有显著性差异（均P〈0.05）。头孢他啶、头孢噻肟、氨苄西林/舒巴坦、头孢哌酮/舒巴坦呈中度耐药。两者对亚胺培南、头孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦均为敏感。结论玉环地区阴沟肠杆菌产AmpC酶细菌检出率较高。产AmpC酶菌株多呈多重耐药;亚胺培南、头孢吡肟、哌拉西林他唑巴坦是治疗产AmpC酶菌株感染的较可靠药物。     

临床分离产AmpC β-内酰胺酶阴沟肠杆菌的耐药性分析

目的研究我院临床分离阴沟肠杆菌的产AmpC酶耐药情况及ampC基因型。方法收集临床分离的耐药阴沟肠杆菌15株；检测产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的菌株；测定MIC值；PCR扩增检测ampC基因及序列测定。结果15株菌中8株菌（53．3％）产AmpC酶，3株菌（20．0％）产ESBLs。产AmpC酶的菌株除对亚胺培南全敏感外。对其它抗菌药不同程度耐药。ampC基因与阴沟肠杆菌ECLC074的ampC基因高度同源。结论产AmpC酶是阴沟肠杆菌对阻内酰胺类抗生素耐药的主要机制之一。阴沟肠杆菌ECLC074 ampC基因是我院主要的阴沟肠杆菌ampC基因型。产AmpC酶的阴沟肠杆菌常呈多重耐药，亚胺堵南是治疗此类菌所致感染的最有效药物。     

产AmpC酶阴沟肠杆菌耐药的基础与临床

目的 对四川大学华西医院阴沟肠杆菌产AmpC酶菌株的检出率、耐药性及ampC结构基因序列进行分析．探讨阴沟肠杆菌产AmpC酶菌株的耐药性及临床特点。方法 采用琼脂稀释法对临床标本中分离的阴沟肠杆菌进行产AmpC酶株的筛选，用酶粗提物头孢西丁三维试验结合PCR法检测AmpC酶．并测定产AmpC酶菌株对9种抗菌药物的MIC值。对3株高度耐药阴沟肠杆菌产AmpC酶的结构基因和1株敏感菌进行PCR扩增并对产物序列进行分析，测序的菌株与E。cloacae p99进行核苷酸序列比较和推导的氨基酸序列比较。结果 阴沟肠杆菌产AmpC酶株的检出率为24．6％。产AmpC酶菌株多呈多重耐药，产AmpC酶耐药菌对9种抗菌药物的耐药率由高至低为头孢西丁、头孢噻肟、阿米卡星、氨曲南、头孢他啶、头孢哌酮／舒巴坦、环丙沙星、头孢吡肟、亚胺培南。阴沟肠杆菌耐药株ampC结构基因的核苷酸序列与E.cloacae p99的同源性为99％．推导的氨基酸序列仅Ala-58→Pro发生点突变。结论 四川大学华西医院阴沟肠杆菌产AmpC酶细菌检出率较高。产AmpC酶细菌多呈多重耐药，亚胺培南是治疗产AmpC酶细菌感染的较可靠的药物。阴沟肠杆菌产AmpC酶是其对β-内酰胺类抗生素耐药的原因之一，其ampC结构基因突变可能与其耐药性有关。     

阴沟肠杆菌产AmpC β-内酰胺酶的流行情况调查

目的了解我国临床分离的阴沟肠杆菌中,诱导性产AmpC酶菌株和组成性高产AmpC酶菌株的发生率.方法用标准纸片扩散法药敏试验对106株临床分离的阴沟肠杆菌进行筛选,对头孢他啶、头孢噻肟、头孢曲松或氨曲南耐药或中介则为初筛阳性,阳性菌株全部进行酶粗提物三维试验和等电聚焦电泳,以进一步对产酶情况进行分析.全部初筛阴性菌株和初筛阳性而三维试验阴性菌株均进行AmpC酶诱导定性试验,以检出其中的诱导性产AmpC霉酶菌株.结果106株阴沟肠杆菌中,42株(39.6%)对头孢他啶、头孢噻肟、头孢曲松或氨曲南耐药或中介,31株(29.2%)组成性高产AmpC酶,68株(64.2%)诱导性产AmpC酶.高产AmpC酶菌株主要分离自痰标本(64.5%)、各种外科感染标本(19.4%)和尿标本(9.7%),其中,痰标本中高产AmpC酶菌株所占比例最高(37.0%).结论在我国临床分离的阴沟肠杆菌中,由AmpC酶介导的第三代头孢菌素耐药问题已经较为严重,必须尽快采取有效措施遏制高产AmpC酶菌株的蔓延.     

