结肠癌患者外周血VEGF-C和CK20 mRNA的表达与淋巴转移的关系

目的探讨结肠癌患者外周血VEGF-C mRNA和CK20 mRNA的表达与淋巴转移的关系。方法应用RT-PCR检测80例结肠癌患者、30例结肠良性肿瘤患者、30例健康人外周血VEGF-C mRNA和CK20 mRNA的表达。结果 VEGF-C mRNA在结肠癌患者外周血的阳性表达率为52.5%,在结肠良性肿瘤、健康人的表达率分别为10.0%、0,其中有淋巴结转移的结肠癌患者的阳性表达明显高于无淋巴结转移的阳性表达(P<0.05)。CK20 mRNA在结肠癌患者外周血的阳性表达率为60.0%,在结肠良性肿瘤、健康人的表达率均为0,其中有淋巴结转移的结肠癌患者的阳性表达明显高于无淋巴结转移的阳性表达(P<0.05)。结论结肠癌患者外周血VEGF-C mRNA和CK20 mRNA的表达与淋巴转移相关。     

大肠癌患者外周血CK20 mRNA的表达

临床上根据转移瘤和原发瘤形态结构近似的这一生物学特性对诊断转移瘤十分有帮助.通常采用免疫组织化学技术显示特殊成分CK及其单克隆抗体以识别上皮性肿瘤.近年来,一些学者应用靶向C20 mRNA的逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测结直肠癌患者外周血中的肿瘤细胞[1-6].我们采用巢式逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法,以220 mRNA为靶基因,检测32例大肠癌患者外周血中CK20 mRNA表达,CK20 mRNA阳性表达可作为癌细胞血行播散的临床指标,结果如下.     

胃肠癌患者外周血肿瘤标志物检测的临床研究

目的检测胃癌和肠癌患者外周血中生存素(survivin)和细胞角蛋白20(CK20)基因的表达,并探讨其与肿瘤诊断、转移之间的关系。方法取胃癌79例,肠癌101例,癌前病变124例(胃56例,肠68例)及正常对照组50例,用实时定量反转录聚合酶链反应(Real-time RT-PCR)方法检测外周血中CK20和生存素基因的转录情况,并分析其与临床病理因素之间的关系。结果正常对照组未检测到CK20和survivin mRNA的转录;良性病变者survivin mRNA的表达率为11.3%,肿瘤组CK20和survivin mRNA表达率分别为胃癌48.1%、87.3%,肠癌48.5%、72.3%,其阳性率与疾病分期及淋巴转移等相关。survivin mRNA高转录者5年生存率显著低于低转录者(P0.01)。CK20和survivin mRNA表达阳性率高于CEA、CA19-9。结论CK20和survivn mRNA在胃肠癌患者中过表达,可作为诊断微转移和评估预后的客观指标,其诊断外周血微转移优于CEA和CA19-9,联合检测有更高的判断价值。     

CK19与CEA在非小细胞肺癌外周血微转移中的对比研究

目的检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血细胞角蛋白（CK19）及癌胚抗原（CEA）的表达,探讨对检测NSCLC微转移的可行性。方法应用RT—PCR技术检测48例NSCLC患者、15例肺良性疾病（BLD）患者和10例健康人外周血CK19及CEA mRNA的表达。结果NSCLC患者外周血中CK19及CEA mRNA的阳性表达率分别为68．75％、58．33％,在BLD组中表达率分别为13．33％、6．67％,而对照组外周血中均无表达,NSCLC组CK19及CEA表达均高于BLD组及对照组（P〈0．05）。外周血CK19及CEA的表达与临床分期及淋巴结转移密切相关,与病理类型及分化程度无关。结论CK19与CEA均可作为检测NSCLC患者外周血微转移较为合适的分子标志物,联合检测有助于提高检测的阳性率。     

