全反式维甲酸减轻大鼠移植心脏血管病变及纤维化

目的 探讨全反式维甲酸(atRA)对大鼠移植心脏血管病变(CAV)及心肌纤维化的影响及可能机制.方法 以近交系Wistar大鼠为供者,SD大鼠为受者,进行异位心脏移植,一组受者术后接受环孢素A(CsA,10 nag·kg-1·d-1)皮下注射,同时以atRA(10 mg·kg-1·d-1)灌胃(atRA治疗组),另一组受者术后接受CsA皮下注射(慢性排斥组).术后60 d,取移植心脏,行Masson染色观察心肌组织纤维化程度,Van Gieson染色分析血管狭窄程度,免疫组织化学染色(sP法)观察心肌组织中CD68+细胞浸润情况,逆转录聚合酶链反应分析心肌组织中血小板生长因子(PDGF)A mRNA的相对含量.结果 慢性排斥组和atRA治疗组心肌纤维化指数分别为64.0±11.9和34.7±6.3,慢性排斥组纤维化指数明显高于atRA治疗组(P<0.01).慢性排斥组的血管狭窄指数为62.9±17.2,atRA治疗组为40.1±8.2,二者比较,差异有统计学意义(P<0.01).慢性排斥组CD68+细胞数为(32.1±9.3)个,atRA治疗组CD68+细胞数为(17.6±4.2)个,慢性排斥组明显高于atRA治疗组(P<0.01).慢性排斥组PDGF-AmRNA的相对含量为0.94±0.11,atRA治疗组为0.46±0.08,慢性排斥组明显高于atRA治疗组(P<0.01).结论 atRA能减轻大鼠心脏移植后的CAV及心肌纤维化,机制可能与其抑制CD68+细胞浸润及PDGF A mRNA表达有关.     

SHH信号通路在血小板源性生长因子诱导的血管平滑肌细胞增殖中的作用研究

目的探讨sonic hedgehog(SHH)信号通路是否在血小板源性生长因子(PDGF)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖中被活化,研究SHH信号通路是否参与PDGF诱导的VSMC增殖。方法体外培养人VSMC,施加PDGF刺激后应用激光共聚焦显微成像、Western-Blot及qRT-PCR检测SHH信号通路分子mRNA的表达变化;分别应用慢病毒介导的RNAi及SHH信号通路特异抑制剂cyclopamine阻断SHH通路后,用细胞计数、BrdU掺入法及Ki67染色评价细胞增殖情况。结果激光共聚焦显微成像及Western-blot及qRT-PCR均显示PDGF能够活化SHH信号通路蛋白shh、patched1及Gli2的表达;阻断SHH信号通路后,PDGF诱导VSMC增殖的作用明显减弱。结论 SHH信号通路在PDGF诱导的VSMC增殖中有重要作用。     

血小板源性生长因子与肾间质纤维化

越来越多的研究发现,肾间质的病变几乎存在于所有慢性肾脏病的过程中,肾间质的病变往往合并肾小管萎缩而使得肾小球滤过率下降。因而,肾小管间质病变程度与慢性肾病的预后密切相关。围绕肾小管间质损伤的发病机制和防治方面的研究显得十分重要,而对血小板源性生长因子所导致肾间质纤维化的研究也越来越受到重视。     

血小板源性生长因子在骨折愈合中的作用

血小板源性生长因子具有多种生物学作用。尤其对骨折愈合有重要意义，被认为是骨代谢过程中的关键因子之一。本文就其分子生物学特性及其在骨折愈合中的作用进行综述，并探讨其生物学作用机制。     

血小板源性生长因子在骨修复中的作用及应用研究

PDGF(platelet-derived growth factor，血小板源性生长因子)具有促进骨形成细胞的迁移募集、分裂增殖、分化及局部血液循环的重建等重要功能，与有关载体结合成缓释系统能有效地加快骨折愈合、促进骨缺损的连接、增强糖尿病与骨质疏松等病态情况下骨修复的能力，为人类有效地干预骨折及骨缺损的修复开拓了新的思路。但是，对PDGF的研究仍处于初步阶段，尚有很多问题有待于解决。     