呼吸内科产AmpC酶阴沟肠杆菌感染的耐药性分析

目的观察分析呼吸内科产AmpC酶阴沟肠杆菌感染的耐药性,总结其临床意义。方法选取我院2009年7月至2011年7月呼吸内科阴沟肠杆菌感染的患者,分离出阴沟肠杆菌共172株,设为观察组;再选取非呼吸内科阴沟肠杆菌感染的患者,分离出阴沟肠杆菌共238株,设为对照组,观察比较两组的药敏试验结果、感染部位及感染的病区分布情况。结果观察组172株菌株中,产AmpC酶率为47.1%(81/172);对照组238株菌株中,产AmpC酶率为17.6%(42/238),两组菌株的产AmpC酶率比较存在明显差异(χ2=19.88,P<0.01),具有统计学意义。结论呼吸内科产AmpC酶阴沟肠杆菌感染率显著高于其他科室,因此,需要给予高度重视,同时呼吸内科产AmpC酶阴沟肠杆菌感染的耐药性明显。     

阴沟肠杆菌超广谱β-内酰胺酶、AmpC酶基因检测及耐药性分析

目的了解阴沟肠杆菌超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和AmpC酶的产生情况，研究β-内酰胺酶的基因型别，并分析产酶特性和耐药表型的相关性。方法用酶提取三维试验检测ESBLs和AmpC酶，聚合酶链反应（PCR）扩增β-内酰胺酶的基因；VITEK全自动药敏分析系统和KB法检测细菌耐药性。结果101株阴沟肠杆菌中，检出ESBLs阳性株39株，高产AmpC酶阳性株53株，其中16株ESBLs和AmpC酶均阳性，非产酶菌25株；12株AmpC酶阳性菌中，7株扩增出blaDHA。基因，8株扩增出6laMIR基因，其中5株同时携带blaDBA．和blaMIR基因，1株同时携带blaMIR和blaFOX基因，4株三维试验阴性菌株blaMIR基因阳性；16株ESBLs阳性菌中，8株扩增出blaTEM基因，2株ESBLs三维试验阴性菌株blaTEM基因阳性，未检出blaSHV基因。阴沟肠杆菌对多种抗生素高度耐药，产酶菌株的耐药性明显高于非产酶株。结论阴沟肠杆菌中ESBLs和AmpC酶检出率均很高，AmpC酶以blaDHA、blaMIR基因型为主。产ESBLs和AmpC酶是阴沟肠杆菌耐药的主要原因。     

76株阴沟肠杆菌产ESBLs和AmpC酶的检测

目的 了解临床分离的阴沟肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和头孢菌素酶（AmpC）及与耐药性的关系。方法 采用纸片表型确证法、表型筛选法与三维试验法分别检测76株临床分离阴沟肠杆菌的ESBLs和去阻遏持续高产AmpC酶,同时用K-B法检测体外药敏结果。结果 在76株阴沟肠杆菌中,纸片表型确证法检出产ESBLs菌株22株,占28．9％;表型筛选法检出产AmpC酶菌株30株,占39．5％;三维试验检出产AmpC酶菌株26株,占34．2％;同时产两种酶菌株4株,两种酶均不产菌株24株。对亚胺培南、哌拉西林／他唑巴坦、头孢吡肟、氨曲南的体外药物敏感率产AmpC酶菌株敏感率分别为100．0％、84．6％、84．6％、76．9％,产ESBLs菌株分别为100．0％、90．9％、54．5％、27．3％。结论 产ESBLs和AmpC酶是阴沟肠杆菌耐药的主要机制,亚胺培南、哌拉西林／他唑巴坦和头孢吡肟对产酶株的效果较好。     