外周血CK20 mRNA表达与结直肠癌临床病理和预后的关系

目的:探讨外周静脉血中CK20 mRNA表达及其与结直肠癌临床病理及预后的关系.方法:选取结直肠癌术前患者61例、健康志愿者20例和结直肠息肉患者10例,采用RT-PCR法检测其外周静脉血中CK20 mRNA的表达,并结合其临床病理特点和随访资料进行综合分析.结果:61例结直肠癌患者术前外周血CK20 mRNA阳性率为41.0%(25/61);其表达与肿瘤TNM分期、浸润深度、远处转移和区域淋巴结转移有关(P<0.05).20例健康志愿者和10例结直肠息肉患者外周血均无CK20 mRNA表达.在61例结直肠癌患者中,术后46mo完整随访的有37例,其中有17例死亡,有10例外周血CK20 mRNA表达阳性.结论:外周静脉血中CK20 mRNA的表达与结直肠癌患者的肿瘤分期和浸润转移有关.血液中CK20是反映结直肠癌患者发生肿瘤微转移较为特异的肿瘤标志物,外周血液中CK20 mRNA的表达可作为评估患者预后的指标.     

外周血表皮生长因子受体mRNA表达对大肠癌微转移和预后的临床意义

目的 检测大肠癌患者外周血中表皮生长因子受体(EGFR)并分析其临床意义.方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测37例大肠癌及40例大肠良性病变患者外周血EGFR mRNA.结果 40例大肠良性病变患者外周血EGFR均为阴性.患者组EGFR mRNA表达阳性为45.9%(17/37).EGFR mRNA表达阳性者在大肠癌Ducke's分期中为A期28.6%(2/7),B期31.3%(5/16),C期80.0%(8/10),D期50.0%(2/4);病理上低未分化(63.2%)及中高分化(28.7%)癌间经χ2检验有显著差异(P＜0.05).结论 RT-PCR方法检测大肠癌患者外周血中EGFR mRNA表达与其临床及病理分期相关,此项指标检测可作为大肠癌微转移及预后的参考指标.     

乳腺癌外周血细胞角蛋白19 mRNA的检测及临床价值

目的应用荧光定量RT-PCR检测乳腺癌外周血中的表达情况,并评价其表达的临床意义。方法用荧光定量RT-PCR方法检测49例乳腺癌患者外周血CK19mRNA表达。结果49例乳腺癌患者外周血中CK19mRNA检测阳性28例,阳性率57.1%,统计结果显示乳腺癌患者外周血CK19mRNA的表达阳性率在患者不同年龄、病理类别、临床分期、ER、PR状态的各组差异无显著性(P>0.05),在淋巴结转移状态间有显著差异。结论CK19mRNA可作为RT-PCR法检测乳腺癌患者外周血微转移的分子标志物,有助于早期预测乳腺癌发生血道微转移,指导临床治疗。     

大肠癌患者外周血人类斯钙素基因的检及其意义

目的探讨靶基因人类斯钙素(hSTC-1)在大肠癌患者外周血中的表达以及与肿瘤恶性程度的关系.方法采用RT-PCR方法检测15例健康成人、5例妊娠期妇女、14例消化道炎症疾病患者、57例大肠癌患者外周血的hSTC-1 mRNA.结果57例大肠癌患者外周血中hSTC-1 mRNA的阳性率为49.12%(28/57),并与大肠癌的临床分期有显著相关性(P＜0.05).而健康成人、妊娠期妇女、消化道炎症疾病患者外周血则无一例出现阳性.结论应用RT-PCR方法检测大肠癌患者外周血中的hSTC-1 mRNA具有高度敏感性和特异性,它有望成为判断大肠癌生物学行为恶性程度、转移和复发以及疗效观察的客观指标.     

血管黏附分子在大肠癌组织中的表达及意义

目的 探讨血管黏附分子(VCAM-1)在大肠癌发生、发展中的作用.方法 用免疫组化SABC法检测65例大肠癌、16例大肠息肉和4例癌旁组织中VCAM-1的表达,酶联免疫吸附试验检测20例健康人、40 例大肠癌患者外周血可溶性VCAM-1(sVCAM-1)水平,分析VCAM-1 表达与大肠癌病理特征的关系.结果 大肠癌组织中VCAM-1阳性率明显高于大肠息肉和癌旁组织(P均<0.01),VCAM-1表达与大肠癌的侵袭深度及淋巴结转移相关.大肠癌患者外周血清sVCAM-1水平高于健康人(P<0.01),其中有淋巴结转移者明显高于无淋巴结转移者(P<0.01).结论 VCAM-1可促进大肠癌的发生、发展;sVCAM-1有望成为大肠癌早期诊断及判断转移的指标.     

