胰岛素基因可变重复序列多态性与PCOS的相关性

目的：探讨胰岛素基因可变重复序列（INS-VNTR）多态性与多囊卵巢综合征（PCOS）易感 性之间的关系及其与PCOS 发生胰岛素抵抗（IR）的相关性。方法：用聚合酶链反应－限制性片段多态性技术,检测130 例PCOS 患者(PCOS 组)和130 例非PCOS 妇女(对照组)的INS-VNTR 多态性。结果：2 组的I/ I、I/III芋和III/III基因型频率分布差别无统计学意义（P=0.196）,经Logistic 回归分析,III/III基因型并没有 增加PCOS 发病的危险性（OR=6.25,95% CI:0.74~52.79）。PCOS 胰岛素抵抗亚组(PCOS-IR 组,88 例)相应 位点的INS-VNTR基因型频率及等位基因频率均高于PCOS 非胰岛素抵抗亚组（PCOSNIR 组,42 例, P<0.05);PCOS 患者中芋/芋基因型者的INS、IR 状态高于I/I基因型者。结论：VNTR 可能不是PCOS 发病 的易感基因,但是Ⅲ型INS-VNTR 可能使PCOS 患者发生IR 的危险性增加。     

胰岛素降解酶基因rs11187007位点多态性与妊娠期糖尿病患者胰岛素抵抗、全身炎症反应的相关性

目的探讨胰岛素降解酶基因rs11187007位点单核苷酸多态性与妊娠期糖尿病(GDM)遗传易感性及患者胰岛素抵抗、全身炎症反应的相关性。方法将2015年1月~2017年1月在该院住院分娩的186例GDM孕妇和158例葡萄糖耐量正常的孕妇分别纳为观察组和对照组,检测计算患者胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)、外周血C-反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,并采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCR-RFLP)技术对胰岛素降解酶基因rs11187007位点进行基因分型,开展相关分析。结果观察组胰岛素降解酶基因rs11187007位点AG基因型频率明显高于对照组,AA基因型频率明显低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。AG基因型孕妇HOMA-IR、外周血CRP、IL-2及TNF-α水平均明显高于AA和GG基因型孕妇(P0.05),HOMA-β明显低于AA和GG基因型孕妇(P0.05)。二元Logistic回归分析显示,AG基因型是GDM的独立危险因素(OR=3.800,P0.05)。结论胰岛素降解酶基因rs11187007位点AG基因型在GDM发病过程中有一定作用,且与胰岛素功能异常、全身炎症反应有关,可能是GDM的易感基因。     

多囊卵巢综合征的候选基因研究进展

多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome,PCOS）是以高雄激素血症、稀发/无排卵、多囊卵巢和生育能力下降为主要特征的女性常见生殖内分泌异常疾病。其确切病因、病理机制未明。越来越多研究指出遗传因素在PCOS发病机制中发挥重要作用,认为PCOS可能是一种多基因遗传疾病,其发病可能是某些遗传因素与环境因素交互作用的结果。因此研究PCOS易感基因对该病的病理机制探索及防治具有重要意义。综述近年来PCOS候选基因研究进展,主要从与雄激素生物合成、储备及作用、性腺功能失调、胰岛素抵抗（insulin resistance,IR）、肥胖和慢性炎症等相关的易感基因进行阐述,以期为PCOS的病因、病理机制研究与靶向治疗提供新思路。     

载脂蛋白E基因多态性与中国人群冠心病的关联

目的 研究载脂蛋白E（ApoE）基因多态性与中国人群冠心病的关联。方法 选择63例冠心病患者及年龄、性别相匹配的90例正常对照组,聚合酶链反应－限制性片段长度多态性（PCR－RFLP）方法检测ApoE基因型。比较两组基因硎圾等位基因频率分布。结果 冠心病组ε4等位基因频率（12．70％）明显高于对照组（5．55％）（P＜0．05）。结论 ε4等位基因可能是冠心病的遗传易患因子。     

胰岛素受体基因微卫星多态性与多囊卵巢综合征的相关性研究

目的:研究胰岛素受体基因(INSR)标志物D19S884微卫星多态性与多囊卵巢综合征(PCOS)发病的相关性,及其与PCOS患者BMI及血清生殖激素间的关系。方法:收集PCOS(155例)和非PCOS(77例)人群的血液标本,检测血清生殖激素,提取DNA并以特异引物聚合酶链反应扩增(PCR),产物经6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,银染,检测IN-SR标志物D19S884微卫星多态性。结果:①INSR-D19S884等位基因频率分布在PCOS组和非PCOS组间无显著差异。②PCOS组,携带等位基因238患者卵泡刺激素(FSH)值显著高于其他等位基因FSH值,初潮年龄、BMI和其他血清生殖激素值在各等位基因间均无显著差异。非PCOS组,BMI及生殖激素在各基因型间均无显著差异。结论:INSR-D19S884可能不是中国汉族人群PCOS致病基因,但可能与该病进展程度存在一定相关性。     

