β-紫罗兰酮抑制SGC-7901细胞潜在的转移作用

目的观察β紫罗兰酮对人胃腺癌细胞(SGC7901)潜在转移的影响。方法采用细胞生长曲线,酶谱法和RTPCR技术,我们检查了不同浓度(25、50、100和200μmolL)β紫罗兰酮对SGC7901细胞生长,IV明胶酶的活性(MMP2和MMP9),nm23H1基因和金属蛋白酶抑制剂(TIMP1和TIMP2)在SGC7901细胞表达情况。β紫罗兰酮处理时间为24小时和48小时。结果β紫罗兰酮可抑制SGC7901细胞增殖。用不同浓度的β紫罗兰酮处理SGC7901细胞8天的抑制率分别为25.93%、28.21%、74.36%和90.11%。β紫罗兰酮作用于SGC7901细胞的IC50值为89μmolL。β紫罗兰酮不影响SGC7901细胞的基质金属蛋白酶2(MMP2)和基质金属蛋白酶9(MMP9)的活性。然而,β紫罗兰酮可明显地促进nm23H1基因、TIMP1和TIMP2的表达,呈现剂量-反应关系。结论β紫罗兰酮可抑制SGC7901细胞的生长和增殖。可能通过上调nm23H1,TIMP1和TIMP2来影响SGC7901细胞潜在的转移。然而,β紫罗兰酮对SGC7901细胞的IV型明胶酶活性没有影响,因而,β紫罗兰酮抑制SGC7901细胞的转移需要进一步研究。     

-紫罗兰酮诱导人乳腺癌细胞(ER+)凋亡作用

目的 为了研究β-紫罗兰酮对雌激素阳性的人乳腺癌细胞(MCF-7)凋亡诱导作用的影响。方法 采用细胞生长曲线,凋亡细胞的荧光显微镜和电镜观察,TUNEL方法及流式细胞光度术以及Western blot的检测方法,观察了用不同浓度β-紫罗兰酮(25、50、100 和200 μmol/L)对MCF-7细胞的抑制作用及诱导该细胞产生凋亡情况。结果 β-紫罗兰酮可明显抑制MCF-7细胞生长,抑制率分别为6.57%、34.58%、65.22%和81.87%。通过荧光显微镜和电镜技术观察到了MCF-7细胞有凋亡的形态特征;TUNEL(末端脱氧核苷酸转移酶缺口末端标记)方法和流式细胞光度术均检测到β-紫罗兰酮可诱导MCF-7细胞产生凋亡,并随着β-紫罗兰酮浓度的增加,细胞凋亡率逐渐增加。TUNEL凋亡指数(AI)分别为20.74%(24h)和33.15%(48h);流式细胞光度术的凋亡指数(AI)分别为27.96%(24h)和38.59%(48h)。通过Western blotting方法观察到β-紫罗兰酮可对MCF-7的细胞增殖相关蛋白PCNA及bcl-2蛋白表达有明显地抑制作用,呈现明显地剂量-反应关系。结论 β-紫罗兰酮可明显地抑制雌激素阳性(ER⁺)人乳腺癌MCF-7细胞的增殖,并诱导该细胞产生凋亡,其作用机制需要进一步探讨。     

α-生育酚琥珀酸酯诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡及其作用的分子形式

目的　探讨α- 生育酚琥珀酸酯 (α TOS)诱导人胃癌SGC -790 1细胞凋亡时发挥作用的分子形式。方法　在体外培养的SGC 790 1细胞中 ,分别加入 5、10和 2 0 μg ml的α- TOS ,以 2 0 μg mlα 生育酚 (α- TOH)和1μl/ ml乙醇为对照培养 4 8小时后采用联咪二苯吲哚 (DAPI)染色 ,荧光显微镜下观察细胞形态 ,琼脂糖凝胶电泳检测DNA降解片段 ,并用HPLC法检测细胞内和培养液中α TOS和α- TOH含量。结果　细胞经DAPI染色发现 ,10 μg ml和 2 0 μg mlα TOS处理组细胞核染色体浓集 ,伴有细胞核固缩和核碎片形成。琼脂糖凝胶电泳检测发现 ,上述 2组细胞DNA出现梯形分子条带。在α -TOS处理的细胞内和培养液中HPLC仅检测到α- TOS ,未发现其分解产物α- TOH。结论　α TOS能诱导SGC 790 1细胞凋亡 ,且是以不分解的整体分子形式发挥其诱导凋亡作用 ,与α- TOH的作用无关。     