结直肠癌患者外周血CK20 mRNA的检测及意义

采用RT-PCR技术检测60例结直肠癌患者和10例健康志愿者骨髓、门静脉和外周血中的细胞角蛋白（CK）20 mRNA。10例志愿者三种标本中均未检测到CK20 mRNA。60例结直肠癌患者骨髓、门静脉血CK20 mRN阳性率分别为78.3%（47/60）、75.0%（45/60）;单次外周血采样CK20 mRNA阳性表达率为45.0%（27/60） 44.8%,两次采样总阳性表达率为70.0%（42/60）;外周血总阳性率略低于骨髓和门静脉血（P〉0.05）;外周血重复采样阳性率高于单次采样的阳性率（P〈0.05）;外周血CK20 mRNA阳性表达者1a内局部或远处转移率明显高于阴性表达者（P〈0.05）。认为结直肠癌患者外周血CK20 mRNA的检测与骨髓、门静脉血有相似的敏感性和特异性,可以作为结、直肠癌微转移的判断指标并指导其治疗和预后判断。     

检测老年胃癌患者腹腔灌洗液CK19、CEA mRNA的临床意义

目的 观察细巢式逆RT-PCR检测老年胃癌患者腹腔冲洗液瘤细胞胞角蛋白19(CK19)、癌胚抗原(CEA)的临床价值.方法 收集45例进展期老年胃癌和8例胃良性病变患者腹腔冲洗液200 ml,其中100 ml行RT-PCR检测CK19、CEA mRNA,另100 ml用于HE染色细胞学检查,胃癌细胞SGC7901为阳性对照.结果 45例老年胃癌病人腹腔冲洗液中CK19 mRNA的阳性表达率为55.6%(25/45);CEA mRNA的阳性表达率为51.1%(23/45);CK19、CEA mRNA的联合检测阳性率为62.2%(28/45).细胞病理学检查45例胃癌病人有8例腹腔冲洗液中发现肿瘤细胞,阳性率为17.8%(8/45),且此8例CK19、CEA mRNA检测结果均为阳性.CK19、CEA mRNA阳性率与肿瘤胃壁浆膜受侵、淋巴结转移和胃癌分期明显相关(P＜0.05).结论 腹腔冲洗液中CK19、CEA mRNA检测胃癌细胞敏感性高.初步临床观察显示此方法对于早期诊断胃癌患者腹腔种植有一定价值.     

食管癌患者外周血中CK19mRNA、CYFRA21—1、TPS联合检测的临床意义

目的 评价食管癌患者外周血中微转移基因标记物细胞角蛋白19(CK19)mRNA和细胞角蛋白片段21-1(CYFRA21-1)、组织多肽特异性抗原(TPS)联合测定的临床价值. 方法 取48例食管癌患者术前外周血标本,应用巢式逆转录聚合酶链反应法(nested-PCR)检测外周血单个核细胞CK19 mRNA的表达,同时采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定患者血清CYFRA21-1和TPS水平. 结果 食管癌患者外周血中CK19 mRNA和血清CYFRA21-1和TPS的阳性检出率分别为 52.1% 、83.3%和66.7%.联合检测CK19 mRNA 、CYFRA21-1和 TPS在食管癌患者中的阳性表达,发现其与患者肿瘤细胞分化程度、浸润深度、临床分期及有无淋巴结转移和远处转移等有相关性(P＜0.05或P＜0.01). 结论 在食管癌患者的随访中开展外周血中CK19 mRNA和血清CYFRA21-1和TPS的联合检测可提高食管癌微转移的检出率,以及时监控患者的病情.     

