分子伴侣Tapasin在介导特异性细胞毒性T淋巴细胞反应中的作用

病毒及肿瘤细胞的清除很大程度上依赖于特异性CD8＋细胞毒性T淋巴细胞（CTL）,CTL通过T细胞受体（TCR）特异性识别病毒肽段并通过MHC-I类分子提呈引起感染细胞融解,经典MHC-I类分子在内质网内的装配要求有抗原肽配体和β2微球蛋白（β2m）的存在,而这一过程需要伴侣分子（chaperones）如Tapasin的参与。Tapasin是抗原递呈相关转运体（TAP）相关蛋白的基因产物,与MHC-I类分子同为免疫球蛋白超家族成员,在介导特异性CTL反应中有着重要作用,本文简述了Tapasin分子结构特征、在介导特异性CTL反应中的作用及与疾病的联系。     

葫芦素B对小鼠的免疫增强作用

葫芦素B（CuB）是中药甜瓜蒂的主要成分，为四环三萜类物质。葫芦素B0.1mg/kg即能提高小鼠外周血液T淋巴细胞数；0.2mg/kg能提高PHA诱导的T淋巴细胞转化率和脾脏空斑形成细胞数；0.4mg/kg时血清溶血素水平也明显增加。较大剂量（0.8mg/kg）时碳粒廓清率及腹腔巨噬细胞吞噬率显著提高。结果表明：葫芦素B能增强整个免疫系统功能，对细胞免疫的作用最强，对体液免疫也有较强作用。     

乳腺癌干细胞RNA-DCs疫苗诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞抗肿瘤免疫应答

目的制备负载乳腺癌干细胞RNA的树突状细胞(DCs)疫苗,研究其诱导的特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)的抗肿瘤免疫反应。方法采用细胞毒性试剂盒检测2种乳腺癌干细胞疫苗[(A组,CD44+CD24-+MCF-7-CTLs)、(B组,MCF-7-CTLs)]和DC-CTLs(C组)的体外细胞杀伤能力。取24只小鼠均分为四组:A1组皮下接种活化的A组疫苗+MCF-7乳腺癌细胞;B1组接种活化的B组疫苗+MCF-7乳腺癌细胞;C1组皮下注射活化的DCs-CTLs+MCF-7乳腺癌细胞;D1组单用MCF-7乳腺癌细胞作为对照。分析裸鼠接种后肿瘤在体内的生长情况。结果体外对CD44+CD24-+MCF-7乳腺癌细胞杀伤能力强度:A组>B组>C组(P<0.05)。体外对MCF-7乳腺癌细胞杀伤能力强度:B组>A组>C组(P<0.05)。在体成瘤实验显示,B1组和A1组的成瘤时间分别为第7周和第6周,明显长于D1组(第1周)和C1组(第2周)(P<0.05)。结论 CD44+CD24-乳腺癌干细胞RNA-DCs疫苗诱导的CTLs能够产生特异性免疫应答,从而抑制乳腺癌细胞成瘤。     

沙利度胺对人T淋巴细胞的免疫调节作用

目的 探讨沙利度胺(Thd)对健康人外周血T淋巴细胞的免疫调节作用.方法 健康人外周血T淋巴细胞经不同浓度Thd作用后,用MTT比色法检测其增殖情况,用流式细胞术检测其早期凋亡及CD28、CD152表达,用RT PCR检测其白细胞介素6(IL-6)、IL-10、肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA表达水平.结果 在体外,与阴性对照组相比,500μg/ml Thd组可促进T淋巴细胞的增殖、早期凋亡,抑制T淋巴细胞CD28的表达.100μg/ml Thd组可促进T淋巴细胞CD152表达.各剂量组均能抑制IL-6、TNF-α mRNA表达,100μg/ml和500μg/ml Thd可增强IL-10 mRNA的表达.结论 Thd可以通过影响T淋巴细胞的增殖、早期凋亡以及CD152、CD28,IL-6、TNF-α、IL-10 mRNA的表达,对健康人T淋巴细胞具有免疫调节作用.     

