复发性流产患者外周血调节性T细胞检测及临床意义

目的探讨不明原因复发性流产患者外周血以CD4＋CD25high-intCD127lowTreg（CD4＋CD25high-intCD127lowTregularcells）为代表的调节性T细胞表达及其意义。方法采用三色荧光抗体标记及流式细胞术分析20例不明原因复发性流产患者、正常妊娠组和正常非孕对照组外周血CD4＋CD25high-intCD127lowTreg占CD4＋T淋巴细胞的比例。结果正常孕妇外周血CD4＋CD25high-intCD127lowTreg较正常对照组差异有统计学意义（P〈0.01）,复发性流产患者CD4＋CD25high-intCD127lowTreg调节性T细胞较正常对照组差异有统计学意义（P〈0.01）,正常孕妇组较复发性流产患者组差别则更显著;其中流产次数小于或等于3次的患者与流产次数大于或等于4次的患者其外周血CD4＋CD25high-intCD127lowTreg占CD4＋T细胞百分比差异无统计学意义（P〉0.05）。结论原因不明复发性流产患者外周血中调节T细胞比例降低,这种改变导致原因不明复发性流产患者细胞免疫耐受被打破,可能是原因不明复发性流产患者发病的重要原因之一。     

复发性流产患者血清维生素D水平与自身免疫抗体、淋巴细胞亚群的关系研究

目的探讨复发性流产（RSA）患者血清维生素D 水平与自身免疫抗体、淋巴细胞亚群的关系。方法回顾性分析RSA患者125 例,根据血清25 羟维生素D[25（OH）D]水平,分为25（OH）D 正常水平组50 例、25（OH）D低水平组75 例,分析两组自身免疫抗体阳性率及淋巴细胞亚群水平。结果25（OH）D低水平组抗心磷脂抗体（ACA）、抗核抗体（ANA）的阳性率及甲状腺过氧化物酶（TPO）抗体阳性率均高于25（OH）D正常水平组,差异有统计学意义（P <0.05）;25（OH）D低水平组外周血CD3+CD4+、CD4+/CD8+、CD19+及CD56+百分率均高于25（OH）D正常水平组,差异有统计学意义（P <0.05）。结论RSA 患者中维生素D 缺乏的比例较高,维生素D 缺乏的RSA 患者ACA、ANA 及TPO 抗体阳性率较高,RSA 维生素D 水平与CD4+T 细胞、B 细胞及NK细胞免疫平衡有关。     

甲状腺功能亢进性心脏病患者调节性T细胞与细胞因子水平的相关性

目的：探讨甲状腺功能亢进性心脏病(HHD)患者中CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺调节性T细胞(Treg)数量、细胞因子水平的变化与HHD相关病变指标的相关性。方法：采用免疫组化染色方法和流式细胞技术检测HHD患者和正常人甲状腺组织中CD25和Foxp3分子的阳性表达及分布情况;通过流式细胞技术检测正常对照组和HHD患者术前外周血中CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺Treg细胞数量变化;通过电化学发光技术分析HHD血清中甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)和甲状腺球蛋白抗体(TGAb)水平;分析Treg细胞数量变化与甲状腺自身抗体的相关性;通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测外周血白细胞介素(IL)-6、IL-2、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-4、转化生长因子-β(TGF-β)及IL-10水平,并同时分析它们与Treg细胞的相关性。结果：在甲状腺组织中,CD25⁺和Foxp3⁺Treg细...     