非小细胞肺癌患者外周血中多参数检测对诊断微转移的作用

目的 探讨细胞角蛋白19（CK19）、肺组织特异性X蛋白（LunX）、上皮癌相关基因（KS1/4）在非小细胞肺癌（NSCLC）外周血中的表达差异与NSCLC微转移的关系.方法 选择经过9个月随访的52例患者,分为转移组和无转移组,并以胸部良性病变手术患者20例作为对照组.提取外周血标本的总RNA,反转录为cDNA,采用荧光定量实时聚合酶链反应（PCR）检测其中CK19mRNA、LunXmRNA、KS1/4mRNA的表达水平.结果 总RNA通过紫外分光光度仪检测RNA纯度,OD268/280值在1.612 ～2.1之间,RNA浓度在100～ 1410μg/ml之间.经过随访,52例患者中发生转移或复发共18例,转移复发率34.6％ （18/52）.其中转移组外周血中CK19mRNA、LunXmRNA明显高于无转移组及对照组（P＜0.05）,但KS1/4 mRNA在三组患者外周血的表达差异无统计学意义（P＞0.05）;转移组的外周血中LunXmRNA的表达量最高,KS1/4 mRNA其次,CK19mRNA表达量最低,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 CK19、LunX可以作为预测NSCLC转移或复发的指标,辅助诊断NSCLC微转移,其中LunX的敏感性略显优势.     

宫颈癌患者治疗前检测外周血细胞角蛋白19 mRNA和鳞状细胞癌抗原的临床意义

目的通过检测宫颈癌患者治疗前外周血中细胞角蛋白(CK)19 mRNA和鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)的表达,探讨其对宫颈癌的诊断意义及与临床病理的相关性。方法对100例宫颈癌患者行治疗前外周血CK19 mRNA及SCC-Ag检测,以40例健康妇女为对照,分析其作为诊断参考的特异性和敏感性,并对两者与宫颈癌临床病理特征的相关性进行分析。结果 CK19 mRNA、SCC-Ag检测诊断宫颈癌的特异性均为97.5%。CK19 mRNA、SCC-Ag水平升高用于治疗前诊断的敏感性分别为39%和57%,两者差异显著(P<0.05)。CK19 mRNA表达升高与深肌层浸润(P=0.031)、盆腔淋巴结转移(P=0.027)相关。SCC-Ag水平升高与病理类型(P=0.005)、肿瘤大小(P=0.002)、深肌层浸润(P=0.001)、盆腔淋巴结转移(P=0.012)显著相关。结论外周血CK19 mRNA和SCC-Ag均是宫颈癌微转移有价值的肿瘤标志物;就宫颈鳞癌患者而言,SCC-Ag仍然是目前首选的肿瘤标志物。     

大肠癌组织中MTAP mRNA表达与其启动子去甲基化的相关性

目的 观察大肠癌组织中甲硫腺苷磷酸化酶(MTAP) mRNA的表达,探讨MTAP mRNA与其启动子去甲基化的相关性.方法 采用半定量逆转录PCR法检测76例正常大肠黏膜和大肠癌组织中的MTAP mRNA,采用MSP法检测大肠癌组织中MTAP基因甲基化状态.结果 大肠癌组织中MTAP mRNA表达阳性率为90.78％ (69/76),高于正常组织中的5.26％ (4/76),P＜0.05;MTAP mRNA表达与大肠癌患者的年龄、性别及病变部位、肿瘤大小无关(P均＞0.05),而与肿瘤的分化程度、临床分期及淋巴结转移有关(P均＜0.05).正常大肠组织中MTAP基因启动子甲基化频率为95.00％ (19/20),高于大肠癌组织中的39.47％ (30/76),P＜0.01;MTAP基因甲基化大肠癌组织中MTAP mRNA表达率显著低于去甲基化大肠癌组织(x2=8.592,P＜0.05),大肠癌组织中MTAP mRNA表达与其启动子去甲基化呈正相关(r=0.919,P＜0.05).结论 大肠癌组织中MTAP mRNA高表达与其启动子去甲基化有关.     

