山莨菪碱抗脂质过氧化的研究

以离体红细胞为对象，研究山莨菪碱（Ａｎｉ）对外加Ｈ２Ｏ２及氧自由基发生系统（ＦｅＣｌ２／抗坏血酸）的抗氧化作用，观察在红细胞中加入Ａｎｉ前后Ｈ２Ｏ２诱导的红细胞溶血试验变化，并分别用荧光偏振法、ＴＢＡ比色法测定了在红细胞中加入Ａｎｉ前后氧自由基发生系统作用下的红细胞膜微粘度、红细胞脂质过氧化物（ＬＰＯ）。结果表明：Ａｎｉ（１．５，２．０ｍｍｏｌ·Ｌ－１）可显著抑制Ｈ２Ｏ２（１００ｍｍｏｌ·Ｌ－１）诱导的红细胞氧化溶血（溶血度分别为：０．３４９±０．０２３、０．２９４±０．０２６，对照组为：０．４４８±０．０３４，Ｐ＜０．０１）；Ａｎｉ（１．０，１．５ｍｍｏｌ·Ｌ－１）可显著抑制ＦｅＣｌ２（０．１ｍｍｏｌ·Ｌ－１）／抗坏血酸（０．５ｍｍｏｌ·Ｌ－１）引起的红细胞ＬＰＯ增加（分别为：５．４６８±０．１７４、４．８９６±０．１９２，对照组为６．１８１±０．２１２μｍｏｌ·Ｌ－１，Ｐ＜０．０１），显著降低红细胞膜微粘度（分别为：０．３６３±０．０２３、０．２９９±０．０１５，对照组为０．４８１±０．０２６Ｐａ·ｓ，Ｐ＜０．０１）。提示Ａｎｉ对氧自由基引发的膜脂质过氧化有保护作用。     

Menadione reduced doxorubicin resistance in Ehrlich ascites carcinoma cells in vitro

目的：研究维生素Ｋ３（Ｍｅｎ）降低ＥＡＣ／Ｄｏｘ细胞对阿霉素（Ｄｏｘ）的抗药性．方法：测定谷胱甘肽（ＧＳＨ），细胞膜流动性及谷胱甘肽Ｓ转移酶（ＧＳＴ）活性．细胞存活力以甲基四唑蓝法测定．结果：ＥＡＣ／Ｄｏｘ细胞ＧＳＨ，ＧＳＴ及膜流动性均较ＥＡＣ细胞增加（Ｐ＜００１）．Ｄｏｘ对ＥＡＣ／Ｄｏｘ细胞ＩＣ５０为２２３（１５８－２８８）ｍｇ·Ｌ－１．Ｍｅｎ５或１０ｍｇ·Ｌ－１可降低ＥＡＣ／Ｄｏｘ细胞ＧＳＨ（Ｐ＜００１），１ｍｇ·Ｌ－１对ＧＳＨ无影响（Ｐ＞００５），但可降低细胞膜流动性（Ｐ＜００５）．Ｍｅｎ１，５或１０ｍｇ·Ｌ－１可使ＤｏｘＩＣ５０降低到９．６（７８－１１３），６０（２８－９２），或５３（３９－６７）ｍｇ·Ｌ－１（Ｐ＜００１）．结论：Ｍｅｎ在体外降低ＥＡＣ／Ｄｏｘ细胞对Ｄｏｘ抗药性与对ＧＳＨ的耗竭有关．     

无机氟对大鼠脑突触体膜流动性的影响

无机氟对大鼠脑突触体膜流动性的影响张本忠吴德生（华西医科大学环境卫生学教研室，成都６１００４６）以ＡＮＳ，ＤＰＨ为荧光探剂，采用荧光偏振技术，体外实验观察了氟对大鼠脑突触体膜表层及膜酯平均流动性的影响．结果显示当氟浓度在１－１２８ｍｍｏｌＬ－１内对突...     