食管癌患者外周血调节性T细胞与NKG2D表达及相关性分析

目的探讨NK细胞活化受体（NKG2D）及调节性T细胞（Treg cells）在食管癌患者外周血中表达水平及其临床意义。方法采用流式细胞术检测140例食管癌患者及51例健康者外周血NKG2D表达率、及调节性T细胞占CD4＋T百分比,分析研究各细胞表达与食管癌临床TNM分期及调节性T细胞与NKG2D相关性。结果食管癌外周血NKG2D表达小于健康者（P〈0.001）;调节性T细胞表达大于健康者（P〈0.001）。NKG2D与调节性T细胞呈负相关性（r=-0.346,P〈0.001）。NKG2D表达总变异的12%与调节性T细胞有关（R2=0.120）。结论食管癌患者外周血调节性T细胞、NKG2D表达均与临床TNM分期有关。调节性T细胞抑制了NKG2D介导的NK细胞抗肿瘤功能。     

复发性流产患者血清维生素Ｄ水平与胰岛素抵抗的相关性分析

目的探讨复发性流产患者维生素D水平与胰岛素抵抗的相关性。方法回顾性分析我院198例复发性流产患者的临床资料,了解其维生素D水平及胰岛素抵抗情况,并根据血清25-(OH)D水平分为三组,通过统计软件对数据进行分析。结果 198例复发性流产患者中,维生素D缺乏患者143例(占72.2%),维生素D不足患者48例(占24.3%),维生素D充足患者7例(占3.5%);125例患者存在IR(占63.1%),非IR患者73例(占36.9%)。胰岛素抵抗发生率在三组间比较差异无统计学意义(P0.05),进一步统计分析发现仅Ins1、Glu2三组间比较有统计学差异,而Ins0、Ins0.5、Ins2、Ins3、Glu0、Glu0.5、Glu1、Glu3、HOMA-IR、Pagt、HCY、BMI等指标三组比较均无统计学差异。HCY水平在IR和非IR患者中存在统计学差异,血小板聚集率在IR和非IR组患者中差异无统计学意义。结论复发性流产患者中普遍存在维生素D的缺乏和不足;维生素D水平与胰岛素抵抗并无显著相关性;胰岛素抵抗与HCY存在相关性,与血小板聚集率无关。     

原因不明性复发性流产患者主动免疫治疗效果及调节性T细胞水平变化观察

目的探讨原因不明性复发性流产患者接受主动免疫治疗的效果及接受主动免疫治疗后患者外周血CD4^＋ CD25^＋调节性T细胞的变化。方法对118例原因不明性复发性流产患者进行丈夫或第三个体的淋巴细胞主动免疫治疗。在118例中随机选取26例用流式细胞术检测主动免疫治疗前后外周血CD4^＋ CD25^＋调节性T细胞的变化。结果118例患者中,62例再次妊娠,56例仍在治疗中。再次妊娠的患者中6例再次发生早期流产（其中2例患者胚胎绒毛染色体发现异常）,22例已成功分娩,34例仍在继续妊娠中（孕周〉12周）。治疗的成功率达90.32％。随机选取的26例患者主动免疫治疗后的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞及CD4^＋CD25^high T淋巴细胞的表达均高于主动免疫治疗前（P〈0.05）。结论主动免疫是一种治疗原因不明性复发性流产安全、有效的方法。主动免疫治疗可能通过提高外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞及CD4^＋CD25^high T淋巴细胞的表达来调控母胎界面免疫耐受的形成。     