肠杆菌科细菌AmpC酶与基因的检测及耐药分析

目的 研究肠杆菌科细菌产AmpC酶情况以及对抗生素的敏感性。方法 收集临床分离的第3代头孢菌素耐药肠杆菌科细菌62株。K-B法对13种抗菌药物敏感性、头孢西丁(FOX)耐药性进行初步筛选;酶粗提物头孢西丁三维实验检测AmpC酶;PCR对产酶菌株AmpC结构基因进行分析。结果 62株肠杆菌科细菌对亚胺培南、头孢吡肟及阿米卡星耐药率低,对氨苄西林-舒巴坦、头孢曲松、头孢他啶等抗菌药物的耐药率较高,FOX的初筛阳性菌有22株;其中17株检测到AmpC基因,并且8株细菌三维实验阳性。结论 产AmpC酶菌株对各种抗生素的耐药率比非产酶菌株明显增高。治疗产AmpC酶细菌所引起的感染以亚胺培南或头孢吡肟为首选,左氧氟沙星、阿米卡星等可作为选用药物之一。     

产"超-超广谱"β-内酰胺酶革兰阴性杆菌的耐药表型及基因分析

目的 首次分析本地区产超-超广谱β-内酰胺酶(super-spectrum β-lactamase,SSBLs)菌株的耐药性及分子流行病学现状.方法 收集自2008年1月～2009年6月本院从临床分离的对头孢西丁和头孢他啶耐药的革兰阴性杆菌105株,采用改良三维试验与质粒结合实验筛选产SSBLs菌株,通过药敏试验鉴定其耐药表型,运用PCR扩增检测其ESBLs基因型与AmpC酶基因型.结果 筛选出的2株产SSBLs菌株(1株阴沟肠杆菌和1株大肠埃希菌)均表现为多重耐药,仅对亚胺培南敏感.阴沟肠杆菌质粒编码的ESBLs基因型为TEM、CTX-M,AmpC酶基因型为ACT;大肠埃希菌质粒编码的ESBLs基因型为SHV、CTX-M,AmpC酶基因型为ACT.结论 本院存在产SSBLs革兰阴性杆菌引起的感染,但此类菌株尚未在本院传播流行,ACT型是SSBLs菌株质粒AmpC酶主要基因型.     

AmpC酶、超广谱β-内酰胺酶在下呼吸道感染细菌检测中的临床研究

目的探讨下呼吸道感染标本常见革兰阴性杆菌分离株中AmpC酶和超广谱β-内酰腔酶（ESBLs）的检出情况。方法 通过酶提取物三维试验检测单产AmpC酶、单产ESBLs、同时产AmpC酶和ESBLs菌株。结果 280株革兰阴性杆菌耐药株中检出单产AmpC酶菌株43株，以阴沟肠杆菌检出率最高。单产ESBLs菌株134株，以肺炎克雷伯菌检出率最高。同时产AmpC酶和ESBLs菌株19株，以阴沟肠杆菌检出率最高。结论 正确区分ESBLs和AmpC酶，对临床选择性用药具有重要的意义。     

3种第3代头孢菌素对常见肠杆菌科细菌的体外抗菌活性比较

目的比较头孢他啶、头孢曲松、头孢哌酮3种第3代头孢菌素对临床常见肠杆菌科细菌的体外抗菌活性。方法收集2011年8月至11月医院临床分离的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌各30株,阴沟肠杆菌22株,用Kirby—Bauer琼脂扩散法做体外药物敏感性试验,并采用NCCLS推荐表型确认试验检测超广谱B一内酰胺酶（ESBLs）。结果82株肠杆菌科细菌对头孢他啶的耐药率（40．24％）低于头孢曲松（60．98％）及头孢哌酮（62．20％）,其中阴沟肠杆菌对3种头孢菌素的整体耐药率最高。60株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中,检出产ESBLs阳性菌株22株,检出率为36．67％。结论3种头孢菌素中头孢他啶对临床常见肠杆菌科细菌体外抗菌活性优于头孢曲松和头孢哌酮。产ESBLs是肠杆菌科细菌对β-内酰胺类抗菌药物耐药的重要机制,应加强产ESBLs茵的检测及采取有效控制措施,以指导临床合理使用第3代头孢菌素。     

阴沟肠杆菌感染高危因素分析

目的研究加强监护病房（intensive care unit,以下简称ICU）内阴沟肠杆菌感染的临床、药敏以及细菌学的特点。方法回顾性分析ICU中83例院内阴沟肠杆菌感染病例。结果高龄、低蛋白血症、侵入性操作、长期住院及使用广谱抗生素是阴沟肠杆菌感染主要的高危因素。阴沟肠杆菌具有多重耐药性,除了亚胺培南对其敏感性较高外,它对多种抗生素耐药率超过了50％。结论减少侵入性操作和广谱抗生素的长期使用,根据药敏结果选择抗生素,能减少阴沟肠杆菌感染的发生。     

