钙调素及其对细胞增殖的影响研究现状

钙调素是Ca2+调节蛋白中最保守、分布最广、调节功能最多的一种[1,2].1978年由张槐耀在纯化牛脑磷酸二酯酶时发现[3].现已证明,钙调素广泛存在于真核生物中[4,5],甚至存在于原核生物中.钙调素具有许多生化活性,在细胞中具有许多功能[6].对钙调素进行深入研究将有助于我们了解各种生理活动的发生机制,并最终揭示生命活动的奥秘所在[7].     

钙调素及其对细胞增殖的影响研究现状

钙调素是Ca2 调节蛋白中最保守、分布最广、调节功能最多的一种[1,2].1978年由张槐耀在纯化牛脑磷酸二酯酶时发现[3].现已证明,钙调素广泛存在于真核生物中[4,5],甚至存在于原核生物中.钙调素具有许多生化活性,在细胞中具有许多功能[6].对钙调素进行深入研究将有助于我们了解各种生理活动的发生机制,并最终揭示生命活动的奥秘所在[7].     

缺锌胸腺T细胞增殖周期与钙调素的变化

探讨胸腺Ｔ细胞内锌浓度（Ｚｎ＾２＋」ｉ与Ｔ细胞增殖周期Ｇ０／Ｇ１期比例、（Ｓ＋Ｇ２＋Ｍ）期比例、细胞内Ｃａ＾２＋浓度（「Ｃａ＾２＋」ｉ）、活性钙调素水平等指标之间的关系。方法采用大鼠缺锌模型,以流式细胞仪测定细胞增殖周期;以原子吸收分光光度计火争法测定「Ｚｎ＾２＋」;采用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ荧光法测定「Ｃａ＾２＋」ｉ和以依赖Ｃａ＾２＋的磷酸二酯酶法测定ＣａＭ水平,结果：缺锌组胸腺Ｔ细胞「Ｚｎ＾２＋」     

博来霉素A5抑制血管生成和抗肿瘤转移作用的实验研究

目的：证实博来霉素Ａ５抑制血管生成和抗肿瘤转移作用。方法：将含有０．５μｇ博来霉素Ａ５的载体置于胚龄７ｄ的鸡胚绒毛尿囊膜（ＣＡＭ）上,４８ｈ后观察抑制血管生成情况。Ｌｅｗｉｓ肺癌皮下接种Ｃ５７ＢＬ／６小鼠６ｄ后,在移植瘤周围及其基底部多处局部注射博来霉素Ａ５,每鼠每次０．６ｍｇ,每５天１次,共３次,接种后２５ｄ处死小鼠,观察皮下移植瘤血管生成抑制民政部和对肺转移的抑制作用。     

外源化学物对钙调素的影响

外源化学物对钙调素的影响张铣近年，外源化学物对细胞损伤的机理研究十分活跃的一个方面是化学物对细胞内钙浓度调节的干扰，即引起细胞钙稳态的紊乱。胞内钙稳态紊乱致使钙依赖的一系列生理与酶系活性发生改变。钙发生生理效应需要与一些蛋白质结合，即钙调节蛋白。其中...     

缬沙坦对博来霉素致大鼠肺纤维化的影响及机制

目的探讨缬沙坦对博来霉素致大鼠肺纤维化的影响及可能机制。方法 Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、缬沙坦低剂量组、缬沙坦高剂量组。气管内注入博莱霉素制备大鼠肺纤维化模型,当日灌胃缬沙坦,第7天、第14天、第28天分别处死大鼠。苏木素-伊红(HE)染色观察肺泡炎和肺纤维化程度,碱水解法检测肺组织羟脯氨酸(Hyp)浓度评价大鼠肺纤维化程度,化学比色法检测肺组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)水平,蛋白印迹法检测肺组织中转化生长因子(TGF)-β1、Smad2、E-钙黏附素(E-cadherin)及波形蛋白(vimentin)的表达。结果与模型组比较,缬沙坦2个剂量组大鼠肺纤维化程度显著减轻,肺组织Hyp含量显著减少,SOD活力明显增加,MDA水平明显减少,TGF-β1、Smad2、vimentin蛋白表达显著减少,E-cadherin蛋白表达显著增加(P<0.05),且有剂量依赖性。结论缬沙坦可减轻博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化程度,其机制可能与其纠正氧化/抗氧化失衡,调节TGF-β1、Smad2、E-cadherin和vimentin蛋白表达有关。     

钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ抑制剂对心房肌细胞钙超载的影响

目的 探讨钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(ealmodulin-dependent protein kinase II,CaMKII)抑制剂KN93对大鼠心肌细胞钙超载及CaMKII蛋白表达的影响.方法 培养大鼠心房肌细胞原代细胞,应用钙离子导入剂ionomyein(1.0 μmol/L)诱导心肌钙超载模型,KN93(0.25、0.5、1.0 μmo/L)作用下,Fluo-3/AM负载心房肌细胞,激光共聚焦显微镜观察心房肌细胞的收缩频率及细胞游离[Ca2+]i的动态变化,计算平均钙瞬变幅度;采用Western blot法检测CaMKⅡ表达水平.结果 KN93可抑制ionomyein诱导的心肌细胞钙超载,且其抑制率与KN93呈剂量依赖关系,KN93可使心房肌细胞CaMKⅡ表达下降.结论 CaMKII抑制剂KN93可纠正ionomyein诱发的大鼠心房肌细胞的钙超载,并下调细胞CaMKⅡ表达水平.     