血清抗甲状腺过氧化物酶抗体、25-羟维生素D水平与复发性流产孕妇临床结局的关系

目的 探讨血清抗甲状腺过氧化物酶抗体(anti-TPOAb)、25-羟维生素D(25-OH-D)水平与复发性流产(RSA)孕妇临床结局的关系.方法 RSA孕妇603例,促甲状腺素(TSH)及游离甲状腺素4(FT4)均正常,分为anti-TPOAb阳性组301例与anti-TPOAb阴性组302例,对比两组孕早期、孕中期的自然流产情况,以及血清anti-TPOAb、25-OH-D、TSH、FT4水平.结果 anti-TPOAb阳性组的总流产率、早孕期及中孕期流产率均高于anti-TPOAb阴性组(P＜0.05).在孕早期及孕中期,anti-TPOAb阳性组血清25-OH-D水平均低于anti-TPOAb阴性组(P＜0.05),anti-TPOAb阳性组自然流产者血清25-OH-D水平均低于未自然流产者(P＜0.05),且低于anti-TPOAb阴性组自然流产患者(P＜0.05);在孕早期及孕中期,anti-TPOAb阳性组、阴性组血清TSH、FT4水平比较,差异均无统计学意义(P＞0.05),anti-TPOAb阳性组、阴性组自然流产者血清TSH、FT4水平比较,差异也均无统计学意义(P＞0.05);在孕早期及孕中期,anti-TPOAb阳性组、阴性组未自然流产者血清TSH、FT4水平比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 anti-TPOAb阳性RSA孕妇维生素D水平低,自然流产率高于anti-TPOAb阴性孕妇,且这可能与甲状腺功能不足无关.     

维生素D与复发性流产的病因学机制研究进展

复发性流产（RSA）的发生率逐年提高,严重威胁了女性的生殖健康,随着国家三孩政策的开放,生育需求也随之升高,但RSA病因学机制错综复杂,至今仍有50%病因不明。随着研究的深入,发现维生素D（VD）在女性生殖疾病中起到重要作用,RSA患者普遍存在VD缺乏的情况,VD水平的下降会导致流产风险升高。VD与遗传、感染、血栓前状态、内分泌及免疫都具有相关性,直接或间接参与RSA的发病。该文就VD与RSA的病因学机制研究作一综述。     

卵巢癌患者外周血调节性T细胞的表达水平分析

目的:分析调节性T细胞在卵巢癌患者外周血的表达情况.方法:利用流式细胞仪检测24例卵巢癌患者及12例健康对照组外周血单个核细胞中CD3+ CD4+T细胞/CD4+T细胞、C'D3+ CD8+T细胞/CD4+T细胞、CD4+T细胞/CD8+T细胞比率以及CD4+ CD25+ CD127- Treg/CD4+T细胞所占的比例.结果:外周血CD3+ CD4+T细胞/CD4+T细胞、CD3+ CD8+T细胞/CD4+T细胞及CD4+T细胞/CD8+T细胞与健康者对照组比较,差异均无显著性;而CD4+ CD25+ CD127- Treg/CD4+T细胞的比例显著高于健康者对照组,且差异有统计学意义(P＜0.05).结论:卵巢癌患者全身免疫状态与健康者对照组相比没有明显改变,而外周血中调节性T细胞的数量增高.     

免疫相关性复发性流产患者血清B族维生素水平的研究

目的:回顾性分析免疫相关性复发性流产患者水溶性B族维生素水平的数据,为临床干预提供参考依据。方法:选取2020年7月至2021年5月在浙江省温州市人民医院就诊的免疫相关性复发性流产患者为流产组(n=40),同期未孕妇女为对照组(n=31),采用高效液相色谱串联质谱分析测定流产组与对照组的外周血中维生素B1、B2、B3、B5、B6、B9水平。结果:流产组与对照组比较,两组的维生素B2、B3、B5、B6水平相比差异无统计学意义(P>0.05)。流产组的维生素B1水平为2.160(1.518,2.505)ng/ml,对照组维生素B1水平为2.710(2.050,3.390)ng/ml;两组的维生素B1水平对比,差异有统计学意义。流产组的维生素B9水平为8.535(6.473,10.850)ng/ml,对照组的维生素B9水平为9.850(8.230,12.650)ng/ml;两组的维生素B9水平对比,差异有统计学意义。结论:维生素B1、B9可能是免疫相关性复发性流产发生、发展的一个重要因素,维生素B1、B9的检测对免疫相关性复发性流产患者的预防及治疗具有一定的临床意义,补充维生素B1、B9是可能的治疗靶点之一。     