牡蛎水溶性抽提物对小鼠脾脏T淋巴细胞转化功能和NK细胞活性的影响

牡蛎软体部份水溶性油提物具有明显提高小鼠脾脏T淋巴细胞转化功能及NK细胞活性.表明牡蛎作为一种保健药品具有应用价值。     

牡蛎水溶性抽提物对小鼠脾脏T淋巴细胞转化功能和NK细胞活性的影响

牡蛎软体部份水溶性油提物具有明显提高小鼠脾脏T淋巴细胞转化功能及NK细胞活性.表明牡蛎作为一种保健药品具有应用价值。     

汉坦病毒灭活疫苗免疫小鼠后特异性细胞毒性T细胞克隆的研究

目的 探讨细胞毒性T细胞(Tc)在汉坦病毒灭活疫苗免疫保护机理中的作用。方法 采用T细胞克隆技术。结果 从用汉坦病毒L_(99)株灭活疫苗免疫的H-2~dBalb/C纯系小鼠脾细胞,获得6株病毒抗原特异性T细胞克隆,其表型为CD_3~+、CD_4~-、CD_8~+。体外杀伤试验表明,T细胞克隆可杀伤汉坦病毒感染的同基因型小鼠腹腔巨噬细胞。结论 灭活疫苗能诱导免疫小鼠产生特异性细胞毒性T细胞,这是重要的细胞免疫保护性机制之一。     

泥鳅多糖对小鼠脾细胞免疫应答的影响

目的:研究泥鳅多糖对小鼠脾细胞免疫应答的影响.方法:分别给正常小鼠、刀豆蛋白(ConA)或左旋咪唑免疫增强小鼠、环磷酰胺免疫抑制小鼠腹腔注射提取的泥鳅多糖,连续给药7d.用~H-胸苷掺入法测定T淋巴细胞的增殖.用~(51)Cr同位素标记法测定细胞毒T淋巴细胞的细胞毒性和天然杀伤细胞的活性.结果:泥鳅多糖5或10mg·kg~(-1)·d~(-1)可以提高T淋巴细胞的增殖,并增强细胞毒T淋巴细胞的细胞毒性和天然杀伤细胞的活性,还能增强ConA解除环磷酰胺对T淋巴细胞增殖抑制的能力,抑制率从环磷酰胺对照组的51.4％分别降低到18.2％和35.1％.而且,给予小鼠10或20mg·kg~(-1)·d~(-1)的泥鳅多糖,可以恢复环磷酰胺所致的天然杀伤细胞活性降低.结论:泥鳅多糖能增强小鼠脾细胞中T细胞、细胞毒T淋巴细胞和天然杀伤细胞的活性.     

基于细胞毒性T淋巴细胞抗原4研发的生物制剂的临床应用进展

免疫疗法是一种快速发展的治疗自身免疫病和癌症的方法。细胞毒性T淋巴细胞抗原4（cytotoxic T lymphocyte antigen 4,CTLA-4）是适应性免疫应答的主要抑制分子,也是该领域最著名和研究最广泛的分子。CTLA-4能够通过多种机制来调节和控制免疫细胞的功能。随着对CTLA-4研究的深入,科学家已经研发出CTLA-4类似物阿巴西普和针对CTLA-4的抗体伊匹木单抗。这两种针对CTLA-4的生物制剂,在自身免疫病和肿瘤疾病的治疗中具有广阔的应用前景。     

灵芝多糖对体外树突状细胞诱导细胞毒性T-淋巴细胞的调节作用(英文)