PLA2G4C基因多态性与精神分裂症的遗传相关性

目的探讨中国北方汉族人群PLA2G4C基因多态性与精神分裂症的遗传相关性.方法采用聚合酶链反应（PCR）和限制性内切酶片段长度多态性（RFLP）方法,在240个精神分裂症患者核心家系中检测PLA2G4C基因上的6个单核苷酸多态性（SNPs）,对结果进行单倍型相对风险（HRR）分析和传递不平衡分析（TDT）.结果在所检测的6个SNPs中,只有rs1366432和rs1549637位点在北方汉族人群中具有高度的多态性.rs1366432和rs1549637位点在精神分裂症病例组和对照组中基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡.HRR和TDT分析表明,rs1549637位点与精神分裂症关联具有显著性（X^2=5.364,P＜0.05;X^2=5.633,P＜0.05）,而rs1366432位点与精神分裂症不存在遗传相关性（X^2=0.027,P＞0.05;X^2=0.007,P＞0.05）.结论PLA2G4C基因可能是精神分裂症的易感基因.     

TNF-α-1031位点基因多态性与冠心病的相关性研究

目的探讨肿瘤坏死因子-α-1031位点基因多态性与冠心病的关系。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测121例冠心病患者和115例正常人的TNF-α基因型。结果TNF-α- 1031位点基因型TT、TC CC频率在患者组和对照组分别为66.9%、33.1%和64.3%、35.7%;等位基因T、C频率在患者组和对照组分别为82.6%、17.4%和80.9%、19.1%。两组基因型和等位基因频率比较差异没有显著性(P>0.05)。结论TNF-α-1031位点基因多态性与冠心病之间不存在明显相关性。     

双创造酶切位点聚合酶链反应-限制性片段长度多态性检测MGMT基因多态性的应用

目的建立简便易行、经济适用的MGMT基因4个单核苷酸多态性位点的检测方法。方法应用碱基错配创造酶切位点原理设计引物,通过聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术判断MGMT基因四个SNP位点多态性。结果设计一对引物PCR扩增含MGMT84多态位点的DNA片段,另一对引物PCR扩增含MGMT基因143、160、178三个多态位点的DNA片段,使用4种限制性内切酶分别酶切判断4个位点多态性,PCR和酶切效果均较好。结论应用创造酶切位点PCR-RFLP原理建立的MGMT四个多态位点的检测方法具备简便、经济、快速的特点。     

HSP70-hom基因多态性与高原反应易感性的关系

目的 探讨热应激或热休克蛋白70-hom(HSP70-hom)基因型与高原反应易感性间的关系,为发现和保护易感人群提供依据。方法随机选取武警战士229人,其中56人有高原反应者为病例组,173人无高原反应者为对照组。应用聚合酶链反应～限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析方法,研究两组观察对象中HSP70-hom的基因型分布情况。结果病例组HSP70-hom A／A基因型的频率明显高于对照组,差异有显著性(P＜0．05)。结论 HSP70-hom A／A基因型的机体可能存在应激能力较弱的问题,这有助于在特定职业人群中发现和保护这些个体,为保障健康,提高工作效率提供科学依据。     

TNFR1基因多态性与早期自然流产的相关性

目的探讨肿瘤坏死因子受体1基因启动子区-383A/C和第1外显子 36A/G的多态性与不明原因早期自然流产的相关性。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术,检测256例不明原因早期自然流产患者和138例对照组肿瘤坏死因子受体1基因-383和 36位点多态性,比较两组基因型和等位基因的分布频率。结果肿瘤坏死因子受体1基因启动子区-383位点的CC、AC和AA基因型在不明原因早期自然流产组中分别为4.69%、13.28%、82.03%,在对照组中分别为2.90%、8.70%、88.41%,两组基因型分布的频率无显著性差异(χ2=2.75,P>0.05);肿瘤坏死因子受体1基因第1外显子 36位点的GG、AG和AA基因型在不明原因早期自然流产组中分别为2.75%、12.84%、84.41%,在对照组中分别为1.56%、20.13%、78.13%,两组基因型分布频率比较亦无明显差异(χ2=2.63,P>0.05)。结论肿瘤坏死因子受体1基因-383和 36位点多态性分布与不明原因早期自然流产的发病无明显相关性。     