单克隆抗体与博来霉素A6偶联物对肝癌的实验研究

用Dextran T40为中介体的方法偶联抗人肝癌单抗Hlll和博来霉素A6,体外实验显示Hlll与A6偶联物对人肝癌细胞抑制90%克隆生成浓度(IC₉₀)为0.17μmol/L:游离A6以及无关抗体与A6偶联物M3-A6分别为17/μmol/L和7μmol/L;同时加入Hlll单抗明显降低Hill-A6偶联物的细胞毒性;体内实验证明:Hlll-A6偶联物对裸鼠移植的人肝癌抑制率达78%,等剂量A6,M3-A6偶联物和Hlll与A6混合物的抑制率均约为30%。结果表明单抗Hlll与A6偶联物对肝癌的抑制作用明显比游离A6强。     

昆布多糖对博来霉素诱导的大鼠肺间质纤维化的影响

目的 观察昆布多糖对博来霉素诱导的大鼠肺间质纤维化的影响。方法 通过气管注射博来霉素复制大鼠肺纤维化模型，不同浓度昆布多糖（25，50，100mg·mL^-1）灌胃给药，在造模的第0，3，7，14，28天测肺羟脯氨酸含量。结果 博来霉素造模第7，28天时，昆布多糖中、高剂量组大鼠肺羟脯氨酸含量与模型组比较有显著性差异（P〈0．05）；第14天时与模型组比较，高剂量组有显著性差异（P〈0．05）。结论 昆布多糖能抑制博来霉素诱导的大鼠肺间质纤维化。     

■牛儿基■牛儿醇转移酶抑制对大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响

目的研究1种牛儿基牛儿醇转移酶抑制(GGTI-286)对大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响。方法用含有不同浓度的GGTI-286处理被10%胎牛血清(FCS)或血小板源生长因子(PDGF)刺激的大鼠肾小球系膜细胞,应用细胞增殖ELISA系统测定溴化脱氧尿嘧啶核苷进入细胞的量来评估DNA的合成,并测定细胞的数量。用蛋白质印迹法研究GGTI-286对原癌基因(Ras)蛋白和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)活化的影响。结果GGTI-286对10%FCS或PDGF刺激大鼠肾小球系膜细胞DNA的合成抑制是剂量依赖性,并且能够抑制细胞的生长,应用台盼蓝排除试验,GGTI-286并不改变系膜细胞的存活率。GGTI-286也能够抑制10%FCS或PDGF诱发的肾小球系膜细胞Ras蛋白活动和MAPK的激活。结论GGTI-286通过影响肾小球系膜细胞Ras蛋白活动和MAPK的激活而抑制肾小球系膜细胞增殖,这可能为治疗系膜增殖性肾小球疾病提供1种新的方法。     

达沙替尼体外抗鼻咽癌细胞增殖与转移的作用

目的SRC作为酪氨酸蛋白激酶在多种实体肿瘤中存在高表达,通过激活RAS/RAF/MEK/ERK、P13K/AKT通路促进肿瘤细胞的生长与增殖,并通过激活FAK促进肿瘤细胞的转移。此外,SRC还参与了EGFR抑制剂耐药的发生。本研究旨在研究SRC的抑制剂达沙替尼在体外对鼻咽癌细胞的抑制作用。方法采用M1Tr方法绘制细胞生长曲线,并计算达沙替尼对鼻咽癌细胞的半数抑制浓度（IC50值）;PI/AnnexinV双染法检测达沙替尼诱导鼻咽癌细胞凋亡的作用;WesternBlot检测达沙替尼引起鼻咽癌细胞中信号通路的改变;Transwell实验检测达沙替尼对鼻咽癌细胞迁移的影响。结果达沙替尼能明显在体外抑制鼻咽癌细胞的增殖,诱导鼻咽癌细胞的凋亡,并且呈浓度依赖性;应用达沙替尼处理CNE2后发现,能明显抑制RAS/RAF/MEK/ERK、P13K/AKT通路活性表现为phospho-AKT、Phospho．MEK、Phospho-ERK的表达水平明显减低;达沙替尼还能明显抑制CNE2的迁移能力和Phospho-FAK的表达水平。结论SRC的抑制剂达沙替尼能在体外明显抑制鼻咽癌细胞中RAS/RAF/MEK/ERK、P13K/AKT通路的活性和FAK蛋白的表达,进一步抑制鼻咽癌细胞的增殖与转移,促进细胞凋亡。     