目的:研究灵芝多糖(Gl-PS)在抗原提呈阶段对体外培养树突状细胞(DC)诱导特异性细胞毒性T-淋巴细胞(CTL)功能的调节及其机制。方法:体外培养小鼠骨髓来源DC经P815肿瘤细胞冻融抗原冲击致敏,并与不同浓度Gl-PS(0.8,3.2,或12.8 mg/L)共培养。成熟DC与脾淋巴细胞共培养诱导P815特异性CTL生成。第5天收集各组悬浮细胞及培养上清,采用乳酸脱氢酶法比较CTL特异性杀伤活性;RT-PCR法测定T扰素γ(IFNγ)及颗粒酶B mRNA在CTL的表达;ELISA或Western blot法检测IFNγ或颗粒酶B蛋白的表达。结果:3种浓度的Gl-PS均可增高培养上清中释放的LDH活性(P<0.01);增加CTL表达IFN7及颗粒酶B mRNA(IFNγ:Gl-PS 12.8 mg/L组与RPMI-1640组,P<0.05;颗粒酶B:P<0.01);促进CTL培养上清中IFNγ蛋白生成(P<0.05)以及CTL表达颗粒酶B蛋白(Gl-PS 12.8 mg/L组与RPMI-1640组,P<0.05)。结论:Gl-PS可在抗原提呈阶段促进P815肿瘤冻融抗原冲击致敏DC所诱导的特异性CTL的杀伤活性,其机制可能是通过IFNγ及颗粒酶B途径的调节。     

双嘧达莫对小鼠免疫功能的影响

双嘧达莫Ｄｉｐ１，１０，４０ｍｇ·ｋｇ－１降低小鼠脾脏系数和末梢血白细胞数，抑制全血白细胞和腹腔巨噬细胞的吞噬功能。降低小鼠血清溶菌酶的含量和血清溶血素的生成，抑制空斑形成细胞的溶血能力。     

家兔主动脉血管平滑肌细胞内钙动员及小檗胺作用的共聚焦研究(英文)

观察小檗胺 ( Ber)对高钾除极 ,Bay K8644,5-羟色胺 ( 5- HT)及咖啡因升高细胞内钙水平( [Ca2 + ]i)的影响。以 Fluo- 3/AM负载家兔培养的主动脉平滑肌细胞 ( VSMC) ,共聚焦显微术测定[Ca2 + ]i,结果以荧光强度 ( FI)表示 .结果 :( 1 )在细胞外钙为 1 .3mmol· L-1时 ,VSMC胞浆静息 FI明显高于核区 ,且不受 Ber的影响 . ( 2 ) Ber 1 0 -1 0 0 μmol·L-1预处理可抑制 KCl60 mmol·L-1或Bay K86441 0 0 μmol·L-1升高的 [Ca2 + ]i,抑制 5-HT 1μmol· L-1升高 [Ca2 + ]i 的持续相 ,但不影响[Ca2 + ]i 的一过性升高。维拉帕米 1 0 μmol· L-1具有相似作用 . ( 3)在无钙 Hanks液中 ,Ber预处理对咖啡因 1 0 0 mmol·L-1升高的 [Ca2 + ]i 无明显抑制作用。结果表明 ,Ber可阻断外钙内流 ,但不抑制内钙释放 ,这可能与 Ber阻断电压依赖性钙通道和受体依赖性钙通道的作用有关 .     

家兔主动脉血管平滑肌细胞内钙动员及小檗胺作用的共聚焦研究

观察小檗胺 (Ber) 对高钾除极,Bay K8644,5-羟色胺 (5-HT) 及咖啡因升高细胞内钙水平 (［Ca²⁺］_i) 的影响。以Fluo-3/AM负载家兔培养的主动脉平滑肌细胞 (VSMC),共聚焦显微术测定［Ca²⁺］_i,结果以荧光强度(FI)表示. 结果：(1) 在细胞外钙为1.3 mmol·L^-1时, VSMC胞浆静息FI明显高于核区, 且不受Ber的影响. (2) Ber 10-100 μmol·L^-1预处理可抑制KCl 60 mmol·L^-1或Bay K8644 100 μmol·L^-1升高的［Ca²⁺］_i,抑制5- HT 1 μmol·L^-1升高［Ca²⁺］_i的持续相,但不影响［Ca²⁺］_i的一过性升高。维拉帕米10 μmol·L^-1具有相似作用. (3) 在无钙Hanks液中,Ber预处理对咖啡因100 mmol·L^-1升高的［Ca²⁺］_i无明显抑制作用。结果表明,Ber可阻断外钙内流,但不抑制内钙释放,这可能与Ber阻断电压依赖性钙通道和受体依赖性钙通道的作用有关.     