甘草提取物(GL-1)对胃癌SGC-7901细胞增殖抑制及促凋亡作用

目的 提取中药甘草提取物（GL-1）,研究其对人胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制及凋亡诱导作用。方法 将甘草粉末溶于水后取沉淀部分、经丙酮萃取、甲醇分离处理,得到甘草提取物GL-1。通过MTT比色法观察不同浓度的GL-1对SGC-7901细胞增殖抑制情况;AO（吖啶橙）/EB（溴化乙锭）双荧光染色法检测SGC-7901细胞凋亡的形态学变化;流式细胞仪测定各浓度组细胞凋亡率。结果 GL-1对SGC-7901细胞的生长增殖有抑制作用,在12 、24 、48 h作用于SGC-7901细胞的半数抑制浓度分别为24.18、20.03、15.60 μg/mL（P < 0.05）;AO/EB染色结果表明12.5、25、50 μg/mL剂量组SGC-7901细胞均有不同程度的凋亡作用;流式细胞仪检测结果表明,GL-1对SGC-7901细胞的诱导凋亡作用具有浓度依赖性。结论 GL-1具有抑制SGC-7901细胞生长增殖作用,并能诱导SGC-7901细胞凋亡。     

β-紫罗兰酮对人乳腺癌细胞(Er~-)MAPK途径的影响

目的为了研究β紫罗兰酮对雌激素受体阴性的人乳腺癌细胞(MDAMB435)MAPKs途径的影响。方法采用细胞生长曲线,细胞核分裂,集落形成以及DNA合成试验,Westernblotting方法,观察了用不同浓度β紫罗兰酮(25、50、100和200μmolL)对MDAMB435细胞生长的影响及其对细胞增殖相关蛋白如PCNA和MAPKs途径的作用。结果β紫罗兰酮可明显抑制MDAMB435细胞生长,细胞核分裂,集落形成和DNA合成。7天的抑制率分别为45.65%,71.24%,81.53%和84.93%;IC50值为42.0μmolL。细胞核分裂的抑制率24小时为-34.57%～58.857%,48小时为-30.05%～75.12%;集落形成试验的抑制率24小时为4.44%～63.79%,48小时为6.42%～95.55%;DNA合成抑制率24h为17.00%～57.56%,48h为62.25%～78.35%。采用Westernblotting方法进一步对其抑制机制结果表明,β紫罗兰酮可抑制PCNA蛋白的表达,抑制MAPK途径中的ERK和MEK1的表达,促进JNK和MKP1的表达。结论β紫罗兰酮对MDAMB435细胞有明显地抑制作用;β紫罗兰酮影响MAPKs级联反应可能是其抑制肿瘤作用的机制之一。     

DHA复合物诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡的实验研究

[目的]研究DHA复合物抗肿瘤作用机理。[方法]以人胃癌细胞SGC-7901为模型,利用吖啶橙染色,荧光显微镜观察人胃癌细胞SGC-7901经DHA复合物治疗前后的形态,研究DHA复合物诱导人胃癌细胞SGC-7901的凋亡作用。[结果]实验发现:经DHA复合物治疗后,人胃癌细胞SGC-7901细胞核出现明显的凋亡核形态。[结论]DHA复合物具有明显诱导人胃癌细胞SGC-7901发生凋亡的作用。     