补肾益气方对反复自然流产患者外周血调节性T细胞的影响

 目的  探讨补肾益气方对反复自然流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)患者外周血调节性T细胞的影响。方法 随机选取15例健康女性（对照组）和30例RSA患者,RSA患者诊断受孕后口服中药补肾益气方,2周后流式细胞仪检测RSA患者服药前后及健康对照组调节性T细胞数量,ELISA法检测外周血肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNFα)、干扰素γ（interferon-γ,IFNγ)及白细胞介素-10（interleukin-10,IL-10)水平变化。结果  中药治疗2周后RSA患者外周血调节性T细胞数量上升,IL-10水平上升,均明显高于服药前及健康对照组(P<0.05),Th1类细胞因子TNFα和IFNγ水平明显下降(P<0.05)。结论  补肾益气方能够上调RSA患者血调节性T细胞水平,改变母体细胞因子分泌状态,诱导母胎免疫耐受,保护胎儿不被免疫细胞排斥。     

不明原因的复发性流产患者外周血T淋巴细胞功能的检测

目的：探讨不明原因的复发性流产（ＵＲＳＡ）与免疫因素的。方法：采肜形态学方法和ＥＬＩＳ本夹心法分别对３０例ＵＲＳＡ患者及３０例健康妇女外周血中Ｔ淋巴细胞转化率及血浆中可溶性ＩＬ－２受体（ＳＩＬ－２Ｒ）进行检测。结果：ＵＲＳＡ患者外周血中Ｔ淋巴细胞转化率和血浆中ＳＩＬ－２Ｒ水平均比正常对照组妇女同（Ｐ〈０．０５,Ｐ〈０．０１）。结论：ＵＲＳＡ患者外周血中Ｔ淋巴细胞被活化、细胞免疫增强,提示Ｔ细胞介导     

再生障碍性贫血患者外周血调节性T细胞、γδT细胞表达分析

[目的]探讨再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)的免疫学发病机制.[方法]用流式细胞术检测32例急性再生障碍性贫血(acute aplastic anemia,AAA)、30例慢性再生障碍性贫血(chronic aplasitc anemia,CAA)患者、32例对照人群外周血淋巴细胞亚群、调节性T细胞、γδT细胞的表达.[结果]与对照组相比AAA、CAA组CD3+CD4+T细胞、CD4/CD8、调节性T细胞显著低于对照组,CD3+CD8+T细胞、γδT细胞显著高于对照组;AAA组与CAA组相比,AAA组γδT细胞高于CAA组,差异有统计学意义(p＜0.05).[结论]T淋巴细胞比例失调、调节性T、γδT细胞功能紊乱可能在AA发生、发展过程中发挥重要作用.     

白癜风患者外周血黑素细胞抗原特异性T细胞、调节性T细胞及自然杀伤T细胞水平及意义

目的 探讨白癜风患者外周血黑素抗原特异性CD8+T细胞、调节性T细胞及自然杀伤T细胞的变化及意义。方法 采用流式细胞术对初诊123例白癜风患者（观察组）和30例正常人（对照组）外周血中黑素细胞抗原特异性T细胞（CD8+Melan-A+/Tyrosinase+CTL）、调节性T细胞（CD4+CD125+CD127-Tregs）及自然杀伤T细胞（CD3+TCRα24+β11+NKT）进行定量分析并进行比较。结果观察组CD8+Melan-A+/Tyrosinase+CTL水平显著高于对照组（P＜0.05）;CD4+CD125+CD127-Tregs、CD3+TCRα24+β11+NKT水平均低于对照组（均P＜0.05）。不同分期白癜风患者外周血各种T细胞表达水平比较中,CD8+Melan-A+/Tyrosinase+CTL在各期中均高于对照组（均P＜0.05）;CD4+CD125+CD127-Tregs、CD3+TCRα24+β11+NKT水平仅在进展期中均低于对照组（均P＜0.05）,稳定期则无统计学差异。3种细胞水平与患者的白斑面积明显相关（r=0.929、-0.982、-0.957,均P＜0.01）。结论CD8+Melan-A+/Tyrosinase+CTL、CD4+CD125+CD127-Tregs、CD3+TCRα24+β11+NKT水平的异常导致白癜风患者体内免疫调节功能失衡,与白癜风的发生、发展有密切关系。     