维生素E对创伤小鼠T细胞功能以及脂质过氧化和膜流动性的影响

观察了创伤小鼠Ｔ细胞丙二醛（ＭＤＡ）含量、膜流动性、Ｔ细胞功能的变化以及维生素Ｅ（Ｖ－Ｅ）的治疗作用。结果显示，创伤后Ｔ细胞ＭＤＡ含量增加；Ｔ细胞质膜，线粒体膜及微粒体膜流动性降低；Ｔ淋巴细胞转化、白介素２（ＩＬ－２）的产生、ＩＬ－２受体（ＩＬ－２Ｒ）的表达以及ＩＬ－２介导的淋巴细胞增殖反应均受抑。这些变化同ＭＤＡ的改变均密切相关。Ｖ－Ｅ（５０或１００ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１，ｉｍ×４ｄ）可明显逆转各指标的变化。表明创伤后脂质过氧化反应是导致Ｔ细胞膜流动性降低及Ｔ细胞功能受抑的重要原因，而Ｖ－Ｅ则具有明显的治疗效果。     

山茛菪碱抗指质过氧化的研究

以离体红细胞为对象，山茛菪碱（Ａｎｉ）对外加Ｈ２Ｏ３及氧自由基发生系统（ＦｅＣｌ２／抗坏血酸）的抗氧化作用，观察在红细胞中加入Ａｎｉ前后Ｈ２Ｏ３诱导的红细胞溶血试验变化，并分别用荧光偏振法，ＴＢＡ比色法测定了以红细胞中加入Ａｎｉ前后氧自由基发生系统作用了的红细胞微粘度、红细胞脂南过氧化物（ＬＰＯ）。结果表明：Ａｎｉ（１．５，２．０ｍｍｏｌ．Ｌ＾－１）＿可显著抑制Ｈ２Ｏ２诱导的红细胞氧化溶血（溶血     

国产温石棉对肺泡巨噬细胞胞浆游离钙的影响

利用Ｆｕｒａ２－ＡＭ钙荧光指示剂，探讨了茫崖及涞源温石棉在生理钙介质中对肺泡巨噬细胞胞浆游离钙的影响。结果表明，两种温石棉均可致胞浆游离钙浓度明显升高，并且具有时间及剂量依赖关系。在受试剂量范围内，两种温石棉对胞浆游离钙的影响无明显差别。经柠檬酸铝处理后，两种温石棉对胞浆游离钙的干扰作用减弱。     

氯化镍对人红细胞膜损伤机理的波谱学研究

为探讨镍对红细胞膜损伤作用的机理,采用傅立叶变换红外吸收技术和园二色光谱技术,分别研究了氯化镍对人红细胞膜蛋白和重组于卵磷脂脂质体上ｂａｎｄ３蛋白的二级结构影响,同时采用５－脱氧不饱和硬脂酸标记的电子自旋共振技术,研究了膜脂质流动性的变化．结果表明：在１－１００μｍｏｌ·Ｌ－１浓度范围内,镍离子可使红细胞膜蛋白发生变性和不可逆聚合,使膜浅层脂质流动性增加;０．０５,０．１０,０．５０ｍｍｏｌ·Ｌ－１的镍可使ｂａｎｄ３的α－螺旋和无规卷曲含量分别有减少和增加的趋势．     

ESR和CLSM技术用于促渗剂作用机制及亲水性大分子跨鼻黏膜转运途径的研究

采用电子自旋共振(ESR)和共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)技术研究促渗剂作用机制及促渗剂对亲水性大分子跨鼻黏膜转运途径的影响。比较重组水蛭素-2(rHV2)与促渗剂联合鼻腔用药前后大鼠的生物利用度；采用以5-噁唑烷氮氧自由基硬脂酸、16-噁唑烷氮氧自由基硬脂酸和马来酰亚胺作为自旋标记物的电子自旋共振技术，考察促渗剂对家兔鼻黏膜脂质和蛋白的影响；采用共聚焦显微镜光学切片结合荧光探针标记技术探讨促渗剂对大鼠鼻黏膜上皮细胞骨架肌动蛋白的作用，同时观察在各种促渗剂作用下rHV2的转运途径。壳聚糖(chitosan,CS),羟丙基-β-环糊精(hydroxyl-propyl-beta-cyclodextrin,HP-β-CD),甘草酸单胺盐(ammonium glycyrrhizinate,AMGZ)均能显著改善rHV2的鼻黏膜吸收；CS主要通过细胞旁路途径增加rHV2鼻黏膜转运，这一结果可能与其对细胞骨架肌动蛋白微丝的影响从而打开细胞间紧密连接有关；HP-β-CD可同时增加跨细胞和经细胞旁路两种途径的转运，可能与其既能改变膜质流动性又能影响膜蛋白构象的特性有关；AMGZ主要增加亲水性大分子跨细胞途径的转运，实验观察到其对膜蛋白有作用，但未观察到其对膜质的作用，确切的机制尚有待研究。本实验可为促渗剂及亲水大分子跨细胞膜转运途径的研究提供借鉴。     