柴胡皂苷D对SGC-7901细胞生长及迁移抑制作用

目的探讨柴胡皂苷D对胃癌SGC-7901细胞生长、迁移抑制作用及机制。方法实验设对照组、低、中、高剂量柴胡皂苷组(5、10、20μmol/L柴胡皂苷D);采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组细胞24、48和72 h细胞增殖情况;采用原位末端转移酶标记法(TUNEL)检测各组细胞凋亡;Transwell检测各组细胞迁移能力;实时定量荧光PCR技术(real time PCR)检测各组细胞中norrin及livin表达;蛋白印迹法检测各组细胞norrin、livin、p57和cyclin E表达。结果 MTT结果显示,与对照组比较,低、中、高剂量柴胡皂苷组SGC-7901细胞增殖受到明显抑制,呈剂量效应关系(P<0.05);Transwell结果显示,与对照组[(190±7)个/视野]比较,低、中、高剂量柴胡皂苷组细胞迁移数量[分别为(114±9)、(87±6)、(38±4)个/视野]均减少(均P<0.05);与对照组(4.94±1.14)比较,低、中、高剂量柴胡皂苷组SGC-7901细胞凋亡指数[分别为(8.46±1.18)、(11.76±2.85)、(34.34±7.74)]均增加(均P<0.05);与对照组比较,中、高剂量柴胡皂苷组SGC-7901细胞中norrin、livin mRNA及蛋白表达均减少(均P<0.05),各剂量组SGC-7901细胞中cyclinE蛋白表达均明显减少,p57表达明显增加,且呈剂量效应关系(均P<0.05)。结论柴胡皂苷D对胃癌细胞生长、迁移具有抑制作用,其机制可能与柴胡皂苷D减少norrin、livin表达,延长细胞周期、促进细胞凋亡有关。     

植酸对SGC-7901细胞凋亡相关蛋白NF-kBP65、Bcl-2、IkB-α及C-myc表达的影响

目的研究植酸对SGC-7901细胞的生长抑制作用的机制。方法采用Western blotting法检测凋亡相关蛋白NF-kBP65、Bcl-2、IkB-α及C-myc的表达。结果植酸可抑制人胃癌SGC-7901细胞中Bcl-2、C-myc、NF-kBP65蛋白的高表达;促进IkB-α蛋白的表达。结论凋亡相关蛋白NF-kBP65、Bcl-2、C-myc、IkB-α参与了植酸对人胃癌SGC-7901细胞的凋亡诱导作用的调控。     

β-紫罗兰酮对人乳腺癌细胞抑制作用

目的　研究 β 紫罗兰酮对人乳腺癌细胞 (MCF 7)生长的影响。 方法　采用细胞核分裂 ,生长曲线 ,集落形成和DNA合成实验 ,观察了用不同浓度 β 紫罗兰酮 (2 5、5 0、10 0和2 0 0 μmol L)对MCF 7细胞生长作用。 结果　β 紫罗兰酮可明显抑制MCF 7细胞增殖、细胞核分裂、集落形成和细胞DNA的合成 ,随着剂量的增加 ,抑制作用增强 ,IC50 值为 10 4 μmol L。细胞核分裂的抑制率分别为 2 4h 12 88%～ 6 8 6 7%。 4 8h 2 0 79%～ 87 79% ;集落形成抑制率分别为 2 4h 14 11%～ 6 5 18% ,4 8h 6 5 8%～ 72 4 8% ;DNA合成实验抑制率为 2 4h 16 75 %～6 5 33% ,4 8h 35 10 %～ 81 89%。结论　β 紫罗兰酮可抑制MCF 7细胞的生长 ,其机制需要进一步探讨。     