天津市汉族胎儿D21S1411和D21S1413 STR基因座遗传多态性的研究

目的:调查天津市汉族胎儿21号染色体上D21S1411和D21S1413短串联重复序列(STR)的遗传多态性,获取群体遗传学数据,为其应用于产前诊断提供依据。方法:选取211例产前诊断样本,提取DNA,复合扩增D21S1411和D21S1413 STR基因座,非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,分析扩增产物。用PowerState V12软件分析群体遗传学指标。结果:D21S1411 STR基因座共发现9种等位基因,45种基因型。D21S1413 STR基因座共发现7种等位基因,28种基因型。D21S1411基因座的观察杂合度(Ho)、多态信息含量(PIC)、个体识别率(DP)和非父排除率(PE)分别为75.4%、0.85%、0.967%、0.516%。D21S1413基因座的Ho、PIC、DP、PE分别为87.2%、0.82%、0.947%、0.739%。D21S1411和D21S1413 2个STR基因座累计PIC为0.973,累计DP为0.998,累计PE为0.874。结论:D21S1411和D21S1413 STR基因座均符合Hardy-W e inberg平衡定律,在天津市汉族胎儿群体中具有较高的杂合度和多态信息含量,可用于唐氏综合征的基因诊断和产前基因诊断。     

贵州苗族HUMTH 01基因座的遗传多态性

调查贵州省苗族群HUMTH 01基因座的遗传多态性分布。方法:106份EDTA抗凝血样采自贵州苗族无血缘关系个体。酚氯法提取DNA,PCR扩增样本后,聚丙烯酰胺凝胶电泳分型。结果:在贵州苗族群体中,HUMTH 01基因座观察到6个等位基因,18个基因型。结论:在贵州苗族群体的该基因座的基因频率分布与其它群体无显著性差异,该基因对人体遗传学和法医遗传学研究是十分有用的遗传标记。     

CYP19基因多态性与PCOS发病相关性

目的 研究芳香化酶基因(C YP19)第4内含子△3(TTTA)n微卫星多态性与多囊卵巢综合征(PCOS)发病、PCOS患者体重指数(BMI)和血清生殖激素之间的关系。方法 收集PCOS和非PCOS人群的血液标本。记录临床数据并检测血清中的生殖激素。采用Chelex-100提取法从180例PCOS患者和127名非PCOS对照者的外周血标本中提取DNA。特异引物聚合酶链反应,产物经6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,银染检测。结果 正常对照和PCOS患者之间的△3(TTTA)n频率分布差异无统计学意义。二者均没有(TTTA)9。PCOS患者中各基因型个体之间的BMI和血清生殖激素差异无统计学意义。结论 C YP19基因第4内含子的多态性与PCOS发病之间没有直接相关性,PCOS的雄激素升高不是其代谢下降,而是合成过多;同时C YP19基因第4内含子的多态性对PCOS患者的BMI和生殖激素也无影响。     

霍乱弧菌4种新类型tcpA基因发现及序列分析

目的研究中国霍乱弧菌（VC）毒力协同调节菌毛A亚单位基因（tcpA）的多态性.方法分别进行聚合酶链反应及限制性片段长度多态性分析、型特异引物PCR分型、基因测序及序列分析.结果 200株O1群埃尔托型（EVC）产毒株和100株O139群VC产毒株的tcpA基因均与EVC国际标准株N16961株为同一类型（t2型）.50株EVC非产毒株中只有3株携带tcpA基因,1株为t2型,另2株为2种新类型.20株O139群VC非产毒株均不携带tcpA基因.20株非O1非O139群VC中只有2株携带tcpA基因,且为2种新类型.4种新类型tcpA基因与国外发现的4种类型比较,基因序列及推测的氨基酸序列同源性分别为58.3%～77.5%和61.0%～85.5%;5′端约102bp基因序列基本一致,推测的氨基酸序列完全一致;3′端约210bp基因序列变异最大,推测的氨基酸序列变异也最大.抗原表位分析,C末端差异最大.结论建立快速准确区分不同类型tcpA基因的方法,并发现4种新类型.     