褪黑素拮抗鼠肝线粒体自由基产生的实验研究

目的观察褪黑素拮抗氧自由基和对膜脂质过氧化损伤的保护作用。方法用电子自旋共振技术，以ＤＭＰＯ和４－ＰＯＢＮ为捕集剂，捕集Ｆｅｎｔｏｎ反应产生的羟自由基和Ｆｅ２＋启动的鼠肝线粒体膜脂质过氧化产生的脂类自由基，以脂肪酸自旋标记物５－Ｄｏｘｙｌ和１６－Ｄｏｘｙｌ标记线粒体膜，研究脂质过氧化损伤后膜流动性的变化。结果褪黑素对羟自由基和脂类自由基有良好的清除作用，５０％清除浓度分别为１８６μｍｏｌ·Ｌ－１和４５０μｍｏｌ·Ｌ－１，而且在５００μｍｏｌ·Ｌ－１浓度范围内能防止脂质过氧化引起的线粒体膜流动性降低。结论褪黑素是一个有效的抗氧化剂，能防止生物膜的脂质过氧化损伤。     

无机氟对大鼠生物膜脂质流动性的影响

以ＡＮＳ，ＤＰＨ为荧光探剂，用荧光偏振技术观察氟对生物膜流动性的影响。体外实验，终浓度１～１２８ｍｍｏｌ／ＬＮａＦ对大鼠脑突触体上ＤＰＨ的荧光偏振度（Ｐ值）无明显影响（Ｐ＞０．０５）；而ＡＮＳ的Ｐ值增大，即膜表层流动性降低，呈剂量－效应关系。体内以每日２０ｍｇ／ｋｇＮａＦ腹腔注射染毒５０天，观察大鼠脑突触体膜，肝细胞膜和红细胞膜的平均流动性变化，发现３种膜中ＤＰＨ的Ｐ值均显著升高（Ｐ＜０．０１）。提示氟的直接作用和通过影响体内代谢导致生物膜流动性降低。     

k—硒化角叉菜胶对大鼠红细胞膜流动性与封闭度的影响

通过测定大鼠红细胞膜荧光偏振度Ｐ和ＮＡＤＨ－细胞色素Ｃ氧化还原酶的变化，研究ｋａｐｐａ－硒化卡拉胶对红细胞膜流动性和封闭度的影响。结果表明，ｋａｐｐａ－硒化卡拉胶１４０ｍｇ·ｋｇ＾－１·ｄ＾－１×３０ｄ可显降低大鼠红细胞膜荧光偏振度，即可显提高细胞膜流动性（Ｐ＜０．０５），ｉｇ１４０及７０ｍｇ·ｋｇ＾－１·ｇ＾－１×３０ｄ可显提高大鼠红细胞膜封闭度（Ｐ＜０．０５）。     

粉防己碱对四氯化碳损伤的肝细胞的保护作用

目的：研究粉防己碱（Ｔｅｔ）对四氯化碳损伤的肝细胞的保护作用，方法：培养细胞中直接加入ＣＣｌ４１０ｍｍｏｌ．Ｌ＾－１造成损伤模型，膜流动性及胞内钙离子浓度分别用ＤＰＨ，Ｆｕｒａ２－ＡＭ进行测定，结果：Ｔｅｔ（１－１０００ｎｍｏｌ．Ｌ＾－１）可以明显抑制ＣＣｌ４引起的肝细胞存活率降低和ＬＤＨ的释放，结论：Ｔｅｔ具有保护肝细胞的作用，Ｔｅｔ的这种作用与其抑制肝细胞的脂质过氧化，稳定钙离子浓度，维持细胞     