临床分离阴沟肠杆菌的分布及耐药性分析

目的 调查阴沟肠杆菌的临床分布及耐药性变化以指导临床抗感染治疗.方法 采用美国Dade MicroScan公司生产的AutoSCAN4半自动鉴定仪和配套的生化反应药敏板及微最稀释法,对287株阴沟肠杆菌进行分离鉴定和药敏试验,并对其分布及耐药情况进行分析.结果 287株阴沟肠杆菌主要标本来源为痰液[146株(50.9%)],科室分布中加强监护病房是主要感染区[58株(20.2%)].阴沟肠杆菌对亚胺培南的耐药率较低(平均耐药率为6.27%),对是哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、左氧氟沙星的平均耐药率分别是27.91%、34.49%、36.40%,其余抗菌药物耐药率均＞40%.结论 临床上应及时正确治疗严重的基础疾病、严格消毒灭菌、避免或缩短侵入性操作、合理应用抗菌药物和激素,以减少阴沟肠杆菌耐药性的产生和播散.

Abstract：

Objective To investigate the clinical distribution of enterobacter cloacae and the change in drug resistance,to give instructions on clinical anti-infectious therapy. Methods Two hundreds and eighty-seven enterobacter cloacae were identified,isolated and performed drug sensitive test by using AutoSCAN4 (Dade MicroScan,USA) and the matching drug susceptibility plate. Results One hundred and forty-six enterobacter cloacae (50.9%) were isolated from expectoration specimen,while 58 enterobacter cloacae (20.2%) were isolated from the specimen from ICU. Enterobacter cloacae showed a low drug resistance rate to imipenem (6.27%),followed by piperacillin/tazobactam (27.91%),amikacin (34.49%),and levofloxacin (34.49%). The rates to other anti-biotic drugs were higher than 40%. Conclusions In the process of clinical treatment,in order to reduce the possibility of the enterobacter cloacae and its generation of drug resistance,physicians should treat primary disease,perform sterilization,avoid invasive treatment and choose the drugs reasonably according to the antibiotic susceptibility results.     

重症监护病房革兰阴性杆菌耐药性监测分析

目的：了解川北医学院附属医院重症监护病房（ICU）革兰阴性菌的分离率及耐药情况。方法采用Bio-Merieux VITEK-32全自动细菌鉴定系统对细菌进行鉴定,琼脂稀释法进行药敏试验,双纸片表型确证试验检测产ESBLs 菌株,结果用美国临床实验室标准化协会（CSLI）2006年公布的标准进行判定。结果 ICU 分离454株革兰阴性杆菌,大肠埃希菌180株（占39.6%）,鲍曼不动杆菌78株（占17.2%）,阴沟肠杆菌59株（13.0%）,铜绿假单胞菌51株（占11.2%）,洋葱伯克霍尔德菌46株（占10.1%）为主。其中,超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌和阴沟肠杆菌的检出率分别达54.5%和39.0%。且大多数革兰阴性杆菌对临床常用抗菌药高度耐药或多重耐药。结论该院 ICU 革兰阴性杆菌分离率高,临床耐药严重。     

阴沟肠杆菌对抗菌药物耐药性分析

目的了解阴沟肠杆菌的耐药现状,指导临床合理用药。方法采用K～B纸片扩散法对临床感染病例标本中分离出的56株阴沟肠杆菌进行10种抗生素药敏试验。结果阴沟肠杆菌对青霉素、氨苄西林、头孢唑啉、氯霉素及哌拉西林的耐药率分别为76．8％、75．0％、67．9％、66．1％和62．5％,对头孢哌酮的耐药率最低（7．1％）’敏感性达87．5％。结论头孢哌酮是治疗阴沟肠杆菌感染较为理想的药物。     