慢性乙型肝炎患者外周血调节性B细胞与调节性T细胞的表达频率及其相关性

目的：分析慢性乙型肝炎患者外周血IL-10＋CD19＋调节性B细胞（regulatory B cells,Breg）与CD4＋CD25^high调节性T细胞（regulatory T cells,Treg）的比例及两者的相互作用。方法：收集急性乙肝（acute hepatitis B,AHB）患者28例,慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B,CHB）患者31例和健康体检者（健康组）25例。分离外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMC）,经CpGODN2006和佛波酯体外作用后,流式细胞术分析Breg、Treg的表达及其相关性,ELISA检测培养上清IL-10水平。通过免疫磁珠剔除CD4＋CD25＋T细胞后分析Breg与Treg表达频率间的相关性。结果：CpGODN 2006和佛波酯作用后CHB组Breg和Treg百分率较AHB组和健康组均明显升高（Breg：P值分别为0．003和0．001;Treg：P值分别为〈0．001,0．005）,AHB组和健康组间两类细胞表达频率差异无统计学意义（Breg：P=0．796;Treg：P=0．227）;Spearman相关性分析显示CHB组Breg与Treg表达百分比存在正相关关系（r=0．50,P=0．004）,而AHB组和健康组无此相关性（r=-0．15,P=0．462;r=0．09,P=0．669）。CHB组IL-10表达高于AHB组和健康组（z值分别为-6．596、-6．373,P均〈0．001）,AHB组和健康组间差异无统计学意义（Z=-0．952,P=0．341）。Spearman相关性分析表明CHB组IL—10与Breg存在正相关关系（r=3．303,P=0．005）。CHB组患者Breg和IL-10的表达在剔除CD4’CD25’T细胞前后间的差异无统计学意义。结论：Breg和Treg在CHB患者中表达频率升高,Breg可能通过IL-10的分泌参与慢性乙肝的免疫调节,且该作用不依赖于Treg。     

复发性流产患者凝血功能与流产次数的相关性

［摘要］目的　探讨反复多次出现复发性流产患者其凝血功能的变化．方法　将收集到的80例确诊为复发性流产的患者按照流产次数分成4组,分别为2次及3次流产史组、4次流产史组、5次及以上流产史组．患者在就诊时抽血送至检验科化验,并收集患者的凝血功能数据．对3组患者的凝血功能中的凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、纤维蛋白原（FIB）、D-二聚体共四项指标进行比较．结果　2次及3次流产史组的凝血功能明显好于后2组,且随着流产次数增加患者的凝血出现异常的概率会逐步增高,其差异具有统计学意义（P＜0.05）．结论　患者在2次及3次流产出现时凝血功能相对稳定,随着患者流产次数的增加凝血功能越发变得紊乱,发生血栓前状态的可能性增加．     

甲状腺自身抗体与复发性流产的相关性分析

目的：研究分析甲状腺自身抗体抗甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）与复发性流产的相关性,为临床诊断复发性流产寻找客观的数据指标。方法选择2012年3月至2014年5月在该院进行体检的妇产科门诊甲状腺功能正常的孕早期妇女1016例作为研究对象,筛选出其中的90例流产患者分成两组,原发性流产组60例,复发性流产组30例,另选90例体检健康的育龄女性作为对照组,统计并对比各组的TPOAb阳性例数,计算比率;记录各组 TPOAb水平,同时分析 TPOAb与复发性流产的相关性。结果复发性流产组的T PO A b阳性率为46．67％,显著高于原发性流产组的25．00％,以及对照组的4．44％;同时原发性流产组的TPOAb阳性率亦显著高于对照组,差异均有统计学意义（均 P＜0．05）。复发性流产组的TPOAb水平显著高于原发性流产组和对照组的水平;同时原发性流产组的 TPOAb浓度水平亦显著高于对照组的水平,差异均有统计学意义（均 P＜0．05）。随访不良妊娠发生情况,以复发性流产为不良妊娠事件,并根据Spearman法分析相关性可知,随着 TPOAb水平的增加,复发性流产的发生率增高,二者之间呈正相关（ r＝0．764,P＝0．000）。结论监测患者 T PO A b水平,可较好地呈现复发性流产的症状情况。     