亚硒酸钠对胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡及hTERT表达的影响

目的探讨亚硒酸钠对人胃癌SGC-7901细胞株生长、凋亡和hTERT表达的作用及相关机制。方法用含不同浓度亚硒酸钠(0、0.5、2.5、5.0、8.0μmol/L)的培养液培养SGC-7901细胞24、48、72、96h,用相差显微镜观察亚硒酸钠对SGC-7901细胞形态的影响;MTT法检测亚硒酸钠对SGC-7901细胞增殖的影响;AnnexinV-FITC/PI双染法检测亚硒酸钠对SGC-7901细胞细胞的凋亡的影响;链霉亲和素-生物素-酶复合物(SABC)免疫细胞化学法检测亚硒酸钠对SGC-7901细胞hTERT蛋白表达的影响。结果 (1)MTT法结果显示:用亚硒酸钠培养SGC-7901细胞株24,48,72,96h后,随浓度增加,吸光度值逐渐降低,24h后当亚硒酸钠浓度大于2.5μmol/L时,与对照组比较其吸光度值均明显降低(P<0.01),48、96h后各浓度亚硒酸钠组与正常对照组比其吸光度值均明显降低(P<0.01)。随浓度的增加,亚硒酸钠对SGC-7901细胞生长抑制率逐渐增加。(2)流式细胞仪检测结果显示:亚硒酸钠可促进SGC-7901细胞发生细胞凋亡。5.0、8.0μmol/L亚硒酸钠组比正常对照组凋亡率明显升高(P<0.01)。(3)免疫细胞化学法检测结果显示:亚硒酸钠可降低SGC-7901细胞中hTERT蛋白免疫细胞化学染色的平均光密度(MOD),24h时5、8μmol/L亚硒酸钠组与对照组比MOD明显降低(P<0.01),48h时0.5、5.0、8.0μmol/L亚硒酸钠组与对照组比MOD明显降低(P<0.01),72h时2.5、5.0、8.0μmol/L亚硒酸钠组与对照组比MOD明显降低(P<0.01),96h时实验组与对照组比较MOD均明显降低(P<0.01)。结论亚硒酸钠能抑制SGC-7901细胞生长,诱导其凋亡,其作用机制可能与下调hTERT表达有关。     

两种类胡萝卜素提取物对胃癌SGC-7901细胞增殖与凋亡作用的比较研究

目的比较红心鸭蛋与普通鸭蛋类胡萝卜素提取物对胃癌SGC-7901细胞增殖与凋亡的作用。方法采用噻唑蓝(MTT)法、流式细胞术、免疫组化法。结果红心鸭蛋类胡萝卜素提取物对SGC-7901细胞增殖抑制作用、凋亡诱导作用及上调促凋亡基因bcl-2、下调抑制凋亡基因Bax表达的作用显著强于普通鸭蛋类胡萝卜素提取物。结论红心鸭蛋类胡萝卜素提取物对SGC-7901细胞增殖抑制与凋亡诱导作用均显著强于普通红心鸭蛋类胡萝卜素提取物。     

植酸对SGC-7901细胞凋亡相关蛋白Fas、Bax及Caspase-3表达的影响

目的:研究植酸对SGC-7901细胞的凋亡诱导作用及其机制。方法:采用MTT实验法观察植酸对SGC-7901细胞的增殖抑制作用;DNA琼脂糖凝胶电泳实验(DNA Ladder)观察植酸对SGC-7901细胞的凋亡诱导作用;Western blotting检测凋亡相关蛋白Fas、Bax及caspase-3的表达。结果:MTT实验结果显示,植酸对SGC-7901细胞具有生长抑制作用,并呈现剂量与时间的效应关系;经3.5mmol/L植酸处理72h的细胞出现了典型的DNA片断的梯形条带;植酸能够诱导caspase-3的活化,植酸处理组细胞中Fas、Bax蛋白比对照组表达增加,且呈现剂量-反应关系。结论:植酸对SGC-7901细胞具有诱导凋亡作用,Fas、Bax及caspase-3参与了植酸对人胃癌SGC-7901细胞的凋亡诱导作用机制。     