小檗胺对ROCC介导的血管平滑肌细胞内游离钙的影响

目的　研究小檗胺 (BA)对受体调控性Ca2 +通道介导的家兔胸主动脉血管平滑肌细胞内游离钙 ([Ca2 +]i)的影响。方法　家兔主动脉血管平滑肌以Fluo 3/AM负载 ,通过激光扫描共聚焦显微镜 (LSCM )测定 [Ca2 +]i。结果　在细胞外Ca2 +存在的条件下 ,BA 30 μmol·L-1不影响静息[Ca2 +]i;但对去甲肾上腺素 (NE) 30mmol·L-1、5 羟色胺 (5 HT) 1μmol·L-1诱导的 [Ca2 +]i 升高有明显的抑制作用。在无胞外钙时 ,对咖啡因 40mmol·L-1诱导的 [Ca2 +]i 升高没有作用。结论　BA对ROCC激活后的外钙内流有明显的抑制作用 ,对内钙释放没有影响。其作用与维拉帕米相似     

Immunotoxicity of N,N-diethylaniline in mice: effect on natural killer activity, cytotoxic T lymphocyte activity, lymphocyte proliferation response and cellular components of the spleen

We previously found that N,N-diethylaniline increased the frequency of sister chromatid exchange (SCE) of human lymphocytes to about five times that of the control value, and was as toxic as cyclophosphamide used as a positive control for SCE. To explore whether N,N-diethylaniline affects the function of lymphocytes, we evaluated its immunotoxicity using CBA/N mice. The mice were divided into four groups and received 0, 100, 200, or 400 mg/kg body weight of N,N-diethylaniline by subcutaneous injection. The following items were investigated on days 3 and 7 after injection: body weight, weight of spleen, number of splenocytes, natural killer (NK) and cytotoxic T lymphocyte (CTL) activities, and concanavalin A (Con A)- and lipopolysaccharide (LPS)-stimulated lymphocyte proliferation using splenocytes. The following splenocyte phenotypes were also quantified by flow cytometry: (1) B cells; (2) total T cells; (3) CD4⁺ and CD8⁺ T cells; (4) NK; (5) macrophages and (6) nucleated erythrocytes. The splenic NK and CTL activities in exposed groups significantly decreased compared to the control in a dose-dependent manner and lymphocytes from the 200 and 400 mg/kg groups showed significantly higher spontaneous proliferation. The weight of the spleen and number of splenocytes were significantly higher in exposed groups than in the control. N,N-Diethylaniline also increased the percentages of macrophages, nucleated erythrocytes and B cells in the spleen. On the other hand, N,N-diethylaniline did not affect LPS-stimulated B cell and Con A-stimulated T cell proliferation, or the percentages of NK, total T, and CD4⁺ and CD8⁺ T cells in the spleen or the body weight of mice. The above findings indicated that N,N-diethylaniline selectively inhibited splenic NK and CTL activity and this inhibition was due to decreased NK and CTL functions, but not due to changes in the numbers of splenic NK and T cells.     