冬虫夏草对离体人肾小球系膜增殖的影响

目的 :观察冬虫夏草对离体人肾小球系膜增殖的疗效 ,并探讨其机制。方法 :利用体外培养的人肾小球系膜细胞 ,采用检测 3H胸腺嘧啶掺入量的方法 ,研究北冬虫夏草和天然冬虫夏草对低密度脂蛋白 (L DL )引起系膜细胞增殖的影响。结果 :2组冬虫夏草组的 3H掺入率均明显低于 L DL对照组 (P<0 .0 1) ,而 2组冬虫夏草之间同一浓度相比无显著性差异 (P>0 .0 5 )。结论 :冬虫夏草明显抑制 L DL引起的系膜细胞增殖 ,北冬虫夏草与天然冬虫夏草作用相似。其机制可能是由于冬虫夏草间接抑制了系膜细胞增殖过程中 DNA的合成。     

6种黄酮类化合物对离体肝储脂细胞增殖的影响(英文)

目的:研究黄颜木素、槲皮素、芹菜素、根皮素、橙皮素和查耳酮对血清、巨噬细胞上清和血小板源生生长因子刺激的HSC-T6细胞增殖的影响。方法:结晶紫染色法测定细胞增殖。结果:黄颜木素、槲皮素、芹菜素、根皮素、橙皮素和查耳酮(6.25-50μmol/L)以剂量依赖方式显著抑制血清、巨噬细胞上清和血小板源生生长因子诱导的HSC-T6细胞增殖。结论:黄颜木素、槲皮素、芹菜素、根皮素、橙皮素和查耳酮具有抑制肝储脂细胞增殖的作用。     

Effect of chymase inhibitor on vascular proliferation

In vascular tissues, angiotensin II is potentially cleaved from angiotensin I by chymase and angiotensin-converting enzyme (ACE). In the normal state, vascular ACE regulates local angiotensin II formation and plays a crucial role in the regulation of blood pressure, whereas chymase is stored in mast cells and has no enzymatic activity. Chymase is activated immediately upon its release into the extracellular matrix in vascular tissues after mast cells have been activated by stimuli such as vessel injury by grafting or a balloon catheter. In dog grafted veins, chymase activity is increased, and the vascular proliferation is suppressed by either a chymase inhibitor or an angiotensin II receptor blocker. After balloon injury in dog vessels, chymase activity is significantly increased in the injured artery, and a chymase inhibitor is effective in preventing the vascular proliferation, but an ACE inhibitor is ineffective. Chymase plays an important role in the development of vascular proliferation via the induction of local angiotensin II formation in injured vessels.     

丹皮酚体外对肝星状细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨丹皮酚对大鼠肝星状细胞(HSC)增殖和凋亡的影响。方法 HSC加入丹皮酚1.66～49.8 mg·L-1作用48 h后,MTT比色法和锥虫蓝染色法检测HSC的存活率。HSC与丹皮酚33.2 mg·L-1分别作用6,12,24,36和48 h,锥虫蓝染色法检测HSC的存活率。HSC与丹皮酚1.66～69.7 mg·L-1作用48 h用细胞乳酸脱氢酶(LDH)活性测定试剂盒检测细胞上清中LDH活性。丹皮酚1.66～49.8 mg·L-1与HSC作用24 h分别用光学显微镜、Hoechst 33258染色和流式细胞术检测HSC细胞形态、细胞凋亡和凋亡率;丹皮酚1.66～49.8 mg·L-1作用48 h用流式细胞术检测细胞周期。结果 MTT实验结果表明,丹皮酚16.6～49.8 mg·L-1对HSC增殖具有明显抑制作用,且具有浓度效应关系(r=0.955,P<0.05),作用48 h时IC50值为105.4 mg·L-1。锥虫蓝染色实验结果表明,丹皮酚对HSC存活率的抑制作用不仅具有浓度效应关系(r=-0.936,P<0.05),浓度为33.2 mg·L-1时还具有时间效应关系(r=-0.965,P<0.05)。丹皮酚16.6～69.7 mg·L-1作用48 h无明显细胞毒性。流式细胞仪检测结果显示,丹皮酚8.3～49.8 mg·L-1作用24 h能显著促进HSC细胞凋亡(P<0.05),且具有浓度效应关系(r=0.920,P<0.05)。丹皮酚33.2和49.8 mg·L-1作用48 h可调节细胞周期,G0/G1期细胞增加(P<0.01),S期细胞减少(P<0.01),具有浓度依赖性(r=0.980,P<0.05)。结论丹皮酚具有促进HSC凋亡和抑制HSC增殖的作用,可能是其抗肝纤维化作用机制之一。