血小板源性生长因子-BB影响下大鼠血管平滑肌细胞增殖及其ras蛋白的表达

目的 观察血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)的增殖及其ras蛋白表达的影响.方法 体外培养大鼠VSMC并传代,将第4代VSMC分4组,设空白对照组,另设3组分别加入1、2、4 μg/L PDGF-BB进行干预,采用细胞计数、免疫组织化学及免疫荧光等方法,观察干预后1、3、7 d 3个时间点的VSMC计数、增殖细胞核抗原(PCNA)表达及相应时段ras蛋白的表达,并分析两者之间的相关性.结果 (1)在7 d内各组VSMC计数均逐渐增加,其中2 μg/L和4 μg/L PDGF-BB组的计数增长较对照组快(P＜0.05),4 μg/L PDGF-BB组较1 μg/LPDGF-BB组快(P＜0.05);(2)免疫组织化学和免疫荧光检测显示,干预3 d后各组VSMC增殖细胞百分比均表现为高PDGF-BB浓度组高于低浓度组(P＜0.05),ras蛋白荧光表达强度亦呈现相同趋势(P＜0.01).PDGF-BB干预后的VSMC的PCNA表达和ras蛋白表达呈显著正相关(r=0.735,P＜0.05).结论 PDGF-BB可以刺激体外培养大鼠VSMC增殖,并可促进其ras蛋白的表达.     

血小板源性生长因子在肾脏疾病的研究进展

血小板源性生长因子(Platelet-derived growth factor,PDGF)系统,包含4个亚型(PDGF-A、B、C、D)和2个受体PDGFR-α、β.PDGF在绝大多数肾脏细胞都有表达,调节众多病理生理事件,如促进细胞DNA合成;诱导细胞进行有丝分裂;促进多种细胞外基质的积聚;产生抗炎因子和炎症介质前体;提高组织渗透性;调节血流动力学等.几乎只要有PDGF组成表达发生改变就会导致人类肾脏疾病.对PDGF的组成、信号转导、在肾脏的分布及表达、与肾脏疾病的关系等的研究具有重要意义.     

血小板源性生长因子-D在膀胱癌中的表达及其临床意义

目的 观察血小板源性生长因子-D(PDGF-D)在膀胱移行细胞癌(BTCC)中的表达,探讨PDGF-D与膀胱移行细胞癌的发生发展之间的关系及其临床意义.方法 分别采用实时定量逆转录-聚合酶链反应(real-time RT-PCR)法和蛋白免疫印迹(Western blot)法检测62例膀胱移行细胞癌组织、10例癌旁正常膀胱组织中PDGF-D mRNA和蛋白的表达,并分析其与临床病理之间的关系.结果 PDGF-D mRNA在BTCC中的表达量是正常对照组的1.89倍,PDGF-D蛋白在癌组织中的表达明显高于正常膀胱组织(相对吸光度比值:正常组0.231±0.041,癌症组0.689±0.083,P＜0.05).而且随着肿瘤病理分级的升高及淋巴结转移的出现,PDGF-D mRNA和蛋白的表达水平均逐渐升高,各组问差异有统计学意义(P＜0.05).但不同分期的癌组织中PDGF.D mRNA和蛋白的表达水平的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 PDGF-D表达增强与膀胱癌的发生及分化、转移密切相关,可能在膀胱癌的发生发展中发挥重要作用.     

转染血小板源生长因子和增殖细胞核抗原反义寡核苷酸抑制移植血管狭窄的实验研究

目的　探讨联合应用血小板源生长因子(PDGF)和增殖细胞核抗原(PCNA)反义寡核苷酸(AODN)防止移植血管狭窄的作用。方法　将同一只兔的左、右髂外动脉(各1 0cm)对换移植,移植血管用PDGF- AODN和PCNA -AODN转染;移植血管病理切片后测量其内膜厚度、内膜面积和移植血管狭窄率,并分别用原位杂交组织化学和免疫组织化学染色计数PDGF和PCNA阳性细胞数。结果　PDGF- AODN加PCNA- AODN组的移植血管内膜厚度、内膜面积、管腔狭窄程度和PDGF阳性细胞及PCNA阳性细胞数均显著低于对照组(P<0 .01),而且亦明显低于单独转染PDGF- AODN组或PCNA -AODN组(P<0. 05 ),PDGF AODN组和PCNA AODN组间差异无显著意义(P>0. 05 )。结论　联合应用PDGF AODN和PCNA- AODN能有效抑制血管平滑肌细胞增殖,阻止内膜增生,防止移植血管狭窄。     

血小板源性生长因子在肾脏疾病的研究进展

血小板源性生长因子(Platelet-derived growth factor,PDGF)系统,包含4个亚型(PDGF-A、B、C、D)和2个受体PDGFR-α、β.PDGF在绝大多数肾脏细胞都有表达,调节众多病理生理事件,如促进细胞DNA合成;诱导细胞进行有丝分裂;促进多种细胞外基质的积聚;产生抗炎因子和炎症介质前体;提高组织渗透性;调节血流动力学等.几乎只要有PDGF组成表达发生改变就会导致人类肾脏疾病.对PDGF的组成、信号转导、在肾脏的分布及表达、与肾脏疾病的关系等的研究具有重要意义.     