四氢小檗碱对血小板聚集和血栓形成的抑制作用(英文)

SD大鼠每天ip THB 30 mg·kg~(-1)共3 d或5 d后,使ADP诱导的血小板聚集程度降低;同剂量ip 1 d,3 d或5 d后,使AA诱导的血小板聚集程度降低,THB在体外抑制AA,ADP和胶原诱导的兔血小板聚集,IC_(50)分别为0.86,1.31和1.10 mmol·L~(-1) THB能抑制AA诱导的兔血小板生成血栓素B_2 THB 15—30 mg·kg~(-1)iv明显抑制大鼠静脉血栓的形成。     

Induction of pathogenic cytotoxic T lymphocyte tolerance by dendritic cells: a novel therapeutic target

Importance of the field: Dendritic cells (DCs) have an important role, both direct and indirect, in controlling the expansion and function of T cells. Of the different subsets of T cells, cytotoxic T lymphocytes (CTLs/CD8⁺ T cells) have been implicated in the pathogenesis and development of many diseases, including various forms of autoimmunity and transplant rejection. It may therefore be of therapeutic benefit to control the function of CTL in order to modulate disease processes and to ameliorate disease symptoms. Currently, pharmacological approaches have been employed to either directly or indirectly modulate the function of T cells. However, these treatment strategies have many limitations. Many experimental data have suggested that it is possible to alter CTL activity through manipulation of DC.

Areas covered in this review: Novel strategies that condition DCs to influence disease outcome through manipulation of CTL activity, both directly and indirectly. This includes the modulation of co-stimulation, negative co-stimulation, as well as manipulation of the cytokine milieu during CTL generation. Furthermore, DCs may also impact CTL activity through effects on effector and regulatory cells, along with manipulation of bioenergetic regulation, apoptotic-cell mediated tolerance and through the generation of exosomes. The implications of related interventions in the clinical arena are in turn considered.

What the reader will gain: Insight into such indirect methods of controlling CTL activity allows for an understanding of how disease-specific T cells may be regulated, while also sparing other aspects of adaptive immunity for normal physiological function. Such an approach towards the treatment of disease represents an innovative therapeutic target in the clinical arena.

Take home message: There are numerous innovative methods for using DCs to control CTL responses. Manipulation of this interaction is thus an attractive avenue for the treatment of disease, particularly those of immune dysregulation, such as seen in autoimmunity and transplantation. With the number of studies moving into clinical stages constantly increasing, further advances and successes in this area are inevitable.     

海南16种红树植物的肿瘤细胞毒活性筛选

目的研究海南红树植物提取物对HeLa细胞的生长抑制作用。方法用乙醇对采自海南文昌县的16种红树植物进行提取,所得提取物分散于水中,用醋酸乙酯萃取后得到醋酸乙酯提取物和水提取物;利用MTT法测定各红树植物的提取物对HeLa细胞的生长抑制率。结果共有6种红树植物的醋酸乙酯提取物显示了对HeLa细胞的生长抑制活性,其中卤蕨和银叶树的醋酸乙酯提取物活性较强,IC50分别为6.3μg.mL-1和9.5μg.mL-1。结论16种红树植物中有6种植物的醋酸乙酯提取物对HeLa细胞显示了生长抑制活性,红树植物的水提物均未显示出活性。     

小鼠骨髓来源树突状细胞对T细胞的活化作用

目的 从小鼠骨髓中体外诱导、扩增树突状细胞(DCs),检测DCs对T细胞的活化作用.方法 从小鼠骨髓中分离单个核细胞(MNCs),在重组鼠粒细胞-巨噬细胞集落因子(rmGM-CSF)、白细胞介素4(IL-4)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的诱导下培养扩增DCs.光学显微镜观察其形态特征,流式细胞仪分析其表型特征,混合淋巴细胞反应(MLR)检测DCs刺激同种异体T细胞增殖的能力.结果 MNCs经过rmGM-CSF、IL-4和TNF-α诱导培养12 d后,具有典型的DCs形态,高表达MHCⅡ类分子、CD11c、CD80、和CD86抗原.具有极强的激发刺激同种异体T细胞增殖的能力.结论 体外诱导、扩增DCs具有极强的激发刺激同种异体T细胞增殖的能力.