CK20 mRNA在胃癌病人外周血中的表达及意义

目的探讨胃癌病人外周血中CK20 mRNA的：表达及临床意义。方法采用巢式RT-PCR技术检测70例胃癌病人手术前、后外周血CK20 mRNA的表达情况，并以20例健康志愿者为阴性对照，以胃腺癌细胞株BGC-823作阳性对照。结果CK20 mRNA术前阳性表达率为32．9％，阳性表达率与组织学类型具有相关性（P〈0．01），而与TNM分期、肿瘤的部位、病人性别无明显相关性（P〉0．05）。术后CK20 mRNA阳性表达率明显高干术前（P〈0．05）；20例健康志愿者无一例阳性表达，胃腺癌细胞株BCK-823均为阳性表达。结论CK20 mRNA作为标志物用于检测胃癌的血循环微转移是可靠的；手术操作可促使肿瘤细胞释放入血。     

荧光定量PCR检测CK20在直肠癌外周血中表达的意义

目的:分析外周血中CK20基因产物的表达与直肠癌Dukes分期和组织学分型的关系,探讨用FQ-PCR检测CK20来预测直肠癌微转移以及判断患者预后的价值.方法:采集47例直肠癌患者外周血标本、10例良性肠道病患者及10例健康志愿者外周血标本.用FQ-PCR检测外周血CK20的表达情况.结果:10例良性肠道病患者及10例健康志愿者外周血中均检测不到CK20的表达,与直肠癌组有明显差异(72.34%,34/47)(χ2=37.434,P<0.01).47例直肠癌患者外周血中CK20的表达量与Dukes分期呈正相关(r=0.680,P<0.01).结论:直肠癌外周血中CK20的表达量与肿瘤分期有关,并且分期越晚CK20的表达量越多,用CK20FQ-PCR检测癌转移较常规病理组织学敏感,对直肠癌患者病情的判定、疗效评价及恢复情况具有重要临床意义.     

实时定量RT-PCR检测大肠癌病人外周血CK-20mRNA、CEA mRNA的研究

目的 研究大肠癌病人外周血CK20mRNA、CEA mRNA的表达，并探讨其临床意义。方法采用实时定量RT-PCR方法，检测大肠癌病人术前外周血CK20mRNA、CEA mRNA，并与临床分期进行相关分析。结果47例大肠癌病人外周血中CK20mRNA的阳性率为36．17％，CEAmRNA的阳性率为40．43％。统计结果显示CK20mRNA、CEA mRNA的拷贝数与Dukes分期无相关性(P分别为0．532及0．964)。结论单次采血定量CK20mRNA、CEAmRNA尚不能作为术前临床分期的一个参考指标，不同病人术前的CK20mRNA、CEAmRNA值不具备可比性。     

胃癌组织中VEGF、MUC2表达与血清微转移的关系

应用免疫组化SP法检测49例胃癌手术切除标本中血管内皮生长因子（VEGF）、黏蛋白（MUC2）的表达,采用巢式RT-PCR法检测外周血中角蛋白（CK20）mRNA、癌胚抗原（CEA mRNA）的表达,CK20 mRNA及CEA mRNA任何一项结果阳性即为存在血清微转移.结果 VEGF在胃癌中的表达率为75.5%.49例患者中,发生血清微转移31例,其中VEGF阳性表达24例（77.4%）;未发生微转移18例,其中VEGF阳性表达6例（33.3%）;血清微转移的发生率随VEGF表达的增高而增高（P＜0.01）.发生微转移者MUC2阳性表达22例,无微转移者为12例（66.7%）,两者比较无统计学差异（P＞0.05）.提示胃癌组织中VEGF的表达与其血清微转移密切相关.     

垂体肿瘤转化基因在大肠癌组织中的表达及临床意义

目的探讨垂体肿瘤转化基因（PTTG）在大肠癌发生、发展中的作用。方法采用RT-PCR及免疫组化法检测80份大肠癌组织、20份正常大肠组织中PTTG mRNA、PTTG蛋白表达,分析其与大肠癌临床病理参数的关系。结果大肠癌组织中PTTG mRNA及蛋白表达量明显高于正常大肠组织,P均〈0.01;PTTG mRNA及PTTG蛋白表达量与大肠癌浸润深度、淋巴结转移、Duke＇s分期有明显相关性。结论 PTTG高表达在大肠癌的发生发展过程中起促进作用;PTTG表达可作为大肠癌转移及预后的预测指标。