DON对体外培养胃癌细胞SGC-7901、BGC-823凋亡的影响

目的探讨脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)对胃癌细胞SGC-7901、BGC-823凋亡的影响及其可能机制。方法体外培养的胃癌细胞株SGC-7901、BGC-823细胞经100、500、1000μg/LDON处理72h,以流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡情况及其量效关系,流式细胞术、免疫细胞化学和Westernblot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2蛋白的表达情况。结果FCM定量检测结果表明,DON各处理组细胞凋亡率均高于对照组,且均随DON浓度升高凋亡率相应增加,具有明显量效关系(SGC-7901:r=0.660,P<0.05,n=4;BGC-823:r=0.750,P<0.01,n=4)。FCM、免疫细胞化学和Westernblot结果显示,DON处理后SGC-7901、BGC-823细胞Bax蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达下降。结论DON可剂量依赖地诱导体外培养的胃癌细胞SGC-7901、BGC-823凋亡,其机制可能与上调Bax蛋白的表达,下调Bcl-2蛋白的表达有关。     

姜黄素诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡机制

目的 探讨姜黄素诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡的可能机制。方法 体外培养人胃癌细胞SGC-7901,细胞计数盒8（CCK8）法观察不同浓度姜黄素对胃癌细胞SGC-7901的增殖抑制作用;流式细胞仪检测SGC-7901细胞周期;Western blot检测SGC-7901细胞核转录因子κB（NF-κB）、livin、caspase-3蛋白表达情况。结果 与对照组比较,各剂量姜黄素组SGC-7901细胞增殖活力均受到抑制,呈剂量效应关系（r=0.901,P<0.01）与时间效应关系（r=0.389,P<0.01）;与对照组（2.8%）比较,20、40、60 μmol/L姜黄素组SGC-7901细胞凋亡率[分别为7.7%、13.4%、20.7%]明显升高（P<0.05）;与对照组（58.59%）比较,20、40、60 μmol/L姜黄素组SGC-7901细胞周期G1期比例[分别为60.24%、65.13%、68.35%]明显升高（P<0.05）;与对照组比较,姜黄素组SGC-7901细胞内NF-κB、livin蛋白表达降低,caspase-3蛋白表达升高（P<0.05）,呈剂量效应关系。结论 姜黄素可抑制人胃癌细胞SGC-7901的活性,其机制可能与姜黄素下调NF-κB信号通路,促进livin解除对caspase的抑制效应而激活caspase-3,发挥其诱导细胞凋亡作用有关。     

组织蛋白酶B在紫杉醇诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡中的作用

[目的]研究组织蛋白酶B(Cathepsin B)在紫杉醇诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡中的作用.[方法]用0.1～0.5 μmol/L紫杉醇作用于SGC-7901细胞.另一组再加入Cathepsin B特异性抑制剂CA-074(Me)对照;再用0.3μmol/L紫杉醇对SGC-7901细胞分别作用0 h、6 h、12 h、24 h、36 h、48 h,另一组再加入CA-074(Me),通过形态学观察及流式细胞术检测细胞凋亡率的变化.[结果]①随着紫杉醇浓度的增高和作用时间的延长,SGC-7901细胞的凋亡率明显增高;②加入CA-074(Me)后,细胞凋亡率明显下降.[结论]Cathepsin B在紫杉醇诱导的细胞凋亡中有着相对重要的作用.     

2,5-己二酮诱导的PC12细胞损伤和凋亡

目的建立2,5己二酮诱导的PC12细胞凋亡模型。方法以PC12细胞为神经元的细胞模型,将2,5己二酮(30、40、50mmol/L)加入培养的PC12细胞中,四甲基偶氮唑盐检测细胞活性,Hochest33258观察细胞核变化,琼脂糖凝胶电泳检测DNA断裂、流式细胞仪检测细胞凋亡率,比较各组间的差异。结果随2,5己二酮浓度增加,细胞存活率下降(P<0.01);荧光显微镜观察有特征性的凋亡细胞核;琼脂糖凝胶电泳有明显的DNAladder;流式细胞仪检测凋亡率随2,5己二酮浓度的增大而增加(P<0.05)。结论一定浓度的2,5己二酮有导致PC12细胞损伤和凋亡的作用。     