心脏移植物血管病变研究进展

同种异体心脏移植(HTx)是终末期心力衰竭患者的首选治疗方法,而HTx术后远期并发心脏移植物血管病变(CAV)是影响受者长期存活的主要因素。迄今为止,尚无预防和治疗CAV的有效方法。本文从CAV的病理学表现、引起CAV的免疫学因素以及引起CAV的其他危险因素等方面进行综述,为CAV研究提供新的思路和认识。     

血小板转化生长因子与移植心脏血管病和纤维化关系的研究

目的 探讨血小板转化生长因子(PDGF)与移植心脏排斥反应之间的关系.方法 建立大鼠颈部心脏移植的动物模型.采用供体脾细胞(SPC)和环磷酰胺(CP)以及环孢素A(CsA)治疗移植受体,在移植术后的不同时间,采集移植心脏,对移植心脏血管病和心肌纤维化以及PDGF的表达水平等进行分析.结果 急性排斥反应和CsA治疗的移植组中,冠状动脉的外膜和中层有大量胶原纤维浸润,并有内膜的水肿、血管壁增厚和血管腔狭窄,PDGF在冠状血管和心脏组织中呈高水平表达.SPC和CP预处理后,移植心脏的存活时间明显延长,PDGF在冠状血管和心肌组织中呈低水平表达,移植心脏血管病和心肌纤维化明显减轻.结论 PDGF的表达水平与移植心脏血管病和心肌纤维化的严重程度密切相关,测定移植受体的PDGF水平可以预测移植器官的功能状况,为移植排斥反应的早期诊断和预防提供依据.     

落新妇甙对小鼠心脏移植后移植物血管病的抑制作用

目的探讨落新妇甙对小鼠心脏移植后移植物血管病的抑制作用。方法建立小鼠颈部心脏移植模型,将受鼠随机分为环孢素A(CsA)组(术后每天用CsA5mg/kg灌胃)和落新妇甙组(术后每天用落新妇甙5mg/kg灌胃)。术后第60d切取移植心,观察移植心脏组织学变化,以HPIAS-1000图像分析仪测量冠状动脉管壁厚度与动脉直径的比值,根据平均内膜厚度和管腔狭窄程度对CAV病变进行评分。结果CsA组移植心脏可见明显的纤维化,大量单核细胞浸润,动脉硬化明显,冠状动脉管壁厚度与血管直径的比值为0.63±0.20,明显高于落新妇甙组的0.22±0.04(P<0.01);CsA组心脏移植物血管病变评分为(2.3±0.6)分,高于落新妇甙组的(1.1±0.3)分(P<0.05)。落新妇甙组心脏移植物的冠状动脉内膜病变轻微,内皮和内弹力层基本保持完整,平滑肌细胞增殖不明显。结论落新妇甙能减缓移植心冠状动脉硬化,对小鼠心脏移植后移植物血管病有明显的抑制作用。     

The experimental study of cardiac allograft vasculopathy and myocardial fibrosis in rats

We sought to analyze the development of myocardial fibrosis and cardiac allograft vasculopathy (CAV) as a theoretical basis for the prevention and treatment of rejection. Heterotopic cardiac transplantation was performed from Wistar rats to Sprague-Dawley rats. The recipients pretreated with donor splenocyte (SPC) infusion followed by cyclophosphamide (CP) were divided into 3 groups: Control animals without immunosuppression (Group 1; n = 10); Group 2, CsA treatment (n = 10) with euthanasia 2-3 months posttransplantation; and Group 3 (n = 20), CP plus SPC treatment with 10 recipients euthanized at 2 weeks posttransplantation and 10 animals monitored for at least 1 year posttransplantation. Histological studies were performed to evaluate myocardial fibrosis and CAV; 2-3 days after transplantation, there was abundant infiltration of collagenous fibers in the adventitia and intima of the coronary arteries in Group 1 allografts. Group 2 allografts demonstrated abundant infiltration of collagenous fibers in the adventitia and intima of arteries and arterioles resulting in significant luminal stenosis. In contrast, pretreatment of animals with SPC and CP induced long-term allograft survival; myocardial fibrosis and CAV were dramatically reduced in Group 3 compared with Groups 1 and 2. The infiltration of collagenous fibers in coronary arteries was one of the major causes of CAV. Preconditioning of recipients with SPC followed by CP not only induced immune tolerance but also alleviated myocardial fibrosis and CAV in allografts.     