维生素D诱导调节性T细胞分化及其在自身免疫性肝炎发病中的作用

目的分析自身免疫性肝炎(AIH)患者外周血调节性T细胞(Treg)比例、白细胞介素-10(IL-10)水平与维生素D的相关性,探讨维生素D对Treg细胞分化的影响。方法选取平顶山市第一人民医院2015年2月至2016年12月收治的AIH患者30例为观察组,另选取同期体检健康者18例为对照组,对照组于体检当日、观察组于入院次日抽取晨起空腹肘静脉血10 m L,以肝素锂抗凝,分离血浆冻存,并采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC),分别采用全自动生物化学分析仪和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆25-羟维生素D[25-(OH)-D3]和IL-10水平,采用多色荧光抗体结合流式细胞术分析样本中CD4~+ CD25~+ Foxp3~+ IL-10~+ Treg细胞比例,分析三者之间的相关性。在体外条件下分离观察组患者的PBMC,在有或无活化形式的维生素D[1,25-(OH)2-D3]的条件下给予佛波酯(PMA)刺激16 h,再用流式细胞术检测刺激后PBMC中CD4~+ CD25~+ Foxp3~+ IL-10~+ Treg细胞比例,同时采用ELISA法检测刺激后上清液中IL-10水平。结果观察组患者血浆25-(OH)-D3、IL-10水平显著低于对照组(P<0.05,P<0.01)。观察组患者外周血CD4~+ CD25~+ Foxp3~+ IL-10~+ Treg细胞比例显著低于对照组(P<0.05)。观察组患者外周血25-(OH)-D3水平与IL-10水平及CD4~+ CD25~+ Foxp3~+ IL-10~+ Treg细胞比例均呈正相关(R2=0.379,P=0.000 3;R2=0.151,P=0.034 1)。在有1,25-(OH)2-D3的条件下给予PMA刺激,观察组患者的CD4~+ CD25~+ Foxp3~+ IL-10~+ Treg细胞比例和上清液中IL-10水平均显著高于无1,25-(OH)2-D3的条件下给予PMA刺激后(P<0.05)。结论维生素D可直接诱导Treg细胞增殖分化,AIH患者体内Treg细胞减少在某种程度上与维生素D缺乏有关。     

2型糖尿病病人血清维生素D含量与甲状腺功能相关性研究

目的探讨2型糖尿病（T2DM）病人血清维生素D与甲状腺功能及临床指标间的相关性。方法选择T2DM病人151例,根据血清25羟维生素D[25（OH）D]含量分为≥ 30 ng/mL正常组,20~ < 30 ng/mL不足组,10~ < 20 ng/mL缺乏组, < 10 ng/mL严重缺乏组,比较血清25（OH）D含量与各临床指标以及甲状腺功能之间的关系。结果在T2DM人群中血清维生素D不足比例为89.40%,4组病人血清25（OH）D含量与游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）、促甲状腺激素（TSH）、甲状腺球蛋白抗体（TGAb）和甲状腺微粒体抗体（TMAb）差异均有统计学意义（P < 0.05~P < 0.01）。logistic回归分析显示,T2DM病人血清25（OH）D含量与TSH呈负相关关系（P < 0.05）。结论T2DM病人体内血清维生素D缺乏和TSH之间呈负相关,对于T2DM病人应考虑及时补充维生素D,并注意监测其甲状腺功能水平。