牛磺酸对肝微粒体膜的保护作用研究

以四氯化碳（ＣＣｌ４，１０ｍｍｏｌ．Ｌ＾－１）与分离的大鼠肝微粒体共同温育（３７℃，１０，２０，３０，６０，１２０分钟），预先或同时加入牛磺酸（Ｔａｕｒｉｎｅ，Ｔａｕ），观察其对肝微粒体膜的保护作用，结果表明，ＣＣｌ４引起孵育体系中外源性加入的还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）、微粒体膜蛋白巯基（Ｐ－ＳＨ）含量降低，膜脂流动性（ＬＦＵ）降低，Ｔａｕ对此均有罗明显的保护作用；在用Ｔａｕ预孵育的实验体系中，Ｔａ     

青石棉体外诱发细胞微核与多核

采用国产青石棉对ＢＡＬＢ／ｃ－３Ｔ３细胞和Ｖ７９细胞染毒，发现该２种细胞均可被青石棉诱发微核与多核．并且观察到含青石棉细胞的微核细胞率和多核细胞率均显著高于不含青石棉的细胞，而后者又比阴性对照显著增高．这提示青石棉进入细胞是其发挥遗传毒性作用的重要条件，但并非必需条件．与青石棉样品比较（２２％），这２种细胞内所含青石棉长纤维（＞１０μｍ）比例增大（６０％－６６％），提示细胞对青石棉的吞噬或保留作用具有一定长度选择性．     

氯化镉对大鼠肝线粒体和微粒体膜功能的影响

体外观察ＣｄＣｌ２对大鼠肝线粒体和微粒体膜流动性，膜结合酶活性，脂质过氧化产物丙二醛（ＭＤＡ）生成的影响以及维生素Ｃ的拮抗作用。结果表明，Ｃｄ２＋可在较短时间内引起膜流动性的降低和ＭＤＡ的增高，并伴有膜结合酶活性的抑制；维生素Ｃ处理不能改善膜流动性的降低。但能完全拮抗ＭＤＡ的增高，并部分缓解Ｃｄ２＋对葡萄糖－６－磷酸酶的抑制，提示Ｃｄ２＋膜毒性并非单纯由脂质过氧化所致，其中包括了对膜脂双层的直接作用。     

Antioxidative activity of 4-oxy- and 4-hydroxy-nitroxides in tisues and erythrocytes from rats

研究氮氧自由基的抗脂质过氧化作用．方法：用·ＯＨ生成系统Ｆｅ２＋＋抗坏血酸刺激大鼠心、肝、肾组织匀浆，用ＴＢＡ比色法测ＭＤＡ生成；用分光光度法测Ｈ２Ｏ２诱导的大鼠ＲＢＣ溶血度；用ＮＢＴ还原法测酵母多糖诱导大鼠中性白细胞生成的Ｏ－２．结果：氮氧自由基ＯＴＭＰＯ和ＨＴＭＰＯ抑制ＭＤＡ生成，对抗溶血反应，但不影响Ｏ－２生成．１羟基化合物ＯＴＭＰＯＨ和ＨＴＭＰＯＨ也有类似作用．但非自由基ＯＴＭＰ和ＨＴＭＰ对组织脂质过氧化无任何影响．结论：氮氧自由基通过清除·ＯＨ而对抗脂质过氧化，其捕捉·ＯＨ不是通过ＮＯ·的还原作用，ＮＯ·基和ＮＯＨ基都是必需活性基团．     