NF-kBP_(65)及Bcl-2蛋白在植酸诱导人胃癌细胞凋亡中的作用

目的:研究植酸对人胃癌SGC-7901细胞的凋亡诱导作用及其机制。方法:采用AO/EB荧光染色法、彗星实验观察植酸对SGC-7901细胞的凋亡诱导作用,Western blot法检测凋亡调控基因Bcl-2及NF-kBP65的表达。结果:荧光染色可见植酸组细胞核染色质成固缩状、串珠状或出现凋亡小体等典型的凋亡细胞形态;植酸组细胞出现了具有凋亡特征的彗星样改变,彗星细胞拖尾率随着植酸浓度的增加呈递增趋势。植酸组细胞中Bcl-2、NF-kB蛋白比对照组表达下降,且呈现剂量-反应关系。结论:植酸对SGC-7901细胞具有诱导凋亡作用,对NF-kB途径的抑制作用可能是其抗癌的机制之一。     

Fas及TRF1、TRF2在亚硒酸钠诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡过程中的表达

目的通过检测Fas蛋白及端粒结合蛋白TRF1、TRF2在亚硒酸钠诱导胃癌细胞SGC-7901细胞凋亡过程中的表达,探讨硒抗癌的机制。方法用含不同浓度亚硒酸钠(0.5、2.5、5.0、.8.0μmol/L)的培养液分别培养人胃癌细胞株SGC-7901细胞24、48、72、96h后,用流式细胞仪检测Fas蛋白的表达;链霉亲和素-生物素复合物(SABC)法和Western blot法检测TRF1、TRF2蛋白的表达。结果亚硒酸钠能提高Fas蛋白阳性表达细胞百分比(P<0.05)。免疫细胞化学法检测结果显示:亚硒酸钠可以降低TRF1蛋白和提高TRF2蛋白的灰度值(P<0.05)。Western blot检测结果显示:亚硒酸钠可以提高TRF1和降低TRF2蛋白表达强度(P<0.05)。它们都具有剂量依赖性。结论亚硒酸钠诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的机制可能跟上调Fas蛋白和TRF1蛋白表达,下调了TRF2蛋白表达有关。     

聚维酮在阿霉素诱导膀胱癌EJ细胞凋亡模型中的作用机制

目的:探讨聚维酮(PVP)在体外加阿霉素(ADM)后诱导EJ细胞发生凋亡的情况以及一些相关机制。方法:应用流式细胞仪(FCM)检测ADM诱导EJ细胞的凋亡率、PVP EJ细胞的凋亡率以及PVP ADM对EJ细胞的诱导凋亡率的情况。结果:PVP对ADM诱导膀胱癌EJ细胞凋亡无影响。结论:PVP在整个诱导过程中并没有协同作用,只起到粘附作用,使得药物停留在EJ细胞表面的作用时间延长,从而达到大量杀伤EJ细胞的作用。     

共轭亚油酸诱导人胃腺癌细胞(SGC-7901)凋亡的作用

目的 研究共轭亚油酸单体（c9,t11-CLA)诱导人体胃腺癌细胞（SGC－7901）凋亡作用。方法 采用细胞生长曲线,凋亡细胞的荧光显微镜、电镜观察,流式细胞光度术的检测以及P53蛋白表达方法。结果 显示出c9,t11-CLA对SGC－7901细胞有明显的抑制作用,并可诱导SGC－7901细胞产生凋亡,并随着c9,t11-CLA浓度的增加,细胞凋亡率逐渐增加;而P53蛋白表达则随着c9,t11-CLA浓度的增加呈逐渐降低的趋势。结论 这可能是c9,t11-CLA抑制肿瘤细胞机制之一。