左旋精氨酸对大鼠心脏移植物血管病变的抑制作用

目的　研究左旋精氨酸对大鼠心脏移植物血管病变的抑制作用及其机理。方法　采用大鼠异位心脏移植模型。对照组 :移植后不用左旋精氨酸 ;实验组 :移植后按 80 0mg·kg-1·d-1将左旋精氨酸加入饮水中。于移植后 2个月和 3个月检测各组的心脏移植物 ,血管病变评分和血浆一氧化氮含量。结果　移植后 2个月 ,实验组的移植物存活率为 90 .5 % ,显著高于对照组的 6 1.5 % (P <0 .0 5 )。移植后 2个月和 3个月 ,实验组血浆一氧化氮含量均显著高于对照组 ,分别为 ( 10 5 .37± 10 .6 6 ) μmol/Lvs( 6 8.5 4± 6 .83) μmol/L(P <0 .0 5 ) ,和 ( 10 4.5 3± 12 .31) μmol/Lvs ( 6 6 .32± 10 .5 4) μmol/L(P <0 .0 5 ) ;而对照组心脏移植物血管病变评分显著高于实验组 ,分别为 2 .4± 0 .7vs 1.1± 0 .6 (P <0 .0 5 ) ,和 3.0±0 .8vs 1.6± 0 .9(P <0 .0 5 )。实验组心脏移植物的冠状动脉内膜病变轻微 ,内皮和内弹力层基本保持完整 ,平滑肌细胞增殖不明显。结论　补充左旋精氨酸可改善心脏移植物血管病变 ,其机理与一氧化氮合成增加有关。一氧化氮具有保持内皮功能 ,抑制平滑肌细胞增殖的作用。     

维拉帕米抑制大鼠心脏异位移植术后冠状血管内膜增厚

目的观察钙离子阻滞剂维拉帕米对心脏异位移植术后冠状血管内膜的影响。方法选用健康成年SD大鼠160只,随机平均分为对照组、实验1组、实验2组和实验3组。建立大鼠同种腹腔异位心脏移植模型。从移植当日到术后第9d,所有大鼠均接受环孢素A治疗,按5mg·kg-1·d-1腹腔注射,共10d;实验1、2、3组术后当天起加用维拉帕米,其剂量分别为0.1mg/kg、0.5mg/kg、1.0mg/kg,均为2次/d,连用3个月。移植后60d和90d切取移植心脏,将每例心尖组织进行HE和弹力纤维染色,根据移植心脏心尖部冠状动脉平均内膜增厚和管腔狭窄程度判定心脏移植物血管病变。结果对照组冠状血管狭窄程度较实验组明显加重,组间比较,差异有统计学意义。结论维拉帕米对大鼠移植心脏冠状血管内膜增厚有明显抑制作用。     

诱生型一氧化氮合酶mRNA的表达对心脏移植术后移植物血管病的抑制作用

目的探讨诱导诱生型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA的表达以促进NO合成对移植物血管病(CAV)形成的抑制作用。方法建立大鼠异位(腹部)心脏移植模型,受者在接受环孢素A腹腔注射的同时,按分组要求分别给予左旋精氨酸(iNOSmRNA组)、一氧化氮合酶(NOS)抑制剂左旋精氨酸甲酯(LNAME组),术后测定血浆NO3-的含量、移植心脏冠状血管iNOSmRNA的表达以及冠状动脉内膜与中膜厚度比的改变。结果术后2周和4周,iNOSmRNA组血浆NO3-的含量明显高于对照组和LNAME组,移植心脏组织中iNOSmRNA的表达水平高于对照组和LNAME组,而术后4周的冠状动脉内膜中膜厚度比显著低于对照组和LNAME组。结论iNOSmRNA的表达可以促进NO的大量合成,对心脏移植后的移植物血管病有一定的抑制作用。     

大鼠移植心脏心肌纤维化的实验研究

目的 分析研究大鼠移植心脏急、慢性排斥反应的心肌纤维化变化。方法 采用供体（Wistar大鼠）脾细胞（CP）预处理移植受体（SD大鼠）,然后行同种异体心脏移植术。对移植心脏的心肌纤维化进行Masson染色分析。结果 急性排斥反应组和环孢素（CsA）组中,移植心脏呈现出严重的心肌纤维化;SPC和CP处理后,移植心脏的存活时间明显延长,其心肌纤维化的程序明显减轻。结论 经供体SPC和CP预处理,可以预防和减缓受体移植心脏心肌纤维化的发生和发展。