三尖杉酯碱对大鼠心肌肌质网膜脂过氧化及膜脂分子运动的影响

目的：研究三尖杉酯碱（Ｈａｒ）对膜脂过氧化及膜脂运动的影响．方法：膜脂过氧化用硫代巴比妥酸法测定，其含量用ＭＡＡ表示；用纳秒荧光偏振技术研究膜脂过氧化对膜脂分子运动的影响．结果：Ｈａｒ１０ｍｇ·Ｌ－１可使ＭＡＡ由１７±０８增加至５４±５１μｍｏｌ／ｇ蛋白质；随过氧化脂质含量的增加，膜脂双层的微粘度增加，磷脂分子摆动角减小（ｒ＝－０８５６５，Ｐ＜００１），Ｃａ２＋转运ＡＴＰ酶活性降低（ｒ＝－０８７１４，Ｐ＜００１）；ＤＰＨ的荧光强度减弱，荧光寿命缩短．结论：Ｈａｒ引起肌浆网膜脂过氧化，因而影响膜脂双层的运动和膜蛋白的功能．     

维生素E对创伤小鼠淋巴细胞功能的调节作用及机制

研究了维生素Ｅ对创伤小鼠淋巴细胞功能的调节作用及机制。结果显示：ＶＥ体内应用（１００ｍｇ／ｋｇ·ｄ－１，ｉ·ｍ×４ｄ）对创伤小鼠淋巴细胞白介素２（ＩＬ－２）ｍＲＮＡ、ＩＬ－２受体（ＩＬ－２Ｒ）ｍＲＮＡ水平，ＩＬ－２的生成，ＩＬ－２Ｒ的表达以及Ｔ淋巴细胞转化具有明显的升高作用。可明显逆转创伤小鼠血清及淋巴组织中ＶＥ含量的降低，丙二醛（ＭＤＡ）含量的升高以及淋巴细胞膜流动性的降低。并可改善创伤小鼠淋巴组织的损害。结果表明：ＶＥ可通过降低创伤小鼠的脂质过氧化反应，保护淋巴细胞膜，进而纠正创伤后淋巴细胞功能的受抑状态。     

丙泊酚对自由基引起的大鼠脑皮质线粒体损伤的保护作用

目的：在大鼠脑皮质线粒体自由基损伤的体外实验中，观察丙泊酚的保护作用，为治疗脑缺血再灌注损伤提供实验依据。方法：采用抗坏血酸-Fe^2＋体系诱导产生氧自由基，对分离的大鼠脑线粒体进行体外损伤实验，与丙泊酚温育后测定线粒体膜流动性、肿胀度和丙二醛（MDA）含量的变化。结果：脂质过氧化可降低线粒体膜流动性、增加线粒体肿胀和MDA含量，30μmol／L的丙泊酚均可减轻上述损伤。结论：脂质过氧化使大鼠脑皮质线粒体结构和功能显著量损．丙泊酚对此有明显保护作用。     

过氧化氢对原代培养大鼠肝细胞的毒性作用及其机理

本文报道了过氧化氢诱发原代培养大鼠肝细胞毒性作用的可能机理．过氧化氢（０．２～１．０ｍｍｏｌ·Ｌ－１）温育６ｈ可以引起大鼠肝细胞坏死性损伤，导致谷丙转氨酶释放增加及细胞存活率下降，加入过氧化氢酶（２５０～１５００Ｕ·ｍＬ－１）及抗氧化剂五味子乙素（１０～１００μｍｏｌ·Ｌ－１）均可降低过氧化氢的毒性作用．加入过氧化氢（０．６和１．０ｍｍｏｌ·Ｌ－１）可在６ｍｉｎ内使大鼠肝细胞内钙从１８０ｎｍｏｌ·Ｌ－１明显持续升高至７００ｎｍｏｌ·Ｌ－１以上（约３．５倍）．过氧化氢与肝细胞作用３０ｍｉｎ至１ｈ既可导致细胞膜脂质过氧化，表现为丙二醛蓄积及膜流动性下降，明显早于肝细胞发生坏死性损伤的时间．肝细胞胞浆中还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）含量在加入过氧化氢３０ｍｉｎ后明显降低，可推测肝细胞在后面的温育中对过氧化氢毒性的敏感性增加．以上结果证实过氧化氢诱发的原代培养大鼠肝细胞致死性损伤可能与细胞内钙迅速持续增高，细胞膜脂质过氧化及ＧＳＨ含量下降有关．