雄激素受体基因多态性与雄激素代谢紊乱疾病的相关性

雄激素受体（AR）基因上的2个三核苷酸多态性重复位点（CAG）n及（GGN）n的片段长度多态性的争议一直很多,多数研究显示,这2个位点的多态性与某些雄激素代谢紊乱相关的病理状态有关,但不同种族人群的研究结果差异也较大。介绍AR结构及功能、AR基因组学、AR基因多态性与某些疾病的相关性,如前列腺癌、男性不育、多囊卵巢综合征,这些疾病中的AR基因多态性与雄激素代谢紊乱相关。     

应用创造酶切位点PCR-RFLP检测乙醇脱氢酶2基因多态性

目的建立简便易行经济适用的乙醇脱氢酶2(ADH2)基因单核苷酸多态性检测方法。方法根据单碱基突变位点的碱基替代情况设计引物,其中一条引物根据突变位点邻近序列设计,人为引入错配碱基,使引物3′端和单碱基突变的一种突变型在PCR扩增后形成一个酶切位点,并应用相应内切酶进行酶切鉴定,通过PCR-RFLP技术判断ADH2基因SNP位点多态性。结果设计一对特异引物并PCR扩增含ADH2多态位点的DNA片段,使用限制性内切酶Bsh1236I酶切判断ADH2位点多态性,PCR和酶切效果均较好。结论应用创造酶切位点PCR-RFLP原理建立的ADH2多态位点检测方法具备简便、经济、快速的特点。     

雌激素受体-α基因多态性与湖南女性原发性膝骨性关节炎的关系

目的 探讨ER-α基因多态性与中国湖南女性原发性膝关节OA的关系. 方法 选取原发性膝OA女性患者38例、正常对照组40例.应用PCR-RFLP法对其进行ER-α基因PvuII和XbaI多态性检测. 结果女性中,ER-α基因XbaI酶切基因型在OA组和对照组的分布差异有统计学意义,等位基因x和X的分布频率其差异亦有统计学意义. 结论携带ER-α基因XbaI酶切基因型xx的女性对原发性膝OA易感.     

海南汉族2型糖尿病患者胰岛素受体底物-1基因Gly972Arg多态性的研究

[目的]研究胰岛素受体底物-1(IRS-1)基因Gly972Arg突变与海南汉族2型糖尿病的关系。[方法]应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,对海南汉族60例2型糖尿病患者和60例糖耐量正常人群进行IRS-1基因Gly972Arg突变位点基因型检测。[结果]2型糖尿病组IRS-1基因Gly972Arg突变频率13.3%,对照组IRS-1基因Gly972Arg突变频率3.3%,两者差异有统计学意义。[结论]IRS-1基因Gly972Arg突变可能与海南汉族T2DM的发生有相关性。     

TGF-β-800G/A基因多态性与尘肺的相关性

采用1∶1配对的病例对照研究方法,病例组为确诊的117例Ⅰ期尘肺病人,对照组与尘肺组同性别、同民族、同一工作车间或相同采掘工作面,年龄差<5岁,开始接尘时间和累积接尘工龄差<2年的接尘工人。应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术对TGF-β启动区的-800G/A位点的基因多态性进行检测。尘肺组TGF-β启动区的-800G/A位点等位基因和基因型频率与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。说明TGF-β-800G/A基因多态性在尘肺的易感性中不起主要作用。     

我国新型恙虫病立克次体目标基因的PCR／RFLR和序列分析研究

为查明江苏恙虫病立克次体（Ｒｔ）流行株目标基因序列特征，构建Ｒｔｔｓａ５６ｋＤａ群、型特异引物，用ＰＣＲ技术进行检测、分型，将群引物扩增产物进行ＲＦＬＰ分析和热循环自动双向测序法进序列测定。结果所构建的Ｒｔｔｓａ５６ｋＤａ的群、型引物具有Ｒｔ的特异性；江苏地区Ｒｔ流行株型别与日本Ｋａｗａｓａｋｉ型相似；群引物扩增产物经ＲＦＬＰ分析，证明该片段ＤＮＡ无ＨｈａⅠ酶切位点；碱基序列测定结果与Ｋａｗａｓａｋｉ型相应ＤＮＡ片段的碱基序列同源性为９６．８７％，而与其它５株Ｒｔ同源性均少于５２％；该片段的ＨｈａⅠ酶切位点ＧＣＧＣ变异为ＧＴＧＣ结构。结果表明江苏地区Ｒｔ株型属于日本Ｋａｗａｓａｋｉ型，但有遗传差异，是我国新发现的株型