小儿呼吸道感染痰液培养细菌构成及药敏分析

目的 了解某院儿科呼吸道感染的患儿痰液培养细菌构成及药敏的耐药情况.方法 对2011年1月到2012年5月儿科呼吸道感染的1 451例患儿进行深部吸痰并进行细菌培养,对培养出的致病菌株进行药敏实验.结果 从1 451份痰标本中分离出273株致病菌,阳性率为18.8%,其中革兰阳性菌52株（19.0%）,革兰阴性菌198株（72.5%）,其他26株（9.5%）,培养分离的细菌排前列是大肠埃希氏菌58株（21.2%）、流感嗜血杆菌51株（18.7%）、金黄色葡萄球菌42株（15.4%）、肺炎克雷伯氏菌34株（12.5%）、阴沟肠杆菌16株（5.9%）、产酸克雷伯菌14株（5.1%）、铜绿假单胞菌9株（3.3%）、肺炎链球菌7株（2.6%）.体外药敏试验表明阴性杆菌对亚胺培南、阿米卡星,哌拉西林/他唑巴坦较为敏感,阳性球菌对万古霉素、利福平、复方新诺明较为敏感.结论 了解小儿呼吸道感染的细菌分布及细菌的耐药状况,可以指导临床合理运用抗生素,减少细菌耐药菌株的增多.     

我院产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的耐药性分析

目的:了解我院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌(ECO)的耐药现状,为临床合理用药提供依据.方法:将1999年1月- 2011年9月我院分离ECO的药敏试验结果,应用WHONET 5.5软件进行统计学分析;产ESBLs菌株采用双纸片协同实验测定并经美国临床实验室标准化协会确证试验确认.结果:ECO和产ESBLs ECO的分离率为21.6%和63.9%.产ESBLs菌株的耐药率远高于非产ESBLs菌株.产ESBLs ECO除对亚胺培南、阿米卡星、呋喃妥因和头孢哌酮钠舒巴坦钠敏感率较高外,对其他抗菌药物耐药严重.结论:我院应重视对产ESBLs菌株的监控,临床应合理应用抗菌药物;碳青霉烯类是治疗产ESBLs ECO最有效的药物.     

小儿阑尾炎病原学分析

目的 了解儿童阑尾炎病原菌及抗生素耐药情况,为临床正确使用抗生素提供参考.方法 对2009年11月至2011年11月住院的阑尾炎患儿进脓液涂片及培养,按照<全国临床检验技术操作规程>进行细菌分离及鉴定,用K-B纸片扩散法进行药物敏感试验.结果 140株病原菌中,以革兰阴性杆菌118株,占84.29%,而其中大肠埃希菌90株,其次为铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌;革兰阳性球菌19株,占13.57%,金黄色葡萄球菌居首位,其次为粪肠球菌及屎肠球菌;真菌3株,占2.14%.混合感染10例.结论 儿童阑尾炎病原菌革兰阴性菌以大肠埃希菌为主,革兰阳性菌以金黄色葡萄球菌为主.临床医师应对阑尾炎患儿及早进行病原学检测及药物敏感实验,并特别关注超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和MRSA的病例.参考细菌药敏结果合理使用抗生素.     

我院2012年10月-2013年3月革兰阴性杆菌产ESBLs和AmpC酶检测及耐药性分析

目的:了解我院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和头孢菌素酶(AmpC)革兰阴性杆菌的耐药性,为临床合理用药提供参考。方法:收集我院2012年10月-2013年3月临床分离出的革兰阴性杆菌。用头孢硝噻吩纸片检测革兰阴性杆菌产β-内酰胺酶情况,双纸片法检测产ESBLs情况,头孢西丁三维试验检测产AmpC酶情况,以确定产酶表型。用K-B法进行药敏检测。结果:103株革兰阴性杆菌中,单产AmpC酶菌42株(40.8%),单产ESBLs菌21株(20.4%),同时产ESBLs和AmpC酶菌12株(11.7%)。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对含酶抑制剂复方制剂如哌拉西林/他唑巴坦,以及碳青霉烯类抗生素亚胺培南和氨基糖苷类抗生素阿米卡星的耐药率均较低。非发酵菌铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对各抗生素耐药率均较高。结论:各革兰阴性杆菌产酶菌株对多种抗生素的耐药率较高,产ESBLs和AmpC酶可能是导致革兰阴性杆菌耐药的主要机制之一。     

尿源性大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药监测

目的:了解本地区泌尿道分离大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)情况及耐药现状。方法:采用法国梅里埃ATB-Expression分析仪进行细菌鉴定,用K-B法进行药敏试验,并用纸片确证试验检测ESBLs。结果:产ESBLs大肠埃希菌检出率为31.8%,107株大肠埃希菌对亚胺培南100%敏感,对其余抗生素出现不同程度的耐药,产ESBLs株耐药率明显高于非产ESBLs株。结论:产ESBLs大肠埃希菌耐药严重,应重视ESBLs的检测,根据药敏试验结果合理选用抗生素。